超声波提取灵芝菌丝体中灵芝酸的研究

目的:利用超声波对灵芝菌丝体中灵芝酸的提取工艺进行研究。方法:以单位灵芝菌丝体中灵芝酸的提取量为指标,采用单因素分析和正交实验,对影响灵芝菌丝体中灵芝酸提取的乙醇浓度、超声波浸提时间、浸提pH和料液比四个因素进行研究。结果:乙醇浓度100%,超声波浸提时间90min,pH2·5,加12倍量乙醇浸提为最佳工艺条件,所提取灵芝酸含量达46·7mg·g-1。结论:采用超声波提取技术可以较大幅度提高灵芝酸的提取得率,大大缩短提取时间。      

超声波法提取灵芝菌丝体总三萜

采用超声波浸提法从灵芝菌丝体中提取总三萜,以熊果酸作为标准品,采用分光光度计法测定其含量.以正交试验设计优化工艺务件,在85%的乙醇溶液中浸泡2 h,150 W功率下超声提取30 min,从灵芝菌丝体中提取的总三萜最多.     

灵芝菌丝体中灵芝酸的体外抑菌作用

采用杯碟法试验灵芝菌丝体中灵芝酸对革兰阴性菌(大肠杆菌)、革兰阳性菌f金黄色葡萄球菌),以及芽孢杆菌(枯草芽孢杆菌)的体外抑菌作用.结果表明,灵芝酸组分对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长有较明显的抑制作用,而对枯草芽孢杆菌的抑制作用相对较弱;该灵芝酸对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为12.5 mg/mL;而对枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度为50 mg/mL.此外,该灵芝酸的抑菌成分在40℃和60℃下(处理2 h)较稳定,但在80℃和100℃温度下,热稳定性较差.     

超声波法提取灵芝菌丝体总三萜的工艺

采用超声波浸提法从灵芝菌丝体中提取总三萜,以熊果酸作为标准品,采用分光光度计法测定其含量.以正交试验设计优化工艺条件,在85%的乙醇溶液中浸泡2 h,150 W功率下超声提取30 min,从灵芝菌丝体中提取的总三萜最多.     

灵芝菌丝体中灵芝酸T、R和S的HPLC测定方法的建立和应用

采用YMC C18柱（250mm×4.6mm,5μm）,以0.5%冰醋酸溶液（A）-甲醇（B）为流动相梯度洗脱（0²0min,85%B→100%B;20³0min,100%B）,检测波长在245nm,流速1mL/min,柱温为30℃的条件下,用HPLC考察灵芝酸T、灵芝酸S、灵芝酸R在不同灵芝菌丝体中的含量差异。结果表明,不同种类的灵芝菌丝体中三种灵芝酸成分的含量存在显著的差异,p=0.0003,而且此方法操作简便,稳定性和重复性良好,适用于同时快速检测灵芝菌丝体中三种灵芝酸含量。      

灵芝菌丝体多糖含量比较及提取工艺研究

对8个灵芝菌株菌丝体多糖含量进行了比较,结果表明,灵芝B菌株菌丝体多糖含量较高;通过单因素试验和正交试验,从提取温度、料液比、提取次数、提取时间4个因素研究该菌株菌丝体多糖提取条件,得出最优提取条件为水提温度85℃,料液比1∶10(g/mL),水提时间2 h,提取次数2次;在此条件下,灵芝菌丝体多糖得率为57.82%。     

纤维素酶法提取富硒灵芝菌丝体多糖的研究

采用纤维素酶法,研究了纤维素酶分离提取富硒灵芝菌丝体多糖的条件,以提高菌丝体多糖的得率.利用正交试验设计,确定了优化的提取条件,即浸提加水量50 mL/g菌丝体,酶解时间80 min,加酶量300 U/mL,pH 4.5,温度55℃.在优化的实验务件下,菌丝体多糖的得率33.6%.利用Q Sepharose Fast Flow离子交换层析分离纯化菌丝体多糖,多糖的回收率达82.8%.     

黄水培养灵芝菌丝体适应性研究

利用浓香型白酒生产中产生的副产物黄水为培养基培养灵芝菌丝体.通过单因素试验优化了培养条件,其最适培养条件为:初始pH值为6.0、接种量9%、装液190mL/250mL、温度27℃、转速150r/min、培养8d,灵芝菌丝体干重可达1.308g/100mL,表明利用黄水培养灵芝菌丝体可行.     

