乳清蛋白抗氧化肽的制备及体外抗氧化活性研究

采用酶解法制备乳清蛋白抗氧化肽并研究其体外抗氧化活性。结果表明:以羟自由基清除率和多肽含量为指标,筛选出中性蛋白酶为最优酶;在单因素试验的基础上,通过响应面试验确定最佳酶解条件为pH 5. 50、酶解温度65℃、酶解时间1. 65 h、底物质量分数5%、加酶量5 000 U/g,此条件下乳清蛋白抗氧化肽对羟自由基清除率为74. 54%;乳清蛋白抗氧化肽对羟自由基、ABTS+自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基都具有较好的清除能力,IC50值分别为2. 174、0. 709、2. 813mg/m L和4. 579 mg/m L。表明乳清蛋白抗氧化肽具有较强的体外抗氧化活性,具有一定的开发利用价值。     

茶渣蛋白抗氧化肽制备及其活性研究

以茶渣蛋白为原料,采用酶解法制备茶渣蛋白抗氧化肽。分别以抗氧化肽的还原力和水解度为考察指标,通过单因素实验和响应面优化酶解法制备茶渣蛋白抗氧化肽的制备工艺,采用超滤法对酶解液进行初步分离纯化,并考察了温度、酸碱度、金属离子、食品添加剂以及体外消化环境对分子量小于3 kDa的茶渣蛋白抗氧化肽的还原力稳定性的影响。结果表明,酶解法制备茶渣蛋白抗氧化肽的最优工艺条件为底物浓度2%、酶解时间3 h、温度51 ℃、pH8.0、加酶量3034 U/g,在此条件下,茶渣抗氧化肽的还原力为0.316;当分子量小于3 kDa时,抗氧化肽的还原力为0.412,比纯化前提高了30.77%。温度从30 ℃升温至90 ℃,还原力从0.410降低至0.360;在酸碱及食品添加剂环境中仍能保持较好的还原力;在模拟消化环境中8 h后,还原力从0.412降为0.327。     

超声波预处理对鹰嘴豆蛋白制备抗氧化肽的影响

采用超声波对鹰嘴豆蛋白进行预处理,研究超声波参数对鹰嘴豆蛋白抗氧化肽活性的影响规律。以还原力、·OH清除率和水解度为指标,设计Box-Behnken试验,考察超声波功率、超声时间、超声温度对鹰嘴豆蛋白酶解产物水解度及抗氧化活性的影响。结果表明,超声波预处理优化工艺参数为超声波功率750W,超声时间28min,超声温度48℃;鹰嘴豆酶解产物的·OH清除率、还原力、水解度分别为95.97%、1.73、25.04%,与理论预测值95.20%、1.75、25.41%误差均在±1%以内,表明采用响应面方法(RSM)优化的工艺条件参数准确、可靠,所建立的预测模型在实践中可行。与未经超声波预处理的比较,·OH的半清除质量浓度IC50值从10.58g/L降到8.81g/L;当多肽质量浓度为12g/L时,还原力从1.46增加到2.16;水解度从20.03%增加到25.04%。超声波预处理能提高鹰嘴豆蛋白的酶解效率和抗氧化活性。     

长白山松子抗氧化肽制备及活性研究

以长白山松子分离蛋白为原料,采用碱性蛋白酶制备抗氧化肽,通过Box-Behnken中心组合试验确定最佳水解工艺条件为:酶解温度56.5℃、加酶量7822U/g、底物质量浓度0.021g/mL、pH9.0、酶解时间240min。对该条件制备的抗氧化肽进行活性研究,结果显示随着浓度的升高,松子抗氧化肽在4mg/mL时对ABTS自由基的清除率和Fe2+螯合率达到100%,16mg/mL时对DPPH自由基清除率达到80.95%,24mg/mL时,对羟基自由基清除率达到100%。     

绿豆抗氧化肽的酶法制备及其抗氧化活性

为提高绿豆淀粉生产过程中产生的废弃物绿豆蛋白的资源利用率,研究了酶法制备绿豆抗氧化肽的最佳条件,并探究其抗氧化活性。通过选用不同蛋白酶及其复合酶,对绿豆蛋白进行水解,综合考虑反应时间、加酶量等因素,对酶解反应进行优化。通过体外抗氧化实验对水解制得的多肽溶液进行抗氧化能力检测,最终确立了最佳的反应条件,具体如下：选用中性蛋白酶进行酶解,底物质量分数3%,酶解时间3 h,加酶量质量分数2%,pH 7,温度50 ℃。按照该条件所制得的绿豆多肽溶液,质量浓度为5 mg/mL时,DPPH自由基清除率可达（91.58±2.44）%,同时还具有较强的还原能力。经凝胶层析柱分离纯化后得到5个分离组分,其中小分子肽段组分5的抗氧化能力最强,高于其他大分子肽段以及未分离多肽。     

