蛋清蛋白质降压肽纯化及分子量测定

蛋清蛋白质Alcalase2·4L酶解产物经交联葡聚糖凝胶Sephadex G-25纯化,去离子水洗脱,采用体外检测方法筛选具有血管紧张素转化酶抑制作用的高活性组分。利用高效凝胶过滤色谱（GPC）方法测定纯化高活性组分的分子量分布,根据马尿酸、Gly-Gly-Gly、Gly-Gly-Tyr-Arg和杆菌肽四种标准品的分子量对数与出峰时间的关系,运用GPC软件,绘制标准分子量分布的标准曲线。结果表明:纯化的各个组分中,洗脱时间在180¹90min的组分抑制率最高（83·18%）,高活性组分的IC50=0·18mg/mL,经GPC测定其分子量分布为241·2198⁵09·6793Da·      

蛋清蛋白质降压肽的化学及酶稳定性研究

以血管紧张素转化酶抑制活性为指标,通过Plackett-Burman 设计研究影响蛋清蛋白质降压肽化学稳定性的因素,同时考察蛋清蛋白质降压肽在模拟胃肠道环境中的抗胃蛋白酶和胰蛋白酶裂解的稳定性。结果表明：pH值、温度、光照、空气、贮藏肽溶液的质量浓度、巴氏灭菌处理、超声波及镁离子等因素对蛋清蛋白质降压肽的化学稳定性影响不显著(P ＞ 0.05);蛋清蛋白质降压肽经胃蛋白酶和胰蛋白酶水解后活性由46.0% 分别下降为13.0% 和4.0%,对胃蛋白酶和胰蛋白酶均没有良好的耐受性。     

蛋清抗氧化肽分离纯化及结构鉴定

为了获得高活性、高纯度的蛋清抗氧化肽,以蛋清酶解物为原料,依次釆用超滤、离子交换色谱、凝胶色谱分离纯化抗氧化活性较强的肽段,运用基质辅助激光解吸离子化质谱解析肽链的氨基酸序列。结果表明:超滤法分离纯化EWPH所得的三个组分中,EWPH-Ⅲ(M_W<3 kDa)组分的DPPH自由基清除率最高,达到79.62%。离子交换层析分离纯化EWPH-III所得到的碱性组分B的DPPH自由基清除率最高,达到82.05%。凝胶过滤色谱分离EWPH-III-B所得到4组分中E组分的DPPH自由基清除率最高,为88.49%。高活性高纯度EWPH-III-B-E组分的相对分子质量为237.575,该二肽的氨基酸序列为丙氨酸-甲硫氨酸。     

咸蛋清中几种重要蛋白质的提取和纯化

咸蛋清是蛋黄加工过程中的副产品。为提高咸蛋清的利用率,本研究建立了一种简单可行,低成本,可连续分离咸蛋清中几种重要蛋白质的工艺方法。本文利用等电点沉淀法、(NH₄)₂SO₄,盐析和醇沉等方法 从咸蛋清中依次分离出卵黏蛋白、卵白蛋白和卵类黏蛋白。研究结果显示:在实验室规模下,卵黏蛋白、卵白蛋白和卵类黏蛋白的产率分别达到83%,98%和76%,SDS-PAGE凝胶电泳显示,3种蛋白质的纯度分别为89%,92%和98%。此外,采用醇沉分离的卵白蛋白在复溶后仍具有良好的起泡性,说明分离方法能较好地保持蛋白质的功能特性。     

蛋清肽的结构及活性研究

蛋清蛋白质活性肽经交联葡聚糖凝胶色谱纯化,通过液相色谱四极杆线性离子阱串联质谱确证3种活性肽的一级结构,氨基酸序列分别为Arg-Val-Pro-Ser-Leu-Met,Thr-Pro-Ser-Pro-Arg和Asp-Leu-Gln-Gly-Lys。Fmoc固相合成法合成相应肽序列,经制备液相色谱纯化纯度分别为98·73%、98·77%、96·68%。利用分析型高效液相色谱分别测定3种肽的血管紧张素转化酶抑制活性,结果表明Asp-Leu-Gln-Gly-Lys的活性较高,血管紧张素转化酶活性抑制率为35%。      

