六神丸对肺癌A549细胞Caspase-3及Survivin表达的影响

目的:探讨六神丸对肺癌A549细胞凋亡的影响及其机制。方法:制备六神丸含药血清,体外培养肺癌A549细胞,分组干预,运用免疫组织化学法检测Caspase-3的表达、RT-PCR法检测Survivin的表达。结果:六神丸具有诱导肺癌A549细胞凋亡的作用,与顺铂联合应用产生协同作用,其机理与上调Caspase-3的表达和下调Survivin的表达有关。结论:六神丸可通过诱导肿瘤细胞凋亡发挥抗肿瘤作用。     

猫人参含药血清对胃癌细胞SGC7901增殖和自噬的影响

目的:观察猫人参对胃癌细胞SGC7901的增殖抑制作用及对自噬的影响。方法:体外培养胃癌SGC7901细胞,用不同体积分数的猫人参含药血清处理后,采用CCK-8法检测细胞增殖率,Western blot检测自噬相关蛋白LC3B、p62及mTOR表达水平。结果:猫人参含药血清作用24 h,对胃癌SGC7901细胞有明显的抑制作用,与空白血清组比较,猫人参含药血清组体积分数为0. 156 25%时,差异有统计学意义(P <0. 05),且随着体积分数的增大,抑制作用增强,呈剂量依赖性;作用48 h,与空白血清组比较,猫人参含药血清在体积分数<2. 5%时对胃癌SGC7901细胞有稍微促进增殖作用,在体积分数≥5%时有抑制增殖作用,体积分数≥10%时,差异开始有统计学意义(P <0. 05)。Western blot结果显示:与空白血清组比较,猫人参含药血清能促进胃癌SGC7901细胞LC3B蛋白表达,抑制p62、mTOR蛋白表达(P <0. 05)。结论:猫人参含药血清能抑制胃癌细胞SGC7901的增殖,其作用机制可能与猫人参能调节LC3B、p62、mTOR蛋白的表达,影响自噬相关。     

扶正解毒方对肺腺癌A549细胞生长及凋亡的影响

目的:探讨扶正解毒方对肺腺癌A549细胞生长及凋亡的作用。方法:将10只大耳白兔随机分为扶正解毒方高剂量组、中剂量组、低剂量组,对照组,环磷酰胺(CTX)组5组,每组各2只。扶正解毒方高剂量组、中剂量组、低剂量组分别按16 g·kg-1、8 g·kg-1、4 g·kg-1剂量口服灌胃;对照组给予相同剂量生理盐水,每日1次,连灌1周;环磷酰胺(CTX)组第1天予20 mg·kg-1腹腔注射。末次用药后1 h,各组均在无菌条件下心脏采血,分离血清。采用血清药理学方法,对A549细胞株进行体外培养,然后分别加入扶正解毒方高剂量、中剂量、低剂量含药血清、对照组含药血清、CTX含药血清,通过光学显微镜直观法、细胞计数法、MTT法、流式细胞仪法等对A549细胞生长及凋亡指标进行测定。结果:A549细胞在显微镜下呈现典型的凋亡形态学改变;细胞生长曲线提示,扶正解毒方对A549细胞的抑制作用呈明显时效和量效关系;MMT法提示,扶正解毒方对A549细胞生长的抑制率随浓度的增加而增加,呈效应-剂量依赖关系;流式细胞仪检测显示,细胞凋亡率随着药物剂量的增加和作用时间的延长而增加,药物作用72 h后,扶正解毒方低剂量组、中剂量组、高剂量组凋亡率分别为(6.30±1.01)%、(15.72±1.54)%、(23.40±1.34)%,与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:扶正解毒方可抑制肺腺癌A549细胞生长、诱导细胞凋亡。     

