米曲霉产大豆异黄酮糖苷酶发酵条件的研究

通过单因素实验和正交实验，探讨米曲霉O3产大豆异黄酮糖苷酶的最佳条件。结果表明：在培养基组分为玉米芯3％、豆饼粉0．2％、KH2PO40．4％、CaCI20．04％、MgSO4-7H2O 0．04％，自然pH，接种量为10％，培养温度为30℃，60h的条件下，米曲霉O3菌株的产酶活性较高，可达388．572U／mL。     

米曲霉产氨肽酶发酵条件优化

该文对1株产氨肽酶的米曲霉产酶条件进行单因子优化。确定产酶培养基和培养条件为:2%黄豆粉、0.3%K2HPO4,0.2%油酸,初始pH 5.0。在30℃,200 r/min下液体培养48 h后胞外酶活达497.13 U/mL,较优化前提高了3倍以上。该米曲霉营养要求简单,氨肽酶产量高,发酵周期短,非常适于生产研究。     

米曲霉腺苷酸脱氨酶的产酶条件

通过实验获得了米曲霉 3.80 0固态发酵产腺苷酸 (AMP)脱氨酶的适宜培养基 ,麸皮为主原料 ,成分质量分数为蔗糖 2 % ,鱼粉 2 % ,(NH4 ) 2 SO4 0 .1% ,吐温 80 0 .1% ,含水量 5 0 % .最佳的培养条件为 :2 5 0mL的三角瓶装 2 0 g培养基 ,在 2 8～ 30℃培养 6 0h .发酵结束称取一定量的麸曲加 10倍质量的蒸馏水 ,调节 pH 6 .0 ,在 35℃条件振荡水浴 2h .酶的浸提液经盐析、透析、DEAE柱层析分离后 ,可收集到较单一的活性峰酶 .     

米曲霉产氨基酰化酶最佳活力条件的研究

通过在不同的反应时间,反应温度,缓冲液种类及pH条件下测定氨基酰化酶的活力,得出氨基酰化酶的最佳活力条件。试验结果表明,氨基酰化酶在反应温度为37℃、磷酸缓冲液pH为7．5、与底物反应30min时,活力最高。     

米曲霉固态发酵大豆辅助提油预处理工艺的优化

研究了应用米曲霉固态发酵大豆辅助提油的预处理工艺。在单因素实验的基础上,采用响应面法优化发酵条件,得到最佳发酵条件为:发酵时间46.24 h,水分含量31.55%,发酵温度37.7℃,接种量9.88%。在最佳发酵条件下,获得蛋白酶活性为1 823 U/mL,纤维素酶活性为7 452 U/mL。在产酶阶段结束继续发酵32 h,利用索氏提取法评价预处理工艺效果,结果表明:油脂完全提取时间从8 h缩短至3 h,且提油率比未经发酵预处理的物料提高了53.5%,工艺效果较为显著。     

米曲霉固态发酵豆粕生产大豆肽

采用米曲霉A-9005固态发酵豆粕,研究所产蛋白酶的活力。结果表明其较优工艺为：发酵原料中豆粕含量为87%,初始pH值6.4,发酵温度为33℃,发酵时间为102 h,测得蛋白酶活为1 789.47 U/g。试验为米曲霉固态发酵豆粕产大豆肽的研究提供了相应的工艺参数和一定的理论依据。     

米曲霉固态发酵大豆粕制备大豆肽研究

对米曲霉固态发酵大豆粕生产大豆肽条件进行研究,结果表明,最适发酵原料(由大豆粕和麸皮组成)中大豆粕含量为93%。发酵温度35℃,初始pH为6.8,发酵时间102 h;在此条件下,发酵得到大豆肽转化率达62.77%。     

