“黑美人”马铃薯多酚氧化酶的特性研究

以邻苯二酚为底物,在413nm处测定黑美人马铃薯多酚氧化酶（PPO）的活性,研究了温度、pH、底物浓度对其活性的影响,并建立了酶促褐变反应动力学方程,探讨了L-半胱氨酸、抗坏血酸、柠檬酸、EDTA及亚硫酸氢钠五种抑制剂对酶促褐变的抑制效果。结果表明:黑美人马铃薯多酚氧化酶最适反应pH为6.3;最适反应温度为35℃;酶促褐变反应动力学符合米氏方程描述的单底物酶促反应动力学,以邻苯二酚为底物,Km=0.0011mol/L,Vmax=142.23U/min.g;动力学方程为V=142.23[S]/（0.0011+[S]）;五种抑制剂均对PPO酶促褐变具有抑制作用,其强弱依次为亚硫酸氢钠>L-半胱氨酸>抗坏血酸>EDTA>柠檬酸。      

鸭梨多酚氧化酶的特性及抑制剂研究

以邻苯二酚为底物，采用分光光度法在420nm处测定鸭梨多酚氧化酶（PPO）的活性，研究了不同底物、温度、pH值和底物浓度对其活性的影响，并建立了酶促褐变反应动力学方程，探讨了柠檬酸、EDTA、亚硫酸氢钠和抗坏血酸四种抑制剂对鸭梨酶促褐变的抑制效果。结果表明，鸭梨多酚氧化酶的最适底物为邻苯二酚，最适温度为30℃，最适pH为6．6；酶促褐变反应动力学符合米氏方程所描述的单底物酶促反应动力学，以邻苯二酚为底物的动力学参数Km=0．333mol／L，Vmax=0．089U／min。相应的动力学方程为v=0．089[S]／（0．333＋[S]；四种物质对该酶均表现出不同的抑制作用，抑制效果为：抗坏血酸〉EDTA〉柠檬酸〉亚硫酸氢钠。     

芒果多酚氧化酶的特性及抑制研究

以邻苯二酚为底物,采用分光光度法在420nm处测定芒果多酚氧化酶(PPO)的活性,研究了温度、pH值、底物浓度对其活性的影响,并建立了酶促褐变反应动力学方程,探讨了L-半胱氨酸、抗坏血酸、亚硫酸氢钠、柠檬酸和醋酸五种抑制剂对芒果酶促褐变的抑制效果。结果表明,芒果多酚氧化酶的最适温度为50℃,最适pH值为6.86;酶促褐变反应动力学符合米氏方程所描述的单底物酶促反应动力学,以邻苯二酚为底物的最大反应速度Vmax=192(U/min·g),Km=0.0173mol/L,相应的动力学方程为v=192[S]/(0.0173+[S]);五种物质对该酶均表现出不同的抑制作用,抑制效果为:抗坏血酸>L-半胱氨酸>亚硫酸氢钠>柠檬酸>醋酸。     

香菇多酚氧化酶酶学特性的研究

以没食子酸为底物,以3-甲基-2-苯并噻唑腙盐酸盐(MBTH)与酶作用产物形成粉红色的复合物,通过分光光度法在505nm处测定该复合物的吸收来测定香菇多酚氧化酶(PPO)的活性.分别研究了温度、pH、底物浓度对酶活性的影响,得到了米氏常数Km和最大反应速度Vmax,并探讨了PPO提取液的稳定性.结果表明:香菇PPO活性在20～60℃内逐渐升高,其最适pH为4.6,温度对酶活的影响比pH的影响要大.三种底物与PPO亲和力高低的顺序为L-多巴-水没食子酸邻苯二酚,其米氏常数Km分别为0.98、1.45、3.07mmol/L,最大反应速度Vmax分别为29、49、80U.     

香菇多酚氧化酶酶学特性的研究

以没食子酸为底物,以3-甲基-2-苯并噻唑腙盐酸盐（MBTH）与酶作用产物形成粉红色的复合物,通过分光光度法在505nm处测定该复合物的吸收来测定香菇多酚氧化酶（PPO）的活性。分别研究了温度、pH、底物浓度对酶活性的影响,得到了米氏常数Km和最大反应速度Vmax,并探讨了PPO提取液的稳定性。结果表明:香菇PPO活性在20～60℃内逐渐升高,其最适pH为4.6,温度对酶活的影响比pH的影响要大。三种底物与PPO亲和力高低的顺序为L-多巴>一水没食子酸>邻苯二酚,其米氏常数Km分别为0.98、1.45、3.07mmol/L,最大反应速度Vmax分别为29、49、80U。      

