高效液相色谱分析乳清蛋白方法研究

建立测定乳清蛋白中α-乳白蛋白和β-乳球蛋白含量的高效液相色谱分析方法,采用Agilent的ZORBOX Eclipse XDB-C8色谱柱(150 mm×4.6 mm),流动相A为10%乙腈中含0.1%三氟乙酸,流动相B为90%乙腈中含0.1%三氟乙酸。采用梯度洗脱,流速为0.25 mL/min,二极管阵列检测器,检测波长214 nm,柱温40℃。外标法定量,α-La和β-Lg两种组分线性关系良好,相关系数分别为0.993 1和0.990 9,检测限为3μg/mL、8μg/mL。     

高效液相色谱法测定乳清蛋白主要成分的研究

建立了测定乳清蛋白中α-La和β-Lg含量的高效液相色谱分析方法,采用Kromasil C8色谱柱(5μm,250mm×4.6mm),流动相A为0.1%的三氟乙酸-水溶液,流动相B为0.09%的三氟乙酸-乙腈溶液梯度洗脱,流速为0.8mL/min,二极管阵列检测器,检测波长215nm,柱温30℃。外标法定量,α-La和β-Lg两种组分线性关系良好,相关系数分别为0.9998和0.9984,检测限为3μg/mL、10μg/mL。     

RP-HPLC法测定毛鸡骨草中芹菜素-6,8-C-二葡糖苷含量

目的建立测定毛鸡骨草药材中芹菜素-6,8-C-二葡糖苷含量的方法。方法用反相高效液相色谱法,色谱柱为Lichrospher C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-0.1%三氟乙酸(35:65),流速1.0 mL/min,检测波长272 nm,柱温为室温。结果芹菜素-6,8-C-二葡糖苷在0.010 2～0.102 0 mg/mL范围内线性关系良好(r=0.999 8);平均回收率(n=6)99.3%,RSD 2.43%。结论所建方法简捷、快速,结果准确,可为评价毛鸡骨草药材的质量提供可靠的依据。     

高效液相色谱-柱后衍生法测定保健品中维生素B_1的含量

文章建立了测定保健品中维生素B_1含量的高效液相色谱-柱后衍生法。方法采用色谱柱:Ultimate XB-C18(4.6mm×150mm,5μm);流动相:(0.01%辛烷磺酸钠+1.5%乙酸+5%甲醇+0.12%三乙胺)-甲醇(65∶35);流速:1.0 mL/min;柱温:35℃;检测波长:Ex=375nm,Em=435nm。研究发现该柱后衍生法测定同一样品中维生素B_1含量得到的峰面积是柱前衍生法测定结果的1.6-18.8倍,维生素B_1含量在0.01-32μg/mL范围内线性良好,R2=0.999,检出限为1 ng/mL。该方法灵敏、简便、准确,重现性好,可用于保健品中维生素B_1含量的测定。     

不同秋果型树莓中槲皮素和山奈酚含量的测定

通过高效液相色谱法测定,不同秋果型树莓中槲皮素和山奈酚的含量。高效液相色谱法的测定条件:色谱柱为安捷伦18反相色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-1%乙酸溶液为流动相,流速为1.000 mL/min,测定波长254 nm,进样量10μL。结果表明:槲皮素和山奈酚分别在0.11μg/mL～11μg/mL(R~2=0.999 8);0.11μg/mL～27.5μg/mL(R~2=0.999 7)呈良好的线性关系;加样回收率分别为为0.76%、0.91%。     

RP-HPLC法测定毛鸡骨草中芹菜素-6,8-C-二葡糖苷含量

目的 建立测定毛鸡骨草药材中芹菜素-6,8-C-二葡糖苷含量的方法.方法 用反相高效液相色谱法,色谱柱为Lichrospher C18 (250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-0.1％三氟乙酸(35:65),流速1.0 mL/min,检测波长272 nm,柱温为室温.结果 芹菜素-6,8-C-二葡糖苷在0.010 2～0.102 0 mg/mL范围内线性关系良好(r=0.999 8);平均回收率(n=6)99.3％,RSD 2.43％.结论 所建方法简捷、快速,结果准确,可为评价毛鸡骨草药材的质量提供可靠的依据.     

凝胶过滤色谱法测定婴儿配方乳粉中α-乳白蛋白

建立了一种用凝胶过滤色谱测定婴儿配方乳粉中α-乳白蛋白的方法。色谱条件:色谱柱为TSK-2000SWXL(7.8 mm×300 mm),流动相为6 mol/L盐酸胍溶液,检测波长280 nm。结果表明:α-乳白蛋白的检出限为2.8μg/m L,回收率在93%~106%之间,相对标准偏差RSD为3.2%。用此方法检测婴儿配方乳粉中α-乳白蛋白,操作简单,结果准确可靠,精密度高,重现性好。     

反相高效液相色谱法同时测定鸡血清中视黄醇和α-生育酚

旨在建立一种可以同时测定鸡血清中视黄醇和α-生育酚浓度的方法.试验将100μL无水乙醇和0.7 mL己烷加入100μL血清中,混合物振荡离心,用氮气干燥己烷,再用甲醇溶解的方法进行测定.试验用色谱柱Agilent ZORBAX SB-C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),用甲醇:水(98:2)作为流动相,在波长325 nm和285 nm下分别检测视黄醇和α-生育酚.结果表明,视黄醇在0.025～2.0μg/mL浓度范围内呈线性(r2=0.999 9),而α-生育酚在0.5～20.0μg/mL浓度范围内呈线性关系(r2=0.999 6);视黄醇和α-生育酚的平均回收率分别为94.5%和93.3%.利用本方法选择不同波长同时测定鸡血清中视黄醇及α-生育酚的含量,方法快速、灵敏、准确,样品处理简便易行.     

