β-葡聚糖酶降解玉米秸秆中β-葡聚糖的工艺

利用β-葡聚糖酶降解玉米秸秆中的β-葡聚糖,确定了酶浓度、pH、酶解时间以及温度等因素,并通过正交实验进行了优化.影响因素为:酶浓度>pH>反应温度>反应时间.酶解的最适条件:酶活25.86万U/g,pH值4.5,反应时间15 h,反应温度45℃.玉米秸秆的β-葡聚糖的降解率为41.96%.     

基于酶反应动力学理论优化脂肪酶活力测定体系

为了提高棕榈酸对硝基苯酯(p-NPP)法测定脂肪酶活力的灵敏度和准确度,以来源于Rhizopus oryzae的脂肪酶Lipase F-AP 15为研究对象,首先对其最适反应pH和反应温度进行优化,然后将表面活性剂作为激活因子引入酶活力测定体系,探究影响机制,并依据酶反应动力学理论优化测定条件(底物浓度、酶质量浓度、反应时间),对优化的p-NPP法的重复性和准确性进行了检验,最后以另一个来源的脂肪酶Lipase-PPL为模型,以同样思路与方法改进与优化其酶活力测定体系,以考察优化方法和思路的适用性。结果表明：表面活性剂PEG 8000的引入使得覆盖在脂肪酶活性位点的α-螺旋结构被重排而打开,脂肪酶由封闭构象转为并保持在活化构象,脂肪酶活性增强;优化测定体系的最适条件为pH 8.0、反应温度30℃、酶质量浓度1.00 mg/mL、底物浓度6 mmol/L、反应时间5 min,在此条件下测得的酶活力是常用p-NPP法(pH 8.0、反应温度30℃、酶质量浓度2.50 mg/mL、底物浓度10 mmol/L、反应时间8 min)测得酶活力的1.4倍;重复性和准确性试验显示,优化p-NPP法重...     

解脂假丝酵母脂肪酶水解乳脂肪的研究

以反应温度、反应时间、酶的用量、底物浓度、pH值等为主要因素研究解脂假丝酵母脂肪酶水解乳脂肪的工艺条件,并利用响应面分析法(RSA)对水解条件进行了优化。得出最佳水解条件为底物浓度50.7%,pH7.5,加酶量317.3U/g,温度40℃。     

壳寡糖修饰多聚半乳糖醛酸酶优化条件研究

以水溶性低分子量壳寡糖作为修饰剂对已纯化的多聚半乳糖醛酸酶进行化学修饰,通过单因素试验和正交试验探讨pH值、温度、修饰时间、壳寡糖的用量等因素对修饰效果的影响和最佳修饰条件的优化筛选.结果表明,通过正交试验筛选出最佳修饰反应条件为:80 mg活化的多聚半乳糖醛酸酶,反应体系中pH为4.0,反应温度为3℃,反应时间为12h,壳寡糖用量为150 mg,修饰效果最佳.利用此条件对多聚半乳糖醛酸酶进行化学修饰具有显著的激活作用,修饰后酶的比活力是340.10 U/mg protein,比修饰前提高了153.42％.     

解脂假丝酵母脂肪酶水解乳脂肪的研究

以反应温度、反应时间、酶的用量、底物浓度、pH值等为主要因素研究解脂假丝酵母脂肪酶水解乳脂肪的工艺条件，并利用响应面分析法(RSA)对水解条件进行了优化。得出最佳水解条件为底物浓度50．7％，pH7．5，加酶量317．3U／g，温度40℃。     

复合酶处理废弃烟末制备烟用美拉德香精

利用α-淀粉酶和β-淀粉酶的复合酶酶解烟草废弃物、浓缩酶解液与特定的氨基酸进行美拉德反应来制备烟用香精。通过单因素实验确定最适酶解条件:质量分数0.2%α-淀粉酶和质量分数3%β-淀粉酶,酶解时间7 h,pH 5.4,温度50℃;在酶解制备的美拉德反应基液中加入氨基酸后,通过正交实验优化美拉德反应条件:反应系含水率15%,反应时间5 h,pH 8,反应温度115℃。经验证实验可知,酶解液中还原糖的质量浓度提高了28.07%,通过GC-MS分析表明,从美拉德反应产物中共检测100种物质,其中与烟草香味有关的化合物有57种,相对质量分数为71.277%。     

