乌鸡肽的营养成分及其功能特性研究

探讨乌鸡肽的营养成分及功能,为其深度开发打下基础。利用木瓜蛋白酶和风味蛋白酶水解乌骨鸡肌肉、活性炭脱色法制备乌鸡肽,高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法检测乌鸡肽的总氨基酸及游离氨基酸含量及相对分子质量分布区间、纳升级液相色谱串联质谱(Nano liquid chromatography tandem mass spectrometry,Nano LC-MS/MS)技术鉴定其组成成分。结果表明,游离氨基酸占总氨基酸的比例为1.74%,总氨基酸含量较高者为Leu、Ala、His、Pro、Met和Phe,游离氨基酸含量较高者为Glu、Pro、Asp、Arg、Gly和Ala;相对分子质量分布范围为0至6 918 Da,其中1 084 Da以下的比例达到88.91%;Nano LC-MS/MS鉴定出源于107种蛋白质的2 287种肽段序列,其中种类最为丰富的蛋白为参与骨骼肌修复的蛋白及酶类。该研究较为全面的分析乌鸡肽的营养成分,并表征了其功能,为乌鸡肽的潜在应用价值研究打下基础。     

乌鸡低聚肽铁的分离纯化及结构鉴定

为了考察乌鸡低聚肽铁中肽段的结构,以乌鸡为原料,以氯化亚铁为铁源制备乌鸡低聚肽铁,对其总蛋白质质量分数、螯合率、得率进行测定,结果表明乌鸡低聚肽铁总蛋白质质量分数为(56.79±0.18)%,螯合率为(83.53±0.15)%,得率为(40.86±0.14)%。然后利用反相高效液相色谱(RP-HPLC)对其进行分离纯化,收集4个组分峰,利用四极杆飞行时间串联质谱仪(QTOF质谱仪)测定肽序列,分析出1个肽段,氨基酸序列为Thr-Ser-Gly-Met-Pro,相对分子质量为491.56。     

乌鸡低聚肽亚铁螯合物的分离纯化与结构鉴定（英文）

从乌鸡中酶解得到乌鸡低聚肽,然后与亚铁螯合制备乌鸡低聚肽亚铁螯合物,螯合率为84.76±0.12%。乌鸡低聚肽亚铁螯合物具有较高的蛋白质含量,高达54.64±1.03%。并且分子量较低,其中分子量小于1000 u的占85.50%。通过扫描电镜、红外光谱对乌鸡低聚肽亚铁螯合物的结构进行分析,结果表明乌鸡低聚肽亚铁螯合物是一种新型的铁螯合物。体外稳定性研究表明乌鸡低聚肽亚铁螯合物具有一定的热稳定性、酸碱稳定性和体外消化稳定性。通过反相高效液相色谱对乌鸡低聚肽亚铁螯合物进行分离纯化,选择一个主要的组分进行收集,然后利用质谱仪进行质谱分析。从乌鸡低聚肽亚铁螯合物的主要组分中鉴定出一个五肽,氨基酸序列为Thr-Ser-Gly-Met-Pro。乌鸡低聚肽亚铁螯合物可作为一种铁补充剂用于食品添加剂、营养物及医药制品中。     

乌鸡低聚肽亚铁螯合物的分离纯化与结构鉴定

从乌鸡中酶解得到乌鸡低聚肽,然后与亚铁螯合制备乌鸡低聚肽亚铁螯合物,螯合率为84.76±0.12%。乌鸡低聚肽亚铁螯合物具有较高的蛋白质含量,高达54.64±1.03%。并且分子量较低,其中分子量小于1000 u的占85.50%。通过扫描电镜、红外光谱对乌鸡低聚肽亚铁螯合物的结构进行分析,结果表明乌鸡低聚肽亚铁螯合物是一种新型的铁螯合物。体外稳定性研究表明乌鸡低聚肽亚铁螯合物具有一定的热稳定性、酸碱稳定性和体外消化稳定性。通过反相高效液相色谱对乌鸡低聚肽亚铁螯合物进行分离纯化,选择一个主要的组分进行收集,然后利用质谱仪进行质谱分析。从乌鸡低聚肽亚铁螯合物的主要组分中鉴定出一个五肽,氨基酸序列为Thr-Ser-Gly-Met-Pro。乌鸡低聚肽亚铁螯合物可作为一种铁补充剂用于食品添加剂、营养物及医药制品中。     