灵芝菌丝体发酵酒的研制

研制了灵芝菌丝体发酵酒的工艺及关键参数,制成风味独特的、具有营养保健功能的灵芝菌丝体发酵酒。     

灵芝菌丝体总三萜超声辅助提取工艺优化

以灵芝菌丝体为原料,在单因素试验基础上,通过正交试验和Box-Behnken响应面设计法优化超声辅助提取灵芝菌丝体总三萜工艺。结果表明,超声辅助提取灵芝菌丝体总三萜正交试验最佳工艺为:超声功率90 W、超声时间50 min、pH 8、料液比1∶40(g/mL),在此条件下灵芝菌丝体三萜平均提取率为0.76%;超声辅助提取灵芝菌丝体总三萜响应面试验最佳工艺为:超声功率90 W、超声时间42 min、pH 8、料液比1∶30(g/mL),在此条件下,灵芝菌丝体总三萜平均提取率为1.09%,与最大预测值1.13%相差0.04%。这两种方法得到的提取工艺参数可靠,可为灵芝三萜工业化生产提供技术参考。     

灵芝提取液清除自由基能力

采用氮蓝四唑(NBT)光化还原法、抗坏血酸—Cu2 —H2O2体系法和亚油酸体系法,对从野生灵芝中提取的有效活性物质,进行清除超氧自由基O2-·、羟基自由基·OH和脂过氧自由基ROO·的效果进行测定.结果表明,采用体积分数85%的丙酮,液固体积质量比为 15 mL∶1 g,超声20 min是灵芝有效成分提取的最佳工艺条件.灵芝提取物对自由基有较强的清除作用,在 3 种不同品种的灵芝提取物中,白灵芝的清除效果最佳,紫灵芝次之,而赤灵芝最差.     

灵芝多糖和三萜的提取工艺研究

以灵芝子实体为原料,采取溶剂浸提、超声波法和微波法对灵芝子实体中的多糖和三萜进行提取。以提取率为指标,设计正交试验,考察料液比、提取时间和提取温度等因素对各种方法的影响。结果表明,提取多糖的最佳工艺为超声波法提取,其最优组合为料液比1∶20,提取时间30min,提取温度60℃,提取三萜的最佳工艺为微波法提取,其最优组合为料液比1∶15,提取时间20min,提取温度70℃,乙醇浓度75%。     

超声和水提法提取灵芝多糖的结构和抗氧化性的比较研究

分别采用超声和水提法制备灵芝多糖,并对两种多糖的性质进行对比分析。研究表明,超声提取和热水提取的灵芝多糖得率分别为2.16%±0.03%和3.26%±0.03%。超声提取多糖的分子量显著低于水提法灵芝多糖,同时通过原子力显微镜(AFM)观察,超声灵芝多糖的结构较水提多糖松散。此外,对两种灵芝多糖进行抗氧化活性对比发现,在多糖浓度为0.5mg/mL时,超声灵芝多糖的DPPH自由基清除率达到79.90%±0.30%,为水提法的1.3倍;多糖浓度为0.9mg/mL时,还原力达到1.035±0.001,为水提法的1.5倍;氧自由基清除能力(ORAC)为(2275.07±115.73)μmol Trolox/g,为水提法的1.8倍。      

三种不同分子标记技术对灵芝单核体多态性的研究

为了探讨灵芝Ganoderma.lucidum原生质体单核体间遗传多态性,为育种材料的筛选提供分子水平依据。运用ISSR、SRAP、RAPD3种分子标记技术对制得的34株灵芝单核体进行了遗传多样性分析和聚类分析。结果显示,三种分子标记技术共扩增出347条条带,多态性条带为308条,多态比率为88.76%,其中ISSR-PCR扩增效果较好,多态性条带和多态比率最高;119-123与其余菌株相异系数最大,或已发生基因突变。根据综合分析结果,在相异系数为0.67时,可以把剩余33株菌株分为两大类群,Ⅱ类含5株菌株,分别为119-180、119-210、119-212、G0119和119-214,剩余的28株菌株为Ⅰ类。研究表明,ISSR、SRAP和RAPD分子标记可用于灵芝单核体多态性研究,这将为育种材料的筛选提供帮助,减少育种工作量和风险。      

灵芝菌丝液体深层发酵培养基的研究

利用液体深层发酵方法进行灵芝菌丝发酵最佳培养基的确定。通过单因素实验研究了可溶性淀粉、葡萄糖、蛋白胨、麸皮、MgSO4·7H2O、KH2PO4对液体深层发酵灵芝菌丝生长的影响,并通过单因素试验和正交试验确定了灵芝液体深层发酵的最适培养基配比为可溶性淀粉1%,葡萄糖2.5%,蛋白胨0.1%,麸皮0.5%,MgSO4·7H2O0.015%,KH2PO40.1%。发酵6d干菌体得率为19.91g/L。     

