浸泡对玉米胚芽超氧化物歧化酶提取的影响

对影响玉米胚芽超氧化物歧化酶(SOD)提取的浸泡条件进行研究。利用单因素法优化的最佳浸泡工艺条件为:100g玉米中加入200mL0.05mol/L磷酸缓冲液,40℃浸泡玉米36h,淋干后分离胚芽与胚乳,再加入胚芽质量2倍的0.05mol/L磷酸缓冲溶液浸提1h,离心得SOD提取液,其总酶活为22549.0U;而未浸泡的玉米胚芽SOD总酶活为2125.3U。由此可知,浸泡对玉米胚芽SOD提取的影响非常显著。     

玉米胚芽超氧化物歧化酶提取及对酒精发酵的影响

从玉米胚芽提取SOD的最佳工艺条件为：100g玉米中加入200mL0．05mol/L磷酸缓冲液，40℃浸泡玉米36h，淋干后分离胚芽与胚乳，再加入胚芽质量2倍的0．05mol/L磷酸缓冲液破碎后浸提1h，离心得SOD提取液，总酶活为22549．0u；然后添加硫酸铵依次达到饱和度40％和90％，进行除杂蛋白和盐析，离心后将沉淀冷冻干燥即得到SOD粗酶制剂，其比活为334．6u／mg蛋白。将分离后的胚乳和提取SOD后的胚芽残渣混合进行酒精发酵，淀粉出酒率达到53．16％，证明胚芽SOD提取不影响酒精发酵，且可降低酒精的生产成本。     

玉米超氧化物歧化酶提取与酒精发酵耦联技术的研究

以玉米为原料,研究了超氧化物歧化酶(SOD)的提取及对酒精发酵的影响。玉米SOD提取的最佳工艺条件为:100g玉米加入0.05mol/L磷酸缓冲液200mL,40℃浸泡36h;淋干后加入0.05mol/L磷酸缓冲液200mL,破碎浸提1h,离心得SOD提取液,活力为38078U;然后添加硫酸铵至饱和浓度90%进行盐析,SOD冻干粉的比活为168.3U/mg(蛋白)。而用提取SOD后的玉米渣进行酒精发酵,其淀粉出酒率达到54.25%。另外,还分别考察了玉米浸泡液和SOD盐析液对酒精发酵的影响。     

浸泡对玉米SOD和醇溶蛋白提取的影响

100g玉米中加入200mL pH7.80·05mol/L的磷酸缓冲液,40℃下浸泡36h后将玉米淋干,将胚芽与胚乳分离、破碎。从胚芽中提取SOD,SOD酶活最高达到371·55U/g玉米,是未浸泡玉米胚芽的15·8倍;破碎的胚乳∶75%(V)酒精=1∶6混合后,60℃下浸提2h,获得醇溶蛋白。一次浸提醇溶蛋白的提取率为78·94%,比对照提高了20·91%,二次浸提提取率达为93·3%。最后,将提取SOD和醇溶蛋白的玉米残渣进行酒精发酵,同时与采用干法粉碎和湿法粉碎的玉米粉进行对比,其淀粉出酒率分别为53·50%、53·56%和53·51%。     

酸果蔓中SOD酶的提取及活性测定

利用正交法探讨了磷酸缓冲液用量、pH值、提取时间、丙酮用量对酸果蔓SOD酶提取率的影响，并用改良Marklund法测定了酸果蔓中SOD的活性，当在酸果蔓中加入1．5倍的磷酸缓冲液，pH7.8，提取2h，再用1倍体积的丙酮沉淀，酸果蔓中SOD酶粗品的提取率达0．95％；酸果蔓中SOD酶单位体积的活力为433.7U／mL。酸果蔓中SOD酶含量高且活性强。     

玉米超氧化物歧化酶的提取与纯化工艺

为优化玉米超氧化物歧化酶(SOD)提取与纯化工艺。研究不同浸提条件及沉淀分离工艺对玉米SOD提取及纯化效果的影响。最佳诱导和浸提的原料与缓冲液配比分别为1∶1.5~1∶3、1∶2,最佳诱导和浸提时间分别为25 h~30 h、1.5 h。采用50、60℃分别处理15、10 min两次热变性除杂蛋白、丙酮沉淀SOD的纯化效果最好。DEAE-纤维素柱层析纯化后,SOD比活为1 699.7 U/mg,回收率为31%,纯化倍数为30.7。该方法高效且低毒污染少,适于工业化生产。     

