不同载体固定化产脂肪酶发酵性丝孢酵母的比较

选择活性炭、硅胶G、大孔树脂DM-130为载体,采用吸附培养的方法将发酵性丝孢酵母细胞固定化,确定了固定化的适宜条件。通过比较适宜条件下固定化细胞的脂肪酶活力,筛选出固定化效果较好的吸附载体为活性炭。结果表明,在培养基中添加10g/L 40目活性炭,接入体积分数为10%的液体种子,于30℃、160r/min吸附培养48h的固定化效果较好,获得的固定化酶活力可达110.32U/g。     

土壤中淀粉酶产生菌的筛选及产酶条件优化

为筛选淀粉酶的高产菌株,利用淀粉水解圈作为筛选模型,从淀粉厂附近土壤中筛选得到产淀粉酶能力较强的细菌B5.对其产酶条件进行优化,最终得到最佳碳源为质量分数为2.0%的淀粉,最佳氮源为质量分数为0.5%的酵母膏加质量分数为0.5%的蛋白胨,最适初始pH值为6.0,最适培养温度为37℃,最适溶氧量为50 mL摇瓶装15 mL培养基,最佳产酶时间为48 h,培养基中同时补充质量分数为0.05%的MgSO4、质量分数为0.05%的CaCl2和质量分数为0.005%的FeSO4时可大幅提高酶活力.菌株B5液体发酵产酶活力最高可达158.89 U/g,该淀粉酶最适反应温度为42℃,最适反应pH值为5.0.     

土壤中产脂肪酶菌株的分离及浓缩培养

从食用油污染的土壤中筛选得到1个产脂肪酶较多的酵母菌株,测得其脂肪酶活力为8.30 U/m L.用正交试验法对该菌株的最佳发酵条件进行了优化.结果表明,最佳培养基成分为:1.50%蛋白胨、1.20%葡萄糖、10.00%橄榄油乳化液、0.5%酵母膏、KH2PO40.65%、K2HPO40.20%、Mg S04·7H2O 0.02%;最佳产酶培养条件为:温度30℃,发酵的初始p H 7.5,接种菌量为2.0%,摇床转速180 r/min,培养20 h后测定脂肪酶酶活力达到33.19 U/m L,是优化前的4倍.在菌株培养20 h时采用微孔滤膜过滤二次培养,结果表明在培养24 h时菌数达到最大;培养28 h后脂肪酶活力达到峰值86.08 U/m L,较未采用微孔滤膜过滤二次培养提高160%,为初始脂肪酶活力的10.4倍,达到浓缩培养要求.     

响应面法优化褐藻酸降解菌的培养条件

通过响应面法对褐藻酸降解菌ZGR-13发酵产酶的培养条件进行了优化。该株褐藻酸降解菌ZGR-13的最适培养条件为:玉米浆质量分数1.85%,酵母膏质量分数0.92%,褐藻酸钠质量分数0.4%,NaCl质量分数3%,FeSO4质量分数0.01%,混合碳源质量分数3%,接种量9%。在最适条件下,菌株的最大酶活理论上可达57.61U/mL。     

南极假丝酵母诱变育种及产脂肪酶条件优化

通过紫外诱变、硫酸二乙酯诱变及复合诱变,对南极假丝酵母菌种进行了选育,筛选出一株高产菌株UDAan-1,其酶活达到42.7 U.mL-1,为原始菌株的1.8倍。在摇瓶条件下对发酵培养温度、初始pH值等南极假丝酵母诱变菌株产酶工艺参数进行了优化。最终确定了各发酵工艺参数:培养温度26℃,初始pH值6.5,发酵用菌种培养20h,接种量6%(体积分数),摇床转速200 r.min-1,250 mL摇瓶装液量50 mL,表面活性剂选用0.1%吐温-80(体积分数)。     

金属离子对发酵性丝孢酵母发酵产油脂的影响

通过摇瓶发酵,考察了不同浓度金属离子(Mg2+、Mn2+、Cu2+、Zn2+)对发酵性丝孢酵母(Trichosporon fermentans)发酵产油脂的影响,研究结果表明:培养基中添加适量的Mg2+、Cu2+、Zn2+有利于细胞积累油脂,但Mn2+对菌体生长及积累油脂不利。     

解酯假丝酵母脂肪酶的性质及固定化

以解酯假丝酵母(Candida lipolytica)为出发菌株,采用摇瓶发酵法产酶,对发酵产的脂肪酶粗酶液进行了性质及固定化研究。该酶反应的最适温度为40℃,最适pH为7.5,在pH 6.0～8.0酶活较稳定,热稳定性较差。脂肪酶的最佳固定化条件为:载体硅藻土与脂肪酶质量比为14,固定化温度为30℃,缓冲液pH为8.0,固定化时间为2h。     

