一株耐酸性α-淀粉酶产生菌的分离鉴定及发酵条件研究

应用锥虫蓝法从淀粉厂、饴糖厂等取来的土样中筛选得到一株产耐酸性α-淀粉酶的菌株.经生理生化及16s rDNA测序鉴定该菌株为枯草芽胞杆菌,命名为xm-1.该菌株最适产酶温度为37℃,最适产酶时间为发酵后第13小时,装液量对该菌株产酶影响不明显.在最优产酶条件下,最高酶活性高达242 U/mL.     

几株纤维素酶产生菌的分离鉴定及其产酶能力

从枯枝、秸秆、土壤中分离出35株产纤维素酶菌株。以酶活值作为复筛标准,筛选出5株产羧甲基纤维素酶和滤纸酶活力相对较高的菌株,分别为柱隔孢霉（Ramularia NS1）、康氏木霉（Trichoderma koningii NS2）、灰绿青霉（Penicillium glaucum NS3）、白腐菌（White-rot fungi NS4）和绿色木霉（T.viride Persex Fx NS5）。经？瓶发酵和酶活检测,其羧甲基纤维素酶活（CMC酶活）分别为297.97 IU/mL,300.11 IU/mL,154.83 IU/mL,146.68 IU/mL,308.14 IU/mL;滤纸酶活（FPA酶活）分别为6.56 IU/mL,5.63 IU/mL,4.29 IU/mL,9.63 IU/mL,8.02 IU/mL。其中绿色木霉（T.viride PersexFxNS5）在发酵条件：麸皮：CMC-Na（1：1）各6 g/L,硫酸铵4 g/L,发酵温度30℃,发酵时间3 d,发酵液CMC酶活和滤纸酶活分别达到352.11 IU/mL和13.96 IU/mL,比初筛酶活分别提高14.26%和74.06%。     

脂肪酶产生菌的筛选及产酶条件优化

从不同土样中分离获得36株脂肪酶产生茼,其中zj-5菌株产酶活性最高,通过对zj-5进行形态学观察,初步确定其属于酵母茵.通过正交试验设计,对zj-5的产脂肪酶条件进行优化,在摇瓶培养条件下,其最适产酶条件为:葡萄糖10.0 g/L,蛋白胨6.0 g/L,反应起始pH值为6.0,发酵温度为42℃,在此条件下的产酶可达245 U/mL.     

缩水甘油丁酸酯水解酶产生菌的筛选及产酶条件研究

从土壤中筛选到一株产缩水甘油丁酸酯水解酶的菌株,经鉴定属于裂殖酵母属(Schizosaccharomyces).产酶条件研究表明,淀粉作碳源,牛肉膏作氮源,初始pH=8.0,温度30 ℃,转速200r/min,摇瓶培养3 d,产酶量最佳,达1.17 U/mL.以摇瓶所得的酵母发酵液直接催化缩水甘油丁酸酯选择性拆分,所得(R)-缩水甘油丁酸酯的对映体过量值(ee)=81.4%,转化率达50.5%.     

酵子中一株醋酸菌的分离鉴定及产酸条件研究

从我国传统面团发酵剂酵子中分离、筛选得到一株醋酸菌菌株A-3,根据菌株的形态、生理生化特征,结合16S rRNA基因序列分析,最终确定菌株A-3为热带醋杆菌(Acetobacter tropicalis)。利用单因素试验对其产酸条件进行优化,结果表明:在接种量6%、pH值5.5、转速180～200 r/min、乙醇体积分数3%～5%、温度37℃的条件下菌株A-3的产酸量可达到31.1 g/L。试验结果为传统发酵剂中功能菌种资源的开发、面团发酵剂的改良以及微生物对面团特性的影响等研究提供参考。     

壳聚糖酶产生菌的筛选、鉴定及其产酶条件优化

从15份土样和5份水样中筛选到一株产酶能力较高的细菌,经鉴定归为假单胞菌属(Pseu-domonas sp.),该菌产生的壳聚糖酶为诱导酶.产酶条件优化实验结果表明,产酶培养基组成为:壳聚糖10 g/L,MgSO4·7H2O 0.5 g/L,KH2PO4 2.0 g/L,K2HPO4 1.0 g/L,NaCl 0.5 g/L,CaCl20.2g/L;最佳培养条件为:培养温度30 ℃,摇床转速180 r/min,培养基起始pH 6.0,培养时间60 h,添加0.2%的蔗糖或酵母浸膏有利于产酶,在优化的培养条件下产量可达1.35 U/mL.     

