双歧杆菌耐氧菌株的筛选及应用

从婴儿粪便中分离出一株厌氧性无芽孢杆菌，经属和种的鉴定，为长双歧杆菌。经长期耐氧驯化，此菌由厌氧生长驯化成有氧生长良好的菌种，与乳酸菌混合发酵后，可制成口感细腻、气味醇和、酸甜适口，有很好的营养保健功能的双歧杆菌酸奶。     

青春双歧杆菌的耐氧驯化及不同低聚糖对其增殖效果的影响

为改善青春双歧杆菌在发酵产品中活菌数低、菌种功效弱的情况,对厌氧青春双歧杆菌进行耐氧驯化,采用无氧有氧交替驯化法,在驯化过程中逐渐增加青春双歧杆菌培养液的氧分压,测定青春双歧杆菌驯化前后生理特性,并对比大豆低聚糖、低聚木糖、低聚麦芽糖对青春双歧杆菌增殖的影响。结果表明,青春双歧杆菌在耐氧驯化后对氧气的敏感程度下降,有氧条件下生长能力达标,产酸能力得到提升,菌体驯化前后形态基本一致,耐氧青春双歧杆菌代谢产生的乙酸与乳酸比值较厌氧青春双歧杆菌更适宜发酵,在3种低聚糖中,低聚木糖对青春双歧杆菌增殖作用明显,可作为青春双歧杆菌良好的双歧因子。耐氧驯化后的青春双歧杆菌有着优良的生理特性,能够作为潜在的益生菌菌种深入研究其功能并可应用于发酵食品中。     

婴儿双歧杆菌的耐氧驯化及应用特性研究

研究婴儿双歧杆菌的生长促进剂,并对活化菌种进行耐氧驯化培养,探讨婴儿双歧杆菌在搅拌花生酸奶加工中的应用。结果表明:酵母浸出液对婴儿双歧杆菌活化影响最大,酪蛋白胨次之,磷酸氢二钾最小,三者最佳水平组合:酵母浸出液0.4%,酪蛋白胨0.2%,磷酸氢二钾0.1%。菌种被连续活化三代后凝乳时间稳定至3.5h。通过对4种因素婴儿双歧杆菌生长的影响研究发现:鲜牛奶与花生乳配比的影响最大,其次是蔗糖,再次是接种量,最后是葡萄糖。当鲜牛奶与花生乳配比1∶1,蔗糖6%,葡萄糖2%,接种量5%,婴儿双歧杆菌达到最佳生长状态,活菌数达到2.5×109 CFU/mL。     

两歧双歧杆菌耐氧耐酸优良菌株的选育

两歧双歧杆菌通过逐渐增加培养基中氧气分压的方法进行多次耐氧驯化,每次耐氧驯化后进行挑选耐氧的两歧双歧杆菌单菌落,然后将经过耐氧驯化的两歧双歧杆菌菌株再通过降低培养基pH值的方法来进行多次耐酸驯化,每次耐酸驯化后进行挑选两歧双歧杆菌单菌落,以确定所获得的两歧双歧杆菌为纯的耐酸菌株.最终得到了1株对氧和酸的耐受能力有较大提高的两歧双歧杆菌菌株,且耐氧耐酸驯化后的菌株没有发生变异.这有利于两歧双歧杆菌产品的开发和保持两歧双岐杆菌制品有较高的活菌量,具有较好的实际应用价值.     

双歧杆菌厌氧培养及耐氧驯化的研究

用４种不同驱氧方式的缸内厌氧法培养双歧杆菌，比较其厌氧培养效果。对厌氧的双歧杆菌进行耐氧驯化，耐氧化明显提高，经生理鉴定证明，驯化后的菌株与未经驯化的菌株相比，生理学特性没有发生变化。     

双歧杆菌的耐氧驯化

本文介绍了通过逐步增加长双歧杆菌(HJ9211)培养环境中的氧分压,将双歧杆菌驯化成兼性厌氧菌体的方法。双歧杆菌的生长促进因子(大豆低聚糖、乳酮糖、维生素C)对驯化前后菌体的生长促进作用和最佳使用浓度不变。驯化菌株的耐氧件由专性厌氧变为兼性厌氧,耐酸性由初始酸度pH 5.5时不生长变为pH 4.5时生长受抑制。双歧杆菌的培养条件得到简化,保藏中的存活性也明显得到提高。     

母乳源长双歧杆菌的筛选鉴定及耐氧驯化

目的：从母乳中筛选双歧杆菌，并提高双歧杆菌在有氧条件下的耐受性。方法：采用稀释涂布法结合16S rDNA鉴定法从母乳中筛选出双歧杆菌，并采用逐渐增加氧分压和有氧厌氧交替的方法进行驯化。结果：筛选得一株MEFZ-2201菌株，通过16S rDNA测序比对，其与长双歧杆菌模式菌（NCBI登录号：ON631733.1）的同源性达到了100%，鉴定为长双歧杆菌（Bifidobacterium longum）。将长双歧杆菌MEFZ-2201进行驯化后，其有氧培养最高的活菌数为8.9×10⁹ CFU/mL，比未经驯化的菌株活菌数提高了一个数量级；此外，驯化前后菌株的生理生化及形态特征并未发生变异；在短链脂肪酸的产生量上，驯化后菌株在厌氧条件下产酸量也显著高于驯化前的菌株。结论：驯化后的长双歧杆菌MEFZ-2201在有氧条件下的活菌数明显提高，有望成为潜在的益生菌菌株进一步开发利用。     