灵芝多糖脱色工艺研究

目的优化灵芝多糖脱色工艺,选取最优脱色方式。方法选取活性炭、壳聚糖、H_2O_2 3种脱色剂对灵芝多糖脱色处理,以脱色率和多糖保留率为指标,在单因素实验基础上,进行正交工艺优化。以2,2-二(4-叔辛基苯基)-1-苦肼基自由基(DPPH·)清除活性分析脱色后的灵芝多糖的抗氧化活性。结果活性炭对灵芝多糖的脱色率为67.72%,多糖保留率为72.12%;壳聚糖对灵芝多糖的脱色率为33.57%,多糖保留率63.00%;H_2O_2对灵芝多糖的脱色率为84.11%,多糖保留率为73.12%,综合考虑H_2O_2脱色效果最好,壳聚糖脱色法所得多糖的DPPH自由基清除能力最强。结论活性炭、壳聚糖、H_2O_2 3种脱色剂均可用于灵芝多糖脱色, H_2O_2效果较好,值得进一步的开发和利用。     

Rheological properties of the hot-water extracted polysaccharides in Ling-Zhi (Ganoderma lucidum)

The intrinsic viscosity, coil overlap and Mark–Houwink parameters of the hot water extracted polysaccharides from the fruit body and mycelia of Ganoderma lucidum were measured as a function of solvents and dehydration methods. Effects of ionic strength on the intrinsic viscosity, salt tolerance and chain stiffness parameters of G. lucidum polysaccharides were also characterized. It was found that when water was used as the solvent for the polysaccharides extracted from the fruit body (GLFP) and mycelium (GLMP) of G. lucidum, molecular aggregations were likely occurred to some extent. However, as DMSO was used, a less compact, more extended conformation was obtained, as indicated by the higher Mark–Houwink exponents (1.32–1.66) and lower power dependence of viscosity on concentration. Intrinsic viscosity of both GLFP and GLMP decreased with increasing ionic strength, possibly due to the presence of uronic acid groups in the polysaccharide structure. GLMP generally showed higher viscosity than GLFP, possibly due to larger molecular size. Drying method, including hot-air, vacuum, and freeze drying, did not show a significant influence on the rheological properties of GLFP and GLMP in the dilute domain. Such information would be relevant during the development of functional foods containing G. lucidum polysaccharide.     

赤灵芝多糖分离纯化及体外抗氧化性研究

对赤灵芝多糖进行分离、纯化和体外抗氧化性研究。从赤灵芝中提取粗多糖,通过离子交换色谱、葡聚糖凝胶色谱对粗多糖进行分离纯化,采用凝胶渗透色谱、气相色谱进行分子量和单糖组成测试,对GLPa-2、GLPb-1、GLPc 3个级分进行了体外抗氧化性研究。结果表明,3个多糖级分主要由葡萄糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖组成,但单糖的摩尔比不同;GLPa-2、GLPb-1、GLPc的重均分子量分别为3.65×10~5,3.87×10~4,1.38×10~4 Da;各样品对自由基的清除率随浓度升高而增大,呈量效关系,分子量最大的GLPa-2抗氧化活性最佳,表明赤芝多糖的抗氧化活性与其组成相关。     

灵芝菌丝体深层发酵工业化生产的研究

目的:采用生物发酵工程技术进行灵芝菌丝体多糖扩大生产;方法:利用农副产品(如玉米粉、豆粕粉)作培养基,在发酵罐中,根据其控制参数(如接种量、总糖量、还原糖、pH值、通风量、罐压、温度、生长因子),进行灵芝菌丝体多糖工业化扩大生产。结果:经过20批容积为10m3,定容为7.5m3发酵罐正常试验,生产周期平均为150h;pH值从6.5降至3.5;放罐后灵芝菌丝体经均质和喷雾干燥后其干粉平均每罐重量为66.1kg,干粉平均收率为8.76kg/m3,干粉中纯多糖含量为68.5g/kg,每罐纯多糖重量为4.225kg。镜检菌丝壁上无明显“芽头与锁状联合”,并有少量菌丝体自溶,无杂菌。结论:试验证明本工艺方案是成功的,是值得推广的新工艺。     

灵芝多糖检测鉴定方法

灵芝多糖是灵芝真菌中的主要活性物质,具有多种生理功能,对灵芝多糖检验鉴定的深入研究将有助于控制产品质量及防伪。分析了国内外近年来对灵芝多糖的含量、多糖的组成、分子量检测及采用IR及1HNMR鉴定其结构的方法。