硝酸镓对卵巢癌细胞蛋白表达的影响

目的:通过硝酸镓对卵巢癌HO-8910细胞作用,分析诱导凋亡中对Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达的情况。方法:通过对卵巢癌HO-8910细胞培养及干预,Western印迹检测Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达。结果:硝酸镓组、顺铂组及联合治疗组HO-8910细胞Bcl-2的水平明显低于空白对照组,硝酸镓组、联合治疗组Bax、Caspase-3的水平明显高于空白对照组,比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:硝酸镓对卵巢癌细胞的作用,可能与Bcl-2的表达水平下调,Bax、Caspase上调有关。     

牦牛Caspase-3克隆、序列分析与组织表达研究

半胱天冬酶3(Aspartate-specific cysteinyl proteinase 3,Caspase-3)是哺乳动物最重要的细胞凋亡执行者,为探究Caspase-3基因在牦牛繁殖活动中的调控作用奠定基础,试验对牦牛Caspase-3编码区进行克隆和生物信息学分析,并比较牦牛和黄牛下丘脑、垂体、卵巢、输卵管及子宫等组织的表达差异.结果表明:牦牛Caspase-3基因编码区全长834 bp,编码277个氨基酸,与黄牛Caspase-3基因相比同源性最高(99. 52%)且遗传距离最近,发生4个碱基突变;与鸡同源性最低(71. 32%)且遗传距离最远,保守且符合动物进化进程.q PCR结果显示Caspase-3在牦牛生殖轴中的表达量均高于黄牛,其中,在下丘脑、输卵管中达到P <0. 01水平,在子宫中达到P <0. 05水平.推测极端环境应激引起Caspase-3基因的高表达可能影响母牦牛的繁殖性能.     

清肺化瘀解毒方对肺癌靶向耐药细胞的逆转作用及机制研究

目的:观察清肺化瘀解毒方对肺癌吉非替尼获得性耐药的调节作用及其机制。方法:采用大剂量冲击和逐渐增加剂量相结合的方法诱导建立人肺腺癌A549细胞株吉非替尼获得性耐药系,清肺化瘀解毒方含药血清及吉非替尼干预后,WST-1法检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western-blot、Real-time PCR技术检测CMET、Integrinβ1、IGF-1R蛋白及mRNA的表达。结果:清肺化瘀解毒方、清肺化瘀解毒方联合吉非替尼对A549/R细胞的增殖有明显抑制作用,且呈一定时效及量效关系;清肺化瘀解毒方能明显促进A549/R细胞的凋亡,与吉非替尼联用后促进作用更为明显(P<0.05);清肺化瘀解毒方组、清肺化瘀解毒方联合吉非替尼组CMET、IGF-1R蛋白及mRNA表达与空白血清组及吉非替尼组相比明显下调(P<0.05),Integrinβ1蛋白及mRNA表达差异不明显。结论:清肺化瘀解毒方有逆转A549吉非替尼获得性耐药的作用,其机制可能与下调CMET、IGF-1R表达有关。     

人参皂苷联合地塞米松对原代淋巴细胞白血病细胞凋亡与P-糖蛋白的影响

目的:体外观察人参皂苷联合地塞米松(DEX)对原代淋巴细胞白血病细胞凋亡和P-糖蛋白表达的影响。方法:抽取临床复发耐药的急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞,体外培养,随机设对照组、人参皂苷组、DEX组、人参皂苷加DEX组。通过锥虫蓝拒染法测定细胞生长抑制率,流式细胞术测定细胞凋亡率及P-糖蛋白的表达。结果:细胞培养72 h后,人参皂苷组、DEX组、人参皂苷加DEX组对细胞生长均有抑制作用,且可导致细胞凋亡的发生,以人参皂苷加DEX组最为显著,并可以显著降低P-糖蛋白的表达。结论:人参皂苷联合DEX具有增强DEX诱导原代淋巴细胞白血病细胞凋亡的作用。     