茄子多酚氧化酶特性及控制研究

茄子多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)是引起酶促褐变,导致果实褐变的主要原因.采用匀浆法从茄子中提取多酚氧化酶粗液,以邻苯二酚为底物,在λ420nm处研究温度、pH值、底物浓度对茄子果实中PPO活性的影响,建立相应的酶促褐变反应动力学方程.探讨L-半胱氨酸、抗坏血酸、亚硫酸氢钠、柠檬酸4种抑制剂对茄子酶促褐变的抑制效果.结果表明,茄子多酚氧化酶的最适温度为30℃,最适pH值为6.0及8.5(可能存在同工酶),酶促褐变反应动力学符合米氏方程所描述的单底物酶促反应动力学,相应的动力学参数Km=0.0215 U/(min·g),Vmax=0.539U/(min·g),相应的动力学方程为v=0.539[S]/(0.0215+[S]);供试4种抑制剂防止果实褐变的效果由强到弱依次是:抗坏血酸、亚硫酸氢钠、L-半胱氨酸、柠檬酸.另外,茄子PPO对高温较为敏感,在100℃时加热105 s可钝化酶活性.     

山药多酚氧化酶的特性和抑制研究

以邻苯二酚为底物,410nm处测定山药多酚氧化酶(PPO)的活性,研究了pH、温度、底物浓度、酶浓度、抑制剂和激活剂对山药多酚氧化酶活性的影响。结果表明,山药PPO最适反应pH为6.5,最适反应温度为40℃;柠檬酸、草酸、L-抗坏血酸、亚硫酸氢钠及半胱氨酸五种抑制剂对山药PPO均有抑制作用,其强弱依次为:L-半胱氨酸>抗坏血酸>草酸>柠檬酸>亚硫酸氢钠;硫酸铜和三氯化铁均有加速酶促褐变作用,强弱为CuSO_4>FeCl_3。     

马铃薯中多酚氧化酶的酶学特性研究

采用分光光度法对马铃薯中多酚氧化酶的酶学特性进行了较深入系统的研究，其中包括酶活力，酶热稳定性以及pH，抑制剂对酶活性的影响。结果表明：多酚氧化酶的最适pH为6．6，最适温度为30℃，酶热失活遵循一级动力学原理，二巯基丙醇，亚硫酸钠，半胱氨酸，抗坏血酸对酶活性有较强的抑制作用。     

马铃薯中多酚氧化酶的酶学特性研究

采用分光光度法对马铃薯中多酚氧化酶的酶学特性进行了较深入系统的研究,其中包括酶活力、酶热稳定性以及pH、温度、抑制剂对酶活性的影响。结果表明,多酚氧化酶的最适pH为6.6,最适温度为30℃;酶热失活遵循一级动力学原理,二巯基丙醇、亚硫酸钠、半胱氨酸、抗坏血酸对酶活性有较强的抑制作用。     

混浊梨汁加工中PPO热失活条件的研究

研究了热处理梨汁（加或不加防褐变剂）,梨浆使其中的PPO完全及部分失活所需要的温度和时间结果为：在90℃处理果汁10s可使其中的PPO完全失活,而对于果浆则需要90℃处理15s以上.加了防褐变剂的果汁经90℃处理10s可使其中的PPO完全失活.此外,经80℃处理30s以上虽不能使其中的PPO完全失活,但添加的防褐变剂及果汁自身的pH可抑制残余的PPO,从而防止酶促褐变的发生.70℃处理梨汁40s不能防止其中的酶促褐变.     

浑浊苹果汁加工中苹果PPO热失活条件的研究

研究了热处理苹果汁(加或不加防褐变剂)、苹果浆使其中的PPO完全及部分失活所需要的温度和时间。结果为:在90℃处理苹果汁15s可使其中的PPO完全失活,而对于苹果浆则需要90℃处理20s以上。加了防褐变剂的苹果汁经90℃处理10s可使其中的PPO完全失活;此外,经80℃处理30s以上虽不能使其中的PPO完全失活,但添加的防褐变剂及果汁自身的pH值可抑制残余的PPO从而防止酶促褐变的发生。70℃处理苹果汁40s不能防止其中的酶促褐变。     

Effects of argon enriched low-oxygen atmospheres and of high-oxygen atmospheres on the kinetics of polyphenoloxidase (PPO)

Abstract: The reported benefits of enrichment of air atmospheres with argon or oxygen for control of enzymatic browning were investigated by determining the effects of these atmospheres on PPO kinetics. Kinetics of purified apple PPO and a commercially available mushroom PPO were studied in an in vitro model system. Enrichment with argon produced greater inhibitory effects than the current industry practice of enrichment with nitrogen. Km^app values (mM) for apple PPO in 3%O₂/97%Ar, 3%O₂/97%N₂, and air, were 133, 87, and 48, respectively. The data indicate that inhibition by both gases is competitive, and also support the hypothesis that the greater inhibitory effect of argon was proportional to the size of the Van der Waals radius of argon against nitrogen (1.91Å against 1.54Å). Much smaller inhibitory effects were observed in the presence of 80% O₂ (Km^app 57mM), and the nature of this inhibition was less clear. The results suggest that the benefits of argon enrichment may be relatively small, and may require critical enzyme, substrate, and gas levels to be successful. However, these benefits may be exploitable commercially in some fresh‐cut products, and may allow less anoxic atmospheres to be used. Practical Application: Control of enzymatic browning without sulfites continues to be a challenge in some fresh‐cut products. While sporadic benefits of these atmospheres in control of enzymatic browning have been reported, results have been inconsistent in commercial practice. The results suggest that the benefits of argon enrichment may be relatively small, and may require critical enzyme, substrate, and gas levels to be successful. However, these benefits may be exploitable commercially in some fresh‐cut products, and allow less anoxic atmospheres to be used.     