金属离子对发酵性丝孢酵母发酵产油脂的影响

通过摇瓶发酵．考察了不同浓度金属离子（Mg^2＋、Mn^2＋、Cu^2＋、Zn^2＋）对发酵性丝孢酵母（Trichosporon fermentans）发酵产油脂的影响，研究结果表明：培养基中添加适量的Mg^2＋、Cu^2＋、Zn^2＋有利于细胞积累油脂．但Mn^2＋对菌体生长及积累油脂不利。     

对产油脂酵母的细胞破碎方法及油脂提取效果的比较

研究了冻融破碎法、超声波破碎法、酸热法以及冻融和酸热结合法破碎发酵性丝孢酵母(Trichosporon fermentans)细胞,并考察了乙醚-石油醚法和氯仿-甲醇法萃取细胞内油脂.实验结果表明,采用酸热法破碎细胞后以乙醚-石油醚作为萃取溶剂油脂提取效果较好,油脂得率高达29.8%.     

分解酒糟生物质的纤维素酶生产菌的筛选研究

从白酒糟采集的样品中分离到15株菌,经过刚果红染色,初筛得到产纤维素酶酶活较高的5株菌。纤维素酶和滤纸酶活研究结果表明,这5株菌在分泌纤维素酶活力及降解滤纸能力方面均较强,其分解纤维素的酶活最高达到11.9 U/mL,而分解滤纸的酶活力则最高达到6.4 U/mL。最适产酶条件为:发酵时间72~96 h,发酵温度25~30℃。对酒糟发酵减重最高达18%。     

脂肪酶产生菌的筛选及产酶条件优化

从不同土样中分离获得36株脂肪酶产生茼,其中zj-5菌株产酶活性最高,通过对zj-5进行形态学观察,初步确定其属于酵母茵.通过正交试验设计,对zj-5的产脂肪酶条件进行优化,在摇瓶培养条件下,其最适产酶条件为:葡萄糖10.0 g/L,蛋白胨6.0 g/L,反应起始pH值为6.0,发酵温度为42℃,在此条件下的产酶可达245 U/mL.     

一株木霉菌株的改良和产酶条件及酶学性质研究

将自然界筛选得到的产纤维素酶活力较高的野生菌株进行紫外诱变得到诱变菌株 TMa-91 1 8,该菌株的产酶最适条件为 :稻草粉和麸皮的质量比例为 8∶ 2 ,培养基含水量质量分数为 65% ,发酵时间 72 h,发酵温度为 30℃。该酶最适反应 p H为 4 .4 ,最适反应温度为 50℃ ,最佳浸提条件为4 0℃蒸馏水。     

土壤中产碱性脂肪酶霉菌的筛选

利用RhodamineB平板筛选模型，以PVA橄榄油为底物的NaOH滴定法为测酶活主要方法，从沈阳化工学院附近含油脂丰富的土壤中筛选得到产碱性脂肪酶能力较高的霉菌M20．对其产酶条件进行优化，最终得到培养基中最佳碳源为葡萄糖2％＋植物油3％，最佳氮源为4％酵母膏，最适初始pH为8．0，最适产酶时间36h，将酶液于4℃下保存，酶活力可在3d内保持稳定．     

米曲霉利用农业废弃物产木聚糖酶的条件优化

主要研究了米曲霉利用农业废弃物产木聚糖酶的情况.对实验室保藏菌株米曲霉M-9生长所必需的碳源、氮源、培养温度和培养基初始pH等条件进行了优化.实验表明,此菌株最适碳源是粒度小于0.08 mm的玉米芯（质量分数为4.0%）,最佳复合氮源是质量分数为1.2%的酵母提取物加质量分数为0.8%的大豆蛋白胨,最适初始pH值为7.5,最适产酶温度为30℃,最佳转速为200 r/m in,添加表面活性剂吐温60对菌株产酶有促进作用.在最适培养条件下,培养5 d,米曲霉沪酿M-9木聚糖酶的产量高达795.93 U/mL,是优化前的2.2倍.     

响应面法优化黄杆菌突变株产脂肪酶摇瓶发酵条件

应用响应面法对经超临界CO2诱变获得的黄杆菌突变株(Flavobacterium sp. YY25-H0.5)产脂肪酶的摇瓶发酵条件进行优化.首先应用Plackett-Burman设计对影响产酶的因素进行效应评价,筛选出3个主要影响因素:起始pH,橄榄油含量和Triton X-100含量.然后用响应面法对主要因素进行优化,得出最适条件:起始pH6.90,橄榄油含量1.17 %和Triton X-100含量0.33%.YY25-H0.5在优化条件下摇瓶发酵24 h所产脂肪酶为38.9 U/mL,是优化前的1.34倍.该突变株的产酶活力在产脂肪酶的细菌中居较高水平.     

