木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶分步水解玉米蛋白酶解产物抗氧化活性研究

采用木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶水解玉米蛋白粉,在两种酶最佳作用条件下,对两种酶作用时间进行了研究,结果表明,采用木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶双酶分步水解其酶解产物的还原力和DPPH·清除率显著提高。木瓜蛋白酶水解1 h后再用碱性蛋白酶水解2 h得到玉米蛋白酶解产物的抗氧化效果最好,且其酶解产物的还原力为0.725,DPPH·清除率为69.6%。     

双酶法制备米糠蛋白抗氧化肽

以提取的米糠蛋白为原料,研究其酶解工艺及其水解物的抗氧化活性。选取木瓜蛋白酶和风味蛋白酶双酶水解制备米糠蛋白抗氧化肽。结果表明,木瓜蛋白酶与风味蛋白酶酶活力之比为1∶1时,清除自由基的效果较佳。选取五个不同的影响因素,进行了酶解工艺的单因素及正交实验。实验结果得出较佳酶解参数为：底物浓度（[S]）1.5%,加酶量4500U/g,pH6.5,温度45℃,时间3h,在此条件下米糠蛋白水解物对DPPH自由基清除率为58.82%,对羟自由基的清除率为34.78%。     

不同苦荞蛋白酶解产物抗氧化活性研究

以苦荞蛋白作为底物,采用碱性蛋白酶Alcalase 2.4 L、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶以及胃蛋白酶加胰蛋白酶模拟体内蛋白消化,制备苦荞麦蛋白水解物。采用DPPH及ABTS~+·法比较不同的蛋白水解物与水解前苦荞蛋白的体外抗氧化活性。结果表明:不同蛋白酶水解产物水解度由高到低的顺序为:碱性蛋白酶胃蛋白酶~胰蛋白酶胃蛋白酶木瓜蛋白酶胰蛋白酶,其中碱性蛋白酶水解苦荞蛋白水解度达29.95%。苦荞蛋白本身具有一定的抗氧化能力,其中DPPH清除率及ABTS~+·清除率最高分别达71.91%及11.25%,但均显著低于阳性对照Vc。随着水解程度的增加,苦荞蛋白水解产物抗氧化能力逐渐增强。其中,以碱性蛋白酶酶解产物抗氧化活性最高,其DPPH清除率及ABTS~+·清除率最高分别为91.65%(0.5 mg/mL)及16.67%(1 mg/mL),均显著高于原苦荞蛋白。其中,碱性蛋白酶水解产物的DPPH自由基清除率在高浓度(0.5mg/mL)条件下,与阳性对照Vc持平。同时碱性蛋白酶酶解产物抗氧化性(DPPH清除率及ABTS~+·清除率)显著优于其他蛋白酶解产物。因此,苦荞麦蛋白采用碱性蛋白酶解制备苦荞水解产物可作为天然的抗氧化剂。     

麦胚蛋白的双酶分步水解及其产物的抗氧化活性研究

前期实验确定中性蛋白酶为水解麦胚蛋白制备抗氧化肽的最适单酶,在此基础上进行了双酶组合水解麦胚蛋白的酶解工艺及酶解产物的抗氧化活性的探讨性研究。结果表明,双酶最佳组合为中性蛋白酶和碱性蛋白酶。经中性蛋白酶酶解270min的酶解液加入碱性蛋白酶后,水解至300min和420min时酶解产物还原能力和肽含量有不同程度增加,但DPPH·清除率始终是呈下降趋势。因此双酶水解比单酶水解麦胚蛋白没有明显优势。     

藜麦多肽的制备及其抗氧化活性研究

目的 优选复合酶协同超声辅助法提取藜麦蛋白的工艺以及探讨藜麦多肽的抗氧化活性。方法 采用 Box-Behnken 响应面法,对超声辅助糖化酶-纤维素酶复合酶法进行优化。使用碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶、酸性蛋白酶、胰蛋白酶和胃蛋白酶制备藜麦多肽,通过 DPPH 法和 ABTS 法对其抗氧化活性进行探究。结果 根据响应面模型对复合酶超声辅助提取条件进行优化, 得到最佳提取条件：总加酶量 400 U/g、pH 5.0、时间 60 min。以最佳优化条件提取,藜麦抗氧化肽的 DPPH 自由基清除率最高达到 79.64%;ABTS 自由基清除率最高达到 76.14% 。结论 采用响应面法建 立的模型相对准确,藜麦蛋白的提取工艺优化方法可行;藜麦蛋白木瓜蛋白酶水解物具有较好的抗氧化活性,为藜麦作为功能食品深入开发提供依据。     

