共查询到19条相似文献,搜索用时 62 毫秒
1.
采用胃蛋白酶和胰蛋白酶依次对酪蛋白进行双酶水解,制备ACE抑制肽。水解物经截留分子质量6ku的超滤膜初步分离,再通过Sephadex G-15进一步纯化,体外测定各分离产物ACE活性的半数抑制质量浓度(IC50值)。纯化得到的各组分经毛细管电泳分析肽谱、Q-TOF LC/MS检测分子质量范围。结果显示:双酶水解产物IC50值为560μg/mL,超滤流出物IC50值为250μg/mL;Sephadex G-15分离得到3个组分,组分Ⅰ的IC50值为123.41μg/mL,含有19个肽段;组分Ⅱ的IC50值为66.67μg/mL,含有14个肽段;组分Ⅲ的IC50值为64.29μg/mL,含有5个肽段。Q-TOF LC/MS测得纯化组分的分子质量范围为400~800u。 相似文献
2.
3.
从醋蛋水解物中分离纯化ACE抑制活性物质 总被引:4,自引:0,他引:4
经胃蛋白酶-胰酶复合酶体系水解醋蛋液得到的水解物对血管紧张素转化酶有较强的抑制活性(IC_(50)= 0.125 mg/mL),醋蛋水解物经Bio-gel P-2纯化、半制备型RP-HPLC分离,得到对ACE有强烈抑制作用的组分X,X经电喷雾质谱、保温后,确定其是序列为Trp-Ala-Ala-Gly-Trp的多肽类物质。 相似文献
4.
5.
目的:为了建立定量检测酪蛋白水解物中的血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽的反相高效液相色谱(RP-HPLC)方法。方法:酪蛋白先经过胃蛋白酶水解、再经过胰蛋白酶水解,用风味蛋白酶和离子交换树脂对水解物先后进行脱苦和脱盐处理。建立标准品十肽酪氨酸-谷氨酰胺-赖氨酸-苯丙氨酸-脯氨酸-谷氨酰胺-酪氨酸-亮氨酸-谷氨酰胺-酪氨酸(YQKFPQYLQY)的RP-HPLC检测方法,运用外标法测定酪蛋白水解物中的ACE抑制肽YQKFPQYLQY的含量。结果:标准品十肽YQKFPQYLQY质量浓度在2.54.5mg/m L(R2=0.95496)范围内与峰面积呈良好的线性关系。酪蛋白水解物中所含十肽质量分数为4.96694%±0.00131%。结论:本液相检测方法操作简便、快速,适用于ACE抑制肽YQKFPQYLQY的定量检测分析。 相似文献
6.
7.
血管紧张素转化酶(ACE)在血压调节方面起重要作用,目前已从乳蛋白中分离出多种ACE 抑制肽。本文对ACE 抑制肽的作用机理和来源进行介绍,并对乳源ACE 抑制肽的获得与开发及其应用进行综述。 相似文献
8.
9.
10.
利用碱性蛋白酶Alcalase对花生分离蛋白进行水解,制备花生分离蛋白水解物,并测定不同水解时间所得产物对血管紧张素转化酶(ACE)的抑制作用。未水解的花生分离蛋白没有ACE抑制活性,而利用碱性蛋白酶Alcalase水解所得的水解物具有很强的ACE抑制活性,水解30 min时水解物活性最高,其半抑制浓度为(IC50)0.56 mg/mL。通过超滤、Sephadex G-15凝胶过滤层析、反相高效液相色谱(RP-HPLC)、基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-MS/MS)和氨基酸组成分析等分析手段从水解30 min所得的水解物中分离鉴定出两种新的ACE抑制肽,氨基酸序列为Gln-Gly-Gly-Ser-Gly-Met-Thr-Leu-Ala-Phe-Pro-Leu-Pro-Lys和Lys-Ile-Phe-Leu-Arg-Leu-Ser,其IC50值分别为10.6μmol/L和36.6μmol/L。 相似文献
11.
12.
13.
采用超声协同稀碱对猪皮实施预处理后,酶解30 min制得的高血管紧张素转化酶(Angiotensin converting enzyme,ACE)抑制活性水解液为原料,采用Sephadex G-15、半制备高效液相色谱分离纯化其中胶原ACE抑制肽并对其序列进行鉴定。结果表明,Sephadex G-15分离胶原ACE抑制肽的最佳分离条件为:样品浓度100 mg/m L;上样量2 m L;流速2 m L/min;洗脱剂为蒸馏水;层析柱为1 m×10 mm的层析柱。在该分离条件下,混合肽被分成AP-I、AP-II两个组分,IC50值分别为19.50、1.01 mg/m L。对抑制活性较强的AP-II进一步采用半制备高效液相色谱进行分离,得到8个组分峰,其中峰2、峰5和峰6的IC50值最小,分别为0.73、0.44和0.4 mg/m L。结合IC50值的大小及半制备收集到样品的量,对峰2和峰6采用LC-MS/MS进行序列分析。结果显示峰2的多肽序列为QGPPGPAGPR(P为Hyp),峰6的序列为AGPPGPPGPA,这两个序列位于胶原蛋白α1链中526?535、730?739位。 相似文献
14.