UPLC法测定乳及乳制品中乳清蛋白的研究

建立了超高效液相色谱法同时测定鲜牛乳和婴幼儿配方奶粉中α-乳球蛋白、β-乳白蛋白、乳铁蛋白的方法.鲜牛乳和奶粉经前处理后,采用ACQUITY UPLC BEH300? C18色谱柱进行分离,以0.1％TFA/H2O,乙腈+三氟乙酸(1000:0.5)为流动相,流速为0.5 mL/min,进行梯度洗脱,在280 nm波长...     

高效液相色谱-二极管阵列检测法同时测定不同品种巴旦杏中槲皮素、山奈酚的含量

目的:建立用高效液相色谱-二极管阵列检测法测定新疆不同品种巴旦杏仁中槲皮素、山奈酚含量的方法。方法:色谱柱:HC-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.4%磷酸溶液(55∶45,V/V);检测波长:360 nm;柱温:30℃;流速:1.00 mL/min。结果:槲皮素和山奈酚分别在1.0~30μg/mL(r=0.999 3)和0.5~40μg/mL(r=0.999 8)质量浓度范围内呈良好的线性关系,平均回收率分别为102.0%(相对标准偏差为2.08%,n=5)和102.8%(相对标准偏差为2.21%,n=5)。结论:该方法简便、快速、有效、准确、具有良好的重复性和回收率,可作为巴旦杏仁的质量控制和评价。     

高效液相色谱和超高效液相色谱法测定乳制品中三聚氰胺含量的对比

目的建立测定三聚氰胺含量的超高效液相色谱(UPLC)法,并与高效液相色谱(HPLC)法的测定结果进行比对。方法 HPLC条件为Agilent Zorbax SB_C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)以离子对试剂缓冲溶液与乙腈为流动相(95:5);流速1.0mL/min;UPLC条件为Acquity UPLC BEH C18柱(2.1mm×100mm,1.7μm);以离子对试剂缓冲溶液与乙腈为流动相(95:5);流速0.5m L/min。结果两种方法所得含量测定结果一致。HPLC法和UPLC法回收率分别为92.9%(RSD=0.84,n=6)和95.3%(RSD=0.48,n=6)。结论 UPLC法与HPLC法相比在具备准确可靠、重复性好的同时,更加快速、灵敏、并且大大减少了有机溶剂的消耗,因此可以成功替代HPLC法测定三聚氰胺的含量。     

柱前衍生高效液相色谱法测定5种常见食用菌中的甲醛含量

目的建立柱前衍生-高效液相色谱法测定5种常见食用菌中甲醛含量。方法将干制与新鲜食用菌用超纯水浸泡,浸泡液经2,4-硝基苯肼(DNPH)衍生后,采用高效液相色谱法检测;色谱柱:C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相:乙腈-水(70:30, V:V);流速为1.0 mL/min;检测波长352 nm;柱温40℃。外标法定量测定食用菌中甲醛含量。结果柱前衍生法对甲醛浓度在10.70～214.00μg/L范围内与其衍生物峰面积呈良好的线性关系,线性回归系数(r~2)为0.9964,方法的检出限为4.20μg/kg(S/N=3)。加标回收率为78.27%～114.26%,精密度1.55%～9.22%(n=6)。5种食用菌样品仅香菇样品检出甲醛。新鲜香菇甲醛含量超标,干制后香菇甲醛含量降低,低至国家标准含量以下。结论本研究的方法简便、快速、准确、稳定,可用于测定食用菌中甲醛含量。     

柱前衍生法测定茶叶中L-茶氨酸的含量

本文研究了柱前衍生测定茶叶中L-茶氨酸含量的方法。茶叶中的L-茶氨酸用热水提取后,经2,4-二硝基氟苯衍生后上高效液相色谱法测定。色谱条件为:色谱柱(Kromasil C18柱4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈︰磷酸盐溶液(pH=6.5)=15︰85梯度洗脱;检测波长:360 nm;流速:1.0 mL/min;柱温:35℃;进样:5μL。本方法检出限4 mg/kg,在1.0~50.0μg/mL呈现良好的线性关系(r=0.999 9),衍生后的样品室温25℃放置6天内稳定,重现性试验相对标准偏差0.16%(n=6),回收率为96.4%~102.2%。本高效液相色谱法可以准确地测定茶叶中L-茶氨酸的含量。     