Alcalase和Flavourzyme协同修饰玉米蛋白制备抗氧化活性蛋白水解物

采用Alcalase和Flavourzyme对高底物浓度玉米蛋白单酶水解条件进行优化,并研究双酶协同水解玉米蛋白制备抗氧化活性蛋白水解物的工艺。结果表明:Alcalase的适宜水解条件为酶解温度50℃,p H 7.7,加酶量2%(V/m),反应时间75 min,该条件下玉米蛋白水解物的DPPH自由基清除率和还原力分别为74.34%和0.984;Flavourzyme适宜水解条件为酶解温度53℃,p H 6.4,加酶量5%(m/m),反应时间50 min,该条件下玉米蛋白水解物的DPPH自由基清除率和还原力分别为70.55%和0.715。双酶协同水解过程中Alcalase+Flavourzyme较Flavourzyme+Alcalase所得玉米蛋白水解物的抗氧化活性高,在110 min时Alcalase+Flavourzyme水解所得玉米蛋白水解物的DPPH自由基清除率与还原力达到整个水解过程中的最高值,分别为91.32%和1.341。     

麦胚蛋白水解度与麦胚抗氧化肽活性关系

用固定化碱性蛋白酶水解冻干麦胚蛋白粉制备麦胚抗氧化肽,研究麦胚蛋白的水解度与抗氧化肽活性的关系。在单因素实验基础上,利用Box‐Behnken实验设计对影响因素进行优化试验和统计分析。结果显示,酶解麦胚蛋白的水解度和麦胚抗氧化肽的活性密切相关;响应面分析试验得到麦胚抗氧化肽对自由基清除率的回归方程,方程达到极显著水平,拟和度较高。固定化蛋白酶水解麦胚蛋白获取抗氧化肽优化工艺参数：pH值为9．0、酶解温度56℃和酶解时间230 min。在此条件下,麦胚蛋白的水解度为17．85％,抗氧化肽对自由基的清除率达到57．42％。     

双酶水解小麦胚芽及水解物的抗氧化活性研究

本文研究双酶相继水解脱脂小麦胚芽及对水解物抗氧化活性的影响。实验结果表明,与碱性蛋白酶和Protamex组合及碱性蛋白酶和风味蛋白酶组合相继水解得到的水解物相比,用碱性蛋白酶(Alcalase 2.4L)和胰蛋白酶相继水解得到的水解物的清除DPPH自由基能力和还原能力最大。上述三组不同酶组合的水解物的抗氧化活性均高于碱性蛋白酶单酶水解脱脂小麦胚芽的水解物。小麦胚芽双酶水解物的抗氧化活性与水解物浓度有关,增加水解物浓度可有效提高其清除DPPH自由基能力和还原能力。     

不同蛋白酶对小麦蛋白酶解物抗氧化活性的影响

小麦蛋白是小麦淀粉加工的副产物,酶解是提高小麦蛋白溶解性和功能性的有效方式,而酶解用酶种类可能对酶解产物的功能性如抗氧化活性有一定影响。采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、风味蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶6种常用的蛋白酶分别对小麦蛋白进行酶解,并对酶解4 h后酶解物的多肽得率、分子质量分布、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率、超氧阴离子自由基(O_2~-·)清除率、羟自由基(·OH)清除率等反映水解程度和抗氧化能力的主要指标进行评价。结果表明,风味蛋白酶酶解物中多肽得率最高,达91.44%,且分子质量小于3 000 D的多肽含量达76.9%;酶解物质量浓度为3 mg/m L时,木瓜蛋白酶酶解物对DPPH自由基清除作用最好,清除率为65.12%(P0.01),其次是风味蛋白酶(58.43%)和碱性蛋白酶(55.29%);碱性蛋白酶酶解物对O_2~-·清除率效果最好,清除率为58.68%(P0.01),其次是风味蛋白酶(49.25%);碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解物对·OH清除效果最佳,清除率分别为59.23%和58.16%。结果说明,蛋白酶种类对小麦蛋白酶解物抗氧化活性影响显著,风味蛋白酶对提高蛋白水解程度和生成小分子质量多肽的作用明显,而碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶对提高酶解产物抗氧化活性效果较好。     