安罗替尼对肺癌A549细胞增殖、迁移侵袭的影响

目的 研究安罗替尼对肺癌A549细胞增殖和迁移侵袭的影响。方法 采用不同浓度的安罗替尼作用于肺癌A549细胞，利用CCK8法检测细胞增殖能力；流式细胞术检测A549细胞凋亡情况；通过划痕实验测定各组细胞的迁移能力；Transwell实验检测细胞侵袭能力。结果 安罗替尼处理后，CCK8结果显示A549细胞的增殖能力降低（P＜0.05）；划痕实验表明A549细胞迁移率降低（P＜0.05）；Transwell实验观察到穿过Transwell小室膜的A549细胞数减少（P＜0.05），侵袭能力受抑制；凋亡双染法发现A549细胞凋亡比例增高（P＜0.05）。结论 安罗替尼能够抑制肺癌A549细胞增殖、迁移侵袭，促进肺癌A549细胞凋亡。     

扶正消癌合剂对人肺腺癌A549细胞作用研究

目的:研究扶正消癌合剂对肺腺癌A549细胞增殖的影响及PI3K/Akt信号通路的作用机制。方法:制备大鼠含药血清,采用CCK8法对A549进行观察,了解其增殖抑制情况,了解其对细胞周期的影响,以及如何造成细胞凋亡。利用Western-Blot法检测含药血清对PI3K,Akt及P-Akt蛋白表达产生的作用。结果:扶正消癌合剂能抑制A549细胞增殖,呈现时间-浓度依赖关系,与顺铂呈正相关,48 h、72 h、96 h的抑制率分别是28.26%、39.62%和37.89%;扶正消癌合剂可以促进A549细胞发生变化,出现凋亡的情况,并且随着浓度的增高而有所增加,镜下观察G2/M期细胞明显增多,所占的比例也相应增加,相对于另一组来说差异有统计学意义(P<0.05)。其在诱导过程中,随着细胞逐渐凋亡,下调PI3K、P-Akt蛋白表达。结论:扶正消癌合剂可以抑制人肺腺癌细胞A549增殖,可能与抑制PI3K/Akt信号通路中PI3K、P-Akt蛋白表达有关。     

PTEN/NF-κB/Caspase信号通路对K562/ADM细胞阿霉素耐药逆转机制的研究

目的:探讨PTEN/Akt/NF-κB信号通路对阿霉素耐药慢性粒细胞白血病细胞系K562/ADM细胞耐药逆转的分子作用机制。方法:将携带有野生型PTEN基因及绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-PTEN-GFP)或空载体(Ad-GFP)腺病毒转染K562/ADM细胞,在转染3d内联合应用不同浓度阿霉素(ADM),观察PTEN基因对阿霉素的协同抑制作用,根据IC50计算药物逆转倍数。通过MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测转染效率、细胞凋亡率,荧光定量PCR(FQ-PCR)检测PTEN、NF-κB、I-κB、P53基因水平变化,Western blot检测PTEN、Akt、p-Akt、P65蛋白质水平变化。结果:Ad-PTEN-GFP转染与阿霉素联合作用后,K562/ADM细胞对阿霉素的敏感性增加,细胞增殖明显受抑,凋亡率明显高于Ad-GFP与阿霉素联合作用组,耐药逆转倍数为3.8倍。与Ad-GFP组相比,Ad-PTEN-GFP转染K562/ADM细胞3d后PTEN蛋白表达明显增加,p-Akt与P65蛋白表达明显下调,NF-κB mRNA表达水平下调,I-κB mRNA无明显改变,P53 mRNA表达轻度升高、Caspase-3/7活性增强。PTEN mRNA表达水平与NF-κB mRNA表达水平负相关(r=-0.968,P<0.05),NF-κB蛋白活性与Caspase-3/7活性负相关(r=-0.986,P<0.05)。结论:野生型PTEN可能通过抑制PI3K/NF-κB/Caspase信号传导通路,逆转K562/ADM细胞的多药耐药。     

