小肠肠炎耶尔森菌天然抑菌剂的快速筛选

在96孔板中培养后利用酶标仪测定了天然酚类物质香兰素、异丁香酚、丁香酚、麝香草酚、愈创木酚存在下小肠肠炎耶尔森菌的光密度（OD）值,并绘制了相应的OD-t生长曲线,该测定方法具有快速、高通量、准确的优点。受试菌生长曲线表明:一定浓度的天然酚类物质对受试菌种有不同程度的抑制作用,其大小顺序为:异丁香酚>麝香草酚>丁香酚>香兰素>愈创木酚,对受试菌的最低抑菌浓度分别为660、1180、1280、1380、2040mg/L。      

核酸试纸条法检测食品中小肠结肠炎耶尔森菌

建立一种基于聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)试纸条技术的快速检测小肠结肠炎耶尔森菌的检测方法。对26株小肠结肠炎耶尔森氏菌标准菌株及26株其他菌属标准菌株进行特异性试验,利用纯菌稀释及样品添加进行灵敏度试验。利用建立方法对市场购买的食品进行筛查并与国标方法进行比较。建立的方法 DNA检测灵敏度达到10~(-3)μg/mL,样品加菌试验检测灵敏度可达100 CFU/25 g。     

小肠结肠炎耶尔森氏菌PCR反应体系的快速优化

影响PCR反应结果的因素较为复杂．为了快速、准确地得到PCR反应的最适条件，避免假阴性或假阳性结果的发生，在研究小肠结肠炎耶尔森氏菌PCR反应体系优化中，采用了正交试验法．通过设计两组正交试验，准确地找出了检测小肠结肠炎耶尔森氏菌的最佳扩增条件，结果表明该方法高效快速，是PCR反应体系优化中值得推广使用的方法。     

食品中小肠结肠炎耶尔森氏菌分离鉴定方法研究进展

小肠结肠炎耶尔森氏菌是一种具有嗜冷特性的食源性致病菌,广泛存在于食品中,对人们健康构成较大威胁。建立高效的分离鉴定技术对该菌进行监控是相关食品安全的重要保障。本文对小肠结肠炎耶尔森氏菌的分离过程,包括分离前增菌、分离前碱处理和平板分离,以及传统生化和血清型鉴定、分子生物学鉴定、免疫学鉴定和谱学鉴定方法等方面的研究进展进行了阐述。小肠结肠炎耶尔森氏菌的深入检测研究不仅有赖于现有分离鉴定方法的不断优化,还需要开发更多新型检测技术应用于菌株溯源分析、流行病学和耐药性等方面的研究,以期为该类菌株资源数据库的建立和整理,预防相关耶尔森氏菌疾病的爆发提供良好的保障。     

小肠结肠炎耶尔森菌前增菌方式的选择

小肠结肠炎耶尔森菌作为一种食源性致病菌逐渐引起了关注。本实验利用胰蛋白胨培养基、改良磷酸盐缓冲液和氯苯酚-替卡西林-氯酸钾培养基对小肠结肠炎耶尔森菌前增菌,并采用实时荧光PCR方法对增菌效果进行检验。结果表明：在纯菌体系中胰蛋白胨培养基对小肠结肠炎耶尔森菌的增菌作用优于其他两种培养基,并且增菌24h后即可检测到该菌。在混菌体系中小肠结肠炎耶尔森菌经过改良磷酸盐缓冲液增菌后灵敏性最高,并且增菌时间可缩短至8h。因此在实际检测中可采用改良磷酸盐缓冲液对该菌进行增菌检测。     

小肠结肠炎耶尔森氏菌分子生物学检测技术研究进展

小肠结肠炎耶尔森氏菌（Yersinia enterocolitica,Y. enterocolitica）是一种重要的食源性致病菌,可以引起人类的耶尔森氏菌病,该病的典型症状为腹泻、回肠炎和肠系膜淋巴结炎等。由于该菌在特定食品（如肉与肉制品）中的检出率较高,因此对食品安全构成一定的威胁。就现有的检测方法而言,分离纯化和生理生化鉴定方法耗时且难以检测出复杂食品基质中低浓度的小肠结肠炎耶尔森氏菌。所以,研发能够快速、准确地检测食品中小肠结肠炎耶尔森氏菌的鉴别方法迫在眉睫。该研究将小肠结肠炎耶尔森氏菌现有的分子生物学检测方法分为两大类：变温扩增技术和等温扩增技术进行相关研究最新进展的总结,并对其优缺点和发展方向进行讨论,以期为小肠结肠炎耶尔森氏菌快速检测方法研究提供参考。     