乌鸡低聚肽的成分分析及抗氧化活性研究

在对乌鸡低聚肽氨基酸组成及相对分子质量分布分析的基础上,对其保护过氧化氢(H2O2)所致人肝癌细胞(Hep G2)氧化损伤的作用进行了研究。采用不同浓度乌鸡低聚肽作用Hep G2细胞4 h,然后用150μmol/L H2O2对细胞进行氧化损伤,4 h后以细胞存活率、细胞内活性氧(ROS)水平、一氧化氮(NO)及乳酸脱氢酶(LDH)释放量评价乌鸡低聚肽对H2O2所致Hep G2细胞氧化损伤的保护作用。研究结果表明,乌鸡低聚肽中谷氨酸含量最高(17.26%),其次是天冬氨酸(9.52%);相对分子质量小于1000 u的组分高达92.33%;乌鸡低聚肽具有提高细胞存活率、抑制细胞内ROS生成、减少NO及LDH释放的功能,对降低Hep G2细胞的氧化应激水平及提高细胞抗氧化能力具有较好的作用效果。从细胞水平上揭示了乌鸡低聚肽对过氧化所致的氧化损伤具有一定的预防保护作用。     

乌鸡低聚肽铁配合物的稳定性研究

以乌鸡为原料制备乌鸡低聚肽铁配合物,以分子量分布和铁含量为指标,对乌鸡低聚肽铁配合物的热稳定性、酸碱稳定性和消化稳定性进行了考察。结果表明:在温度为20⁸0℃时,乌鸡低聚肽铁配合物各个分子量区间的比例变化不超过2%,配合物的铁含量无显著性差异;在pH为380℃时,乌鸡低聚肽铁配合物各个分子量区间的比例变化不超过2%,配合物的铁含量无显著性差异;在pH为3⁹时,分子质量小于1 000 u的总含量略有升高,但升高不到6%,铁含量有所降低,但在广泛的pH范围内仍然有58.4%以上的铁含量;乌鸡低聚肽铁配合物经过蛋白酶消化后,分子质量小于1 000 u的总含量略有升高,但升高不到8%,经过胃蛋白酶消化和胰蛋白酶共同消化后,仍然有37.6%的铁含量。这说明乌鸡低聚肽铁配合物具有一定的热稳定性、pH稳定性以及消化稳定性。     

紫苏籽低聚肽中营养及特征成分研究

考察了紫苏籽低聚肽蛋白质含量、低聚肽含量、相对分子质量分布、氨基酸组成以及具有功能活性特征肽段成分。结果显示,蛋白质含量为93.14%,低聚肽含量为86.35%,相对分子质量主要分布在140～1 000 Da,占总比例的82.8%,氨基酸组成较为平衡,精氨酸含量较高,为102.72 mg/g。胱氨酸和蛋氨酸是紫苏籽低聚肽的限制氨基酸。必需氨基酸指数为59.55%,氨基酸组成基本符合FAO/WHO推荐的人体必需氨基酸的构成模式。从紫苏籽低聚肽中鉴定出了2条具有生物活性的二肽结构,分别为甘氨酰精氨酸二肽(glycyl-arginine,GR)和丙氨酰精氨酸二肽(alanlyl-arginine,AR),这2条二肽序列均为国内外首次从紫苏籽低聚肽中鉴定出来。     

