紫芝胞外三萜物质的体外抑菌作用

通过液体发酵获得紫芝发酵液物质,从中制备了胞外三萜,采用管碟法试验了胞外三萜物质对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌以及黑曲霉和青霉的体外抑菌活性。结果表明,紫芝胞外三萜物质对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的生长均具有显著抑制作用;但对枯草芽孢杆菌、青霉和黑曲霉的抑制作用较弱。进一步研究结果表明,紫芝胞外三萜物质对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度分别为30、30、60mg/mL,对黑曲霉和青霉的最小抑菌浓度分别为120、60mg/mL。      

抑制铜绿假单胞菌耐药菌株中药活性的研究

目的研究14种中药水提物对铜绿假单胞菌的质控菌株和耐药菌株的体外抑菌作用。方法先用纸片扩散法验证分离所得到的铜绿假单胞菌对庆大霉素和丁胺卡那霉素的耐药性,再用平板倍比稀释法测定中药水提物对铜绿假单胞菌质控菌株和耐药菌株的最低抑菌浓度（MIC）。结果苦参、石榴皮和鱼腥草对质控菌株和耐药菌株无抑菌作用（MIC〉100mg/mL）;金银花、蒲公英和黄芩对耐药菌株的抑菌作用明显优于对质控菌株,其他中药水提物对2种菌株的抑菌作用相似,其中西青果和石斛的抑菌作用最强（MIC=3.125 mg/mL）。结论多种中药水提物对铜绿假单胞菌具有显著的抑菌作用,尤其是对耐药菌株具有抑菌作用,表明中药在对抗细菌耐药性方面具有重要的开发价值。     

几种天然防腐剂的抑菌性能研究

本试验以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、假单胞菌、热死环丝菌为供试验菌,通过滤纸片试验法对常见十种天然防腐剂的抑菌性能进行研究,试验结果显示茶多酚对这四类菌都具有很强的抑菌作用;壳聚糖的抑菌谱也比较宽,但对各菌的抑菌力不如茶多酚强;大蒜对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌表现出很强的抑菌作用;溶菌酶、蜂胶和Nisin都主要对G+有较强的抑制作用,而对G-作用弱或无作用;丁香提取液对金黄色葡萄球菌和热死环丝菌的抑菌作用较强;桂皮提取液对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌作用较强,但对假单胞菌的抑菌作用相对较弱;生姜在试验中未表现出有抑菌作用,迷迭香的抑菌作用也很弱.由此可作为进一步优选几种天然防腐剂复配时的优选依据.     

MIC法测定四种抗氧化剂的抑菌作用

本文采用最小抑菌浓度法（MIC）测定了抗氧化剂丁基羟基茴香醚（BHA）、二丁基羟基甲苯（BHT）、特丁基对苯二酚（TBHQ）、没食子酸丙酯（PG）对食品中常见的大肠杆菌、沙门氏菌、枯草杆菌、酵母菌、黑曲霉、青霉等的抑菌作用。结果表明：所用的抗氧化剂对几种待测微生物均有不同程度的抑菌作用。以最小抑菌浓度来比较，各抗氧化剂的抑菌作用由强到弱依次为：TBHQ〉BHA〉PG〉BHT。     

海洋细菌B-1106生长特性及产胞外多糖研究

对从海泥中筛选到的1株海洋细菌B-1106的生长特性及产胞外多糖进行了初步研究.结果表明,海洋细菌B-1106耐盐度为4 g/dL,培养基初始pH 7.0～8.0,在淡水及海水培养基中产糖量时间均为96 h,产胞外多糖的较佳碳源、氮源分别为蔗糖和硫酸铵,较佳碳氮源质量浓度比为10∶1.     

丹参提取液体外抑菌活性研究

目的 研究丹参提取液的体外抑菌作用.方法 采用常量肉汤稀释法测定最低抑菌浓度(MIC),探讨其体外抑菌作用.采用杯碟法检测丹参不同提取方式、不同灭菌方式以及改变提取液pH值对金黄色葡萄球菌抑菌活性的影响.结果 丹参醇提液对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、铜绿假单胞杆菌、短小芽胞杆菌均有抑菌作用,其95%醇提液对上述菌的MIC分别为20,20,40,80,80 mg/mL,对白色念珠菌无抑菌作用.丹参醇提液对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌抑菌活性较强;不同灭菌方式及改变提取液pH值对金黄色葡萄球菌抑菌活性无差异.结论 丹参提取液具有一定抑菌作用.     

丹参提取液体外抑菌活性研究

目的 研究丹参提取液的体外抑菌作用.方法 采用常量肉汤稀释法测定最低抑菌浓度(MIC),探讨其体外抑菌作用.采用杯碟法检测丹参不同提取方式、不同灭菌方式以及改变提取液pH值对金黄色葡萄球菌抑菌活性的影响.结果 丹参醇提液对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、铜绿假单胞杆菌、短小芽胞杆菌均有抑菌作用,其95%醇提液对上述菌的MIC分别为20,20,40,80,80 mg/mL,对白色念珠菌无抑菌作用.丹参醇提液对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌抑菌活性较强;不同灭菌方式及改变提取液pH值对金黄色葡萄球菌抑菌活性无差异.结论 丹参提取液具有一定抑菌作用.     