宇佐美曲霉产木聚糖酶的固态发酵条件研究

研究了培养基组分及培养条件对宇佐美曲霉(Asp usamii) 固态发酵产木聚糖酶的影响。采用Plack ett Burman和Box Behnken实验设计确定了最佳培养基组成和培养条件为:麸皮3 4g ,玉米芯4 6 g ,NH4NO31% ,KH2 PO40 3% ,CaCl2 0 1% ,MgSO40 1% ,Tween 80 0 4 % (均为相对于固体料的质量百分数) ,液固比为1 2∶1;最佳初始pH为自然pH ,2 8℃静置培养72h ,其间翻曲2～3次。酶活最高达到74 4 2IU/g(干曲)。     

红曲霉固态发酵萌芽米条件的研究

通过单因素和正交试验研究了利用红曲霉进行萌芽米固态发酵的条件.结果表明,红曲霉固态发酵萌芽米的最适条件为萌芽米初始含水量为50%,冰醋酸添加量为0.2%,最适温度为32℃,在此发酵条件下,次级代谢产物Monacolin K的产量为2.85mg/g.此法发酵后的萌芽米不仅食用加工性能得到改善,而且使其附加价值得到提高.     

米曲霉固态发酵豆粕制备大豆肽的研究

对米曲霉固态发酵豆粕生产大豆肽的条件进行了研究。结果表明,最适的发酵原料（由豆粕和麸皮组成）中豆粕含量为93％,发酵温度35℃,初始pH值为6．8,发酵时间102h。在此条件下,发酵得到的大豆肽转化率达62．77％。     

复方发酵促进剂对米曲霉沪酿3.042生物活性的影响

就复方发酵促进剂对米曲霉沪酿 3 0 4 2生物活性的影响进行了研究 ,结果表明该促进剂可明显提高米曲霉产蛋白酶的能力 ,最佳添加浓度为 4～ 6× 1 0 - 5 g g培养基时 ,可促进米曲霉生长、繁殖 ,使沪酿 3 0 4 2的蛋白酶产量增加 2 0 %左右 ;该促进剂还具有保护主酶活性等多重功效。     

利用葡萄渣黑曲霉固态发酵产果胶酶的研究

对黑曲霉（Aspergillus niger）BB-6利用葡萄渣固态发酵产果胶酶的发酵条件进行研究。结果表明,在基础发酵培养基中添加葡萄糖4%、硫酸铵0.6%,含水量60%,培养温度30 ℃条件下培养72 h,果胶酶酶活达12.226 U/g。     

米曲霉沪酿3.042原生质体制备和再生的研究

研究了酶液组成、酶解温度、酶解时间、渗透压稳定剂、培养基成分、再生培养方式等因素对米曲霉沪酿3.042原生质体制备和再生的影响,建立了米曲霉沪酿3.042原生质体制备和再生的适宜方法,即在查氏液体培养基中28℃培养10h,菌体用0.8mol/L NaCl配制的3%溶壁酶、1%纤维素酶、1%蜗牛酶、0.5%溶菌酶的复合酶液,30℃酶解4h￣6h后,经0.8mol/L NaCl再生固体培养基,双层平板培养法进行原生质体再生,可获得超过70%的再生率。为进一步通过原生质体技术选育优良的酱制品生产用菌株奠定了方法学基础。     

固态发酵生产木聚糖酶的研究进展

由于木聚糖酶能够将半纤维素中的木聚糖主链分解,因而广泛应用于造纸、饲料和食品等行业。固态发酵可以直接利用低成本的农业废弃物,具有低成本、低能耗、高产率和环境污染少等优点。因此,有必要对固态发酵生产木聚糖酶的工艺控制和研究现状进行简要概括,为大规模的工业化生产提供理论依据。     

米曲霉3．042种曲蛋白酶特性研究

蛋白酶活性中心对米曲霉育种、制曲等研究至关重要,本研究选择四种专一性蛋白酶抑制剂AEBSF、E-64、Pepstatin A和EDTA,研究其对制曲时间为72 h的种曲蛋白酶酶活的影响,并确定三类蛋白酶的活性中心.研究发现酸性蛋白酶的活性中心主要由丝氨酸和天冬氨酸构成,中性蛋白酶的活性中心主要是天冬氨酸,碱性蛋白酶的活性中心最为复杂,含有四大类酶的活性中心.     