米渣肽抗疲劳作用及分离鉴定

米渣中蛋白质量分数在60%以上,但目前米渣仅用于附加值低的饲料行业。为了提高米渣的功能特性,拓展其应用范围,采用碱性蛋白酶对米渣进行酶解,酶解的产物经大孔树脂纯化得到具有高蛋白含量的米渣肽。超滤分离得到具有不同相对分子质量范围的米渣肽。与灌胃生理盐水、米渣肽和高相对分子质量米渣肽组相比,灌胃低相对分子质量(<1 000)米渣肽可以显著延长小鼠游泳的疲劳时间和小鼠血糖含量,并显著降低血乳酸含量,说明小分子肽具有显著的抗疲劳作用。经过高效液相色谱分离,得到一个抗疲劳肽,其序列为Gln-Ser-Pro-Glu-Ile。     

食源性低聚肽的血管紧张素转化酶(ACE)抑制作用

在对海洋胶原低聚肽、乌鸡低聚肽、玉米低聚肽、小麦低聚肽、大豆低聚肽的基础理化成分和分子量分布进行分析的基础上,对其ACE抑制作用进行了考察。组成分析显示:5种食源性低聚肽中蛋白质含量很高,均达到了85%以上;分子量大多为1000 u以下(均在85%以上),主要分布在132~576 u范围内。ACE抑制作用实验结果显示:这5种食源性低聚肽的ACE抑制活性均呈显著的量效关系,半抑制浓度IC_(50)值在0.53-2.76 mg/mL之间,其中玉米低聚肽的ACE抑制作用最强,乌鸡低聚肽的ACE抑制作用最弱。研究明确了食源性低聚肽的ACE抑制作用,为其作为降血压保健食品的开发利用提供了一定的理论支持。     

高纯度大豆和花生低聚肽的体外抗氧化活性

为了比较高纯度大豆低聚肽和花生低聚肽的抗氧化活性,在分析蛋白质含量、氨基酸组成和分子量分布等理化性质的基础上测定清除自由基能力和还原力.结果表明:大豆低聚肽和花生低聚肽的蛋白质含量高达95%,谷氨酸、天门冬氨酸和亮氨酸的总量均在47%以上,相对分子质量分布在423.57和364.92;大豆低聚肽使0.2 mmol/L的DPPH自由基减少50%时的浓度SC50是52.85 mg/mL,约为抗坏血酸的1/2000,而花生低聚肽在上述条件下未达到50%的DPPH自由基清除率;在2.73～27.3 mg/mL浓度范围内,大豆低聚肽的还原能力约为花生低聚肽的1.51～1.83倍.大豆低聚肽的抗氧化效果优于花生低聚肽.     

乌骨鸡蛋与普通鸡蛋品质特征及脂肪酸组成比较

通过测定乌骨鸡蛋和普通鸡蛋的蛋重、蛋形指数、蛋黄比例、蛋黄干物质比例等,比较两者的蛋品品质特征,并以气相色谱-质谱法联用技术对乌骨鸡蛋和普通鸡蛋中的蛋黄油总脂质、蛋黄油及蛋黄磷脂侧链脂肪酸进行鉴定和组成分析。结果表明,乌骨鸡蛋蛋重极显著低于普通鸡蛋(p<0.01),约为普通鸡蛋蛋重的72％;两种鸡蛋蛋形指数无显著性差异(p>0.05);乌骨鸡蛋黄比例和蛋黄干物质比例分别为30.71%和15.73%,极显著高于普通鸡蛋(p<0.01);乌骨鸡蛋黄总脂质比例和蛋黄油比例分别为10.33%和7.93%,极显著高于普通鸡蛋(p<0.01);蛋黄磷脂比例无显著差异(p>0.05);花生四烯酸在乌骨鸡蛋黄总脂质、蛋黄磷脂侧链和蛋黄油脂肪酸中的相对百分比含量分别为3.52%、8.80%和1.78%,分别比普通鸡蛋约高35%、17%和76%。乌骨鸡蛋中较高的蛋黄比例和蛋黄干物质比例,使得乌骨鸡蛋较普通鸡蛋的营养价值高。较高的花生四烯酸含量,使得乌骨鸡蛋更加适宜孕妇和婴幼儿食用。     

