响应面法分析优化米曲霉产β-葡萄糖苷酶液体发酵培养基

利用快速有效的响应面分析法对米曲霉ASPE0485产β-葡萄糖苷酶的发酵培养基进行优化,利用PlackettBurman显著因子实验和Box-Behnken响应面分析优化了β-葡萄糖苷酶产生菌的发酵培养基,确定摇瓶发酵的最佳培养基组成为(%,w/v):玉米芯3.8%、大豆蛋白胨0.5%、KH2PO40.5%、MgSO4.7H2O0.05%、CaCl20.05%、吐温-800.27%和接种量5.3%;在此条件下发酵,得到酶活为21.1U/mL比原始酶活(17.65U/mL)提高了19.55%。     

响应面法分析优化米曲霉产β-葡萄糖苷酶液体发酵培养基

利用快速有效的响应面分析法对米曲霉ASPE0485产β-葡萄糖苷酶的发酵培养基进行优化,利用PlackettBurman显著因子实验和Box-Behnken响应面分析优化了β-葡萄糖苷酶产生菌的发酵培养基,确定摇瓶发酵的最佳培养基组成为（%,w/v）:玉米芯3.8%、大豆蛋白胨0.5%、KH2PO40.5%、MgSO4.7H2O0.05%、CaCl20.05%、吐温-800.27%和接种量5.3%;在此条件下发酵,得到酶活为21.1U/mL比原始酶活（17.65U/mL）提高了19.55%。      

米曲霉FZ58固体发酵β-葡萄糖苷酶条件优化及酶学特性研究

对米曲霉FZ58β-葡萄糖苷酶固体发酵培养基进行优化,确定最适碳源为甘蔗渣、氮源为黄豆饼粉、固液比为1：3。对FZ58固体发酵的产酶条件优化结果如下：发酵初始pH自然,发酵温度36℃,发酵周期为120h。酶学特性研究表明：酶最适作用温度是60℃,最适作用pH为5．0。     

米曲霉FZ58固体发酵β-葡萄糖苷酶条件优化及酶学特性研究

对米曲霉FZ58β-葡萄糖苷酶固体发酵培养基进行优化,确定最适碳源为甘蔗渣、氮源为黄豆饼粉、固液比为1：3。对FZ58固体发酵的产酶条件优化结果如下：发酵初始pH自然,发酵温度36℃,发酵周期为120h。酶学特性研究表明：酶最适作用温度是60℃,最适作用pH为5．0。     

米曲霉产β-葡萄糖苷酶发酵条件的研究

将经过筛选的产β-葡萄糖苷酶的米曲霉,通过单因子及正交实验对其产酶发酵条件进行研究,结果显示:培养基为玉米芯3%、豆饼粉0.2%、KH2PO40.4%、CaCl20.04%、MgSO40.04%,自然pH,装液量(300mL三角瓶)为60mL,发酵时间为60h时为最佳发酵条件。     

响应面法优化米曲霉产β-半乳糖苷酶固体发酵培养基

为了提高米曲霉UV-LiCl-38产β-半乳糖苷酶的能力,采用Plackett-Burman重要因素筛选实验和中心组合实验对其基础发酵培养基进行了优化。优化后的培养基中麸皮与营养液的比例为1∶1（w/v）,营养液中含乳糖2.39%（w/w）,蔗糖1%（w/w）,（NH4）2SO40.56%（w/w）,牛肉膏0.5%（w/w）,KH2PO41.8%（w/w）,MgSO40.5%（w/w）,MnSO40.5%（w/w）,营养液的pH为4.5。在该培养基中30℃发酵5d,酶活达到188.92U/mL,比基础培养基的酶活145.62U/mL提高了29.7%。      

无花果曲霉β—葡萄糖苷酶的固体发酵工艺初探

采用固体曲培养箱发酵生产β－葡萄糖苷酶,对料层厚度,接种温度,堆积期、品温的控制等工艺条件进行试验,在最佳条件下产酶可达２０９．３μｍｏｌ／（ｓ．ｇ）。     

响应面法优化黑曲霉HQ-1产β-葡萄糖苷酶的固体发酵条件

采用单因素试验和响应面法对黑曲霉(Aspergillus niger)HQ-1产β-葡萄糖苷酶的固体发酵条件进行了优化,得到产酶的最佳发酵条件为:玉米秸秆粉6.0 g、麦麸6.0 g、(NH4)2SO41.5 g、KH2PO41.6 g、MgSO4.7H2O 0.8 g、含水量73.4%、起始pH3.91、培养温度和培养时间分别为33.7℃和96 h。优化后,β-葡萄糖苷酶比活力最高为8.244μkat/g,比未优化的酶比活力最高值(1.700μkat/g)提高了3.85倍。     

