微生物发酵法制备大豆多肽的研究

对微生物发酵方法制备大豆多肽的发酵条件进行研究,以脱脂豆粕为原料,在其发酵过程中通过对各种条件进行控制,选择出最佳的调控方案,通过比较各种调控因素如底物浓度、pH值、温度、发酵周期对肽转化率的影响,选择出转化率相对较高的最佳发酵条件:底物浓度为10%、最适pH值为7.0、最佳发酵温度为36℃、发酵周期为30 h,肽比率可达79.33%。     

蛋白质水解物水解度的测定

利用茚三酮显色法及甲醛固定法对蛋白质的水解度进行测定并进行了比较,结果表明二法是一致的。蛋白质水解度的测定为蛋白质水解程度的控制提供了必需的手段。     

多酶分步水解法制备菜籽多肽工艺的研究

采用多种酶对菜籽蛋白进行分步水解制备菜籽多肽。以菜籽蛋白为原料,在水解温度、水解时间、pH值和酶添加量四个单因素实验的基础上,采用响应面法优化菜籽蛋白水解条件。结果表明,一次水解最优实验条件为反应温度55.5 ℃、水解时间90 min、反应pH 10.5、加酶量10 400 U/g,该条件下水解度为31.64%。使用复合风味蛋白酶进行二次水解,水解120 min时可有效脱除苦味,水解度达到38%以上。提高了菜籽多肽的提取率,得到了脱苦效果好的菜籽多肽。     

胶原水解度的测定

研究了一种新的制革废弃胶原水解程度的定量评价方法,即分别测定胶原在水解反应中断裂的肽键数和胶原中的总肽键数,通过计算两者间的比值得到胶原的水解度。试验结果表明:采用该方法可以准确、直观地表征胶原的水解程度;与茚三酮比色法相比,甲醛滴定法能够更准确地测定胶原水解产物中的氨基含量,因此更适合用于胶原水解度的测定。     

不同水解度下的大豆分离蛋白的结构表征

利用中性蛋白酶水解大豆分离蛋白(SPI),并通过荧光探针法、SGS-PAGE凝胶电泳及扫描电镜技术对不同水解度(DH)下的SPI的疏水性进行分析,且对其二级结构和微观结构变化进行表征。结果表明:随着水解度的增加,SPI的表面疏水性呈增长趋势。通过不同DH下制备的SPI的电泳分析,随着DH的增大,SPI被逐渐水解形成更多的低分子量多肽,且不同DH下的SPI的多肽与亚基分布相似,随着DH的增大,SPI的低分子量多肽含量先增大后降低,新增的聚集肽含量增多。不同DH下的SPI,皆呈单个球状蛋白分布,分布较为松散,每个球状蛋白上皆有亚基分布,大部分球蛋白球体表面呈塌陷状态,随SPI的DH增大,SPI的球蛋白表面塌陷越明显,且亚基未被解离。     

大豆分离蛋白的酶法水解研究

本试验主要从预处理温度、预处理时间、底物浓度、加酶量、酶解温度、酶解时间等方面系统研究了AS1·398中性蛋白酶对大豆分离蛋白水解的影响,并运用正交试验设计和方差分析得到水解最佳条件。     

热处理对大豆蛋白水解度的影响

以大豆分离蛋白为原料，配制成5％大豆分离蛋白溶液，使用碱性内切酶2．709对其进行酶法水解。研究了不同热处理温度、时间对大豆蛋白酶解液水解度的影响，实验结果表明，大豆分离蛋白经90℃、15min热处理，其水解度可达到20％以上。     

双酶分步水解法制备棉籽多肽的蛋白酶筛选

本研究利用6种蛋白酶对棉籽蛋白进行单酶和双酶组合水解,测定水解过程中棉籽蛋白的水解度,同时对酶解产物的多肽得率进行了分析比较。结果表明,为了高效制备棉籽多肽,可先用Alacalase水解蛋白酶对棉籽蛋白进行水解,再利用Flavourzyme风味蛋白酶继续酶解,最终产物的水解度可达到36.58%,多肽得率达到71.32%,相比单独应用Alcalase水解蛋白酶,水解度提高了91.32%,多肽得率提高5.88%。     

复合酶法水解小麦面筋蛋白的研究

小麦面筋蛋白由于其溶解性较差,限制了其应用,实验利用酶法水解能有效提高小麦面筋蛋白的溶解度。通过单因素实验及正交实验优化了碱性蛋白酶与中性蛋白酶复合水解小麦面筋蛋白的最佳工艺条件。实验结果表明:复合酶配比(碱性蛋白酶∶中性蛋白酶)为5∶5,水解温度为55℃,复合酶浓度为1.0%,底物浓度为5%,水解初始pH为8.0,水解时间为3.5h时面筋蛋白的水解度最高,水解度可达14.6%。      

