透膜法生产L-天冬氨酸的工艺研究

为提高天冬氨酸的转化效率,对大肠杆菌发酵产酶条件和发酵转化液的酶促反应条件进行了优化,结果表明,在大肠杆菌在10 L发酵罐上溶氧维持在25%,发酵周期为8 h,发酵3 h时添加0.2%的吐温-60的条件下,天冬氨酸酶产率最高。大肠杆菌所产天冬氨酸酶为胞内酶,因此,采用表面活性剂、有机溶剂及超声波破碎法对大肠杆菌的细胞膜透性进行处理,结果表明:反应结束后发酵转化液用0.5%的甲苯处理1 h后进行底物转化,转化效果最好。在此条件下优化了酶促反应温度和pH,结果表明:温度为45℃,pH为8.5时,发酵转化液对底物的转化效果最佳。在上述条件下,10 mL发酵转化液转化90 mL质量浓度为200 g/L的富马酸底物时,转化周期在6 h以内,底物转化效率大于99%。     

双酶连续催化生物合成D-丙氨酸

建立了天冬氨酸消旋酶和D-氨基酸转氨酶双酶连续催化制备D-丙氨酸的方法。利用天冬氨酸消旋酶全细胞催化L-天冬氨酸消旋得到DL-天冬氨酸,离心去除天冬氨酸消旋酶全细胞后升温灭活残留的游离天冬氨酸消旋酶,再加入经镍柱亲和纯化的D-氨基酸转氨酶酶液,催化D-天冬氨酸(D-Asp)和丙酮酸(PA)经转氨反应生成D-丙氨酸。经单因素实验得到天冬氨酸消旋酶最佳催化条件为:反应温度40℃,0.2 mol/L磷酸钾缓冲溶液(pH=7.0),底物L-天冬氨酸质量浓度为100 g/L。D-氨基酸转氨酶最佳催化条件为:反应温度42℃,0.2 mol/L磷酸钾缓冲液(pH=7.0),4 mmol/L磷酸吡哆醛,DL-天冬氨酸质量浓度为50 g/L,底物n(PA)∶n(D-Asp)=1∶10。转化产物经等电点结晶和阳离子树脂分离得到D-丙氨酸。在该条件下,D-天冬氨酸转化率达94%,D-丙氨酸收率为84%,对映体过量值(ee值)=98%。     

酶法分离制备γ-氨基丁酸和L-天冬氨酸

以L-谷氨酸(L-G lu)和L-天冬氨酸(L-Asp)两种混合酸性氨基酸〔m(L-G lu)∶m(L-Asp)=1∶1〕为原料,利用大肠杆菌菌体内脱羧酶对L-谷氨酸的专一脱羧作用,酶法分离制备了γ-氨基丁酸和L-天冬氨酸。考察了转化体系温度、pH等影响L-谷氨酸脱羧酶活力的主要因素,实验表明,最佳工艺条件为:温度35℃,转化体系pH=5.0,ρ(菌体)=6 g/L,ρ(Tween80)=0.15 g/L,菌龄16 h,ρ(底物)=60 g/L。L-谷氨酸脱羧酶在最适转化条件下比酶活高达15 036 U。1 g湿菌体可重复使用3次共转化L-谷氨酸和L-天冬氨酸混合物30 g,其中L-谷氨酸完全转化为γ-氨基丁酸。γ-氨基丁酸及L-天冬氨酸的总收率可分别达到理论收率的88%和90%。     

双酶偶联生物合成L-酪氨酸

多酶偶联催化是酶法制备手性药物中间体的重要方法之一。该文采用双酶偶联体系,利用天冬氨酸转氨酶全细胞催化L-天冬氨酸转氨至苯丙酮酸,生成L-苯丙氨酸,同时得到中间产物丙酮酸;反应体系中的酪氨酸酚裂解酶全细胞催化丙酮酸、苯酚和氨酶法合成L-酪氨酸。经考察确定了双酶偶联反应的最佳条件为:温度40℃,pH=8.5,底物苯丙酮酸质量浓度为25 g/L,苯丙酮酸与L-天冬氨酸摩尔比1∶1.2,天冬氨酸转氨酶与酪氨酸酚裂解酶细胞质量比1∶1,4 mmol/L PLP,0.1 g/L吐温80。30 g/L的氯化铵对双酶偶联反应有促进作用。双菌双酶偶联生物法合成L-酪氨酸,充分利用了反应副产物丙酮酸得到附加值较高的产品,对资源合理利用及绿色合成工艺具有参考意义。     