产普鲁兰酶芽孢杆菌L5的ARTP诱变育种及发酵优化研究

普鲁兰酶是高效利用淀粉的关键酶之一,选育普鲁兰酶高产菌株对其工业化应用具有重要意义。从土壤中筛选得到一株产普鲁兰酶菌株L5,产酶活力为10.83 U/m L。通过16S r DNA测序和构建系统发育树,鉴定菌株L5为芽孢杆菌菌属(Bacillus genus)。以L5菌株为出发菌株采用常压室温等离子体(ARTP)技术进行诱变育种,筛选出4株普鲁兰酶高产突变菌株G1(20.33 U/m L)、G2(19.68 U/m L)、G3(19.31 U/m L)、G4(22.01 U/m L),较之前酶活性分别提高了87.7%、81.7%、78.3%、103.2%。利用正交试验优化发酵培养基,最优组合:可溶性淀粉1.5%、糊精1.0%、蛋白胨0.5%、黄豆粉1.5%、Ca~(2+)0.05%、Fe~(2+)0.10%、Zn~(2+)0.15%,在最优发酵培养基条件下,G4菌株产酶活力可达27.22 U/m L(提高了23.7%)。试验所产普鲁兰酶的最适反应温度为50℃、最适反应pH值为6.5,在30～60℃保温2 h酶活能维持在80%以上,在pH 5～9保存4 h后酶活力仍能维持在60%以上,该酶具有良好的热稳定性。     

一株海洋细菌产脂肪酶发酵条件研究

对分离自海泥中产脂肪酶海洋菌株L42进行产酶发酵条件研究,包括发酵时间、起始pH、装液量、接种量、发酵温度、摇床转速以及底物、碳源、氮源种类。结果表明,发酵24 h,起始pH=8.0,装液量75 mL(250 mL三角瓶),接种量4%(体积分数),发酵温度20℃,摇床转速150 r/min有利于产脂肪酶;最佳培养基组成为蛋白胨质量分数1%,葡萄糖质量分数0.5%,橄榄油体积分数1%。通过产酶条件的优化,酶活较起始提高了44.4%。     

产低温碱性脂肪酶菌株Acinetobacter johnsonii LP28的鉴定及发酵条件优化

从实验室保藏的49株碱性脂肪酶产生菌中筛选出产低温碱性脂肪酶菌株LP28,初步酶学性质研究表明,该脂肪酶的最适作用温度为30℃,最适作用pH为9．0,粗酶液在室温条件下处理48h仍具有93．78％的残余酶活．该菌经16SrDNA鉴定为约氏不动杆菌（Acinetobacter johnsonii）,同源性为99％．摇瓶实验表明,该菌株最适产酶培养基为（g/L）：淀粉10,牛肉膏20,K2HPO41,PvA-大豆油20．最高酶活为3．06U／mL．     

超声波破碎法提取发酵性丝孢酵母胞内脂肪酶的条件优化

利用超声波对发酵性丝孢酵母(Trichosporon fermentans)进行细胞破碎,研究了输出功率、辐射时间、工作总时间、菌体质量浓度等因素对胞内脂肪酶活性的影响。通过单因素试验和正交试验,获得较高活性脂肪酶的提取条件:超声波每次辐射时间为6s(间歇时间5s),菌体质量浓度为25g/L,输出功率为550W,工作总时间为5.5min,在此条件下提取的脂肪酶活力达到128.46U/g。     

氮源调控Schizochytrium sp. DP-16发酵产DHA油脂

利用一株海洋真菌Schizochytrium sp. DP-16发酵产DHA油脂,从有机氮源、无机氮源两方面研究不同氮源种类和浓度下DHA油脂积累情况。利用GC分析DHA占总脂肪酸的质量分数,结果表明,在牛肉膏、玉米浆、蛋白胨、酵母浸粉4种有机氮源中,添加酵母浸粉15 g/L,油脂产量达到20.7 g/L,相比对照组提高了16.9%。添加谷氨酸钠10 g/L,油脂产量为22.8 g/L,DHA占总脂肪酸质量分数的36.6%,相比对照组提高了11.2%和28.4%。硝酸钠、硫酸铵、氯化铵3种无机氮源中,添加氯化铵1.5 g/L,DHA产量占总脂肪酸的质量分数高达41.5%,相比对照组提高了17.5%。油脂发酵结果表明,添加酵母浸粉15 g/L和谷氨酸钠10 g/L氮源复配条件下发酵效果可观。