RP-HPLC测定小茴香中槲皮素和山奈酚含量

建立用反相高效液相色谱法同时测定小茴香中槲皮素和山奈酚含量的方法。采用Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm);柱温:25℃;流动相:甲醇-0.4%磷酸(50∶50);流速:1mL/min;检测波长:360nm。槲皮素、山奈酚分别在2.19~109.6μg/mL和2.28~114.0μg/mL范围内线性关系良好。槲皮素和山奈酚的平均回收率分别为95.61%,94.41%,RSD分别为2.4%,3.0%。此方法简便、准确、可靠,可作为小茴香中槲皮素和山奈酚的定量分析方法。测定出小茴香总黄酮水解物中槲皮素和山奈酚的含量分别为:槲皮素0.29 mg/g,n=3,RSD=2.60%;山奈酚含量为:0.36mg/g,n=3,RSD=3.25%。     

反相高效液相色谱法同时测定鲜牛乳中的乳清蛋白

通过对高效液相色谱条件中色谱柱、流动相、流速、检测波长、柱温优化的试验,建立了反相高效液相色谱对鲜牛乳中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、乳铁蛋白同时微量检测的分析方法,最终确定采用Agela Venusil ASB C8(5μm,4.6 mm×250 mm,150μm)色谱柱;三氟乙酸/乙腈/水流动相,流速0.8 m L/min,检测波长215 nm,柱温30℃的色谱条件,并利用外标法定量。结果表明,α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、乳铁蛋白3种组分的线性关系良好,相关系数分别为0.9999、0.9991、0.9998,检出限为0.001~0.012 mg/m L,样品平均回收率在86.5%~109.08%之间,精密度和重现性试验RSD值均小于5%。该方法的前处理简单、耗时少,样品损失少,分离效果好,能够实现牛乳中3种蛋白的同时检测。     

HPLC法测定仙人掌中芦丁的含量

采用HPLC法测定仙人掌中芦丁的含量.色谱条件为:Symmetry-C18柱(150mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇:0.5%醋酸=3:7(v/v);流速:0.6mL/min;波长258nm.结果表明,芦丁标准工作曲线:Y=2×106X-2×106,R=0.9993,线性范围为:0.0008～0.016μg/mL,平均回收率为100.07%,RSD=1.51%(n=5).     

HPLC法同时测定复方中药保健酒中松果菊苷和毛蕊花糖苷的含量

采用高效液相色谱仪建立测定复方中药保健酒中松果菊苷与毛蕊花糖苷含量的方法。AlltimaC18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相:乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱(流动相A为乙腈,B为0.1%甲酸水,梯度条件为0-30 min,15-27%A,85-73%B;30-40 min,27%A,73%B);流速:1.0 mL/min;检测波长:330 nm;柱温30℃,进样量10μL。松果菊苷、毛蕊花糖苷分别在0.05-1.60mg/mL(R2=0.9999;n=6)、0.25-0.80mg/mL(R2=1;n=6)范围内线性关系良好,加样回收率分别为99.52%及97.20%。该方法重复性好,准确,可用于复方中药保健酒中松果菊苷、毛蕊花糖苷含量测定。     

HPLC法测定山茱萸及其保健酒中马钱苷的含量

建立了测定山茱萸及其保健酒中马钱苷含量的高效液相色谱分析法.样品用80%甲醇回流提取并用0.45μm微孔滤膜过滤.色谱柱为Phenomsil C18 BDS柱(250mm×4.6mm,5μm),柱温为35℃,马钱苷检测波长为236nm,流动相为乙腈-水(1486),流速为1mL/min.该方法测得马钱苷的线性范围为0.092μg/mL～0.92μg/mL,回归方程为A=1264.1C 18.992(R=0.9997),平均回收率为99.82%,RSD=l.95%(n=5)山茱萸及其保健酒中马钱苷的含量分别为1.378%、0.703%.此法准确、快捷、重复性好,适合于马钱苷的含量测定.     

HPLC测定阿昔莫司缓释片的含量

目的建立采用高效液相色谱(HPLC)测定阿昔莫司缓释片含量的方法。方法采用Agilent TC-C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为0.13%庚烷磺酸钠溶液-甲醇-冰醋酸(85:15:1),检测波长为273 nm,流速为1 mL/min。结果阿昔莫司在19.63~98.16μg/mL范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为99.61%,RSD为0.60%。结论本方法准确、高效,可用于阿昔莫司缓释片质量控制。     

改进的HPLC法测定夏枯草中熊果酸的含量

改进高效液相色谱法(HPLC)测定熊果酸的方法,得出最佳色谱条件:AtlantisTMC18分析柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为0.02mol/L;磷酸二氢钠∶甲醇(体积比为15∶85);检测波长为215nm;流动相流速为0.8mL/min。线性范围:59～950μg/mL,回归方程为Y=201.55X-2070.9,r=0.9997。在上述条件下对中药夏枯草中所含熊果酸进行了含量测定,分析结果表明,此法简单快速、高效灵敏、重现性好。