玉米超氧化物歧化酶超声波提取技术的研究

以玉米湿法加工淀粉副产物玉米胚芽为原料,经超临界CO2萃取脱脂、低温超细粉碎处理后超声波破碎提取超氧化物歧化酶(SOD)。实验结果表明,最佳超声波提取工艺条件为固液比1:25、超声波处理时间6s、次数40次、间隔时间2s;采用热变性和丙酮沉淀及SephadexG-75葡聚糖凝胶过滤纯化后得到的SOD样品酶活收率为40.56%,蛋白去除率99.36%,比活力为3079.41U/mg,纯化倍数达到63.09;紫外波长扫描的结果表明其最大紫外吸收峰在260nm处,说明玉米胚SOD类型为Cu/Zn-SOD。     

玉米萌发植酸酶酶学特性的初步研究

研究了在玉米发芽过程中改变发芽温度、环境pH值、添加赤霉素和金属离子等培养条件对植酸酶活力的影响,确定了玉米发芽工艺条件:浸泡方式添加金属Ca2+离子,溶液pH4.0,发芽温度30℃,发芽48h.在此最佳条件下,植酸酶活力达到最大值为5.857U/g(绝干).     

花生发芽过程中脂氧合酶活力的变化

选用“花育30号”品种作为实验材料,对花生脂氧合酶活力的测定体系进行优化,研究发芽过程中花生不同部位脂氧合酶活力的变化。结果表明：花生脂氧合酶活力测定的最适条件为：测定温度32 ℃,磷酸盐缓冲液pH 6.8,磷酸盐缓冲液浓度0.10 mol/L。发芽36 h时花生脂氧合酶活力最高,其后酶活力总体呈下降趋势。该酶在子叶和胚芽中的活力呈现出与全粒花生几乎相同的变化趋势,且胚芽中酶活力比子叶中酶活力低。     

玉米超氧化物歧化酶的纯化及性质研究

从玉米胚芽提取得到的SOD粗酶液,经硫酸铵分级沉淀、DE-52纤维素柱层析和Sephadex G-75层析法分离纯化,得到纯的玉米SOD,比活为3 583.3 U/mg蛋白,纯化倍数为61.4.经鉴定,玉米SOD为Cu,Zn-SOD,Cu和Zn离子含量之比约为1∶5,在260nm处有最大吸收峰.用SDS-PAGE测得SOD亚基分子量为18 800,玉米SOD分子量为37 600.实验表明,玉米SOD在50℃以下热稳定性较好,在pH 7～8较稳定.     

利用玉米胚内源酶富集γ-氨基丁酸工艺条件的研究

以脱脂玉米胚为原料,利用其中的蛋白酶和谷氨酸脱羧酶(GAD)富集γ-氨基丁酸。通过实验确定的富集工艺条件为:脱脂玉米胚与磷酸盐溶液(0.06mol/L、pH5.7)比例1∶40(g∶mL),反应时间5h,温度40℃,pH值5.7;同时添加600μmol/LCa2+可将GABA产量提高到4mg/g,比未富集时提高了10倍。另外,通过添加底物L-谷氨酸进行反应,脱脂玉米胚与磷酸盐缓冲液(0.08mol/L、pH5.7)比例为1∶40(g∶mL),VB6和CaCl2的添加量分别为3mmol/mol(Glu)和15mmol/mol(Glu),脱脂玉米胚与L-Glu质量之比为45∶1,40℃下反应6h,Glu的转化率可达100%,GABA产量为15mg/g,比未富集时提高40倍。     

蜂蛹超氧化物歧化酶(SOD)的提取及理化性质研究

对蜂蛹超氧化物歧化酶(SOD)的提取工艺及理化性质进行了研究。结果表明,用磷酸盐缓冲液可以对蜂蛹SOD进行有效的提取,最佳提取工艺条件为:用pH7.6的磷酸盐缓冲液于室温下静置提取4h后于55℃条件下加热20min,按该工艺条件进行提取,蜂蛹SOD的活力为110.41U/mgpro。蜂蛹SOD最适温度为40～60℃,最适pH为pH7.0～9.0,氰化钾和H2O2是蜂蛹SOD的抑制剂,可以有效地抑制蜂蛹SOD的活性。     