胃肠癌贫血患者EPO、EPO-R和MVD的相关性研究

目的:探讨胃肠癌贫血患者EPO、EPO-R和微血管密度(MVD)表达的关系。方法:对177例胃肠癌患者进行常规方法检测Hb、血浆EPO浓度,免疫组化法检测EPO、EPO-R、MVD,并进行相关分析。结果:(1)57例贫血患者的EPO水平明显高于无贫血者(P<0.05);血清EPO水平和Hb值呈明显负相关(P<0.001)。(2)EPO、EPO-R阳性患者的MVD明显高于EPO、EPO-R阴性患者(P<0.05);MVD与EPO、EPO-R呈正相关(P<0.001)。结论:胃肠癌贫血患者的EPO水平明显增高,并与Hb值呈明显的负相关关系;EPO、EPO-R的表达与MVD呈正相关。     

生(鲜)地黄的化学、药理与应用特点

地黄是河南省的道地药材,古怀庆府为地黄的道地产区。地黄中的主要化学成分为糖类,环烯醚萜苷及氨基酸等,地黄中的梓醇,有抗癌、保护神经细胞等多种作用,具有很大的研发价值。地黄具有降血糖、增强免疫力的作用,对怀地黄的成分进行分离,找到了具有显著的降血糖作用的活性部位P-BP-F。地黄在食疗方面多用于粥类、饮料等,为新一代功能性产品的研发奠定了基础。     

牙周炎患者牙周维护治疗依从性的影响因素分析

目的:分析影响牙周炎患者牙周维护治疗依从性的因素。方法:纳入牙周科门诊已经完成第1阶段基础治疗的患者328例,采取问卷调查和电话回访形式了解患者的一般社会情况、对牙周疾病的认识、牙周基础治疗情况等,分析影响患者维护治疗意愿依从性的影响因素。结果:脑力劳动患者、居住地与医疗机构距离<20 km、收入介于3000~10 000元/月、参加深圳医保的患者牙周维护治疗的依从性较高,牙周知识得分越高其依从性越高,配合使用道具进行口腔卫生宣教、有牙周手术治疗经历的患者依从性较高,与其他相关情况进行比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:患者的职业、居住地与医疗机构距离、月收入、医疗支付方式、牙周知识及牙周基础治疗情况均可影响牙周维护治疗的依从性。     

二倍体黄芩与四倍体黄芩D20药材性状及显微特征比较研究

目的研究二倍体黄芩和四倍体黄芩D20的药材性状及显微特征。方法采用性状鉴别和显微鉴别的方法分别对二倍体黄芩和四倍体黄芩D20药材性状、横切面及粉末的显微特征进行研究。结果外观性状:四倍体黄芩D20比二倍体黄芩的根较粗壮肥实,分支多,单株产量高。显微特征:二倍体黄芩根的横切面特征表现为皮层与韧皮部界限明显,而四倍体黄芩D20皮层与韧皮部界限不明显且木射线宽广,较二倍体黄芩多。粉末特征:韧皮纤维、石细胞较二倍体黄芩大。结论二倍体黄芩与四倍体黄芩D20因染色体数目不同,二者的性状区别较大,组织结构和粉末非常相似,但也存在细微差异。     

天冬的显微与薄层色谱鉴别方法研究

目的建立天冬的显微与薄层色谱(TLC)鉴别方法。方法从贵州及周边收集天冬药材标本,对天冬块根进行徒手切片后进行图像采集系统摄像鉴别;薄层色谱鉴别中以菝葜皂苷元为对照品,石油醚-乙酸乙酯(3∶1)为展开剂对其块根进行鉴别。结果不同地区收集的天冬在显微特征上有一定差异,薄层色谱显色后,均在对照品相同的位置显相同颜色的斑点。结论研究结果可为其生药鉴别及进一步开发利用提供参考依据。     