泰和乌骨鸡鸡肉总磷脂含量及其侧链脂肪酸组成的特性

本文比较了相同条件养殖的泰和乌骨鸡和两种非药用鸡鸡肉的总磷脂含量,并以GC-MS联用技术对三种鸡肉中磷脂的疏水侧链脂肪酸组成进行了鉴定和分析,用面积归一法,计算各脂肪酸的相对百分含量。结果表明,泰和乌骨鸡鸡肉中总磷脂含量显著高于非药用鸡,而两种非药用鸡间无显著差异;泰和乌骨鸡鸡肉磷脂侧链脂肪酸中多不饱和脂肪酸和花生四烯酸含量显著高于非药用鸡。     

中华传统肉食煲汤的基本营养成分

以乌鸡、排骨、老母鸡、猪蹄等为原料,采用清水慢炖煲汤和中华传统肉食煲汤2种方式进行煲制。然后对汤汁中的总蛋白质、粗脂肪、总固形物和相对分子质量分布进行了分析。结果显示:煲汤仅能溶出7.80%-22.98%的蛋白质,而且汤中蛋白质的相对分子质量以大于10000的为主,汤中寡肽比例最高的是老母鸡汤,占总蛋白质的36.68%。这表明汤中虽有营养物质,但仅靠喝汤不能摄取足量、优质的营养。     

略阳乌鸡汤对D-半乳糖致衰老小鼠不同组织的保护作用

目的:研究略阳乌鸡汤对D-半乳糖致衰老小鼠不同组织的抗氧化作用,为略阳乌鸡的深加工和产业化开发提供理论支撑。方法:通过分析略阳乌鸡汤中矿物质元素和氨基酸含量,评价略阳乌鸡汤的主要营养价值。采用腹腔注射D-半乳糖构建衰老小鼠模型,用略阳乌鸡汤对衰老模型小鼠进行灌胃干预,连续干预10周。记录小鼠生长状态及体重变化,检测血清、睾丸、肝脏以及肾脏中超氧化物歧化酶（SOD）活力、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力、总抗氧化能力（T-AOC）和丙二醛（MDA）含量。制备肝脏、肾脏、睾丸组织切片,通过HE染色观察组织病理学变化,通过SA-β-GAL染色分析不同处理组小鼠睾丸、肾脏和肝脏的衰老程度。结果:略阳乌鸡汤中未检出铅、砷、汞,钙、锌、硒含量分别为1040±2.59 mg/kg、3.25±0.65 mg/kg、8.72±0.53 μg/kg;氨基酸总量1234 mg/100 g,其中必需氨基酸占25.5%,非必需氨基酸占74.5%,支链氨基酸占8.16%。与衰老模型组相比,略阳乌鸡汤干预组能显著（P<0.05）提高小鼠血清、睾丸、肝脏以及肾脏SOD活力、T-AOC、GSH-Px活力,显著降低MDA含量（P<0.05）。HE染色和SA-β-GAL染色发现,略阳乌鸡汤能显著修复D-半乳糖对小鼠不同组织造成的损伤。结论:略阳乌鸡汤具有明显的抗氧化能力,可延缓衰老。     

鸡肉蛋白酶解条件及产物降解规律

采用木瓜蛋白酶水解鸡肉蛋白,通过单因素实验和正交实验确定水解鸡肉蛋白的最适条件,并在此水解条件下酶解24 h,研究水解过程中酶解液中游离氨基酸含量和肽分子质量分布的变化规律。结果表明,最佳的酶解条件为:温度45℃,pH6.5,酶用量6.0%,固液比1∶2,水解时间6 h;酶解产物中游离氨基酸种类齐全且含量较高,水解过程中,游离氨基酸总量变化呈增长的趋势,16 h后变化不大;酶解液的肽分子质量都集中在3 000Da以下,酶解过程中大分子质量肽不断减少,小分子质量肽不断增加;酶解24 h后,分子质量小于1 000 Da的小分子肽和氨基酸含量可达97.19%。     