牦牛乳酪蛋白降血压肽制备工艺及分离纯化研究

研究了胰蛋白酶制备降血压肽的最佳水解条件和分离纯化工艺。通过单因素、正交实验,确定了最佳水解条件胰蛋白酶添加量2.5%,温度37℃,最适p H8.0,反应时间2.5h,水解产物抑制血管紧张素转化酶的能力为85.26%;通过液相色谱及质朴检测,得到降血压肽的序列片段为HQGLPQEVLNENLLR、AVPYPQR和TKVIPYVR。      

牦牛乳酪蛋白降血压肽制备工艺及分离纯化研究

研究了胰蛋白酶制备降血压肽的最佳水解条件和分离纯化工艺。通过单因素、正交实验,确定了最佳水解条件胰蛋白酶添加量2.5%,温度37℃,最适p H8.0,反应时间2.5h,水解产物抑制血管紧张素转化酶的能力为85.26%;通过液相色谱及质朴检测,得到降血压肽的序列片段为HQGLPQEVLNENLLR、AVPYPQR和TKVIPYVR。     

蛋清活性肽的研究进展

我国蛋品资源丰富,鸡蛋蛋清不仅是优质蛋白质的来源,也是产生活性肽的原料。蛋清蛋白经不同的酶水解后产生不同活性的功能片段,比如抗氧化、调节血压、抗凝血、抑菌、改善记忆等。文章介绍了蛋清活性肽的制备方法及活性研究现状,论述了蛋清活性肽的未来重点研发前景,以期为后续深入的基础研究和应用开发提供参考。      

蛋清蛋白质水解物的精制

蛋清蛋白质水解液含盐量高，风味欠佳。本研究用离子交换树脂对蛋清蛋白质水解液进行脱盐处理，在10倍柱体积/h的流速下，氮回收率为87％，脱盐率可达90％以上。实验结果还表明，水解液在温度高于50℃时有明显异味，β－环状糊精能有效改善产品的风味。     

蛋清肽及肽钙配合物的制备

为获得高生物效价的补钙制剂及提高蛋清蛋白的附加值,首先对鸡蛋清进行酶法改性,筛选实验用酶,采用正交试验,分别对酶解条件及肽钙反应条件进行优化,并采用红外光谱法比较反应前后图谱的变化。结果表明：选择先碱性蛋白酶后中性蛋白酶进行双酶酶解,酶解条件为底物质量分数6%、碱性酶酶底比1:100、pH8.0、酶解时间3h;中性酶酶底比1:25、pH7.0、酶解时间3h。制备肽钙配合物最优反应条件为肽钙(CaCl2)质量比2.5:1、pH9.5、底物质量分数4%、温度55℃,在此条件下,可溶性钙含量为21.15mg/L,水解度为8.66%。制备蛋清肽时,使用双酶的水解效果优于单酶,蛋清肽与钙形成了双单齿配合物,其钙质量分数为8.75%。     

蛋源降血压肽研究进展

鸡蛋不仅是人们饮食营养的重要来源,而且还含有许多生物活性蛋白。鸡蛋活性蛋白经酶解后会产生许多具有生物活性的多肽,其中最重要的就是具有降血压活性的多肽。本文介绍了鸡蛋来源的降血压多肽的发现、特性、生产和分离及体内外活性,以期为国内相关研究提供参考。     

Novel peptides derived from egg white protein inhibiting alpha-glucosidase

The aim of this study was to search and identify potential anti-diabetic peptides with α-glucosidase and α-amylase inhibitory activities. After the Alcalase hydrolysis, egg white protein hydrolysates were purified and identified by LC–MS–MS. Eight identified peptides were further synthesized by the Fmoc solid-phase synthesis. The anti-diabetic activities of these synthetic peptides were assessed using enzymatic inhibitory assays against the α-glucosidase and α-amylase. Among the eight peptides, peptide RVPSLM was discovered as a potential α-glucosidase inhibitor with an IC₅₀ value at 23.07 μmol L⁻¹. However, it did not exhibit a visible or detectable inhibitory efficiency on the α-amylase. These studies indicate the potential of using egg white protein hydrolysates as a functional food product with the anti-diabetic activity.     