高水解度大豆寡肽专用复合酶的配方优化

为提高大豆分离蛋白(SPI)的水解度,实现深度酶解,生产低分子质量寡肽,比较不同蛋白酶与不同配方的复合酶对SPI的水解能力,并采用响应面法对复合酶的组成进行优化。结果表明：不同蛋白酶对SPI的酶解能力不同,其中以碱性蛋白酶的水解度寡肽收率最高。多酶复合水解可以提高SPI的水解度与寡肽收率,其中以同时加入碱性蛋白酶、风味蛋白酶和中性蛋白酶进行水解时水解度最高。由此3种酶组成的复合酶的最佳组成是碱性蛋白酶39.6%、风味蛋白酶25.4%、中性蛋白酶35.0%,最适用量为SPI干质量的3%。以此复合酶在55℃、SPI质量浓度10g/100mL、自然pH值的条件下酶解6h,SPI的水解度可达27.2%,寡肽收率高达83%。     

玉米醇溶蛋白高水解度酶解制备短肽

以高水解度水解蛋白为目标,对酶解玉米醇溶蛋白制备短肽的工艺进行了研究。选择了碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶,采用均匀试验设计法对三种酶的酶解工艺进行了考察,同时还对复合酶水解、理化前处理技术的作用进行了探讨。实验结果对三种酶的酶解工艺条件进行了优化;明确了三种酶复合水解时,得到的水解度均显著高于单酶水解结果,且其中以"碱性蛋白酶+中性蛋白酶+胃蛋白酶"顺序的复合酶组合得到的水解度最高达(29.95±0.87)%;考察的加热、添加亚硫酸钠、超声等三种理化前处理技术,对玉米醇溶蛋白水解度没有明显的影响。总而言之,应用合适的蛋白酶及酶解方式,玉米醇溶蛋白水解制备短肽,可以达到较高的水解度。     

超声和Alcalase 酶复合处理水解大豆分离蛋白工艺研究

以大豆分离蛋白为底物,通过单因素试验和正交试验,确定超声和Alcalase 酶复合处理对大豆分离蛋白水解的最佳条件。结果表明,最佳水解条件为大豆分离蛋白质量分数5.0%、超声处理时间30min、加酶量5.0%、酶解pH8.0、酶解温度55℃、酶解时间4.0h,在此条件下,大豆分离蛋白水解度为12.21%。     

微波预处理对脱脂豆粕蛋白水解度的影响

为得到高水解度的脱脂豆粕蛋白酶解液,在相同酶解条件下,研究微波预处理对脱脂豆粕蛋白水解度的影响,并运用响应面法对微波预处理的功率、温度和持续时间进行优化。结果表明：微波预处理的最佳工艺条件为底物质量分数2%、功率414W、温度79.6℃、持续时间111s;而后经碱性蛋白酶Alcalase酶解水解度能达到30.46%,比未经预处理的样品水解度提高了18.45%,这说明微波处理是一种非常有效的酶解预处理手段。     

微生物液态发酵法生产大豆蛋白活性肽的研究

选育了1株能转化大豆肽的菌种LB—05,分别以豆粕、大豆分离蛋白、大豆组织蛋白为底物通过微生物30 h的发酵,其蛋白利用率分别为98.1%、97.9%和98.5%,肽含量分别达到87.6%、88.3%和89.2%,其适宜底物浓度为8%～10%,发酵pH值为6.8～7.0,发酵温度为36%。另外,对发酵液的后处理进行了研究,对7种絮凝剂的絮凝效果和过滤效果进行了试验,其中壳聚糖(CS)的絮凝效果较好,并得出壳聚糖优化后的絮凝工艺条件是:pH4.0,絮凝剂添加浓度150mg/L,温度35℃。     

蛋白质水解度的测定

介绍了一种新的测定蛋白质水解度的方法,该方法利用待测蛋白样品完全水解液做为茚三酮比色的标准样品测定蛋白质的水解度,并和常用的几种测定水解度的方法进行了比较,该种方法消除了由一种氨基酸做为对照样品所带来的测定误差,是一种简易行的测定水解度的方法。     

Alcalase水解大豆蛋白制备大豆蛋白寡肽的研究

研究了Alcalase水解大豆蛋白制备大豆蛋白寡肽时影响水解效果的各种因素,在此基础上通过正交试验确定了Alcalase水解大豆蛋白的水解条件:温度70 ℃,底物浓度60 g/L,Alcalase酶与底物比为20 μL/g,pH 7.5,水解时间为4 h.在此水解条件下,水解液水解度达到了24.1 %.     

动物蛋白酶解研究（Ⅰ）

本文主要目的是以美拉德（Maillard）反应产物（MRPs)的风味为判断依据，以水解度（DH）为动物蛋白酶解液－Maillard反应底物之一的特征性指标，根据MRPs的风味确定动物蛋白水解液的最佳DH或DH范围。