玉米低聚肽硒螯合物的理化性质及稳定性

以玉米低聚肽和亚硒酸钠为原料制备玉米低聚肽硒螯合物,对其水分、酸溶蛋白、总氮(粗蛋白)、分子量分布进行了考察,然后以螯合态的硒含量和分子量分布为指标,研究了螯合物对温度、pH、消化方式的稳定性,结果表明:玉米低聚肽硒螯合物的螯合率为54.25%±0.24%,得率为53.02%±0.17%,水分含量为7.46%±0.07%,酸溶蛋白含量为16.38%±0.03%,总氮含量为21.17%±0.35%,分子量低于1000 u的比例为85.1512%。在25~100℃环境下,分子量低于1000 u的比例变化不超过7%,硒含量最低不小于70%;在pH=2~12的环境下,分子量低于1000 u的比例变化最高不超过16%,硒含量最低仍在75%以上;在经过胃蛋白酶、胰蛋白酶和两种酶的消化后,分子量低于1000 u的比例分别增加5%、7%和8%,硒含量最低仍在70%以上。这说明玉米低聚肽硒螯合物具有一定的热稳定性、酸碱稳定性和消化稳定性。     

Effect of Existence of Exogenous Protein on Physicochemical Properties of Heat- and Transglutaminase-induced Bovine Collagen-peptide Gel

ABSTRACT: The combined influence of preheat treatment, mixing with various proteins, and the addition of microbial transglutaminase (MTGase) on the physicochemical properties of bovine collagen-peptide (BCP) gel was investigated. The preheat treatment and the mixing with various proteins contributed to the enhancement of the gel strength and polymerization of BCP. The gel made with 0.1% MTGase showed the highest breaking strength. The melting point of the preheated BCP gel was higher than that of the unheated one ( P < 0.05). The gel made with a combination of preheated BCP-casein or preheated BCP-soybean protein showed a higher melting point than that made with preheated BCP alone ( P < 0.05). The sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) pattern of the mixture of preheated BCP with casein or soybean protein showed that the protein bands with relatively low molecular weights disappeared and the bands with relatively high molecular weights increased. Observation by a scanning electron microscope revealed that the preheated BCP gel prepared with MTGase had a well-defined cross-linked network and showed some clumps of aggregated proteins. These results show that preheating, mixing with other proteins and MTGase treatment, are effective ways to make BCP a fine biopolymer.     

乌鸡血酶解工艺条件的研究

以新鲜乌鸡血为主要原料,研究了乌鸡血的酶解工艺条件,结果表明对乌鸡血进行间歇式超声破碎处理,其效果比机械破碎效果更好;通过比较AS1.398中性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶对乌鸡血酶解作用能力大小,选取AS1.398中性蛋白酶作为酶解用酶;同时在单因素和正交实验基础上,确定了AS1.398中性蛋白酶的酶解最佳工艺条件为:酶解液初始pH7.5,酶加量为8000U/g,酶解温度为45℃,底物浓度为8%,酶解时间6h。此条件下的水解度达到22.22%,血红素含量为0.62mg/mL。      

动植物源蛋白体外消化产物结构性质及ACE抑制活性

为揭示动植物源蛋白对于血压调节功能上的差异是否由蛋白肽的血管紧张素转化酶（angiotensin conversion enzyme,ACE）抑制活性所引起,动植物蛋白经体外消化后,对蛋白肽的ACE活性抑制进行研究。采用胃蛋白酶-胰蛋白酶两步消化法,水解植物蛋白（大米、燕麦、大豆、豌豆）、红肉蛋白（猪肉、牛肉）和白肉蛋白（鸡肉）。测定所获蛋白肽的水解度、分子质量分布、氨基酸组成及其ACE抑制率。结果表明,随着蛋白质水解度的增加和分子质量的减小,3类蛋白消化产物的ACE活性抑制率均相应增大。其中,植物蛋白消化产物ACE抑制率最高（60.41%）,红肉蛋白最低（40.13%）。对蛋白质消化产物的氨基酸组成进行分析,结果表明,植物蛋白和白肉蛋白消化产物的疏水性氨基酸含量均显著高于红肉蛋白。3类蛋白中消化产物的疏水性氨基酸含量越高,则ACE抑制活性越高,说明疏水性氨基酸含量高可能是植物蛋白肽具有高的ACE抑制活性的主要原因之一。