用不同的干燥方法干燥富含血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽的酪蛋白水解物,研究对ACE活性抑制的影响。在研究过程中,采用喷雾干燥法、流化床干燥法和真空冷冻干燥法干燥富含ACE抑制肽的酪蛋白水解产物,以干燥产物的水分含量低于5%为指标,确定干燥条件,以干燥产物的ACE活性半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)值,优化干燥条件。并通过动物实验,评价不同干燥方法所得产物的降血压效果。结果显示,采用喷雾干燥法干燥水解产物优化条件为:进风温度190 ℃、出风温度75 ℃、进料量44 mL/min,其干燥产物的ACE活性抑制的IC50值为0.442 mg/mL;流化床干燥水解物的条件为:进风温度65 ℃、进料量180 mL、悬浮介质添加量30 g,其干燥产物ACE活性抑制的IC50值为0.294 mg/mL;真空冷冻干燥产物的ACE活性抑制的IC50值为0.275 mg/mL。动物实验结果显示,采用真空冷冻干燥方法所得干燥产物,最有利于ACE抑制肽活性的保留,其次是流化床干燥,而喷雾干燥产物的活性损失最大。因此,在富含ACE抑制肽水解产物干燥时,采用冷冻干燥方法较好。 相似文献
15.
16.
酶解-膜分离组合制备ACE抑制肽 总被引:1,自引:0,他引:1
测试了膜分离操作压力、温度、pH值、料液体积浓度等操作参数对酶活力、血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽分离的影响,并建立分段酶解、分级膜分离组合模式实现从扇贝裙边酶解产物中分离ACE抑制肽.结果表明:膜分离操作操作参数对酶活力、ACE抑制肽分离均有较大影响;二段酶解-二级膜分离组合模式制备及分离ACE抑制肽的得率最高,为5.73%,其IC50为0.088mg/ml;一段酶解-二级膜分离组合模式制备及分离ACE抑制肽的得率为3.19%,其IC50为0.081mg/ml;一段酶解-单级膜分离组合模式制备及分离ACE抑制肽的得率只有2.31%,其IC50为0.078mg/ml. 相似文献
17.
为了考察海洋胶原低聚肽中ACE抑制肽的活性和结构,本文以深海鲑鱼皮为原料,采用两步酶解法制备出海洋胶原低聚肽,在对其分子量分布进行分析的基础上,测定了其血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性。结果表明,海洋胶原低聚肽中分子量小于1000 u的组分高达90.79%,主要分布在132~576 u范围内,其ACE抑制活性的IC50为1.18±0.12 mg/m L。然后利用反相高效液相色谱(RP-HPLC)对海洋胶原低聚肽进行分离纯化,收集11个组分峰,对其ACE抑制活性进行了测定。结果表明,有7个组分的ACE抑制活性比海洋胶原低聚肽高。最后利用Q-TOF质谱仪对收集的11个组分进行了结构鉴定,并对鉴定出的15个肽段进行了ACE抑制活性测定。结果表明,15个肽段均有一定的ACE抑制活性,其中Ala-Pro(AP)、Val-Arg(VR)、Gly-Arg(GR)的ACE抑制率比海洋胶原低聚肽高,IC50值分别为0.07±0.01 mg/m L、0.35±0.03 mg/m L、0.92±0.85 mg/m L,活性大约是海洋胶原低聚肽的16.86、3.37、1.28倍,是具有较高ACE抑制活性的肽段。 相似文献
18.
19.
以富含血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽的酪蛋白水解物和富含花青素的紫薯提取物为原料,灌胃12 周龄雄性原发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)和正常雄性Wistar大鼠,研究富含ACE抑制肽的酪蛋白水解物和紫薯提取物对SHR血压的影响。用不同剂量的酪蛋白水解物(10、20、30、40 mg/kg,以体质量计,下同)和紫薯提取物(5.4、10.8、21.6、32.4 mg/kg,花青素含量为9.25%)分别灌胃SHR和Wistar大鼠。然后选用酪蛋白水解物的2 个剂量组分别与紫薯提取物的3 个剂量组联合灌胃SHR。用智能无创血压计测量SHR血压变化。结果表明:富含ACE抑制肽的酪蛋白水解物和富含花青素的紫薯提取物,在实验灌胃剂量范围内均具有较好的降压效果,而且两者联用进行单次灌胃后降压效果显著提高(P<0.05)。其中酪蛋白水解物(10 mg/kg)分别与紫薯提取物3 个剂量(5.4、10.8、21.6 mg/kg)联合灌胃SHR后4 h或者5 h,血压分别降低了(24.67±4.46)、(28.47±3.96)、(41.51±4.89) mmHg。用酪蛋白水解物(20 mg/kg)分别与紫薯提取物的3 个剂量(5.4、10.8、21.6 mg/kg)联合灌胃SHR后5 h或者6 h,SHR血压分别降低了(38.03±3.46)、(43.92±2.92)、(47.20±4.31) mmHg。两者联用灌胃后对Wistar正常大鼠的血压无影响。另外,酪蛋白水解物2 个剂量(10、20 mg/kg)和紫薯提取物(10.8 mg/kg)分别联合使用,间隔4 h灌胃1 次,每天灌胃2 次,SHR大鼠血压较灌胃前分别降低了(28.20±3.02)、(43.54±2.55) mmHg,而且能较长时间维持在较低血压水平。因此,富含ACE抑制肽的酪蛋白水解物和富含花青素的紫薯提取物联合食用对SHR的降压具有显著效果。 相似文献