大米蛋白的提取及抗氧化肽的制备工艺

本文以DPPH清除率为指标,研究不同蛋白酶、酶解温度、酶解时间和加酶量等因素对大米蛋白酶解产物的抗氧化活性影响,并采用L9(34)正交试验优化其酶解工艺。研究结果表明:中性蛋白酶是制备大米蛋白抗氧化肽的最佳水解用酶,其最佳酶解工艺为:酶解时间20 min,酶解温度50℃,加酶量4000 U/g。在此条件下,大米蛋白酶解产物的DPPH自由基清除率可达80.17%。     

核桃蛋白肽的抗氧化活性研究

以VC为对照,研究了分子质量小于3000u的核桃蛋白肽混合物的还原能力、羟自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力以及二苯代苦味酰基自由基清除能力。结果显示,随着核桃蛋白肽浓度的增加,其还原能力、羟自由基的清除能力和超氧阴离子清除能力增大,在浓度为30mg/mL时,核桃蛋白肽还原能力达到VC的57.1%;在浓度为50mg/mL时,核桃蛋白肽对羟自由基(OH.)的清除率分别69.1%,对超氧阴离子自由基的清除率达到了85%。而对二苯代苦味酰基自由基清除能力则是先增大后变小,在20mg/mL时达到最大值66%。核桃蛋白肽的分子质量分布主要有2大区域,蛋白肽氨基酸含量达到89.74%。     

长白山榛子抗氧化肽制备及其活性研究

以长白山榛子分离蛋白为原料,采用碱性蛋白酶制备抗氧化肽,通过Box-Behnken中心组合试验确定最佳水解工艺条件为:酶解温度50℃、加酶量8 000 U/g、底物浓度5.0%、pH9.5。对该条件制备的抗氧化肽进行活性研究,结果显示随着浓度的升高,榛子抗氧化肽在4 mg/mL时对ABTS自由基和DPPH清除率均达到100%,8 mg/mL时对·OH清除率和总还原能力分别达到85.46%和0.859,12 mg/mL时,对Fe~(2+)螯合率达到99.3%。     

黑曲霉固态发酵制备花生蛋白肽及抗氧化活性研究

研究黑曲霉固态发酵制备花生蛋白肽,为进一步研究发酵花生粕的深加工产品提供理论基础。运用单因素和正交试验方法对固态发酵制备花生蛋白肽工艺条件进行优化,其最佳制备工艺条件为:营养盐溶液添加量15 mL,黑曲霉液添加量1 mL,30℃下发酵36 h。此工艺下制备的花生蛋白肽的可溶性氮浓度达到38.74 mg/mL,发酵液对1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)自由基清除率为81.22%,羟自由基清除率为84.88%。分子量小于5 ku的花生蛋白肽具有较高的抗氧化活性。     

酶解酸枣仁蛋白制备抗氧化肽的研究

为优化Alcalase蛋白酶酶解酸枣仁蛋白制备抗氧化肽的工艺条件,以DPPH自由基清除率作为指标,通过单因素试验考察酶解温度、底物浓度、酶与底物浓度比（[E]/[S]）、酶解pH和时间对DPPH自由基清除率的影响,在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken设计,建立并分析各因素与清除率之间关系的数学模型;并对酸枣仁蛋白酶解产物的氨基酸组成及含量进行分析。结果表明:酶解酸枣仁蛋白制备抗氧化肽的最佳工艺条件为酶解温度51.2℃、酶解pH8.1、底物浓度4.7%,在此条件下DPPH自由基清除率的最大理论值为91.59%,该回归模型具有较好的预测性能,可用于指导生产实践。酸枣仁蛋白酶解产物共含有17种氨基酸,富含脯氨酸、甘氨酸和谷氨酸。      