β-葡萄糖苷酶产酶发酵条件的优化研究

通过单因子及正交试验，对培养基优化后，酶活由５１．５μ／ｍｌ增加到９６．５μ／ｍｌ，提高了近一倍，最终得到了β－葡萄糖苷酶发酵的最适条件。     

响应面法优化α-葡萄糖苷酶发酵条件研究

采用Plackett-Burman（PB）分析法和响应面法（Response surface methodology,RSM）对臭曲霉产α-葡萄糖苷酶的发酵条件进行了优化。PB实验表明麦芽浸粉、KH2PO4、尿素、pH和接种量具有显著影响效应;然后利用最陡爬坡实验逼近最大响应区域,通过中心组合实验对影响产酶的主要因素进行研究,建立了影响因素与响应值之间的回归方程,并获得最佳发酵条件:麦芽浸粉38.13g/L,KH2PO47.88g/L,尿素0.91g/L,pH为5.76,接种量为9.63%。在此优化条件下发酵,α-葡萄糖苷酶产量提高了35%左右,达到1218.6U/mL。      

响应面法优化α-葡萄糖苷酶发酵条件研究

采用Plackett-Burman(PB)分析法和响应面法(Response surface methodology,RSM)对臭曲霉产α-葡萄糖苷酶的发酵条件进行了优化。PB实验表明麦芽浸粉、KH2PO4、尿素、pH和接种量具有显著影响效应;然后利用最陡爬坡实验逼近最大响应区域,通过中心组合实验对影响产酶的主要因素进行研究,建立了影响因素与响应值之间的回归方程,并获得最佳发酵条件:麦芽浸粉38.13g/L,KH2PO47.88g/L,尿素0.91g/L,pH为5.76,接种量为9.63%。在此优化条件下发酵,α-葡萄糖苷酶产量提高了35%左右,达到1218.6U/mL。     

细菌HGS-3产β-葡萄糖苷酶发酵条件的优化

对细菌HGS-3的产酶条件进行了优化。试验结果表明,栀子甙对细菌HGS-3产酶有着强烈地诱导效果,最佳的产酶条件为碳源(甘蔗渣∶麸皮=3∶1)5%,牛肉膏0.5%,栀子甙0.2%,KH2PO40.4%,MnSO40.04%,pH9.0,装液量20mL,转速200r/min,45℃发酵24h,发酵液中的酶活可达到93.48U/mL,比优化前的酶活16.55U/mL提高了近6倍。     

黑曲霉ZJ1摇瓶发酵产β-葡萄糖苷酶的研究

本文研究了黑曲霉ZJ1发酵产 β -葡萄糖苷酶的发酵条件及 β -葡萄糖苷酶的酶学性质。结果表明 :黑曲霉摇瓶发酵产 β -葡萄糖苷酶的培养基组成为 (g/L) :稻草 5 0 ,麦麸 15 ,大麦粉 15 ,(NH4) 2 SO410 ,KH2 PO40 .5 ,MgSO4·7H2 O 0 .5 ,起始pH 5 .0。产酶条件为 :培养温度 2 8℃ ,转速为 2 0 0r/min ,当培养时间为 14 4h ,β -葡萄糖苷酶活性达到最大。β -葡萄糖苷酶的最适作用温度为 5 0℃ ,在 4 0℃时热稳定性较好 ;β -葡萄糖苷酶的最适反应pH为 5 .5 ,在pH 3.0～pH 8.0之间较稳定 ;Zn2 、Al3 、Ca2 和Mn2 对 β -葡萄糖苷酶酶促反应均有一定的促进作用。     