一株拮抗绿脓杆菌的抗菌蛋白产生菌的分离与鉴定

获得了产生拮抗绿脓杆菌抗菌蛋白的菌株。从土壤样品中筛选拮抗绿脓杆菌的菌株,采用形态学和16S rDNA分析鉴定其分类地位,采用琼脂平板扩散法测定分离菌发酵产物拮抗绿脓杆菌的活性,采用硫酸铵沉淀、分子筛分离发酵上清中的目标蛋白,测定了目标蛋白的蛋白酶敏感性、高温耐受性。结果表明:从土壤中分离出的该株不动杆菌,从其发酵产物中纯化出的目标蛋白有拮抗绿脓杆菌的活性;该目标蛋白对蛋白酶K或高温敏感,处理后可降低或丧失抗绿脓杆菌的活性,该抗菌蛋白相对分子量约35 KD。     

寡糖特异性麦芽糖酶产生菌的产酶条件优化

针对麦芽糖的生产存在葡萄糖、麦芽三糖、四糖等低聚糖以及多糖等副产物,高浓度麦芽糖生产效率低的工业难题,筛选了一株寡糖特异性麦芽糖酶生产菌,该酶具有将麦芽低聚糖降解并生成葡萄糖和麦芽糖的能力。该菌株最佳产酶条件为:以麦芽低聚糖作为碳源,碳源的质量浓度为50 g/L,以酵母浸粉作为氮源,氮源的质量浓度为2.0 g/L,发酵时间为24 h,温度为37℃,培养基初始pH为6.5。     

寡糖特异性麦芽糖酶产生菌的产酶条件优化

针对麦芽糖的生产存在葡萄糖、麦芽三糖、四糖等低聚糖以及多糖等副产物,高浓度麦芽糖生产效率低的工业难题,筛选了一株寡糖特异性麦芽糖酶生产菌,该酶具有将麦芽低聚糖降解并生成葡萄糖和麦芽糖的能力.该菌株最佳产酶条件为:以麦芽低聚糖作为碳源,碳源的质量浓度为50 g/L,以酵母浸粉作为氮源,氮源的质量浓度为2.0 g/L,发酵...     

土壤中淀粉酶产生菌的筛选及产酶条件优化

为筛选淀粉酶的高产菌株,利用淀粉水解圈作为筛选模型,从淀粉厂附近土壤中筛选得到产淀粉酶能力较强的细菌B5.对其产酶条件进行优化,最终得到最佳碳源为质量分数为2.0%的淀粉,最佳氮源为质量分数为0.5%的酵母膏加质量分数为0.5%的蛋白胨,最适初始pH值为6.0,最适培养温度为37℃,最适溶氧量为50 mL摇瓶装15 mL培养基,最佳产酶时间为48 h,培养基中同时补充质量分数为0.05%的MgSO4、质量分数为0.05%的CaCl2和质量分数为0.005%的FeSO4时可大幅提高酶活力.菌株B5液体发酵产酶活力最高可达158.89 U/g,该淀粉酶最适反应温度为42℃,最适反应pH值为5.0.     

白腐菌产木素过氧化物酶发酵条件的优化

在静置和振荡两种培养条件下研究营养条件对白腐菌合成木素过氧化物酶(1igninperoxidase，LiP)的影响。静置培养时，LiP在碳氮比(C／N)低的培养基中显示较高的酶活力，碳源以葡萄糖(0．02％)和糊精(0．18％)同时存在及分段加入要比单一葡萄糖作为碳源时获得更高的酶活；振荡培养时，在碳氮比高的培养基中LiP酶活最高，而类似于静置培养的氮源组合及分段模式却明显地抑制了LiP的合成。优化后，静置培养在第6天可获得7560U／L的酶活；振荡培养在第8天获得6500U／L的酶活。发酵液中LiP酶活力与菌体分泌的其同功酶的数量成一定的对应关系。     

一株产漆酶真菌的筛选、鉴定及发酵研究

采用愈创木酚显色法筛得一株产漆酶周期较短的丝状真菌.通过形态学观察和分子生物学序列分析,鉴定其为棘孢木霉(Trichodermaasperellum),并对所获菌株进行了发酵条件优化.通过单因素试验和正交试验获得该菌的最佳发酵条件为:蔗糖25g/L、麸皮汁80g/L、酒石酸铵10g/L和豆粕18g/L,KH2PO4 2,MgSO4·7H2O 0.6,CaCl2·2H2O 0.8,Cu2+0.25(1mM),pH 5.5~6.5,其漆酶最高酶活水平为571.32U/L.     

一株产菊粉内切酶酵母Kluveromyces NSY5发酵条件优化

在单因素实验基础上,采用Plackett-Burman实验设计对影响KluveromycesNSY5发酵产菊粉内切酶的碳源、氮源、无机盐、发酵时间等8个选择因素进行筛选,结果显示,培养基的菊芋汁浓度、摇瓶装液量和发酵时间对菌株发酵产酶具有显著影响。根据实验结果和经验方法对显著影响因素的优化取值范围进行预估,并选择适当的水平设计,用Box-Behnken中心组合实验和响应面寻优分析找出显著影响因素的极优值,验证实验结果表明,采用优化的菊芋汁浓度3.5%、装液量50 mL/250 mL、发酵时间56 h,KluveromycesNSY5摇瓶发酵液中的菊粉内切酶I/S比值达到18.29,比初始发酵条件下的菊粉内切酶I/S比值12.4提高47.5%,优化预测值和实验验证值的相对误差为0.26%。     

一株甲醛降解菌的分离鉴定及降解条件研究

从污水处理厂收集的土壤中分离到一株能降解甲醛的菌株,经过形态学分析、生理生化鉴定和16SrDNA序列比对分析,鉴定该菌为Methylobacteriumsp.XJLW.经驯化后,该菌株对甲醛的耐受由0.1g/L提高至1.2g/L.通过单因素实验得到该菌株降解甲醛的优化条件为:酵母膏1g/L,KH2PO40.7g/L,K2HPO40.8g/L,MgSO40.5g/L,温度30℃,pH 7.0.在优化后的条件下,培养52h后,该菌株对1.2g/L甲醛的降解率为31%.此外,该菌株的休止细胞8h后对2,15,30,45,60g/L的甲醛降解率分别为100%,96.8%,84.0%,26.5%,22.5%,具备较高的降解能力.     