无花果叶提取物的抑菌作用研究

为探讨无花果叶逐级提取物的抑菌作用,实验测定了无花果叶逐级提取物对各实验菌种的抑菌圈及最低抑菌浓度,结果表明各级提取物对实验菌分别有不同程度的抑菌作用,其中对金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的抑菌作用最为明显,各级提取物的抑菌强度依次为:乙酸乙酯萃取物(金黄色葡萄球菌:MIC≤6.25mg/mL,枯草杆菌MIC:≤12.5mg/mL)、正丁醇萃取液(两种菌的抑菌作用:MIC≤25mg/mL)、石油醚萃取液(两种菌的抑菌作用:MIC≤50mg/mL),其中乙酸乙酯萃取物的抑菌活性最强。      

灵芝菌丝体乙酸乙酯提取物的体外抑菌作用

从灵芝发酵菌丝体中制备了乙酸乙酯提取物,实验了其对三种典型细菌生长的抑制作用。结果表明,灵芝菌丝体乙酸乙酯提取物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长有较明显的抑制作用,而对枯草芽孢杆菌的抑制作用很弱。该提取物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为30mg/mL;而对枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度为100mg/mL。此外,该提取物的抑菌成分在40℃和60℃下(处理2h)较稳定,但在80℃以上的温度下,热稳定性较差。      

灵芝菌丝体中灵芝酸的体外抑菌作用

采用杯碟法试验灵芝菌丝体中灵芝酸对革兰阴性菌(大肠杆菌)、革兰阳性菌f金黄色葡萄球菌),以及芽孢杆菌(枯草芽孢杆菌)的体外抑菌作用.结果表明,灵芝酸组分对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长有较明显的抑制作用,而对枯草芽孢杆菌的抑制作用相对较弱;该灵芝酸对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为12.5 mg/mL;而对枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度为50 mg/mL.此外,该灵芝酸的抑菌成分在40℃和60℃下(处理2 h)较稳定,但在80℃和100℃温度下,热稳定性较差.     

响应面法优化灵芝发酵三七渣产灵芝三萜工艺

通过单因素试验和Box-Behnken试验对三七渣固态发酵生产灵芝三萜的发酵条件进行优化。结果表明,各影响因素对于发酵培养物中灵芝三萜含量影响程度的排序为：培养基初始含水量＞酵母粉添加量＞磷酸盐添加量。优化发酵条件为：过60目筛的三七渣,酵母浸出粉添加量2.5%,磷酸二氢钾添加量0.15%,培养基初始含水量65%。在此优化条件下,发酵培养物中灵芝三萜含量为0.37%。     

基于油酸诱导的高产三萜灵芝菌丝体发酵条件优化

本文对油酸促进灵芝菌丝体高产灵芝三萜发酵条件进行了优化,旨在提高灵芝三萜的产量。实验进行了碳源、氮源等单因素的筛选,利用CCD实验设计对培养基进行优化,以及对发酵条件单因素进行了优化。实验结果表明,促进灵芝菌丝体高产灵芝三萜的最优条件为:培养基成分为可溶性淀粉3.4%、鱼蛋白胨0.72%、KH2PO40.3%、Mg SO40.15%、VB10.005%(m/v),p H5.5,在发酵培养第0 d加油酸4.38%(v/v);装液量为100 m L,接种量为10%(v/v),发酵天数为9 d,胞内三萜产量达到(282.67±3.77)mg/100 m L。该方法不仅大幅度提高了三萜产量,对于灵芝的工业化生产也有重要意义。      

高效液相色谱-大气压化学电离质谱法分析赤芝中的三萜类成分

采用反相高效液相色谱-二极管阵列检测器（RP-HPLC-DAD）和大气压化学电离质谱（APCI-MS）联用技术,分析赤芝中含有的三萜类化合物。使用反相C18色谱柱,以乙腈和水（含2%冰醋酸）为流动相梯度洗脱,流速为0.8ml/min,室温下,色谱检测波长253nm;用DAD检测器记录各个色谱峰的紫外吸收光谱,采用APCI-MS进行在线同步分析,记录TIC总离子流色谱图和各个色谱峰的质谱图,通过紫外光谱及质谱分析并与文献对照初步鉴定了赤芝中的32个三萜类成分。     

复合诱变灵芝原生质体选育高产胞外多糖菌株

分别采用紫外线(UV)+甲基磺酸乙酯(EMS)、UV+氯化锂复合诱变灵芝原生质体,对高产胞外多糖的菌株进行了筛选。结果表明:UV+EMS最佳诱变条件为UV照射10s,EMS质量分数为0.06%,胞外多糖产量最高为2.95mg/mL,较原发菌株提高了49.75%;UV+氯化锂最佳诱变条件为UV照射20s,氯化锂质量分数为0.02%,胞外多糖产量最高为3.11mg/mL,较原发菌株提高了57.87%;2种诱变方式中,最佳诱变条件下,UV+氯化锂复合诱变所获得的胞外多糖产量较UV+EMS复合诱变的高5.42%。诱变株FE3第3、5代胞外多糖产量较原发菌株分别提高了40.10%、25.38%,诱变株FL10第3、5代胞外多糖产量较原发菌株分别提高了51.78%、30.96%,都具有较好的遗传稳定性。     