天冬氨酸转氨酶法制备L-4-氟苯丙氨酸的研究

利用重组大肠杆菌(E.coliBL21-pET/aspC)所产天冬氨酸转氨酶立体选择性地催化转化对氟苯丙酮酸(FPPA)生成L-4-氟苯丙氨酸(FPhe)。优化了转化条件,实验结果表明,最佳转化条件:温度37℃,pH值范围5.0—8.0,菌体用量为菌体与FPPA质量浓度比为5.5(菌龄8 h),吐温80的质量分数为0.6%,FPPA的质量浓度7.08 g/L,L-天冬氨酸与FPPA摩尔比为1.6。在最适条件下,经过12 h酶转化反应基本完成,FPPA转化率达到90%以上,FPhe得率达到85%以上,为FPhe的制备提供了一种新方法。     

重组表达天冬氨酸-β-脱羧酶及其酶学性质

利用p ETDuet-1为载体在宿主细胞E.coli BL21(DE3)中重组表达了粪产碱菌(Alcaligenes faecalis)来源的天冬氨酸-β-脱羧酶(Asd),研究了其酶学性质,考察了p H、p H稳定性、温度、热稳定性、底物浓度对酶活的影响。结果表明,天冬氨酸-β-脱羧酶重组表达成功;最适反应温度和p H分别为45℃和6.0;动力学常数Km和Vmax分别为0.72 mmol/L和10.52 mol/(L·min·g)。0.1 g菌体细胞在10 m L 0.2 mol/L磷酸缓冲溶液中催化2.0 g L-天冬氨酸,40℃,p H=6.0反应15 h,L-天冬氨酸的摩尔转化率达到98.6%。     

天冬氨酸酶基因工程菌固定化细胞制备L-天冬氨酸合成条件优化

以反丁烯二酸和氨水为原料,采用天冬氨酸酶基因工程菌固定化细胞生物催化法合成L-天冬氨酸。通过响应面法考察反丁烯二酸浓度、温度、p H对合成L-天冬氨酸的影响。结果表明,固定化天冬氨酸酶基因工程菌合成L-天冬氨酸最佳条件为:底物反丁烯二酸的质量浓度为300 g/L,反应温度为37℃,底物p H为7.5,L-天冬氨酸的产率为96.7%。固定化细胞可连续使用10批次。通过电镜观察发现天冬氨酸酶基因工程菌均匀分布于载体,天冬氨酸酶基因工程菌固定化细胞具有良好的稳定性。     

游离酶法生产L-天冬氨酸的工艺研究

以大肠杆菌ATCC11303培养液作酶源，采用游离酶法由富马酸转氨生成L-天冬氨酸。取培养26h左右的培养液作酶源，37℃酸反应6d，可转化富马酸9kg／L。研究发现高浓度底物对酶反应有抑制作用。     

內消旋酒石酸的合成研究

L（＋）-酒石酸在强碱条件下加热,分子发生内部构型的转变生成内消旋酒石酸。本文研究了反应时间、温度及pH值对L（＋）-酒石酸转化生成内消旋酒石酸的影响,发现反应的最佳时间2 h,反应温度为118℃,pH值为5左右为转化反应的最佳条件。     

