有限酶解猪血红蛋白制备亚硝基血红素多肽的研究

为了使亚硝基(NO-)更易结合于血红素亚铁离子及提高色素稳定性,本研究采用蛋白酶有限酶解猪血红蛋白,酶解液中大分子血红素多肽与亚硝基反应合成亚硝基血红素多肽。试验表明,以选用木瓜蛋白酶效果较好,最佳酶解条件为:底物浓度16%,加酶量4000U/g,水解时间6h;酶解液合成色素最佳参数为:pH5.00,反应时间12min,反应温度为55℃,NaNO2的添加量为1.6%。     

酶法水解血红蛋白制备亚铁血红素肽

以新鲜猪血为原料制备血红蛋白采用中性蛋白酶和风味酶两步水解工艺，并通过除氧和添加抗氧化剂保护亚铁离子，水解产物经过10kDa和3kDa的微孔滤膜超滤，得到分子量在3～10kDa的亚铁血红素肽，其中亚铁血红素与肽的比值达到9．92％。通过微胶囊包埋，得到稳定的红色产品。     

富血红素多肽产物制备用酶的比较研究

为筛选适于生产富血红素多肽产物的蛋白酶,比较不同蛋白酶对猪血红蛋白的水解效果。在AS1398 中性蛋白酶、2709 碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶的最适水解pH 值及温度下,以L16(45)正交试验研究酶种类、酶质量分数、底物质量分数和水解时间等因素对水解率、水解液中粗多肽含量和血红素含量等指标的影响。结果表明：酶种类和水解时间两因素对水解率指标的影响达到极显著水平(P ＜ 0.01);底物质量分数是影响粗多肽含量指标的最重要因素;酶种类对血红素含量指标的影响则达到显著性水平(P ＜ 0.05)。中性蛋白酶有利于提高水解率,木瓜蛋白酶有利于提高水解物的粗多肽含量,而碱性蛋白酶则有利于提高水解物的血红素含量。     

酶解血红蛋白制备血红素的研究

以猪血为原料,选用多种蛋白酶水解血红蛋白制取血红素,用分光光度法测定水解液的血红素量。结果表明碱性蛋白酶Alcalase具有最好的水解效果。单因素实验确定水解条件为最适pH为7.5,温度为60℃,底物浓度为4%,加酶量为4%。离心分离后,血红素粗品的纯度为23%。凝胶色谱分析得到沉淀主要有3个峰,最后一个为血红素单体。     

复合酶协同水解法制备绿豆抗氧化多肽

研究复合酶协同水解法制备绿豆抗氧化活性多肽的最佳条件,并探究其体外抗氧化活性。以水解度为指标,在单因素实验的基础上,以pH、温度、底物浓度、酶用量为实验因素,通过L₉(3⁴)正交实验设计筛选出制备绿豆多肽的最佳水解条件,使用DPPH自由基、超氧阴离子自由基及羟自由基的清除能力评价其抗氧化活性。结果表明:复合酶协同水解绿豆蛋白的最适反应条件为pH8.5,温度56 ℃,底物浓度8%,酶用量4%,水解度可达到33.95%。所得绿豆抗氧化多肽对DPPH自由基、超氧阴离子自由基及羟自由基清除率分别为82.8%、76.82%和56.85%,具有较强的抗氧化活性,在天然抗氧化剂和保健食品领域有一定的开发利用价值。     

血红蛋白水解液脱除血红素工艺的优化

用分光光度仪对血红蛋白水解液进行波长扫描,结果表明在波长λ=410nm处的吸光率A410可作为血红蛋白水解液脱色效果的指标。利用响应面回归分析法对血红蛋白水解液脱除血红素的工艺进行优化,研究了沉淀pH值、脱色pH值和活性炭量三因素对脱色蛋白水解液吸光率A410的影响,建立了 A410的数学模型。     

复合酶水解猪血工艺条件优化研究

为了优化酶水解猪血制备血红素的工艺条件,对水解酶进行了选择研究,应用响应面分析法对水解条件进行优化.采用中性蛋白酶和木瓜蛋白酶复合水解,得出水解的最适工艺条件参数为:酶水解时间为123 min、酶水解温度为56℃、加酶比例(中性蛋白酶:木瓜蛋白酶)为0.98:1、酶用量0.11%.经测定水解液中血红素含量为4.40g/L.     