酶解酸枣仁蛋白制备抗氧化肽的研究

为优化Alcalase蛋白酶酶解酸枣仁蛋白制备抗氧化肽的工艺条件,以DPPH自由基清除率作为指标,通过单因素试验考察酶解温度、底物浓度、酶与底物浓度比([E]/[S])、酶解pH和时间对DPPH自由基清除率的影响,在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken设计,建立并分析各因素与清除率之间关系的数学模型;并对酸枣仁蛋白酶解产物的氨基酸组成及含量进行分析。结果表明:酶解酸枣仁蛋白制备抗氧化肽的最佳工艺条件为酶解温度51.2℃、酶解pH8.1、底物浓度4.7%,在此条件下DPPH自由基清除率的最大理论值为91.59%,该回归模型具有较好的预测性能,可用于指导生产实践。酸枣仁蛋白酶解产物共含有17种氨基酸,富含脯氨酸、甘氨酸和谷氨酸。     

鲍鱼内脏蛋白肽的理化性质及其抗氧化活性

对鲍鱼内脏蛋白肽（AVP）的基本成分、分子质量分布和氨基酸组成等理化性质和体外抗氧化活性进行探究。以正常组、模型组和GSH组作为对照,考察低、中、高剂量组（125,250和500 mg/kg AVP） 对D-半乳糖致氧化损伤小鼠的影响,评价AVP的体内抗氧化活性。结果显示：AVP 除含主成分蛋白外,还含有5.11%多糖和少量的矿物质元素,分子质量主要分布在180～500 u范围。AVP中疏水性氨基酸和支链氨基酸分别占结构氨基酸的49.77%和22.92%,清除羟自由基和DPPH自由基活性的EC50值分别为1.54 mg/mL和1.51 mg/mL。AVP抑制脂质过氧化的效果优于维生素C。AVP能提高D-半乳糖致衰老鼠中血清和肝脏的SOD活性,降低血清的MDA含量,减缓肝脏组织氧化损伤。以上结果表明利用鲍鱼内脏制备的AVP具有良好的抗氧化活性,可作为天然抗氧化剂应用在生物制品和食品工业。     

超声辅助酶解海带蛋白制备抗氧化肽及其活性研究

海带是一种食药两用的海生褐藻植物,营养丰富,其蛋白质含量高、氨基酸种类齐全、比例适当,是酶法制备生物活性肽的理想蛋白原料。实验以海带蛋白为原料,以DPPH自由基清除率为评价指标,采用单因素试验和响应面试验优化超声辅助酶解海带蛋白制备抗氧化肽工艺,探讨酶种类,超声时间、酶底比、酶解温度、pH和超声功率对制备抗氧化肽的影响,并采用Box-Behnken试验设计的响应面（response surface methodology,RSM）分析方法优化工艺。结果表明,中性蛋白酶为最佳酶,酶解海带蛋白制备抗氧化肽的最佳工艺条件为酶底比2.3%、超声时间91min、超声功率240、酶解温度44℃,所得的DPPH自由基清除率为84.25%。对所得抗氧化肽DPPH自由基清除率、ABTS+自由基清除率、还原能力、羟基自由基清除率测定,结果表明其具有较好的抗氧化活性。本实验为酶解海带蛋白制备抗氧化肽工艺优化及海带蛋白抗氧化肽在抗氧化保健食品中的开发应用提供了依据。     

大米蛋白抗氧化肽的活性以及组成鉴定研究

采用碱性蛋白酶酶解大米蛋白制备大米蛋白抗氧化肽。研究表明大米蛋白酶解产物具有螯合金属铁离子、清除H2O2、羟自由基、DPPH自由基、抑制亚油酸自然氧化的作用。通过应用高解析离子淌度质谱（HD-MS）分析鉴定米蛋白抗氧化肽的序列主要为Met-Pro-Pro-Ser-Ser-Pro-His（376.68u）,Leu-Ala-Gly-Pro-Lys-Phe-Ala-Leu（408.75u）和Met-Pro-Arg-His-Asp-Pro-Gln（440.70u）。      

核桃清蛋白抗氧化肽的制备及其活性研究

以核桃清蛋白为原料,用碱性蛋白酶进行酶解制备抗氧化肽,通过单因素与响应面试验,分析确定制备核桃清蛋白抗氧化肽的最佳工艺条件为:pH9.5,温度45℃,底物浓度4%,加酶量8 000 U/g,酶解时间2.5 h。对最优条件下制备的抗氧化肽进行活性研究,测定其Fe~(2+)螯合能力及对羟基自由基、DPPH·、ABTS~+·3种自由基的清除能力,结果表明核桃清蛋白抗氧化肽对几种自由基均有显著的清除作用和金属离子螯合能力,是一种活性的的天然抗氧化剂。     