双歧杆菌的功能性和免疫原性及其应用研究

主要探讨了双歧杆菌对人体具有生物屏障和拮抗作用，维持肠道内的微生物态平衡，防止便秘，防癌，改善代谢，提供营养，改善肝功能，提高人体免疫功能，改进乳制品的耐乳糖性，降低胆固醇，防止心血管疾病等生理功能及其保健机理；并通过微生物态描述了双歧杆菌的免疫原性；双歧杆菌不同的培养和驯化方法；双歧杆菌产品的种类和应用研究；最后对双歧杆菌的研究前景作了展望。     

双歧杆菌的分离鉴定与耐氧驯化

本研究从鸡盲肠内容物中分离出单菌落,经菌落菌体形态观察和生理生化鉴定为双歧杆菌.采用逐级增加氧气含量的方法对筛选出的双歧杆菌进行耐氧驯化,以改善双歧杆菌时氧气的耐受力,经过多次驯化,优选出对氧气有一定耐受力、凝乳能力较好,且在贮藏过程中活菌数能够达到保健功能要求的菌株B05.经二次鉴定该菌株保持了双歧杆菌的形态和生理特征.     

两歧双歧杆菌耐氧耐酸耐胆盐优良菌株的选育

通过反复驯化的培养方法将两歧双歧杆菌驯化成耐氧耐酸耐胆盐的优良菌株。实验结果表明，在牛乳培养基中耐氧驯化后的双歧杆菌的增殖比例为41000％，而原始菌的增殖比例仅为8233％，且前者的凝乳时间为后者的2／3；经过耐酸驯化的菌株在低pH值条件下的产酸性能也大为提高，且耐酸性明显优于未经驯化的菌株；胆盐驯化的菌株经胆盐浓度为0．5％的培养后也有较高的活菌数，其对胆盐的忍耐力明显增强。     

乳双歧杆菌Probio-M8氧气耐受性驯化研究

氧气对双歧杆菌具有毒性作用,导致菌体活力受损,限制其生产及应用。为提高双歧杆菌对氧气的耐受性,采用改变培养基中氧分压的方法对乳双歧杆菌Probio-M8进行氧气耐受性驯化。通过测定生理特性、氧气耐受性相关NADH氧化酶活性及细胞膜流动性变化,评价氧气对乳双歧杆菌Probio-M8的影响。结果表明：氧气耐受性驯化后1 000代菌株与原始菌株相比在有氧及厌氧环境中,pH值显著下降0.23和0.27（P＜0.05）,产酸能力明显提升;RBGR值、NADH氧化酶活性显著上升0.47和31.14 U（P＜0.05）,氧气耐受性明显增强;不饱和脂肪酸含量显著上升17.26%（P＜0.05）,细胞膜流动性增强。氧气耐受性驯化后乳双歧杆菌Probio-M8的氧气耐受性明显增强,为其在食品中应用及开发提供借鉴。     

双歧杆菌在大豆酸乳中的应用研究

对双歧杆菌菌种发酵大豆酸乳的可行性进行了研究,并对开发大豆酸乳的生产工艺及各种主要影响因素作了进一步探讨。实验结果证明：只要做好菌种的驯化工作和选择合适的工艺技术参数,利用两歧双歧杆菌发酵大豆酸乳是完全可行的。     

长双歧杆菌多因素连续驯化的研究

双歧杆菌因对外界环境的耐受性较差,限制了其规模化生产和实际应用。通过对长双歧杆菌进行连续的耐氧、耐酸以及耐胆盐的驯化,使长双歧杆菌对氧、酸以及胆盐的耐受性有了一定的提高,活菌数和产酸性能都有所提高。耐氧驯化时,通过逐渐增加培养基中的氧分压的方法进行;耐酸驯化时,通过逐渐降低培养基的初始pH的方法进行;耐胆盐驯化时,通过逐渐增加培养基初始胆盐含量的方法进行。实验结果表明,耐氧耐酸驯化后的菌株活菌数能达到9.4×108 cfu/mL,为初始菌的1.92倍;耐胆盐驯化后的菌株在胆盐浓度为0.3%时培养也能保持一定的活菌数,而初始菌株不能存活。     

双歧杆菌体外增殖培养的初步研究

本文主要研究了婴儿双歧杆菌的厌氧培养方法、碳源、氮源以及一些生物材料提取物对婴儿双歧杆菌体外增殖的影响。实验结果，盐水瓶培养法是婴儿双歧杆菌厌氧培养的最好方法；乳糖、大豆蛋白胨分别是婴儿双歧杆菌生长适宜的碳源和氮源；玉米、羊栖菜和马尾藻提取液能显著促进婴儿双歧杆菌生长；羊栖菜提取液分别与玉米提取液、酵母膏配合能进一步促进婴儿双歧杆菌的生长。     