固定化米黑根毛霉脂肪酶的制备工艺优化及其酶学性质北大核心CSCD

以海藻酸钠-羧甲基纤维素钠(CMC)为复合载体,戊二醛为交联剂,探究了包埋-交联法制备固定化米黑根毛霉脂肪酶的最佳工艺条件,并对固定化米黑根毛霉脂肪酶的酶学性质进行分析。结果表明,制备固定化米黑根毛霉脂肪酶的最佳工艺条件为海藻酸钠质量分数2.5%、CMC质量分数1.5%、脂肪酶液浓度800 U/mL、CaCl_(2)质量分数5%、戊二醛质量分数0.03%、交联固定化时间30 min,在此条件下固定化米黑根毛霉脂肪酶的酶活力为245.58 U/g,与游离脂肪酶相比,固定化脂肪酶热稳定性和pH稳定性均有所提高。交联剂戊二醛的添加可以提高固定化脂肪酶的操作稳定性和储存稳定性,在重复使用7次后相对酶活力保持在57.39%,在4℃下存放7周后相对酶活力为61.89%。包埋-交联法制备的固定化米黑根毛霉脂肪酶具有更好的稳定性和适应性,为实现植物油酶法酯化脱酸工业化生产提供参考。     

高产L-乳酸米根霉的原生质体制备与再生条件研究

为建立原生质体融合法选育高产L-乳酸米根霉(Rhizopus oryzae)菌株,对米根霉菌株原生质体制备及再生条件进行研究。考察酶种类、酶质量浓度、时间、温度、pH值、渗透压、预处理等因素对原生质体制得量及再生率的影响,获得原生质体制备及其再生的优良条件：不添加甘氨酸,渗透压稳定剂为0.6mol/L的NaCl缓冲液,按1.5mg/mL组合酶质量浓度,蜗牛酶、纤维素酶和溶壁酶质量浓度配比为1:1:1进行混合,35℃、pH6、酶解2h,可获得原生质体制得量最大为2.74×106个/mL,再生率最高为6.8%。     

糖基化改性对鲣鱼加工副产物活性肽抗氧化能力的影响

目的 本研究利用酶法糖基化修饰鲣鱼加工副产物酶解产物,优化反应条件,制备具有强抗氧化活性和高接枝度的修饰产物,并对产物进行抗氧化活性评价。方法 通过胰酶酶解鲣鱼加工副产物,利用转谷氨酰胺酶（Transglutaminase,TGase）和D-氨基葡萄糖（D-glucosaminase,D-GlcN）酶法糖基化修饰酶解物;采用单因素实验和响应面法优化反应条件;使用羟自由基测定试剂盒等对修饰产物的进行四个指标的抗氧活性评价。结果 酶法糖基化修饰的最优条件为:粗蛋白浓度为40 mg/ml,氨基糖与粗蛋白浓度比为1:1,TGase添加量为108 U/g,反应pH=7.5,反应温度50℃,反应时间5 h。此条件下得到的修饰产物具有很强的抗氧化能力:清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基的半抑制质量浓度（median inhibitory concentration, IC50）值为10.02 mg/mL,清除羟自由基的IC50值为2.94 mg/mL;当质量浓度为10 mg/mL时,修饰产物的总抗氧化能力值为0.78 TEAC（Trolox Equivalent Anyioxidant Capacity）,铁离子还原能力值为1.97 OD700（700 nm下测定的吸光度）。结论 鲣鱼胰酶酶解物经过TGase和D-GlcN糖基化修饰后,相比修饰前,具有更强的抗氧化活性,具备作为功能食品原料的潜力。     

Lipozyme RM IM脂肪酶催化苦瓜籽油和癸酸合成功能性油脂

以苦瓜籽油为原料,利用癸酸在脂肪酶Lipozyme RM IM的催化下进行结构修饰,来降低苦瓜籽油中桐酸的含量。选取底物物质的量的比、加酶量、反应温度、反应时间为影响因素,采用响应面分析法进行反应条件优化,得最佳反应条件为底物物质的量的比(苦瓜籽油:癸酸)=1:4、加酶量(占底物质量的质量分数)12.5%、反应温度60℃、反应时间14.8h。在此最优反应条件下得到的新油脂中癸酸含量为47.12%,同时桐酸含量由反应前苦瓜籽油中的56.17%降为25.46%。     

Preparation and Properties of Rhizopus oryzae Lipase Immobilized Using an Adsorption-Crosslinking Method

The aim was to develop an enzyme immobilization method for Rhizopus oryzae lipase to improve its acidolysis activity and stability. Lipase was adsorbed into NKA-9 resin and then crosslinked with glutaraldehyde as a crosslinker. The optimum conditions obtained using the response surface methodology were as follows: 34.6 mg lipase/100 mg support, 4.1 h of adsorption time, 45°C, pH 6.8, 0.5% glutaraldehyde concentration, and 2.5 h of crosslinking time. The acidolysis activity of the immobilized lipase was 31.78%, the free lipase activity was only 11.02%. The immobilized lipase showed better performance, such as higher acidolysis activity, better pH tolerance and temperature stability, enhanced storage stability, and improved reusability.     