棉籽肽的制备工艺、抗氧化活性及部分特性研究

以水解度(DH)及DPPH·清除率为考察指标,利用单因素实验和正交实验探讨碱性蛋白酶酶解棉籽蛋白制备棉籽肽的最佳工艺条件。以VC为对照研究了棉籽肽的总还原力、对·OH及O-2·的清除作用及部分特性。结果表明,棉籽肽的最佳制备条件为:反应时间180 min,p H 9.5,温度55℃,底物质量浓度3.00 mg/m L,碱性蛋白酶加酶量50 U/m L。在最佳条件下,棉籽肽的DPPH·清除率为63.42%,DH为85.90%。棉籽肽的·OH及O-2·清除率均随其质量浓度增大而增强,半数抑制浓度(IC50)分别为0.044 mg/m L和0.046 mg/m L,且均强于VC。棉籽肽总还原力与其质量浓度呈剂量依赖关系,稍弱于VC。棉籽肽等电点约为p H 2,不同p H下,棉籽肽的·OH清除率均在60 min时达到最大,但在不同温度下,棉籽肽·OH清除率随时间变化不大,60℃时达到最大值。     

米蛋白短肽抗氧化活性研究

以米渣为原料,通过蛋白酶酶解,并进行膜分离,得到米蛋白短肽。通过对样品蛋白分子量及短肽含量测定可知:米蛋白短肽分子量大部分集中在1 ku下,短肽含量为77.87%;并对米蛋白短肽抗氧化活性测定,结果显示:样品对样品对DPPH.、.O2-及.OH 3种自由基均具有一定清除能力,当米蛋白短肽浓度为10 mg/mL时,清除率分别为62.36%、82.07%、35.41%。     

复合风味蛋白酶酶解麦麸蛋白制备麦麸抗氧化肽的研究

以麦麸蛋白为原料,复合风味蛋白酶为水解酶,探讨麦麸蛋白水解度(DH)与麦麸肽抗氧化能力的关系,并以超氧阴离子自由基(O2-·)清除率为指标,采用正交试验设计优化制备麦麸抗氧化肽的工艺条件.试验结果表明,制备麦麸抗氧化肽的最佳酶解条件为pH 5.0,加酶量为6000U/g麦麸蛋白,底物浓度5%,温度55℃,酶解7.5h,在该条件下制得的麦麸抗氧化肽清除超氧阴离子自由基的清除率可达53.70%.     

蚕蛹蛋白酶解制备抗氧化肽的初步研究

将蚕蛹通过粉碎和丙酮脱脂后,得到蚕蛹蛋白粉.用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶酶解蚕蛹蛋白粉,以DPPH清除能力为指标对酶解过程进行分析,结果表明胃蛋白酶对蚕蛹蛋白有较好的酶解效果.然后通过正交优化胃蛋白酶的酶解条件,并研究水解产物多肽的体外抗氧化活性.     

鲁梅克斯叶蛋白的抗氧化肽活性及功能性质研究

本文旨在探究鲁梅克斯叶蛋白酶解物的抗氧化性能和叶蛋白的功能性质,为鲁梅克斯叶蛋白的应用和推广辅以理论依据。研究选用碱热法获取的叶蛋白粉,分别采用胰蛋白酶和胃蛋白酶水解,对其酶解物进行自由基的清除能力和对金属离子的螯合能力评价;另外,本研究中还探讨了不同的温度、p H、Na Cl浓度对鲁梅克斯叶蛋白溶解性、持水性、持油性、发泡性及乳化性的影响。结果表明,在肽浓度分别为0.5、1、8、0.2 mg/m L时,胰蛋白酶酶解肽的还原力、对DPPH·的抑制率、对·OH的清除率和对Fe2+的螯合能力显著高于胃蛋白酶酶解肽（p<0.05）;而当肽浓度为80 mg/m L时,胃蛋白酶酶解肽对O-2·的抑制率则显著高于胰蛋白酶酶解肽（p<0.05）。二者在对自由基种类和清除效果上出现的差异,可能与酶解所得肽段中疏水性氨基酸的种类和数量有关。叶蛋白的功能性质研究表明,鲁梅克斯叶蛋白具有较高的持水性（均大于4 g/g）和发泡性（最高可达45%）,二者受温度、p H和Na Cl浓度的影响较小;而溶解性、持油性和乳化性受温度、p H和Na Cl浓度影响,表现出规律性差异,存在一定幅度上的波动。