组成型天冬氨酸转氨酶基因工程菌的构建与高效表达

天冬氨酸转氨酶AspAT是苯丙酮酸转氨制备L-苯丙氨酸的关键酶. 本研究将大肠杆菌中天冬氨酸转氨酶基因aspC克隆到3种不同质粒中,构建组成型表达质粒pUC/P-aspC, pSE/P-aspC, pET/P-aspC,并分别转化至6种常用的大肠杆菌宿主中. 通过对18种重组子的生长及产酶情况的分析,比较了各种重组子生长压力、质粒稳定性与表达酶活的关系,并经SDS-PAGE电泳分析AspAT的表达量,筛选出高产AspAT的重组子BL21(pET/P-aspC),以该工程菌发酵液直接作为酶液,以天冬氨酸和苯丙酮酸(20 g/L)为底物,发酵液与底物以1:3的体积比转化生成L-苯丙氨酸16.2 g/L,转化率高达80.1%. 该体系表达无需诱导,转化无需添加辅酶PLP,展现了良好的产业化前景.     

绿色阻垢剂的研究进展

介绍了具有较高阻垢活性、良好生物降解性、无毒性的被誉为绿色阻垢剂的类型和性能 ;阐述了该类阻垢剂在国内外研究的现状及发展的方向 ;比较了不同阻垢剂在相同条件下的不同阻垢效果 ;并分析了该类阻垢剂的阻垢作用机理及具有最佳阻垢作用的相对分子质量的范围 .     

电除尘器不同电场飞灰含碳量分布规律的研究

对部分电厂电除尘器不同电场飞灰的粒度分布、含碳量和比电阻特性的实测及综合分析, 发现电除尘器各分电场飞灰的含碳量呈“正向”或“逆向”分布, 对此, 从机理方向作了初步揭示。     

C80高强粉煤灰混凝土及其应用

本文研究了粉煤灰替代部分水泥配制Ｃ８０砼的压蒸工艺技术，结果表明，采用此技术可以稳定生产Ｃ８０混凝土和高强预应力混凝土管桩（简称ＰＨＣ桩）。     

我国粉煤灰利用研究的进展

评述了近几年来粉煤灰基础研究的有关进展，介绍了粉煤灰在高性能混凝土（ＨＰＣ）、新型胶凝材料、建筑制品方面的应用及粉煤灰的特殊用途，在此基础上，提出了今后利用粉煤灰的意见     

冶金厂含铬废水还原吸附治理

针对冶金厂排放的黄绿色含铬废水和以硫酸亚铁和改性膨润土处理 ,找出其最佳的还原吸附条件并对吸附机理作了探讨。试验结果 :铬和色度去除近 10 0 % ,废水治理后可考虑作为工业用水     

结构因素对粉煤灰活性激发的影响

从粉煤灰玻璃体结构入手，分析其活性特征；通过对机械细磨、水热合成、碱性激发等激活机理的分析，阐明结构对粉煤灰火山灰活性的决定性影响     

弹性支承正交异性层合板位移计算的刚度调整法

为计算弹性支承正交异性层合板的位移，提出了刚度调整法。并引用了柔度法。文中含有２种方法得到的计算结果。实验验证了计算结果的正确性。刚度调整法具有简便和适用性广的优点。     

极大螺旋藻藻蓝蛋白的提取与纯化

将极大螺旋藻用高渗液低温浸泡、经（ＮＨ４）２ＳＯ４沉淀、透析后,经过改进的羟基磷灰石柱层析２次纯化得到试剂级的藻蓝蛋白。比较了干藻粉在不同高渗液的渗出液条件下藻蓝蛋白的得率和纯度。建立了低温浸泡时ＰＣ得率与纯度和时间的关系。提出了一种简易可行而高效的羟基磷灰尘石制法。     

粉煤灰加气砼隔墙板的开发及性能研究

本文介绍以粉煤灰为主要原材料的加气混凝土隔墙板的成型机理、生产工艺和物理力学性能，并结合实际，阐述了在施工应用中其所独有的特点     

PE/PS合金的研究进展

综述ＰＥ／ＰＳ合金相容剂的合成方法，包括接枝共聚法、嵌段共聚法和反应性增容法。使用相容剂后，ＰＥ／ＰＳ合金的机械性能和相容性能大大提高。