鲜肉中小肠结肠炎耶尔森菌的半定量风险评估

目的:分析南京市售鲜肉中小肠结肠炎耶尔森菌的风险程度。方法:将国内外文献报道及市场调查数据的统计分析相结合,运用经典的半定量风险评估软件"Risk Ranger"进行风险分级。结果:南京市售猪肉和牛肉中小肠结肠炎耶尔森菌的风险评分分别为31和24,每人每天因食用污染该菌的鲜肉造成食物中毒的概率分别为3.62×10-9,3.12×10-10,前者为后者风险的11.6倍。通过进一步研究发现,加工后采取有效的控制体系,均使两者的风险均降低到10%。结论:南京市售牛肉中小肠结肠炎耶尔森菌的风险程度较低,而市售猪肉中已接近中等程度,需做好预防措施,加强监管。     

致病性小肠结肠炎耶尔森氏菌分离鉴定及三重PCR检测方法的建立

为鉴定导致患病鲫鱼肛门红肿、腹部有出血点症状的病原菌,并建立一种快速检测该病原菌的方法.本研究从患病鲫鱼中分离了病原菌,采用形态学、理化特性分析及16SrDNA序列分析方法鉴定菌株.采用PCR扩增法检测该菌毒力基因,琼脂纸片扩散法检测该菌株的耐药性,致病性能验证试验检测其致病性.针对该菌ail基因、inv基因和intB...     

不同厂家小肠结肠炎耶尔森氏菌微量生化鉴定试剂盒的比对

评价本实验室研制的小肠结肠炎耶尔森氏菌微量生化鉴定试剂盒（简称EasyID）的使用性能。用36株菌（包括小肠结肠炎耶尔森氏菌2株标准株,19株分离株;弗氏耶尔森氏菌5株分离株;中间型耶尔森氏菌5株分离株;克氏耶尔森氏菌5株分离株）,测试EasyID,传统液态生化管（简称HKM）以及国内其他品牌（简称KIT）的三种鉴定试剂盒。结果表明：36株测试菌株的鉴定结果,EasyID、KIT两种干制鉴定试剂盒与HKM传统液态鉴定试剂盒鉴定结果相比总体符合率分别为99.69%、98.15%,EasyID相比KIT,与HKM的符合率更高;EasyID、HKM、KIT三种鉴定试剂盒与标准要求相比总体符合率分别为99.37%、99.07%、97.83%,EasyID符合率最高,HKM其次,KIT略低。结论：EasyID小肠结肠炎耶尔森氏菌微量生化鉴定试剂盒的可靠性优于KIT,与HKM相当。在使用方便性上,采用一步加样的技术的EasyID优于HKM和KIT。     

Antimicrobial activity of binary combinations of natural and synthetic phenolic antioxidants against Enterococcus faecalis

This study investigated the antimicrobial activity of 3 natural (thymol, carvacrol, and gallic acid) and 2 synthetic [butylated hydroxyanisole (BHA) and octyl gallate] phenolic compounds, individually and in binary combinations, on 4 dairy isolates of Enterococcus faecalis with different virulence factors (β-hemolytic, gelatinase, or trypsin activities; acquired resistance to erythromycin or tetracycline; and natural resistance to gentamicin). A checkerboard technique and a microdilution standardized method were used. All compounds individually tested exhibited antimicrobial activity against E. faecalis, with minimal inhibitory concentrations (MIC) ranging from 30 μg/mL (octyl gallate) to 3,150 μg/mL (gallic acid), although no significant differences were detected among strains to each phenolic compound. Carvacrol in combination with thymol or gallic acid, and gallic acid combined with octyl gallate showed partial synergistic inhibition of all E. faecalis strains. The most effective combinations were thymol + carvacrol and gallic acid + octyl gallate, as the MIC for each of these compounds was reduced by 67 to 75% compared with their respective individual MIC. These results highlight the possibility of using combinations of these phenolic compounds to inhibit the growth of potential virulent or spoilage E. faecalis strains by reducing the total amount of additives used in dairy foods.     

致病性小肠结肠炎耶尔森氏菌实时荧光RPA检测方法的建立

本研究建立了致病性小肠结肠炎耶尔森氏菌的实时荧光重组酶聚合酶扩增(real-timeRecombinasePolymerase Amplification,real-time RPA)检测方法。根据致病性小肠结肠炎耶尔森氏菌黏附侵袭位点ail致病基因序列设计特异性引物和exo探针,在37℃恒温下20 min内即可完成检测,方法特异性高,对目的DNA的检测限为0.1 ng/μL。在稳定性实验中,对10 ng/μL、0.1ng/μL、0.01 ng/μL、0.001 ng/μL的目的DNA各进行8个平行的测试,0.1 ng/μL及以上浓度的DNA均可稳定检出;当DNA为0.1 ng/μL时,8个平行的阈值时间和最大荧光值的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)最低且≤7.06%。致病性小肠结肠炎耶尔森氏菌在奶粉和牛肉的人工污染样品中初始污染量为3 CFU/25 g时,培养20 h后,可用本方法检出。对20份各种类实际样品进行检测,本方法与国标方法结果一致。本方法对致病性小肠结肠炎耶尔森氏菌的常温现场快速定性检测具有重要意义。