液态烷烃氧载体对褐黄孢链霉菌合成纳他霉素的影响

利用单因素摇瓶发酵的实验方法,以多种液态烷烃作为氧载体,分别研究了其不同添加浓度、添加时间对褐黄孢链霉菌生长及对纳他霉素生物合成的影响。实验结果表明,正己烷、正十二烷和正十六烷都不能作为碳源被细胞利用,是有效的氧载体。正十二烷作为氧载体效果较好:接种同时添加6%的正十二烷培养,细胞干重和纳他霉素含量分别比对照组提高了22.9%和46.4%;而最佳添加时间为发酵后24 h,纳他霉素含量比接种同时添加提高了7.0%。添加6%的正十六烷,纳他霉素含量比对照组提高了43.3%。添加高于3%浓度的正己烷,菌体干重和那他霉素产量均低于对照组,推测可能是正己烷对细胞产生毒性而抑制了菌体生长和纳他霉素的合成。     

响应面法优化褐黄孢链霉菌ZM701产纳他霉素发酵培养基

为了提高褐黄孢链霉菌（Streptomyces gilvosporeus）ZM701生产纳他霉素的产量,该文通过单因素试验,研究碳源、氮源及无机盐对菌体生长和纳他霉素产量的影响,采用响应面分析法优化发酵培养基中葡萄糖、豆粕、CaCO3的添加量。结果表明,褐黄孢链霉菌（S. gilvosporeus）ZM701产纳他霉素最佳发酵培养基组成为：葡萄糖52.6 g/L,酵母蛋白胨3.0 g/L,豆粕23.3 g/L,MgSO4·7H2O 2.0 g/L,CaCO3 3.2 g/L。在此条件下,纳他霉素产量达到5.41 g/L,比优化前提高了77.8%。     

纳他霉素效价测定方法的改良及含量的快速测定

为了确定固体发酵过程中纳他霉素含量快速测定和生物效价准确测定方法,本文采用高效液相色谱法、紫外分光光度法和管碟法测定了同一批褐黄孢链霉菌固体发酵产物纳他霉素的含量。其中高效液相色谱法和紫外分光光度法测定纳他霉素固体发酵产物含量分别为2351.52 mg/L和1979.87 mg/L,前者结果准确而稳定。后者测定准确率为96.97%(以高效液相色谱的测定结果为100%计)。适用于固体发酵过程中的纳他霉素含量的快速测定。管碟法测定纳他霉素平均效价为1979.87 mg/L。改良管碟法采用正己烷封盖纳他霉素溶剂甲醇后,测定的平均效价达到1990.29 mg/L,准确率由84.20%提高到84.64%(以高效液相色谱的测定结果为100%计)。采用正己烷封盖能有效控制纳他霉素溶剂甲醇的挥发性并提高管碟法的准确性和测定的浓度范围,而正己烷本身不具有抑菌效果。     

纳他霉素——一种抗真菌生物防腐剂

纳他霉素是26种多烯大环内酯类抗真菌抗生素的一种，主要由3种链霉菌产生，分别是恰努加链霉菌（Streptomyces chattanovgensis）、纳塔尔链霉菌（Streptomyces natalensis）和褐黄孢链霉菌（Streptomyces gilvosporeus），经发酵、提取、精制获得的具有广谱、双效的生物防腐剂。它既可以抑制各种霉菌、酵母的生长引起的食品腐败，又能抑制真菌毒素的产生，防止造成毒素型食物中毒。     

纳他霉素高产突变菌株高通量筛选方法的建立

为了提高纳他霉素（natamycin）高产菌株诱变后的筛选效率,建立一种24孔深孔板/酶标仪发酵初筛和摇瓶发酵复筛的高通量筛选检测方法,得到在24孔深孔板发酵结果与摇瓶发酵有很好的一致性,证实了酶标仪检测可以替代高效液相色谱法检测用于突变菌株的快速高通量筛选。以褐黄孢链霉菌（Streptomyces gilvosporeus TUST01）作为出发菌株,通过多轮的紫外诱变、常压室温等离子体（atmospheric and room temperature plasma,ARTP）以及硫酸二乙酯复合诱变、孔板初筛与摇瓶复筛,从887株突变株中筛选出遗传性稳定的高产菌株S. gilvosporeus Y-4-75,其摇瓶纳他霉素产量（5.95 g/L）与生物量（29.19 g/L）较出发菌株分别提高了31.93%和15.19%。     

纳他霉素高产菌株的选育及其发酵条件的研究

利用链霉素抗性突变选育纳他霉素高产菌株 ,即将经过紫外线诱变处理的纳他霉素(natamycin)产生菌褐黄孢链霉菌 (Streptomycesgilvosporeus)ATCC1 332 6菌株孢子涂布在含有链霉素最小抑制浓度 (0 6μg/mL)的培养基平板上 ,获得了 1 2 2株链霉素抗性突变株。其中纳他霉素产量高于出发菌株的有 1 3株。其中突变株SG 56的生产能力比出发菌株提高到 1 4 6 % ,研究了其发酵性能 ,优化了培养基组成和发酵工艺条件 ,使纳他霉素产量提高到 1 70 %。     

纳他霉素发酵液的超滤膜提纯研究

采用钛合金膜超滤中试系统对纳他霉素发酵液进行除菌体试验研究.结果表明,钛合金膜对菌体的截留率超过99%,纳他霉素没有损失;无机钛合金膜除菌体的最佳操作条件为:系统压力为1.0 MPa,pH6.5,表面流速5 m/s,过滤温度为70°C.     