CCD响应面设计优化米曲霉产果糖基转移酶的发酵工艺

本文用蔗糖、豆粕粉、玉米粉作为基础培养基,对产果糖基转移酶的米曲霉诱变融合菌株RⅢ-7进行发酵实验,通过Plackett-Burman优化实验,得到影响其发酵的3个显著因素,分别为蔗糖浓度、豆粕粉浓度、转速;再通过中心复合设计（CCD）响应面设计进一步优化米曲霉产果糖基转移酶的发酵工艺,实验结果表明,蔗糖、豆粕粉和转速之间存在着交互作用,其中豆粕粉浓度与转速之间的交互作用显著,得到最优工艺参数为:蔗糖浓度为5.95%、豆粕粉浓度为1.60%、转速为165 r/min。经验证,在最优发酵工艺条件下,米曲霉产果糖基转移酶酶活力达到870.21 U/g,与预测值895.68 U/g接近,误差为0.028%。      

响应面法优化米曲霉液体发酵生产中性蛋白酶工艺

为提高米曲霉（Aspergillus oryzae）液体发酵生产中性蛋白酶的能力,采用单因素试验、Plackett-Burman（PB）试验筛选碳源、氮源和无机盐,并通过响应面法优化其最佳配比,提高米曲霉液体发酵生产中性蛋白酶的活性。结果表明,米曲霉液体发酵生产中性蛋白酶的最佳碳源、氮源和无机盐分别为玉米粉、牛肉膏和氯化钙,发酵的最优条件为玉米粉添加量17 g/L,牛肉膏添加量10 g/L,氯化钙添加量0.04 g/L,接种量5%,装液量60 mL/250 mL,于30 ℃条件下发酵84 h。在此优化条件下,产生的中性蛋白酶活性从最初的21.4 U/mL提高至110.5 U/mL。     

高转苷活性β-葡萄糖苷酶菌株复合选育

筛选得到的野生米曲霉产高转苷活性β-葡萄糖苷酶,可以通过酶转苷作用合成龙胆低聚糖,通过亚硝基胍和紫外线复合诱变,经过七叶苷平板和发酵测酶活复筛,快速筛选得到一株遗传稳定性好的菌株ALQ1,β-葡萄糖苷酶酶活力达到241.43U/g,较原始菌株提高了88.62%。     

产β-葡萄糖苷酶真菌的筛选鉴定、纯化及酶学性质分析

经刚果红平板染色法从土样中筛选到3株产纤维素酶的真菌,通过对其β-葡萄糖苷酶活力的测定,选择一株相对活力较高的菌株进行菌种鉴定。在形态鉴定的基础上,通过内转录间隔区(ITS)序列构建系统发育树初步鉴定为米曲霉(Aspergillus oryzae),命名为giF-10。对米曲霉giF-10进行摇瓶发酵,经硫酸铵沉淀、Sephadex G-100凝胶层析、DEAE Cellulose 52离子交换层析进行纯化。得到纯化后的β-葡萄糖苷酶,比活力为40.84U/mg,分子质量约90kD;该β-葡萄糖苷酶最适温度为55℃;在30～50℃之间热稳定性好;最适pH值为4.5;pH4.0～6.0稳定性好;金属离子对酶活力具有一定的影响,Mn2+对酶具有较强的激活作用;Fe3+和Cu2+对β-葡萄糖苷酶活力有较强的抑制作用;该酶对水杨素和纤维二糖具有较强的底物特异性;β-葡萄糖苷酶对水杨素的动力学参数：Km为0.676mmol/L;对纤维二糖的动力学参数为：Km为2.906mmol/L。     

响应面方法优化黑曲霉产β-葡萄糖苷酶培养基成分的研究

通过Plackett-Burman实验确定了培养基组分中对Aspergillus niger Glu05产β-葡萄糖苷酶影响较为显著的因子是麸皮、蛋白胨和Na+;在Plackett-Burman实验基础上开展响应面实验优化培养基组分,优化后的β-葡萄糖苷酶活力达到了48.11 IU/mL,较初始酶活力32.87 IU/mL提高了46%。     

响应面法优化米曲霉产孢工艺条件

米曲霉(Aspergillusoryzae)是一种在食品中应用广泛的真菌。为了得到较多的米曲霉孢子,基于单因素试验选取了培养温度、培养基含水量和接种量3个因素,利用Design-Expert响应面分析法对产孢进行了优化。结果表明,在培养温度为22.66℃,培养基含水量为48.79%,接种量为3.44‰时,产孢子数预测可达到12.7437×109CFU/g,实际测得为12.1×109CFU/g,达到预测值的94.95%。