东海中华管鞭虾多酚氧化酶(PPO)的纯化及特性研究

本文采用匀浆浸提法提取中华管鞭虾(Solenocera crassicornis,S. crassicornis)多酚氧化酶(polyphenoloxidase,PPO),经硫酸铵质量分级、离子交换、凝胶过滤纯化后,以左旋多巴胺(L-DOPA)为底物研究其底物专一性和动力学特性,并选取不同抑制剂和金属离子探讨对该PPO的抑制影响。结果显示,匀浆浸提法提取PPO的最佳条件为料液比1:2(W/V)、p H 7.5、浸提3 h、温度50℃,从100 g中华管鞭虾中获取的PPO的产量和纯化倍数分别是1.2%和25.9,中华管鞭虾PPO对L-DOPA和儿茶酚具有很显著地催化氧化作用(p≤0.05),Km值为分别是3.8 mM和8.12 mM,说明该酶为儿茶酚家族酶。PPO活性对苯硫脲、抗坏血酸、柠檬酸较为敏感,能显著被Cu~(2+)、Zn~(2+)、乙二胺四乙酸(EDTA)抑制。结果表明,中华管鞭虾PPO可能是活性部位含Cu~(2+)的金属酶,为控制中华管鞭虾黑变提供基础的信息。     

牛蒡多酚氧化酶的特性及酶促褐变的抑制

采用制作丙酮粉的方法提取了牛蒡中的多酚氧化酶(PPO),并对其酶学特性进行了研究。实验结果表明,牛蒡多酚氧化酶最适温度为40℃,最适pH为6.0,在40℃下热稳定性较好,而在70℃加热3min即可使其完全失活。牛蒡PPO的米氏常数为0.1337mol/L,最大反应速率Vmax为7.387U/min。通过响应面实验设计的方法对防止牛蒡酶促褐变的配方进行了优化,结果表明当复合护色液中EDTA、L-半胱氨酸和柠檬酸亚锡二钠的护色剂的浓度都为0.04%(w/v)时,牛蒡的褐变度最小。     

百合鳞茎多酚氧化酶特性的初步研究

用分光光度计法在波长420nm下,以邻苯二酚为底物研究了兰州百合鳞茎中多酚氧化酶(Polyphenoloxidase,PPO)的部分特性。实验发现百合PPO的活性在4～25℃时,随着温度的升高而升高,25℃时PPO活性达到最大值,之后PPO活性随着温度的升高而下降;百合PPO有两个最适pH,分别为4.0和6.0,当pH低于4.0、高于6.0时活性均较低。抗坏血酸、异抗坏血酸钠、半胱氨酸在实验用的五种抑制剂中对PPO的抑制作用最强。     

苹果浓缩汁加工中热灭酶工艺研究

通过在不同温度和时间下热处理苹果汁,研究了使果汁中多酚氧化酶(PPO)部分或完全失活的条件,并考察了与果汁自然pH值相近的模拟体系对处理后的果汁酶活的抑制情况。表明:75℃、30s虽不能完全灭活PPO,但对其活性破坏较大,处理后的PPO酶活可以较好地被接近果汁自身pH值的低pH(3.8)所抑制,为最佳处理条件。     

Ascorbic acid and 4-hexylresorcinol effects on pear PPO and PPO catalyzed browning reaction

ABSTRACT:  The effects of ascorbic acid (AA) and 4-hexylresorcinol (4-HR) on pear polyphenoloxidase (PPO) activity and stability have been investigated in vitro . AA does not interact directly with PPO but prevents browning by reducing oxidized substrates. The 4-HR exerts a dual role on PPO. If no substrates are present, it interacts preferably with the deoxy form of PPO inactivating it. If substrates and 4-HR are both present they compete for the catalytic site. The 4-HR behaves then as a canonical enzyme inhibitor, binding to the met form of PPO. Simultaneous addition of 4-HR and AA has synergistic inhibition or inactivatory effects depending on the presence or the absence of PPO substrates.     

果酒中多酚氧化酶及其性质的研究

对山楂酒中含有的六种分子量不同的多酚在多酚氧化酶作用下,测定氧化前后其涩度的变化.发现多酚物质的氧化作用能够加重果酒的苦涩味.并对山楂中的多酚氧化酶进行提取,测定其基本特性,确定了底物、温度、pH值对其活性的影响,并进一步测定其酶动力学曲线,发现多酚氧化酶催化的最适温度是25℃,其最适pH是6.5,其作用的最适底物是儿茶酚,其米氏常数是1.077×10-2M.