牛乳酪蛋白源降血压肽的分离及其分子量分布研究

采用聚醚砜膜超滤、羧甲基-纤维素离子交换层析对牛乳酪蛋白的酶解物进行分离，用高效凝胶排阻色谱测定酶解物中降血压肽的分子质量分布。结果表明：酪蛋白的酶解物经超滤层析分离，得到的ACE抑制率为86、36％的组分，经高效凝胶排阻色谱测定样品中至少含有6种分子量在1500u以下的多肽物质。     

大豆降压肽研究进展

从高血压的形成机理,以及能够有效调节血压作用的ACE抑制肽的结构和功能入手,综述了食源性降压肽--大豆降血压肽的研究现状,提出了目前研究中需要解决的一些问题,阐述了大豆降压肽的开发价值和应用前景.     

植物源降血压肽研究进展

降血压肽的实质是血管紧张素转化酶抑制肽,它通过抑制血管紧张素转化酶(ACE),阻碍有升高血压作用的血管紧张素Ⅱ的生成,同时抑制具有降血压作用的血管舒缓激肽的分解,从而使血压下降。对血压调节机制,降血压肽的结构和组成对其功能的影响,以及目前植物源降血压肽研究进展进行了综述。     

花椒籽蛋白降血压肽的加工适应性研究

在利用花椒籽蛋白制备得到降血压肽基础上,进一步研究花椒籽蛋白降血压肽的加工特性。将花椒籽蛋白酶解液经过截留相对分子质量为5 k Da的超滤膜进行纯化,测定不同相对分子质量的氨基酸组成,研究截留液组分的理化性质以及经胃肠道消化后对其ACE抑制率的影响。结果表明:花椒籽蛋白酶解液经超滤之后透过液的ACE抑制活性提高,达到78.76%;各组分氨基酸组成较齐全,其中谷氨酸含量最高;截留液在较宽的p H(2.0~10.0)范围内溶解性良好;有较高的吸油性;在p H 2.0~10.0范围内,起泡性呈先降低后升高的趋势,但泡沫稳定性正相反;乳化性随着p H的升高而增大,但乳化稳定性先降低后升高;热处理(60~95℃)、光照、p H和糖类对其ACE抑制率影响较小。此外,花椒籽蛋白降血压肽经胃肠道蛋白酶消化后,ACE抑制活性基本不变,具有抗消化性。     

Antioxidant activity of peptides derived from egg white proteins by enzymatic hydrolysis

This work reports the antioxidant activity of peptides produced by enzymatic hydrolysis of crude egg white with pepsin. Four peptides included in the protein sequence of ovalbumin possessed radical scavenging activity higher than that of Trolox. The hydrolysate of egg white with pepsin for 3 h was previously found to exhibit a strong angiotensin I-converting enzyme (ACE) inhibitory activity in vitro. The combined antioxidant and ACE inhibition properties make it a very useful multifunctional preparation for the control of cardiovascular diseases, particularly hypertension. No correlation was found between antioxidant and ACE inhibitory activities. However, the peptide Tyr-Ala-Glu-Glu-Arg-Tyr-Pro-Ile-Leu, which was a strong ACE inhibitor (50% inhibitory concentration, 4.7 microM) also exhibited a high radical scavenging activity (oxygen radical absorbance capacity-fluorescein value, 3.8 micromol of Trolox equivalent per micromol of peptide) and delayed the low-density lipoprotein lipid oxidation induced by Cu2+ at a concentration of approximately 0.16 mg/mg of low-density lipoprotein. Present results support that antioxidant peptides and amino acids not only act individually, but also cooperatively and synergistically.     

花生降血压肽的超滤分离研究

采用超滤技术对花生降血压肽进行分离,一级超滤用截留分子量为5000的超滤膜,二级超滤用截留分子量为1000的超滤膜。研究了操作压力、料液浓度和操作温度对超滤过程的影响。结果表明:一级超滤的最适操作条件为操作压力174Pa,料液浓度5%～7.5%,操作温度35℃;二级超滤的最适操作条件为操作压力209Pa,料液浓度7.5%,操作温度40℃;经超滤分离后,分子量小于1000的短肽降血压活性非常突出,IC50达到0.4mg/mL。