熟地黄的现代研究及应用现状分析

目前对熟地黄的研究主要集中在对免疫系统、血液系统、神经系统的影响,而对于熟地黄抗衰老、养生与美容作用,却研究较少,深入开展对熟地黄在抗衰老及其养生与美容方面应用,具有十分重要的意义。对熟地黄补血作用的深加工产品,符合熟地黄的功效特点,更是道地药材疗效的体现,应是未来熟地黄重要研究方向之一。     

影响苹果矮砧扦插生根因素的研究进展

扦插繁殖是目前苹果矮化自根砧繁育的主要方式,扦插能否生根是扦插繁殖的关键。笔者综述了影响苹果矮化自根砧扦插生根的主要因素,认为基因型是影响扦插生根的最重要的因素,有的品种易生根,有的品种难生根。同时,扦插生根又受插条生理状况、发育程度、营养状况,以及光、温、湿、气等多种因素的影响,通过生长素处理可促进插条生根,但处理效果受生长素种类、使用浓度、处理方法、处理时间、插条生理状况及环境等多因素影响,只有各因素都处于适宜状态,才能保证生根的顺利进行。今后应加强扦插生根机理方面的研究工作,同时建议将易繁殖作为矮化砧木育种的首选目标,从根本上解决自根砧繁育难的问题。     

太子参化学成分研究进展

对太子参的化学成分进行总结和分析,为其资源的利用与开发提供参考。太子参化学成分类别主要包括糖类,皂苷类,环肽类,甾醇类,油脂类,挥发油类,氨基酸类,磷脂类,脂肪酸类,微量元素。分别对以上化学成分的研究进行归纳,并对其相关药理作用进行综述。     

白花前胡转录组简单重复序列位点分析

目的:根据白花前胡转录组数据中简单重复序列(simple sequence repea,SSR)的位点信息,统计分析后进行引物设计,为开发新的SSR标记做准备。方法:利用Microsatellite(MISA)软件对前胡转录组数据70 752条Unigenes的SSR位点信息进行分析,使用Primer 3软件设计引物,并进行筛选。结果:在白花前胡转录组中共检测到12 267个SSR位点(出现频率为17.34%),分布在10 674条Unigenes中,平均3.78 kb就出现1个SSR位点;在白花前胡转录组SSR中,从单核苷酸至六核苷酸重复类型均有出现,其中二核苷酸重复基元是主要重复类型,占SSR总数的61.57%,其次是单核苷酸重复(16.82%)和三核苷酸重复(15.73%),其余仅占0.73%,并且不同重复类型之间的平均距离差异较大;在93种重复基元中,单核苷酸、二核苷酸、三核苷酸、四核苷酸、五核苷酸、六核苷酸重复基元分别为2、6、30、40、8、7种,其中单核苷酸重复基元A/T、二核苷酸重复基元AT/TA和三核苷酸重复基元CTT/GAA是优势重复基元,分别占SSR总数的16.59%、38.21%和1.14%,其余类型核苷酸重复基元较多,数量较少;通过设计共得到10 254对引物,按照SSR序列长度大于20bp的标准筛选得到其中841对SSR引物。结论:白花前胡转录组中SSR位点出现频率高,重复类型多样,特别是以单、二、三核苷酸重复为主SSR在多态性潜能方面有较高的应用价值,可以有针对性的进行引物设计并加以应用。     

柴胡的药性及功用考证

从历代本草记载及临床应用可见柴胡具有味苦、辛,性微寒,归肝、胆经等特点,能够解表退热、截疟、疏肝解郁、升举阳气,适用于肝郁气滞证、中气下陷证、少阳证、外感发热等,常与黄芩、黄芪、升麻、香附等药物配伍以增效。现代研究多认为柴胡具有解表退热,疏肝解郁,升举阳气等功效,适用于外感发热,病邪在少阳寒热往来,疟疾,肝郁所致胁痛、乳胀、月经不调,气虚下陷之脱肛、子宫脱垂、胃下垂等。