酶法改善卵白蛋白起泡性

采用碱性蛋白酶对卵白蛋白进行酶法改性处理以改善其起泡性。探讨酶解时间、底物质量分数、酶用量因素对卵白蛋白起泡性和泡沫稳定性的影响,在单因素试验基础上采用Box-Behnken中心组合试验设计优化酶法改性条件。结果表明,碱性蛋白酶酶法改性卵白蛋白改善其起泡性的最佳条件为：酶用量144 000 U/g、底物质量分数1.90%、酶解时间34 min。在此条件下酶法改性后卵白蛋白起泡性达202.0%,为未改性（120%）的1.683 倍。     

液压压榨澳洲坚果粕酶解制备多肽工艺优化

以液压压榨澳洲坚果粕为原料,分析了其常规营养成分含量与氨基酸组成。采用碱性蛋白酶与中性蛋白酶催化酶解澳洲坚果粕蛋白制备多肽。以水解度为指标,利用单因素试验与正交试验考察了各因素对澳洲坚果粕蛋白水解度的影响。结果表明：液压压榨澳洲坚果粕中含有32.25%的蛋白质,17 种氨基酸,含量为25.05%。碱性蛋白酶各因素对澳洲坚果粕蛋白水解度影响的主次顺序为：酶解时间＞酶解温度＞加酶量＞酶解pH值＞底物质量浓度,最佳工艺条件为：酶解温度60 ℃、酶解时间3.5 h、底物质量浓度110 g/L、酶解pH 8.0、加酶量2 400 U/g,在此条件下水解度达到了22.83%。中性蛋白酶各因素影响水解度的主次顺序为：加酶量＞酶解时间＞底物质量浓度＞酶解温度＞酶解pH值,最佳工艺条件为酶解温度55 ℃、酶解时间3.5 h、底物质量浓度100 g/L、酶解pH 7.0、加酶量3 200 U/g,水解度达到了22.78%。碱性蛋白酶与中性蛋白酶各因素对澳洲坚果粕蛋白水解度的影响均达到了极显著水平（P＜0.01）。在最佳工艺条件下,碱性蛋白酶酶解液压压榨澳洲坚果粕制备多肽的效果优于中性蛋白酶。     

磁性壳聚糖微球固定化脂肪酶研究

以磁性壳聚糖微球为载体,通过戊二醛交联进行脂肪酶固定化,对影响脂肪酶固定化各种因素进行考察,确定最佳条件,并比较游离酶与固定化酶pH和热稳定性。结果表明,固定化适宜条件为:脂肪酶加入量5.0 mg/100 mg载体、温度40℃、时间5 h、pH 8.04、戊二醛浓度10%、最高固载率可达90.56%,酶活4034 U/g载体;与游离酶相比,固定化酶pH和热稳定性都有较宽适用范围。     

文冠果壳皂苷抑制胰脂肪酶活性的研究

本文旨在确定文冠果壳皂苷作为减肥因子对胰脂肪酶活性的作用效果。通过对胰脂肪酶反应条件(pH、反应时间和反应物加入顺序)的摸索,确定AB-8大孔树脂纯化的文冠果壳皂苷对胰脂肪酶活性的影响,并通过紫外吸收光谱(200~340 nm)、荧光光谱(激发波长290 nm,扫描波长300~450 nm)确定文冠果壳皂苷对胰脂肪酶作用的机理。研究结果表明,文冠果壳皂苷对胰脂肪酶抑制率高达87.5%,最佳反应体系pH 7.4,反应时间15 min,反应物加入顺序为底物与文冠果壳皂苷预热后加入胰脂肪酶溶液反应。文冠果壳皂苷与胰脂肪酶作用后,改变了胰脂肪酶中发光氨基酸(Trp、Tyr)所在微环境,胰脂肪酶分子结构和构象发生变化,导致胰脂肪酶紫外吸收光谱最大吸收波长红移和荧光强度降低,胰脂肪酶活性抑制。文冠果壳皂苷可通过抑制胰脂肪酶发挥减肥因子的作用。     