酶解方式对核桃蛋白肽及其抗氧化活性的影响

分别采用7种蛋白酶对核桃蛋白进行单酶水解,并与双酶复合酶解进行比较,考察不同酶解方式对酶解产物水解度、短肽得率和抗氧化活性的影响。结果表明,碱性蛋白酶单酶酶解核桃蛋白,产物的水解度和短肽得率显著高于其它单酶处理,分别达到18.94%和76.37%,对DPPH自由基清除能力的IC50值仅为3.23mg/mL,抗氧化活性显著高于其它处理;将碱性蛋白酶分别与其它蛋白酶组合酶解,核桃蛋白酶解产物的水解度和短肽得率均有所提高,其中与木瓜蛋白酶组合处理的水解度可达28.36%,短肽得率可提高至85.62%。双酶酶解产物对提高清除DPPH自由基和羟自由基的活性不显著,碱性蛋白酶分别与中性蛋白酶、木瓜蛋白酶的组合可以显著提高酶解产物清除超氧阴离子自由基的活性。     

麦麸多肽的分离纯化及抗氧化功能研究

采用碱性蛋白酶Alcalase 水解麦麸蛋白制备麦麸多肽,利用SephadexG-25 和DEAE-32 对麦麸多肽进行纯化,醋酸纤维素薄膜电泳法测定麦麸多肽纯度,用硝基四氮唑蓝(NBT)还原实验、脱氧核糖法检测其对超氧阴离子自由基(O2·)和羟自由基(·OH)的清除能力,分光光度法测定小鼠红细胞溶血和肝线粒体膨胀程度。结果表明,分离纯化的麦麸多肽对O2·和·OH 的清除率别为53.16%、62.39%,并且具有明显抑制氧化溶血现象和·OH 诱导线粒体肿胀的作用,说明麦麸多肽具有较强的抗氧化功能。     

The effect of lactic acid bacteria fermentation on the antioxidant activity of wheat gluten pancreatin hydrolysates

The antioxidant activities of the fermented wheat gluten hydrolysates with different fermentation times were investigated to elucidate the impact of lactic acid bacteria (LAB) fermentation on the wheat gluten hydrolysates. Prior to LAB fermentation, wheat gluten was deamidated by hydrochloric acid and then hydrolysed by pancreatin to 12 and 24 h, respectively. Results showed that LAB fermentation had significant impacts on the enzymatic efficiency and antioxidant activities of wheat gluten. The degree of hydrolysis and protein recovery of hydrolysates gradually increased and then reached maximum values, respectively, when fermenting with LAB for 36 h. The hydrolysis degree and protein recovery of fermented pancreatin 24‐h hydrolysates were larger than that of the fermented pancreatin 12‐h hydrolysates during the whole fermentation. The antioxidant activity analysis revealed a marked increase and improvement in the scavenging activities of 1,1‐Diphenyl‐2‐picrylhydrazyl·radicals, hydroxyl radicals and oxygen radical absorbance capacity, while the scavenging activities of ABTS⁺ radical decreased as the fermentation time extended. The antioxidant activities of pancreatin 24‐h hydrolysates were higher than that of the pancreatin 12‐h hydrolysates during the whole LAB fermentation.     

酶解麦胚蛋白制备抗氧化肽的研究

通过单因素试验和响应面分析,确定了采用碱性蛋白酶ProleatherFG-F制备麦胚抗氧化肽的最佳酶解条件为:[S]5.00%、[E]/[S]4.90%～5.05%、pH9.5、温度53.30～54.50℃、时间3.8h,该条件下制备的麦胚抗氧化肽对DPPH自由基和超氧阴离子自由基的清除率分别为59.55%和56.38%。     

琥珀酸脱酰胺对小麦面筋蛋白酶解产物抗氧化性的影响

研究琥珀酸不同脱酰胺程度对小麦面筋蛋白胰酶的酶解产物抗氧化性的影响。在相同水解度下,以DPPH.清除率、.OH清除率、ORAC值为抗氧化指标,结果表明低脱酰胺程度(22.4%)的小麦面筋蛋白酶解产物的抗氧化性有较大幅度的提高,高脱酰胺程度(60.4%)的小麦面筋蛋白酶解产物的抗氧化性降低。水解度15%的酶解产物的肽分子量分布表明,低脱酰胺的小麦面筋蛋白酶解产物中分子量小于3000u的肽段增加,高脱酰胺的小麦面筋蛋白酶解产物中分子量小于3000u的肽段减少;在相同水解度下的氨基酸分析结果表明,脱酰胺后的小麦面筋蛋白酶解生成的肽的疏水性和抗氧化性的氨基酸含量提高。因此,低脱酰胺的小麦面筋蛋白酶解产物抗氧化性提高的主要原因是产物中含疏水性和抗氧化性氨基酸的小分子肽含量提高。     