Plackett-Burman试验设计及响应面法优化超声辅助提取明绿豆SOD工艺

为了充分提取明绿豆中的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),选用Plackett-Burman试验设计对影响磷酸盐缓冲液提取明绿豆SOD比活力的7个因素进行评价,筛选出具有显著效应的3个因素液固比、磷酸盐缓冲液p H值和超声水浴温度。在此基础上,采用响应面分析法优化出主要影响因素的最佳参数水平。结果表明:采用液固比22∶1(m L/g)、磷酸盐缓冲液p H 7、超声功率140 W、超声时间20 min、超声水浴温度44℃、水浴浸提时间1.5 h、水浴浸提温度60℃的组合,明绿豆SOD的实际比活力为856.95 U/mg。与传统SOD源相比,明绿豆SOD含量处于较高水平,可成为一种新的植物SOD源。     

废弃食用菌栽培块中纤维素酶的提纯工艺研究

利用废弃食用菌栽培块通过浸提、膜浓缩、盐析和双水相萃取等方法提取加工工业级和高纯度纤维素酶制剂。结果表明：采用含体积分数0.2% Triton X-100 的pH5.0、0.2mol/L 乙酸- 乙酸钠缓冲液作为酶浸提液,在25℃浸提3h 条件下可以抽提出102.64U/mL 的纤维素酶溶液,再在质量分数60% 的(NH4)2SO4 饱和度条件下可回收65.54% 的纤维素酶总活力,制备成酶活力达到2865.47U/mL 的工业级纤维素酶制剂;再经质量分数22% 聚乙二醇6000(PEG6000)-20%(NH4)2SO4 双水相体系在pH5.5、7mmol/L NaCl 条件下常温萃取,可获得酶活力为10208.46U/mL,酶比活力106.62U/mg 的高纯度纤维素酶,酶总活力得率为51.22%,纯度是浸提液的12.85 倍。     

小麦苗中超氧化物歧化酶(SOD)提取条件的优化研究

利用磷酸盐缓冲液提取小麦苗中抗氧化组分超氧化物歧化酶(SOD),对磷酸缓冲液pH、抽提时间、热处理温度、热处理时间四个提取工艺参数进行单因素实验,并采用四因素三水平的响应曲面分析法(RSA)对上述因素的最佳水平范围进行优化,以邻苯三酚自氧化法对超氧化物歧化酶的活性进行测定。结果表明,在磷酸缓冲液pH8.0、抽提时间1h、热处理温度70℃、热处理时间15min的最优工艺条件下酶的活性较高,超氧化物歧化酶的活性可达587.60U/mL,此技术为小麦苗的综合利用提供了新方向。      

反胶束法萃取玉米胚芽蛋白及其功能性研究

研究了AOT/异辛烷反胶束法萃取玉米胚芽蛋白及玉米胚芽蛋白的加工功能性。在实验中分别考察了纤维素酶加酶量、AOT浓度、KCl浓度、缓冲液pH值、W0对玉米胚芽蛋白前萃率的影响,以及萃取时间、KCl浓度、缓冲液pH值对后萃率的影响,确定了前萃的最佳技术条件:加酶量为4 000 IU/g玉米胚芽、AOT浓度为3 g/50 mL异辛烷、萃取pH 6、KCl浓度0.1 mol/L、W0为25;后萃的最佳技术条件为:KCl浓度为0.5 mol/L、萃取pH 10.5,萃取时间40 min;对玉米胚芽蛋白的部分加工功能性进行研究,结果表明其吸油性(2.9 mL/g)、乳化性(54.5%)、乳化稳定性(86.5%)以及泡沫稳定性(58.3%)都较好,但吸水性和起泡性相对较差,玉米胚芽蛋白不但营养效价高,而且具有较好的加工功能特性,在食品工业中具有应用潜力。     

鸭肝乳酸脱氢酶的分离纯化及部分性质研究

新鲜鸭肝经匀浆、磷酸盐缓冲液抽提,乙醇和硫酸铵分级沉淀,DEAE-Sepharose离子交换层析及Superdex-200凝胶过滤层析,获得电泳纯的乳酸脱氢酶。该酶经纯化后酶比活力达到668.82 U/mg,酶活回收率为25.79%,纯化倍数为185.78。该酶的全分子质量约为170.93 kD,亚基分子质量为44.72 kD;最适反应温度为45 ℃,最适pH值为7.4,在25～45 ℃及pH 5～10的范围内稳定性较好;在45 ℃、pH 7.4条件下,测得该酶对底物还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reduced form of nicotinamide-adenine dinucleotid,NADH）的Km值为3.407 μmol/L,对丙酮酸钠的Km值为8.431 μmol/L;草酸、十二烷基硫酸钠（sodium dodecyl sulfate,SDS）、Cu2＋、Ag＋对该酶的抑制作用最强,Co2＋、K＋对该酶有双重作用,低浓度时有激活作用,而高浓度时具有抑制酶活性的作用。