动物蛋白酶酶解制备广西产牡蛎肉抗肿瘤活性肽的实验研究

目的:采用动物蛋白酶作为工具酶对牡蛎蛋白质进行酶解,并对酶解条件采用正交实验进行优化。以期获得具有抑制肿瘤细胞生长的活性肽。方法:利用正交实验L9（33）,以氨基氮生成率和肿瘤细胞生长抑制率为观察指标,确定动物蛋白水解酶水解广西产牡蛎肉的水解条件如温度、酶量、水解时间,并对最佳水解产物进行柱层析和超滤分离获得不同分子量的多肽,采用MTT法检测了各组分对鼻咽癌细胞CNE-1生长的抑制作用。结果:动物蛋白水解酶在60℃、酶的质量分数2.0‰、水解时间为4h的水解条件下获得的水解氨基氮含量最高;水解产物在分子量为小于3000Da多肽具有明显地抑制鼻咽癌CNE-1细胞的生长作用。结论:选取动物蛋白水解酶作用的最佳条件,可以获得具有抗肿瘤细胞生长的牡蛎蛋白活性肽,具有进一步开发应用的价值。      

青鱼肉活性肽的制备及其抗肿瘤活性研究

以青鱼肉为原料,经二步酶解、凝胶色谱分离纯化制备抗氧化和抗肿瘤活性肽.首先以抗氧化活性和水解度为评价指标,采用单因素和正交试验优化青鱼肉活性肽的制备工艺;然后采用凝胶色谱进行分离纯化,得到不同分子质量多肽组分并分析其氨基酸组成、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,...     

近江牡蛎糖胺聚糖的酶解提取及其抗肿瘤活性研究

探讨酶解法提取近江牡蛎糖胺聚糖(SG1)的务件,结果表明:先用枯草杆菌中性蛋白酶1.0%(质量分数),pH7.0,50℃酶解5 h,再加胰蛋白酶1.0%(质量分数),pH7.8,50℃酶解5 h效果最佳.粗提物SG1的得率为2.40%,总糖胺聚糖含量为13.6%,总糖含量为61.3%.采用四氮唑蓝还原法(MTT法)研究粗提物SG1对人宫颈癌细胞(Hela细胞)的体外抗肿瘤活性,结果显示:500μg/mL剂量组与600μg/mL剂量组48h时的抑制率分别为43.1%(P<0.05),55.8%(P<0.05),近江牡蛎糖胺聚糖粗提物SG1具有较明显的抗肿瘤活性,存在一定的量效关系.     

螺旋藻水解肽的制备及其抗肿瘤活性研究

以螺旋藻为原料,在反复冻融、均质和超声联用的基础上,比较了盐提和水提两种不同方式的蛋白提取率,并以水提螺旋藻蛋白为原料,利用胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胃蛋白酶、碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶分别进行单酶解、双酶解以及体外模拟胃肠道消化的三酶解,得到6种酶解肽。水解度及脱色前后的抗肿瘤活性鉴定结果表明,水解度与抗肿瘤活性无直接相关性,而脱色会降低酶解组分的抗肿瘤活性。对5种活性显著的酶解肽进行超滤,得到9个对乳腺癌和肝癌细胞株的体外生长均有显著抑制作用的组分,并对其中的碱性蛋白酶0~3 K组分进行Sephadex G-15分离纯化,得到对MCF-7和Hep G-2均有较强抑制作用的组分A3,其IC50值分别为64.59μg/m L和61.65μg/m L;得到对Hep G-2具有较强选择性抑制作用的组分A1,A4和A5,其IC50值分别为47.67μg/m L、79.44μg/m L和69.54μg/m L。本研究成果对以螺旋藻为原料的药品和保健食品的开发提供了理论基础。     

海藻抗肿瘤活性肽的研究进展

肿瘤是人类健康安全的严重威胁,发病率和死亡率逐年攀升。近年来,天然海藻成为获取高效、低毒副作用的生物活性肽的海洋生物来源之一,海藻源活性肽的抗肿瘤活性逐渐为研究人员所关注。文中综述了海藻活性肽的常见种类和常用制备方法,同时对海藻抗肿瘤活性肽的活性评价方法和作用机制加以阐述,期望为抗肿瘤天然药物和食品的开发提供参考。     

中性蛋白酶酶解玉米肽及其醒酒活性研究

旨在提高玉米蛋白的附加值，用中性蛋白酶在pH6．7～7，温度45℃，改变酶底比、料液比和酶解时间的条件下，分别得到高、中、低不同水解度的肽，动物实验表明：喂食低水解度（DH=9．1％）的肽能极显著抑制酒精灌胃小鼠血清中乙醇浓度的升高。     

