蚕蛹蛋白酶解工艺及其水解产物抗氧化性

以蛋白水解度为指标,利用中性蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解蚕蛹蛋白。通过单因素试验和正交试验对影响蚕蛹蛋白水解度的因素进行优化试验,分析了两种蛋白酶对蚕蛹蛋白酶解效果的影响,并测定水解产物抗氧化活性。结果表明,中性蛋白酶酶解蚕蛹蛋白时,最优工艺条件为底物浓度为1.2%、酶解时间3.5 h、酶解pH 10.0、酶与底物比5.0%,此时,蚕蛹蛋白水解度最高为27.38%;木瓜蛋白酶酶解蚕蛹蛋白时,最优工艺条件为底物浓度为1.5%、酶解时间5.0 h、酶解pH 10.0、酶与底物比9.0%,此时,蚕蛹蛋白水解度最高为18.26%。最佳工艺条件下,中性蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解产物DPPH清除率分别为83.84%和81.24%,超氧阴离子自由基清除率分别为6.36%和9.72%,羟基自由基清除率分别为43.30%和62.24%。综上所述,木瓜蛋白酶对酶解产物的抗氧化效果较好。     

蚕蛹蛋白肽酶水解条件优化

为了降低蚕蛹过敏风险,提高蚕蛹优质蛋白利用价值并制备免疫活性肽,对蚕蛹蛋白进行了酶解优化。本文选用菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶和木瓜蛋白酶这5种酶对脱脂蚕蛹蛋白进行酶解。通过对小鼠脾细胞增殖和水解度的检测,选取最佳蛋白酶。在此基础上对最佳蛋白酶的四个单因素(酶和底物量,初始p H,水解温度和底物浓度)进行优化,从而确定最佳的酶解条件。结果表明,5种蛋白酶中碱性蛋白酶对脱脂蚕蛹蛋白的酶解效果最好。对碱性蛋白酶进一步优化,通过Box-Behnken实验和回归分析获得碱性蛋白酶酶解脱脂蚕蛹蛋白的最佳条件为加酶量=6.0%,温度=55℃,酶解时间=2.00 h,p H=8.0,水∶底物=20∶1,测得的水解度为19.96%±1.02%,免疫活性OD490 nm为0.2512±0.0125。     

蛹虫草HWM剩余物蛋白酶解工艺研究

以酶解液多肽指数为指标,选用胃蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶以及蜗牛酶、纤维素酶水解蛹虫草HWM剩余物,筛选蛹虫草HWM剩余物蛋白酶解最佳用酶。采用二次回归正交试验确定其最佳酶解工艺。试验结果表明,碱性蛋白酶为蛹虫草HWM剩余物蛋白降解的最佳用酶,其最佳酶解工艺参数为反应时间12 h,加酶量为干基底物质量的10%,底物质量浓度70 mg/mL,酶解温度55℃,初始pH 12.0。在此条件下,蛹虫草酶解液多肽指数达90.32%。     

双酶水解蚕蛹蛋白工艺研究

研究了碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶双酶法水解蚕蛹蛋白的工艺条件。通过单因素试验探讨了温度、加酶量、底物浓度、水解时间、酶质量比(碱性蛋白酶∶木瓜蛋白酶)对蚕蛹蛋白水解效果的影响,然后通过正交试验优化水解工艺务件。结果表明,影响水解率的主次关系依次为:温度、底物浓度、时间、酶用量、酶比。优化的工艺条件为:温度55℃,加酶量3.0%,底物浓度3%,水解时间6 h,酶质量比4∶1,上述条件下蚕蛹蛋白水解率达25.04%。     

蚕蛹蛋白的酶法水解工艺及其口服液的制备

为了制得蚕蛹免疫活性蛋白肽口服液,对蚕蛹蛋白酶解工艺进行了优化。本文选用菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶和木瓜蛋白酶这五种酶对脱脂蚕蛹蛋白进行酶解,以水解度和小鼠脾细胞的增殖为检测指标,得出碱性蛋白酶对脱脂蚕蛹蛋白的酶解效果最好,并通过单因素和响应面实验确定蚕蛹蛋白肽酶解的最佳工艺条件为:酶解温度55℃,加酶量6%,酶解时间2 h,pH8,水和底物比20:1,此条件下水解度为19.96%±1.02%,免疫活性OD₄₉₀为0.2512±0.0125。并进行蚕蛹蛋白肽免疫活性口服液的研制,通过感官评定得到最佳工艺为:蔗糖量8%,柠檬酸量1%。     

碱性蛋白酶对蛹虫草蛋白质水解的工艺技术优化研究

以蛹虫草蛋白粉为原料,利用碱性蛋白酶进行酶解处理,并对其酶解工艺进行优化研究。以水解度和酶解得率为评价指标,采用正交试验结果对蛹虫草水解工艺进行优化。当底物浓度为8%、碱性蛋白酶的加酶量为1.3%、酶解时间10 h、酶解温度为53 ℃时的水解度最高,为15.01%;当底物浓度为8%、碱性蛋白酶的加酶量为1.9%,酶解时间8 h、酶解温度为56 ℃时的酶解得率最高,为75.27%。经碱性蛋白酶酶解、过滤、干燥等工艺处理后,酶解产物的分子质量小,酶解剩余物少,酶解得率高,可以进行产业化推广应用。     

两种蛋白酶对米渣蛋白的酶促降解作用

碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶均可水解从米渣中提取的蛋白质,前者酶解米渣蛋白的效率明显优于后者。通过分析底物浓度、酶用量、溶液酸碱度、酶解温度和时间对酶促降解米渣蛋白效率的影响,得出碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶各自水解米渣蛋白的最适条件,即碱性蛋白酶作用底物的浓度、酶的用量、溶液pH、酶解温度和时间分别为0.6%、50U/ml、8.5、45℃和4h;木瓜蛋白酶则依次为0.9%、300U/ml、6.0、70℃和4h。     

蓝圆鲹鱼肉蛋白酶解条件的确定

以水解液中α-氨基态氮含量为指标,选用木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶和动物蛋白水解复合酶对蓝圆鲹鱼肉进行单酶水解,确定中性蛋白酶为水解用酶.利用正交实验确定的水解条件为:加酶量1300IU/g、温度55℃、酶解时间6h、底物浓度为33%.在此条件下水解率为47%.     

蛹虫草培养基的酶水解研究

以蛹虫草培养基为原料,采用酶法水解原料中的碳水化合物和蛋白质,制备保健食品的基料。实验中先用2%的淀粉酶、2%的糖化酶水解蛹虫草培养基溶液中碳水化合物,再通过对木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和菠萝蛋白酶的优选实验,优选出最佳水解酶为木瓜蛋白酶,并进行正交实验确定了木瓜蛋白酶的最佳水解条件为:温度55℃、固液比为1:12、加酶量为2%及水解时间为6h,此时酶解液中游离氨基态氮含量最高,达0.844%,固形物总量为10%。     

猪血红蛋白酶解制备ACE抑制肽的研究

本实验选用碱性蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶等六种商业蛋白酶在各自最适反应条件下分别水解猪血红蛋白12h,研究其水解产物对血管紧张素转换酶抑制率和蛋白水解度的影响。结果显示:采用胃蛋白酶酶解获得的产物ACE抑制率最高。胃蛋白酶的酶解条件为底物5%(质量分数),酶与底物浓度比E:S=3%,温度37℃,pH2.0,水解4h后其ACE抑制率为81.10%,水解度为6.64%。