响应面法优化海蓬子皂苷提取工艺条件与生物活性研究

响应面分析法优化海蓬子皂苷提取工艺,初步鉴定海蓬子皂苷的结构,并探讨其对α-葡萄糖苷酶与胰脂肪 酶的体外抑制活性。海蓬子皂苷最佳提取条件为料液比1∶27（g/mL）、乙醇体积分数62%、超声时间30 min。在此 条件下,海蓬子皂苷的提取量为10.14 mg/g;显色反应和红外光谱初步分析表明,海蓬子皂苷为四环三萜类皂苷; 体外实验表明,经纯化的海蓬子皂苷提取物对α-葡萄糖苷酶和胰脂肪酶均有较强抑制作用,并呈剂量效应,对α-葡 萄糖苷酶、胰脂肪酶的抑制率分别达到68.20%和84.28%。该结果提示海蓬子皂苷可能具有阿卡波糖样的降血糖机 制以及降血脂的功效。     

超声波场中酶法合成L-抗坏血酸豆蔻酸酯及其抗氧化性

以固定化脂肪酶（Novozym®435）为催化剂,在超声波场中合成L-抗坏血酸豆蔻酸酯,分别测定L-抗坏血酸豆蔻酸酯的清除羟自由基、DPPH自由基能力和还原力。结果表明：超声波可以显著加速底物在叔丁醇中的溶解,并使反应时间由48 h缩短到4 h,产率达77.58%,纯化后产物纯度为98.1%,固定化脂肪酶可重复利用4 次。L-抗坏血酸豆蔻酸酯具有很强的抗氧化性能,在等质量浓度条件下与L-抗坏血酸棕榈酸酯相当,优于特丁基对苯二酚,同时添加入油脂时其抗氧化能力也较优。     

响应面法优化菊芋渣酶解制备抗氧化肽工艺

以菊芋渣蛋白为原料,在单因素试验基础上,采用Plackett-Burman设计选出最显著的因素,即底物质量浓度、酶解时间、pH值,再用响应面分析法对其进行考察,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除率为评价指标,优化菊芋渣抗氧化肽酶解工艺。结果表明,最佳酶解条件为加酶量8 000 U/g、酶解温度50 ℃、pH 5.0、酶解时间3.5 h、底物质量浓度0.16 g/mL,在此条件下DPPH自由基清除率实测平均值达88.10%,与预测值88.08%相近。     

机械活化玉米淀粉的辛烯基琥珀酸酐酯化改性

采用行星式球磨机对玉米淀粉进行机械活化,再与辛烯基琥珀酸酐（octenyl succinic anhydride,OSA）发生酯化反应制备OSA淀粉酯。研究机械活化时间、反应温度、反应体系pH值、淀粉乳质量分数、反应时间因素对玉米淀粉酯化反应的影响,并采用二次回归正交旋转组合设计方法和响应面分析对制备条件进行优化。结果表明,机械活化对玉米淀粉OSA酯化反应有明显的增强作用,且反应不受pH值的影响;得到最优工艺条件为机械活化10 h、反应温度33.1 ℃、pH 8.45、淀粉乳质量分数12.2%、反应时间3 h,在此条件下制得机械活化辛烯基琥珀酸淀粉酯的平均取代度为0.020 3。     

响应面法优化纳米SiOx/鸡蛋清蛋白可食性膜的琥珀酰化改性工艺

目的：以鸡蛋清蛋白为原料,制备纳米SiOx/鸡蛋清蛋白可食性膜,研究琥珀酰化改性工艺对膜性能的影响。方法：以琥珀酸酐添加量、反应时间、反应温度及反应pH值为影响因素,以拉伸强度、断裂伸长率、水蒸气透过系数及透油系数为响应值,采用单因素试验和响应面分析法,优化可食性膜的琥珀酰化改性工艺。结果：建立了回归模型,优化琥珀酰化改性工艺为琥珀酸酐添加量0.70 g、反应时间40.35 min、反应温度34.87 ℃、反应pH 8.30,在此条件下可食性膜拉伸强度、断裂伸长率、水蒸气透过系数及透油系数的预测值分别为4.935 MPa、75.446%、3.499 g·mm/（m2·d·kPa）、0.874 g·mm/（m2·d）,验证值为：（4.891±0.126）MPa、（73.560±4.329）%、（3.651±0.097）g·mm/（m2·d·kPa）、（0.914±0.008）g·mm/（m2·d）,与之接近,优化结果可靠。结论：琥珀酸酐添加量和反应pH值是影响膜性能的主要因素。