酶解制备水产动物活性肽研究进展

生物活性肽是一类分子量较低的小分子蛋白,具有特殊的生物活性。以水产动物为原料通过酶解制备的生物活性肽具有抗氧化、降血压、免疫等多种生物学活性。综述活性肽的主要生物学功能、酶水解制备以及离子交换色谱、凝胶色谱和高效液相色谱等分离纯化手段,并展望其研究趋势和市场前景。     

抗肿瘤活性肽的研究进展

抗肿瘤生物活性肽与化疗药物相比,具有毒性低、特异性强、不易形成耐药性等优点,已经成为抗肿瘤新药研究的热点。本文从近十多年来国内外对抗肿瘤活性肽的应用研究着手,对抗肿瘤活性肽的天然来源及制备技术、构效关系、抗肿瘤作用机制等进行综合阐述,并指出了其在肿瘤治疗中的发展优势和可能存在的问题。     

抗肿瘤活性肽的研究进展

抗肿瘤生物活性肽与化疗药物相比,具有毒性低、特异性强、不易形成耐药性等优点,已经成为抗肿瘤新药研究的热点。本文从近十多年来国内外对抗肿瘤活性肽的应用研究着手,对抗肿瘤活性肽的天然来源及制备技术、构效关系、抗肿瘤作用机制等进行综合阐述,并指出了其在肿瘤治疗中的发展优势和可能存在的问题。      

坛紫菜木瓜蛋白酶水解肽的抗肿瘤活性研究

坛紫菜是一种重要的经济海藻,营养价值极高。为了探究坛紫菜中的抗肿瘤活性多肽,本研究以坛紫菜粉末为原料,采用反复冻融法和超声波破碎法相结合提取蛋白,使用木瓜蛋白酶对粗蛋白进行酶解。初酶解物在MTT细胞增殖检测结果的指引下,结合超滤、葡聚糖凝胶Sephadex G-15的分离纯化和MALDI-TOF质谱分析,最终筛选出具有较强抗肿瘤活性的多肽。结果显示经木瓜蛋白酶酶解物（设为P,分子量0³ ku）分离纯化得到的多肽组份P2,包含5个多肽,对乳腺癌MCF-7和肝癌细胞Hep G-2的IC50值分别是63.64μg/m L和59.09μg/m L,其抗肿瘤活性均显著高于阳性对照5-氟尿嘧啶（对MCF-7和Hep G-2的IC50值分别是195.45μg/m L和122.72μg/m L）,组份P3包含11个多肽,对肝癌细胞Hep G-2的IC50值是209.09μg/m L,也具有一定的选择性抑制作用。      

酶解动物蛋白制备抗氧化多肽研究进展

动物蛋白资源丰富,酶法水解动物蛋白制备的抗氧化多肽具有多种生理机能,成为研究的热点。综述了酶解动物蛋白制备抗氧化多肽的研究现状,为提高畜禽副产品附加值提供了理论依据。     

王浆蛋白酶解技术及活性肽产物研究进展

蜂王浆是重要的蜂产品和保健滋补品,含有丰富的功能蛋白。最新研究表明,王浆蛋白通过酶解产生生物活性肽可有效提高其营养和保健功能。本文介绍了王浆蛋白的种类和主要功能,酶解法制备活性肽的主要方法,已知酶解产物中抗氧化肽和降压肽的生物活性。并根据国内外研究现状,提出了充分利用现代生物技术,研究开发王浆蛋白活性肽的建议。     

酶法水解芝麻粕制备芝麻多肽

以芝麻制油后副产物芝麻粕为原料,采用蛋白酶水解法制取芝麻多肽。在水解酶筛选、单因素试验基础上,以多肽产率为指标,设计正交试验对碱性蛋白酶酶解芝麻粕制取芝麻多肽工艺进行了优化。结果表明,最佳工艺参数为:pH 9.0,料液比1∶20,加酶量11 000 U/g,酶解时间2.5 h,酶解温度65℃。在此条件下,多肽产率达到3.51%。     

风味蛋白酶水解制备豌豆蛋白抗氧化酶解产物工艺条件优化

采用风味蛋白酶水解豌豆蛋白,对制备豌豆蛋白酶解产物清除DPPH.清除率进行研究;通过单因素实验和响应面回归分析,得到制备酶水解产物最佳酶解工艺条件:酶解温度48.8℃、酶解时间3.1 h、pH 5.5、加酶量4.0%、底物浓度6.0%,在此条件下,风味蛋白酶酶解产物对DPPH.清除率为60.10%。     