一株新型乳酸菌素产生菌的分离及其鉴定

从新鲜牛乳中分离得到乳酸菌Ｘ４。该菌株在发酵过程中产生的乳酸菌素有较广的抑菌谱,不仅对芽孢杆菌,葡萄球菌、链球菌等革兰氏阳性细菌的生长具有较强的抑制作用,而且对大肠杆菌、沙门氏菌等革兰氏阳性铁生长也具有较强的抑制作用。经鉴定,Ｘ４菌株为乳脂链球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｃｒｅｍｏｒｉｓｓｐ．Ｘ４）。     

一株磷脂酶D高产菌的筛选及发酵条件优化

磷脂酶D可以催化合成磷脂酰丝氨酸,为了得到高活力的磷脂酶D,采用蛋黄平板法从油脂厂区的土壤中筛选出产磷脂酶D的菌株X1。通过摇瓶培养,用TLC薄层层析法测定酶活力,达到2 023U/L。对发酵培养基组分及发酵条件进行优化,结果表明,葡萄糖为碳源10g/L,蛋白胨为氮源15g/L,发酵温度为30℃,发酵液初始pH为7,摇床转速为180r/min的发酵条件,酶活力达到最大,为7 330U/L。     

甲壳素水解酶产生菌的分离选育

从沿海滩涂土壤、海鱼消化道、海水和海底污泥等自然环境中采集样品34个，从中分离获得能降解甲壳素的微生物114株，经过初筛和复筛，从中获得产酶能力较高的菌株C43，用比色法测定其酶活，发酵液粗酶活达0．115u。初步鉴定C43菌株为噬纤维菌科、噬纤维菌属。暂命名为噬纤维菌C43（Cytophaga.sp C43)。研究表明：噬纤维菌C43产生的甲壳素水解酶为诱导型。其产酶的最佳条件为：起始pH6．0，温度28℃，摇瓶转速200r/min，发酵周期为60h。     

三七内生菌的分离及其产皂苷发酵条件的优化

从三七的种子和根等部位分离三七内生菌,分离纯化后共获得三七内生菌11株。用薄层层析法对发酵液中皂苷类活性物质进行定性检测,并采用香草醛-硫酸显色法定量分析发酵液中皂苷的含量,筛选出一株可以产皂苷的内生菌株N3。生理生化鉴定和16SrDNA基因序列同源性比对分析结果表明,此株菌为肠杆菌属(Enterobacter)。通过单因素试验,确定内生菌株N3最适发酵条件为以蔗糖为碳源,牛肉膏为氮源,pH 7.0,温度28℃。     

长双歧杆菌 Ｆ１６菌株胆盐水解酶基因的鉴定及产酶条件优化

在前期益生性实验过程中,驯化后的长双歧杆菌 Ｆ１６菌株具有显著的降胆固醇作用,对人体健康具有重要意义。为探讨其降解机制,实验测定了其产胆盐水解酶（Ｂｉｌｅｓａｌｔｈｙｄｒｏｌａｓｅ,ＢＳＨ）能 力并鉴定了胆盐水 解 酶 基 因。为 提 高 Ｆ１６ 菌 株 的 降 胆 固 醇 效 果,在 单 因 素 实 验 的 基 础 上,利 用 Ｂｏｘ－Ｂｅｈｎｋｅｎ中心组合原理设计３因素３水平响应面实验,以葡萄糖质量浓度、蛋白胨质量浓度和 接种量为自变量,ＢＳＨ 活性ＯＤ５７０为响应值,确定了Ｆ１６菌株产ＢＳＨ 的优化发酵条件：葡萄糖质量浓度为１０．０５ｇ／Ｌ、蛋白胨质量浓度为１５ｇ／Ｌ、接种量为１．０５％（ＯＤ６００为１）,既定条件下 ＢＳＨ 活 性ＯＤ５７０可达到０．８９６,酶活可达到优化前的１．８倍。对 Ｆ１６菌株降解胆固醇的降解率进行了测 定,优化后在４８ｈ内的胆固醇降解率可达到７２．６％,约为优化前的１．６倍。实验结果表明 Ｆ１６菌 株的益生性能在食品、保健和医药等领域具有潜在的应用前景。     

植酸酸产生菌产酶条件研究

经采样、分离、筛选出多株植酸酶产生菌；并将其中产酶水平较高的黑曲霉和无花果曲霉用固态培养法进行了产植酸酶条件的对比研究。