氧载体对恩拉霉素发酵合成的影响

考察氧载体对恩拉霉素发酵合成的影响,筛选出适合恩拉霉素发酵的氧载体并优化其添加方式。首先以恩拉霉素含量和菌体浓度作为评价指标,考察不同氧载体对恩拉霉素发酵的影响,确定最合适的氧载体。之后采用单因素试验法考察最适氧载体添加时间和添加量,最后通过响应面法优化最适氧载体的添加方式。结果表明:正十六烷为最适氧载体,其最优添加量为0.72%,添加时间为44h。该条件下进行发酵可使生产菌菌体浓度较对照提高23%,恩拉霉素含量达到2 940.65mg/L,与理论预测值的相对误差在0.48%,较对照提高70%。因此,添加正十六烷能加强发酵液中氧传递,提高溶氧水平,从而促进菌体生长及恩拉霉素合成。     

纳他霉素发酵液的超滤膜提纯研究

采用钛合金膜超滤中试系统对纳他霉素发酵液进行除菌体试验研究。结果表明,钛合金膜对菌体的截留率超过99%,纳他霉素没有损失;无机钛合金膜除菌体的最佳操作条件为:系统压力为1.0MPa,pH6.5,表面流速5m/s,过滤温度为70℃。     

纳他霉素发酵工艺探讨

通过研究不同温度、不同pH、不同溶解氧、不同接种种龄及接种量对发酵生产纳他霉素的影响,发现生产纳他霉素较佳的发酵条件是:温度29℃,接种量2%,种龄26h,溶解氧30mg/L,pH随发酵的不同阶段而进行控制。     

植物激素对纳塔尔链霉菌发酵产纳他霉素的影响

以纳塔尔链霉菌（Streptomyces natalensis）为发酵菌种,在摇瓶培养基中添加植物激素,通过单因素试验初筛,获得能够有效提高纳他霉素的产量的植物激素;采用Box-Behnken试验设计建立数学模型,进行响应面分析优化确定最优组合。结果表明：吲哚乙酸、赤霉素和6-苄氨基嘌呤均能够有效提高纳他霉素的产量,在5.5 mg/L吲哚乙酸、14.8 mg/L赤霉素和20.5 mg/L 6-苄氨基嘌呤的条件下发酵120 h时,发酵液中纳他霉素的发酵产量可达到1.805 g/L,为对照组的1.63 倍。     

发酵液中纳他霉素的生物检测法

实验对管碟法测定纳他霉素的各项参数进行了研究并量化控制。首先从16种酵母菌中筛选出最利于检测的一种酵母菌,并确定了酵母菌浓度。纳他霉素含量与抑菌圈直径平方呈良好的线性关系,回归方程为y=0.0013x－1.3369(R2=0.9965)。利用此回归方程对纳他霉素进行检测,最小检测浓度为0.1g/L,最大检测浓度为1.5g/L。     

添加液态烷烃氧载体对法夫酵母发酵生产虾青素的影响

在法夫酵母培养过程中,氧的供给是细胞生长和虾青素合成的重要因素。试验中测得法夫酵母摇瓶培养时比耗氧速率(qp)为60mg(O2)/(g.h)(cell),临界溶氧浓度10%。试验还考察了多种液态烷烃作为氧载体对法夫酵母生长和类胡萝卜素合成的影响,发现正十六烷作为氧载体效果较好,其最佳条件是在法夫酵母接种同时添加10%(v/v)的正十六烷。在此条件下,细胞干重达到10.1g/L,类胡萝卜素产量13.2mg/L,分别比对照增加22%和43%。同时,单位细胞类胡萝卜素产量从1.11mg/g增加到1.31mg/g,合成能力提高了18%。     

纳他霉素对银杏果的抑菌作用及保鲜效果

探讨银杏果贮藏过程中霉变问题的解决途径;以银杏果主栽品种大佛指为试材,分离筛选出其在贮藏过程中的主要致霉菌,采用纳他霉素作为抑菌剂进行体外抑菌实验,并分别采用不同质量浓度纳他霉素喷涂处理银杏果,研究其在0 ℃冷藏过程中的生理生化及相关营养和贮藏品质的变化规律;250 mg/L纳他霉素对致霉菌便有明显的抑制作用,使用500 mg/L的纳他霉素处理银杏果,可有效抑制贮藏期间果实的呼吸强度,降低果实的细胞膜透性,维持较高的过氧化物酶和过氧化氢酶活性,保持较高的含水量和淀粉含量,较低的霉变率、萎缩率和石灰化指数。     

纳他霉素对西兰花的保鲜效果

研究纳他霉素处理对西兰花冷藏保鲜品质的影响。纳他霉素处理浓度分别为800 mg/L、1 200 mg/L,在(0±1)℃冷藏期间每10 d取样测定西兰花理化指标及营养成分。结果表明:与冷藏对照相比,纳他霉素处理对于延缓西兰花可溶性固形物含量、VC含量及叶绿素含量的下降均有明显效果,并可抑制西兰花贮藏期间的呼吸强度;纳他霉素处理可提高西兰花SOD的活性和降低PPO活性,延缓了细胞膜相对透性的升高。说明冷藏结合纳他霉素处理对西兰花的成熟衰老有抑制作用,其中经1 200 mg/L处理的西兰花保鲜效果较好。     

促进纳他霉素合成的真菌诱导子筛选及诱导条件优化

采用真菌诱导子提高纳他霉素的产量,通过初筛,获得具有正向调节作用的真菌诱导子;采用Box-Behnken试验设计建立数学模型,进行响应面分析优化,确定诱导条件。结果表明：黑曲霉代谢产物诱导子能够有效提高纳他霉素的产量;质量浓度为122μg/mL的黑曲霉代谢产物诱导子在纳他霉素发酵18.3h后加入,诱导78.5h时,发酵液中纳他霉素的发酵产量可达到2.89g/L,为空白对照组的1.68倍。