富血红素多肽生产初探

以血红素/多肽氮比及酸溶性血红素多肽百分比为指标,研究酶法水解血红蛋白生产富血红素多肽。结果表明,热处理及超高压处理与酶解效果呈负相关的关系,而不经前处理的血红蛋白的最佳酶解条件为:Protamex/Alcalase=1∶1,E/S=2%,S%=10%,pH=8.0,45℃,12h。     

猪脾多肽的制备工艺研究

脾脏多肽是一种良好的功能性食品及医药化工原料，以猪脾脏为原料就脾脏多肽的提取工艺及纯化进行了初步的研究。     

富血红素多肽生产初探

以血红素/多肽氮比及酸溶性血红素多肽百分比为指标,研究酶法水解血红蛋白生产富血红素多肽。结果表明,热处理及超高压处理与酶解效果呈负相关的关系,而不经前处理的血红蛋白的最佳酶解条件为:Protamex/Alcalase=1∶1,E/S=2%,S%=10%,pH=8.0,45℃,12h。      

酶法水解血球蛋白工艺及其参数研究

本试验通过测定酶解的水解率,选择水解猪血血球蛋白的最优蛋白酶,并确定酶的最佳水解条件(包括底物浓度、酶添加比例、pH值、温度、反应时间以及沉淀血红素的pH值)。试验结果表明,最佳水解条件为底物浓度10%、酶添加比例8‰、pH7.5、水解温度53℃、水解时间为10h。     

响应面法优化猪血红蛋白制备ACE抑制肽的酶解工艺条件

以猪血红蛋白为原料,采用胃蛋白酶水解猪血红蛋白制备ACE抑制肽。以体外ACE抑制率和水解度为指标,通过单因素试验对酶解温度、酶解pH值、底物质量浓度、加酶量、酶解时间等酶解工艺参数进行研究,并用响应面法优化酶解工艺,建立二次多项数学模型。结果表明,胃蛋白酶水解猪血红蛋白制备ACE抑制肽的最佳工艺参数为酶解温度37.60℃、酶解pH 1.98、底物质量浓度4.98g/100mL、加酶量3.04%、酶解时间4h,酶解产物的最大ACE抑制率为70.09%。     

酶法制备芝麻粕多肽的工艺研究

通过单因素试验和正交试验分析,确定碱性蛋白酶Alcalase水解芝麻粕蛋白的最佳水解工艺条件为底物浓度70g/L、温度65℃、[E]/[S]为6%、pH8.0、水解时间3h。在此水解条件下,水解液水解度达到了31.3%。     

酶解猪血红蛋白制备降血压肽工艺参数优化

为获得具有较高降血压活性的降血压肽,选用胰蛋白酶对猪血红蛋白进行水解。以水解物对血管紧张素转化酶(ACE)抑制率为指标,先进行单因素试验,确定底物质量浓度、水解温度、pH值、酶用量及水解时间5个因素的最适水平范围,再通过正交试验对酶解工艺参数进行优化。结果表明胰蛋白酶水解猪血红蛋白制备降血压肽的最佳酶解条件为：底物质量浓度10g/100mL、水解温度45℃、pH8.0、水解时间8h、酶用量2000U/g,此时酶解产物对血管紧张素转化酶的抑制率为68.74%。     