米曲霉液态发酵香菇残次品产蛋白酶条件优化

为了充分综合利用香菇资源,该研究以米曲霉（Aspergillus oryzae）为发酵菌种,对香菇残次品进行液态发酵,以蛋白酶活为响应值,采用单因素试验和响应面法优化米曲霉产蛋白酶发酵条件。结果表明,米曲霉产蛋白酶的最优发酵条件为发酵时间3 d、料液比1∶10（g∶mL）、初始pH值6.5、转速175 r/min,在此优化条件下,蛋白酶活力为1 182.48 U/mL。     

米曲霉固态发酵降解大豆致敏原条件的优化

为了最大程度地降低甚至消除米曲霉固态发酵豆粕产品的免疫反应性,此研究利用响应面法对米曲霉固态发酵豆粕降解大豆致敏原的条件进行了优化。首先对影响米曲霉固态发酵豆粕降解大豆致敏原的几个因素（发酵时间、接种量、发酵温度、培养基初始pH、料水比）进行了单因素研究,确定了对结果有较大影响的料水比、发酵温度和培养基初始pH这三个因素。其后利用Box-Behnken设计,确定了固态发酵的最佳条件,即当料水比为1:1.21（g/mL）、发酵温度29.8℃、pH为6.63时,得到理论最低致敏原降解率为99.15%。最后,经验证实验,最佳条件下实际平均致敏原降解率为99.02%。验证实验结果与理论值相差0.13%,说明该方程与实际情况拟合较好。      

基于基因组改组的米曲霉沪酿3．042多亲株PEG介导融合育种

利用经过分生孢子的原生质体紫外线-氯化锂、NTG复合诱变得到的米曲霉沪酿3.042的8株突变株作为候选株文库,采用基因组改组(genome shuffling),利用原生质体,进行多亲株双灭活PEG介导融合,优化融合条件.以酪蛋白平板初筛,以及固体发酵测定中性蛋白酶酶活复筛,通过2轮融合操作,筛选出6株高产中性蛋白酶的融合株.其中融合菌株FII-41酶活达到7412U/g(干基),比原始出发菌株4212 U/g(干基)提高1.76倍,且遗传稳定.     

基于基因组改组的米曲霉沪酿3.042多亲株PEG介导融合育种

利用经过分生孢子的原生质体紫外线-氯化锂、NTG复合诱变得到的米曲霉沪酿3.042的8株突变株作为候选株文库,采用基因组改组(genome shuffling),利用原生质体,进行多亲株双灭活PEG介导融合,优化融合条件。以酪蛋白平板初筛,以及固体发酵测定中性蛋白酶酶活复筛,通过2轮融合操作,筛选出6株高产中性蛋白酶的融合株。其中融合菌株FII-41酶活达到7412U/g(干基),比原始出发菌株4212U/g(干基)提高1.76倍,且遗传稳定。     

一种米曲霉耐盐蛋白酶的纯化及酶学性质分析

采用硫酸铵沉淀、Q-HP阴离子交换柱和Superdux 75凝胶柱等技术,从酱油大曲中纯化得到一种耐盐蛋白酶,经飞行时间质谱鉴定为钙蛋白酶RIM13,属于一种半胱氨酸蛋白酶。该蛋白酶的最适温度为50?℃;最适pH值为6.5;稳定温度为40?℃;稳定pH值为7.0;Mn2＋促进蛋白酶活力,Fe3＋、Fe2＋、Cu2＋、Ca2＋、K＋、Na＋抑制蛋白酶活力,以上金属离子对蛋白酶二级结构也产生不同程度的影响;米氏常数Km为2.43?g/L,最大反应速率Vm为103.09?mg/（L·min）。在5、10?g/100?mL和15?g/100?mL的NaCl质量浓度条件下,蛋白酶保留的酶活力分别为77.22%、54.39%以及41.15%。该蛋白酶在高盐度环境下保持较高的酶活力,因此具有潜在的工业应用价值。