啤酒糟醇溶蛋白酶法水解及水解产物的抗氧化研究

用碱性蛋白酶(Alcalase)对啤酒糟醇溶蛋白进行水解,并使用正交试验设计以水解度为指标对酶法水解进行了优化。结果表明,啤酒糟醇溶蛋白的酶解最优条件为底物浓度2%,酶解温度60℃,pH9.5,酶浓度(E/S)0.096 AU/g,酶解时间3h。以DPPH自由基清除率和羟自由基清除率为指标,用抗坏血酸做对照,对酶解产物的抗氧化活性进行了分析。分别得到了两种自由基清除的最优酶解条件。啤酒糟醇溶蛋白酶解产物对不同自由基的最佳清除作用的水解条件不一致,可能与所产生的多肽对几种自由基的清除机理有关。     

Antioxidant properties of papain hydrolysates of wheat gluten in different oxidation systems

Enzymatic hydrolysis was used for preparing hydrolysates from wheat gluten which is by-product during production of wheat starch. The enzyme used for the hydrolysis was papain. The hydrolysate was separated based on the molecular weight of the peptides by membrane ultrafiltration (UF) with a molecular weight cut-off of 5 kDa into permeate (P) and retentate (5-K) fractions. The antioxidative activities of the hydrolysate and its UF fractions were investigated by using the TBA method and scavenging effect of 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical. The three fractions showed strong antioxidative activities in the linoleic acid oxidation system, and exhibited DPPH radical scavenging activity. The antioxidative activity of the P fraction was almost the same as that of vitamin E at pH 7.0. The molecular weight distribution of the P fraction was concentrated in 4.2 kDa (86.5%) after gel permeation chromatography fractionation using an HPLC system.The P and 5-K fractions had higher surface hydrophobicities (H₀) at pH7.0 compared with the hydrolysate. The resulting UF fractions were superior to the hydrolysate in terms of antioxidative activities.     

植物油的不同组分DPPH自由基清除能力及其与微量有益成分含量的相关性

研究评估13种常见植物油的极性组分、非极性组分和全油样品的DPPH自由基清除能力,并将DPPH自由基清除能力与生育酚、多酚、植物甾醇等微量有益成分含量进行相关性分析。结果表明:橄榄油、芝麻油、小麦胚芽油和米糠油极性组分的DPPH自由基清除能力高于其他植物油,均大于200μmol TE/100 g;植物油非极性组分的DPPH自由基清除能力在10.53~553.20μmol TE/100 g之间,小麦胚芽油和米糠油的清除能力较高;植物油全油的DPPH自由基清除效果比非极性组分的略高;植物油非极性组分、植物油全油的DPPH自由基清除能力与生育酚含量、β-谷甾醇含量、菜油甾醇含量呈显著相关(P0.01);植物油极性组分的DPPH自由基清除能力则与多酚含量呈显著相关(P0.05)。     

鸭肉蛋白酶解产物的抗氧化特性

为了解酶解时间、蛋白酶种类对鸭肉蛋白酶解产物抗氧化特性的影响,分别用复合蛋白酶、风味蛋白酶和胰酶对鸭肉进行单酶酶解和双酶分步酶解（胰酶＋复合蛋白酶、胰酶＋风味蛋白酶）,制备不同时间段的酶解产物,并对其自由基清除能力（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基、羟自由基（hydroxyl radical,·OH）和超氧阴离子自由基（superoxide radical,O2－·））和总还原力进行分析。结果表明：各鸭肉蛋白酶解产物的DPPH自由基清除率随着酶解时间的延长而增加,但·OH和O2－·清除率及总还原力随着酶解时间的延长先增加后降低（P＜0.05）。在5 种鸭肉蛋白酶解产物中,复合蛋白酶酶解物表现出最强的DPPH自由基清除能力（75.70±1.54）%、·OH清除能力（59.41±1.24）%和O2－·清除能力（98.50±4.51）%,但用双酶分步酶解得到的酶解产物表现出最强的总还原力（0.330±0.017）。因此鸭肉蛋白酶解产物的抗氧化特性受酶解时间和蛋白酶种类的影响,复合蛋白酶是制备鸭肉蛋白源抗氧化肽的最适蛋白酶。     

不同水解度蜂王浆蛋白体外抗氧化活性的分析

探讨不同水解度的蜂王浆蛋白水解物在体外的抗氧化活性,为新蜂王浆制品的研制提供理论依据。测定了不同酶解度的蜂王浆蛋白酶解物在体外对DPPH自由基清除能力、羟自由基清除能力、还原力和抗脂质过氧化能力。得出蜂王浆蛋白对DPPH自由基清除能力、羟自由基清除能力、还原力和抗脂质过氧化能力的最佳水解度分别为4.18%、4.50%、4.18%、4.50%。该结论对今后研制具有不同抗氧化功能的蜂王浆制品,具有一定的理论指导价值。