灵芝菌丝体深层发酵工业化生产的研究

目的:采用生物发酵工程技术进行灵芝菌丝体多糖扩大生产;方法:利用农副产品(如玉米粉、豆粕粉)作培养基,在发酵罐中,根据其控制参数(如接种量、总糖量、还原糖、pH值、通风量、罐压、温度、生长因子),进行灵芝菌丝体多糖工业化扩大生产。结果:经过20批容积为10m3,定容为7.5m3发酵罐正常试验,生产周期平均为150h;pH值从6.5降至3.5;放罐后灵芝菌丝体经均质和喷雾干燥后其干粉平均每罐重量为66.1kg,干粉平均收率为8.76kg/m3,干粉中纯多糖含量为68.5g/kg,每罐纯多糖重量为4.225kg。镜检菌丝壁上无明显“芽头与锁状联合”,并有少量菌丝体自溶,无杂菌。结论:试验证明本工艺方案是成功的,是值得推广的新工艺。     

灵芝菌丝体总三萜超声辅助提取工艺优化

以灵芝菌丝体为原料,在单因素试验基础上,通过正交试验和Box-Behnken响应面设计法优化超声辅助提取灵芝菌丝体总三萜工艺。结果表明,超声辅助提取灵芝菌丝体总三萜正交试验最佳工艺为:超声功率90 W、超声时间50 min、pH 8、料液比1∶40(g/mL),在此条件下灵芝菌丝体三萜平均提取率为0.76%;超声辅助提取灵芝菌丝体总三萜响应面试验最佳工艺为:超声功率90 W、超声时间42 min、pH 8、料液比1∶30(g/mL),在此条件下,灵芝菌丝体总三萜平均提取率为1.09%,与最大预测值1.13%相差0.04%。这两种方法得到的提取工艺参数可靠,可为灵芝三萜工业化生产提供技术参考。     

海藻酸钠固定灵芝细胞对胞外三萜类产量的影响

采用海藻酸钠和氯化钙对灵芝细胞进行固定,研究包埋法固定灵芝细胞的工艺条件,探讨固定化工艺对灵芝胞外三萜类产量的影响。结果表明:固定灵芝细胞的最佳工艺条件为:4.5%海藻酸钠、2.2%CaCl2、培养基pH值自然,接种40个固定化小球,28℃、110r/min培养12d,胞外三萜类产量为(49.53±1.37)×10-2mg/mL。固定化灵芝细胞较未固定细胞,具有更好的耐酸、耐碱性,长时间培养仍具有较高的产三萜类能力,回收利用次数可达5次。     

发酵灵芝胞外多糖硫酸化修饰

发酵灵芝胞外多糖表现出微弱的抗肿瘤活性,硫酸化是改善多糖抑癌活性的重要途径,而多糖的硫酸化取代度与其生物活性密切相关。为了了解硫酸化取代度与硫酸化条件之间的关系,以获取不同取代度的产品,对发酵灵芝胞外多糖的硫酸化试剂以及硫酸化反应条件与取代度之间的关系进行了较深入研究。实验结果表明,氨基磺酸比氯磺酸的硫酸化过程更加缓和,尿素的加入也有利于缓和反应条件,提高取代度。     

部分稀土元素对灵芝多糖和三萜类物质液体发酵的影响

研究5种稀土元素(镧(La)、铈(Ce)、钕(Nd)、镨(Pr)、铒(Er))对灵芝液体发酵生产灵芝多糖产量和灵芝三萜类物质的影响。结果表明：不同的稀土元素在适宜浓度时对灵芝多糖和灵芝三萜的产量均具有一定程度的促进作用。其中稀土元素镨对灵芝胞内多糖、胞外多糖和胞内三萜的生产促进作用最明显,分别在浓度为0.01、0.001mmol/L和0.1mmol/L时,使三者产量分别达到最高的772.56、452.76mg/L和398.49mg/L,分别是对照的4.67、3.05和1.91倍;而对于胞外三萜,0.001mmol/L的镧诱导效果最好,其产量达到610.08mg/L,是对照的2.03倍。可见适宜的稀土元素及浓度可显著提高灵芝多糖和灵芝三萜的生产。     

CO2超临界萃取深层发酵灵芝真菌菌丝体中麦角固醇的研究

采用CO2超临界萃取深层发酵灵芝真菌菌丝体中麦角固醇的含量,在单因素实验基础上,L9(34)正交实验优化萃取条件,结果表明,萃取压力、萃取温度的作用效果显著,CO2流量影响不显著,三因素的适宜组合为：A2B3C3即：萃取压力20 MPa、萃取温度50 ℃、CO2流量2.5 L/min,试验验证此组合条件下麦角固醇的萃取量为1.1362 mg/g,高于正交试验组合。