响应面法优化酶法制备猪血红蛋白抗氧化肽

以猪血红蛋白为原料,研究蛋白酶水解制备抗氧化肽的工艺.通过研究酶解时间、酶与底物比、酶种类对制备的抗氧化肽还原力和水解度影响,筛选出最佳蛋白酶及制备抗氧化肽的最佳工艺条件.结果表明:7种酶中,胃蛋白酶的水解度和还原力最佳.胰蛋白酶和胃蛋白酶复合水解比单酶水解的水解度提高了11.83％,还原力没有显著性差异.在此基础上设计单酶响应面,得到最佳还原力酶解条件为:酶解温度37.31℃、pH1.95、酶与底物比3526.74U/g.脱色条件为活性炭用量3％、pH4.0、温度70℃、脱色时间1h,粉末状活性炭的脱色率达到85.69％,蛋白质损失率20.32％.     

胰蛋白酶对猪血红蛋白酶解脱色条件优化

以酶解液水解度（hydrolysis degree,DH）、三氯乙酸（trichloroacetic acid,TCA）可溶性氮含量及血红素残留量为评定指标,采用单因素试验比较胰蛋白酶和碱性蛋白酶对猪血红蛋白的酶解脱色效果。在单因素试验基础上,进行4因素3水平正交试验。结果表明：胰蛋白酶水解脱色的效果更好,最佳酶解工艺参数为酶底比7500 U/g、酶解温度45 ℃、pH 7.5、底物质量浓度8 g/100 mL,在此条件下,酶解液DH为25.67%,TCA可溶性氮含量为80.05%,血红素残留量为18.34%,猪血红蛋白多肽粉蛋白含量83.17%;对此条件下制备的猪血红蛋白多肽粉进行分子质量分布分析,分子质量在1 000 Da以下的小肽占比94.20%;最佳酶解脱色条件下,猪血红蛋白多肽粉中TCA可溶性氮含量为80.05%的蛋白占猪血红蛋白多肽粉蛋白含量的96.25%,这与分子质量分布结果比较符合。     

猪血红蛋白酶解制备ACE抑制肽的研究

本实验选用碱性蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶等六种商业蛋白酶在各自最适反应条件下分别水解猪血红蛋白12h,研究其水解产物对血管紧张素转换酶抑制率和蛋白水解度的影响。结果显示:采用胃蛋白酶酶解获得的产物ACE抑制率最高。胃蛋白酶的酶解条件为底物5%(质量分数),酶与底物浓度比E:S=3%,温度37℃,pH2.0,水解4h后其ACE抑制率为81.10%,水解度为6.64%。     

响应面法优化猪血红蛋白抗菌肽的制备工艺

以猪血红蛋白为原料,利用筛选出的蛋白酶水解制备抗菌肽,以酶解液抑菌率和水解度为指标,通过单因素试验对酶解温度、加酶量和酶解时间3个主要工艺参数进行研究,在此基础上,通过响应面优化酶解工艺,建立数学模型.结果表明,胰蛋白酶最适合水解猪血红蛋白制备抗菌肽,其最佳条件为酶解温度49.72℃、加酶量2852.81U/g、酶解时间5.19h,酶解产物抑菌率的理论预测值89.70％,实际测量值90.32％.可见,利用胰蛋白酶水解猪血红蛋白能够得到抑菌活性较高的酶解产物,且该模型能够较好的预测抗菌肽制备最佳工艺条件.     

马铃薯蛋白质酶解制备多肽工艺优化

以马铃薯蛋白质为原料,用蛋白酶催化水解制备多肽。以水解度(DH)为评定指标,考察各因素对水解度的影响。结果表明,中性蛋白酶为最佳蛋白酶,其他因素对马铃薯蛋白质水解度影响的顺序为水解时间＞水解温度＞加酶量＞马铃薯蛋白质质量分数。最佳工艺条件为马铃薯蛋白质质量分数8%、中性蛋白酶(pH7.0)加酶量5.0mg、温度45℃、水解时间3h,水解度可达23.4%。