酶解核桃蛋白制备抗氧化肽的研究

利用木瓜蛋白酶酶解核桃分离蛋白制备小分子活性肽,并研究了不同分子量段核桃小分子肽的抗氧化性能。通过单因素实验和正交实验,确定了木瓜蛋白酶制备抗氧化肽的最佳酶解条件为:pH8.5,温度50℃,酶与底物浓度之比[E]/[S]=3:100,底物浓度[S]=3.5g/100mL,酶解时间5h。用截留分子量分别为3kDa和10kDa的超滤膜将核桃粗肽液分离成<3kDa、3～10kDa及>10kDa3个分子量段,并对不同分子量段核桃多肽的抗氧化性进行了研究,结果表明,分子量<3kDa的核桃多肽的抗氧化性大于其他两个分子量段。     

酶解水牛乳蛋白制备ACE抑制肽的工艺优化

以水牛乳蛋白为原料,选用6种蛋白酶在各自适宜的条件下酶解制备血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽,用高效液相色谱检测酶解产物对ACE的体外抑制活性,筛选出胃蛋白酶为制备水牛乳蛋白ACE抑制肽的最佳用酶.在此基础上,分别考察了酶解时间、初始酶用量、初始底物浓度、酶解温度和pH值对酶解工艺的影响,得到水牛乳蛋白制备ACE抑制肽的适宜酶解工艺条件:酶解时间为3h,酶用量为10 000U/g,底物质量浓度为20 g/L,反应温度为37℃,pH值为2.0,此时酶解产物的水解度为17.4％,ACE抑制率可达90.0％.采用超滤技术对酶解产物活性组份进行分离富集,结果表明产物中高活性部分均可富集于10 ku和5 ku渗透液中,且高活性组份分子量主要集中在5 ku以下,该组份对ACE的活性抑制率为84.7％.     

牡蛎蛋白酶解物的制备及其抗氧化活性研究

选用中性蛋白酶,研究了前处理方法、E/S、pH、温度和时间对酶解牡蛎蛋白效果的影响,制备牡蛎蛋白酶解物,分析其游离氨基酸含量及分子量分布,体外实验测定其抗氧化活性。结果表明,酶解前100℃热处理10min能够提高酶解物中蛋白肽的含量,E/S为2.0%、pH7.0、温度50℃、时间3.0h为酶解的适宜条件,其DH达到14.95%;所制备的EHOP的主要成分为小分子肽类物质,分子量主要集中在500～3091u,EHOP的还原性较强,且对羟基自由基和超氧阴离子均有较好的清除能力,EHOP浓度为25mg/mL时,其还原力A700为0.44,超氧自由基清除率和·OH清除率分别为68.86%和21.20%。      

蓝园鲹制备抗氧化肽酶解工艺的研究

运用响应面(RSM)分析法对酶解蓝园鲹蛋白制备抗氧化肽的工艺进行优化.在单因素的基础上,以还原力和羟基自由基清除率为指标,研究了酶解时间、温度、水料比对 Alcalase2.4 酶解蓝园够蛋白酶解液抗氧化性的影响.结果表明,最大还原力的最优条件为温度 50℃,酶解时间 200 min.水料比为 2.6,此时还原力达到0.640.最大羟基自由基清除率的最优条件为温度 50℃.酶解时间220 min,水料比为 2.2,羟基自由基清除率达到 53.58%.     

蚕蛹蛋白肽酶水解条件优化

为了降低蚕蛹过敏风险,提高蚕蛹优质蛋白利用价值并制备免疫活性肽,对蚕蛹蛋白进行了酶解优化。本文选用菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶和木瓜蛋白酶这5种酶对脱脂蚕蛹蛋白进行酶解。通过对小鼠脾细胞增殖和水解度的检测,选取最佳蛋白酶。在此基础上对最佳蛋白酶的四个单因素（酶和底物量,初始p H,水解温度和底物浓度）进行优化,从而确定最佳的酶解条件。结果表明,5种蛋白酶中碱性蛋白酶对脱脂蚕蛹蛋白的酶解效果最好。对碱性蛋白酶进一步优化,通过Box-Behnken实验和回归分析获得碱性蛋白酶酶解脱脂蚕蛹蛋白的最佳条件为加酶量=6.0%,温度=55℃,酶解时间=2.00 h,p H=8.0,水∶底物=20∶1,测得的水解度为19.96%±1.02%,免疫活性OD490 nm为0.2512±0.0125。      

酶解法制备榛子粕ACE抑制肽工艺研究

以榛子粕为原料,利用中性蛋白酶酶解制备ACE抑制肽。以酶解产物的ACE抑制率为指标,采用单因素试验分别考察底物质量分数、酶用量、酶解温度、pH和酶解时间的影响。在单因素试验基础上设计响应面Box-Behnken中心组合试验对酶解条件进行优化。结果表明:榛子粕最佳酶解工艺条件为底物质量分数5%、酶用量0.3%、酶解温度40℃、pH7.5、酶解时间1.5h,在此条件下榛子粕酶解产物的ACE抑制率达到91.76%。