青春双歧杆菌耐氧驯化及培养条件的响应面法优化

对一株青春双歧杆菌进行耐氧驯化,通过有氧、无氧交替驯化法对出发菌株进行耐氧驯化,得到耐氧能力较强的青春双歧杆菌菌株,在有氧静止培养条件下活菌数可达到4.31×1011cfu/mL。对该耐氧菌株通过响应面法进行培养条件优化,确定培养耐氧青春双歧杆菌的最佳条件:接种量5%,玉米糖化液浓度12.1°Bx,初始pH6.48,培养温度37℃,发酵时间24h。在此条件下菌液最大OD值为1.819,此条件下培养的活菌数为3.05×1012cfu/mL。     

动物双歧杆菌乳亚种BZ11的耐氧驯化及降胆固醇性能的研究

为了提高动物双歧杆菌乳亚种BZ11对有氧环境的耐受性,采用逐渐增加培养基中的氧分压和有氧、厌氧条件下交替培养两种方案对其进行了耐氧驯化。通过对驯化前后菌株的生长特性进行分析得出逐渐增加培养基中的氧分压的驯化方案取得了更好的效果。经最优方案驯化后的菌株在有氧条件下培养20 h后,活菌数可达到6.30×10~8CFU/m L,是初始菌株的2.24倍。驯化后菌株的降胆固醇率为27.31%±0.80%,与初始菌株相比没有显著性差异(P0.05)。通过鉴定得出,动物双歧杆菌乳亚种BZ11在耐氧驯化前后保持了相似的形态及生理生化特征。因此,驯化后的菌株有望作为1株潜在益生菌被开发利用。     

双歧杆菌体外增殖培养的初步研究

本文主要研究了婴儿双歧杆菌的厌氧培养方法、碳源、氮源以及一些生物材料提取物对婴儿双歧杆菌体外增殖的影响.实验结果,盐水瓶培养法是婴儿双歧杆菌厌氧培养的最好方法;乳糖、大豆蛋白胨分别是婴儿双歧杆菌生长适宜的碳源和氮源;玉米、羊栖菜和马尾藻提取液能显著促进婴儿双歧杆菌生长;羊栖菜提取液分别与玉米提取液、酵母膏配合能进一步促进婴儿双歧杆菌的生长.     

耐氧性双歧杆菌的驯化及其培养条件的研究

通过对一株青春双歧杆菌的耐氧驯化,获得了具一定耐氧能力的双歧杆菌ad,该菌株可在含有一定空气容积的密闭容器中良好生长。并探讨了以大豆为主要原料发酵培养青春双歧杆菌ad的工艺条件,其最佳培养基配方为:豆浆浓度3BX,葡萄糖1%,自制乳肽0.5%,番茄汁2.5%,胡萝卜汁2.5%;pH7.0;接种量2%;培养温度37℃;厌氧培养24～48h。发酵液活菌数可达6.9×109cfu/mL。青春双歧杆菌ad发酵液原液直接冷冻干燥,无须添加其他保护剂;双歧杆菌ad冻干前增加温度前处理环节,可提高菌体成活率;双歧杆菌ad含水冻干粉活菌数达1.0×1010cfu/g;绝干样品活菌数达1.1×1010cfu/g。     

两歧双歧杆菌耐氧耐酸耐胆盐优良菌株的选育

本实验通过反复驯化的培养方法将两歧双歧杆菌驯化成耐氧耐酸耐胆盐的优良菌株。在耐氧驯化时,通过增加培养基中的氧气分压的方法进行驯化;在耐酸驯化的过程中,通过降低培养基的初始pH值的方法进行。实验结果表明,在牛乳培养基中耐氧驯化后的双歧杆菌的增殖比例为42000%,而原始菌的增殖比例仅为8333%,且前者的凝乳时间较后者短,为后者的2/3;再经过耐酸驯化的菌株在低pH值条件下的产酸性能也大为提高,且耐酸性明显优于未经驯化的菌株;最后再经过胆盐驯化的菌株在胆盐浓度为0.5%时培养后也有较高的活菌数,说明其对胆盐的忍耐力明显增强。     

双歧杆菌对仔猪小肠黏液糖蛋白的粘附研究

通过扫描电镜观察细菌在仔猪肠黏膜的粘附状况，发现肠道茵群与黏膜表面的黏液层有密切联系。采用放射性代谢标记方法研究所拥有的双歧杆菌与仔猪肠黏膜黏液糖蛋白的粘附，发现青春双歧杆菌的粘附能力最强，为44．61%；其次是短双歧杆菌，为33．20％；婴儿双歧杆菌和长双歧杆菌分别是18．40％和11．78％。结果表明，所实验的糖、初乳粉以及婴儿双歧杆菌、长双歧杆菌、大肠杆菌和沙门氏茵上清均能导致青春双歧杆菌粘附下降，而青春双歧杆菌和短双歧杆菌上清却有促进其粘附的作用。