酶法水解滑菇蛋白制备抗氧化肽的工艺优化

本文研究了酶法水解滑菇蛋白制备抗氧化肽的工艺条件,通过水解度与羟自由基(·OH)清除率来综合评价水解产物的抗氧化能力。以·OH清除率为指标,从碱性蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶5种蛋白酶中筛选最适酶。在单因素实验研究酶浓度、底物浓度与水解时间对酶解产物·OH清除率和水解度影响的基础上,通过L_9(4~3)正交实验对水解工艺进行优化。结果得出,碱性蛋白酶活力高于其他4种蛋白酶,能使蛋白质充分水解,正交实验各因素对水解产物·OH清除率的影响程度依次为底物浓度酶浓度水解时间。其中,碱性蛋白酶的最佳水解工艺条件为:底物浓度3.0%、酶浓度3500 U/g、p H9.0、温度55℃、水解时间3.5 h。在此条件下,水解产物的·OH清除率可达82.7%,水解度为23.1%。碱性蛋白酶水解滑菇蛋白制备抗氧化肽的工艺可行,为滑菇蛋白高附加值产品的开发提供技术参考。     

响应面法优化秋刀鱼酶解制备抗氧化活性肽的工艺

采用酶解法从秋刀鱼肌肉中提取抗氧化活性肽,以水解度(DH)、TCA-可溶性肽含量、DPPH自由基清除率、Fe3+还原力、·OH清除率以及O2?·清除率为指标,从六种商业用酶中(中性蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、胰蛋白酶)筛选出最适蛋白酶.以料液比、酶添加量、酶解时间、温度、pH五个因素进行单因...     

超声波预处理对鹰嘴豆蛋白制备抗氧化肽的影响

采用超声波对鹰嘴豆蛋白进行预处理,研究超声波参数对鹰嘴豆蛋白抗氧化肽活性的影响规律。以还原力、·OH清除率和水解度为指标,设计Box-Behnken试验,考察超声波功率、超声时间、超声温度对鹰嘴豆蛋白酶解产物水解度及抗氧化活性的影响。结果表明,超声波预处理优化工艺参数为超声波功率750W,超声时间28min,超声温度48℃;鹰嘴豆酶解产物的·OH清除率、还原力、水解度分别为95.97%、1.73、25.04%,与理论预测值95.20%、1.75、25.41%误差均在±1%以内,表明采用响应面方法(RSM)优化的工艺条件参数准确、可靠,所建立的预测模型在实践中可行。与未经超声波预处理的比较,·OH的半清除质量浓度IC50值从10.58g/L降到8.81g/L;当多肽质量浓度为12g/L时,还原力从1.46增加到2.16;水解度从20.03%增加到25.04%。超声波预处理能提高鹰嘴豆蛋白的酶解效率和抗氧化活性。     

超声波辅助酶解玉米胚芽脱脂粕预处理条件的优化

为进一步提高玉米胚芽脱脂粕的酶解效率,以玉米胚芽粕为原料,酶解前期对其进行超声波预处理,然后在碱性蛋白酶和风味蛋白酶最适条件下分步酶解,并以其水解度、可溶性蛋白含量和抗氧化活性为指标,通过选取不同的超声功率、超声时间和超声温度,并采取单因素和正交试验比较酶解过程中的变化趋势,选择最优预处理条件。试验结果表明:在55℃下,以214 W的超声功率酶解玉米胚芽脱脂粕30min后,玉米胚芽脱脂粕水解物的水解度、可溶性蛋白含量、抗氧化活性分别为36.58%、21.06mg/mL、514.67U/mL。     

磁化水结合超声波辅助Alcalase 2.4L FG酶水解绿豆蛋白的工艺研究

利用Alcalase 2.4L FG酶制备绿豆肽时对绿豆蛋白进行磁化水溶解、超声波预处理。以可溶性蛋白含量为检测指标,研究磁化水、超声波处理时间、超声波功率、超声波处理温度对绿豆可溶性蛋白含量的影响,进而以水解度为指标,研究底物浓度、温度、酶浓度和p H对Alcalase 2.4L FG酶水解效果的影响,Laemmli-SDS-PAGE电泳表征水解肽的分子量分布。结果表明:磁化水溶解可提高绿豆可溶性蛋白含量,超声波预处理的最佳工艺参数为:45℃、20min、225W;Alcalase 2.4L FG碱性蛋白酶水解的最适条件为:底物浓度5.27%、加酶量3.01%、p H8.5、温度60℃。Laemmli-SDS-PAGE分析结果显示,该方法得到的水解肽分子量分布范围广,6.5KDa以下含量较高,水解效果较好。     

2种蛋白酶水解牦牛血液蛋白工艺优化

目的 以牦牛血为原料，在碱性蛋白酶水解基础上，加入风味蛋白酶建立复酶分步水解牦牛血液蛋白工艺。方法 以蛋白水解率为指标，运用单因素与正交试验获得碱性蛋白酶水解工艺，在此基础上采用四因素三水平正交试验优化复酶水解pH、水解温度、酶浓度、水解时间，获得碱性蛋白酶与风味蛋白酶分步水解工艺。结果 复酶工艺为在底物浓度1:6 g/mL、最适pH9、最适温度55 ℃、1.00 %的碱性蛋白酶水解1 h后，调节pH到7，添加0.75 %的风味蛋白酶继续水解5 h，可获得最高蛋白水解率为30.77±0.18 %。结论 对研究酶水解牦牛血制备高附加值产品具有重要参考作用。     

不同酶解法水解黑龙江小麦麦胚蛋白的抗氧化功能比较研究

通过采用四种不同蛋白酶对麦胚蛋白分别进行单酶水解、双酶同步水解和分步水解,以水解产物的水解度和抗氧化性为指标,比较研究麦胚蛋白的酶解方法与水解物的抗氧化功能的关系。结果表明：单酶水解时碱性蛋白酶的水解物抗氧化效果最好,DPPH 自由基清除率达到39.74%;双酶分步水解的效果优于双酶同步水解,其中先加碱性蛋白酶后加木瓜蛋白酶效果最好,DPPH 自由基清除率达到45.36%。因此选择先加碱性蛋白酶后加木瓜蛋白酶作为水解麦胚蛋白最佳工艺。     

酶法水解麦胚蛋白及其产物的抗氧化活性研究

选择碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胰酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶5种蛋白酶对麦胚蛋白进行水解,并考察其水解产物的抗氧化活性。结果表明,中性蛋白酶为制备麦胚抗氧化肽的最适蛋白酶,其最佳水解条件为:底物质量分数4%,酶添加量6 000U/g,酶解温度50℃,pH值7.5,水解至270min时抗氧化活性最大。     

扁杏仁抗氧化肽的制取工艺研究

研究了扁杏仁抗氧化肽的酶解制备工艺及其体外抗氧化活性。以羟基自由基的清除率和水解度为考察指标,用响应面分析法研究酶用量、底物浓度、温度和p H对扁杏仁抗氧化活性肽酶解工艺的影响。得出优化后的酶解条件为:碱性蛋白酶-风味蛋白酶的复合酶用量6725 U/g(碱性蛋白酶为3645 U/g,风味蛋白酶为2690 U/g)、底物质量分数为3%、温度60℃、p H8.28,在该条件下制备的扁杏仁抗氧化活性肽对羟基自由基的清除率和水解度分别为84.18%和20.87%。     

羊血浆蛋白抗氧化肽酶法制备与工艺优化

以羊血浆蛋白为原料,采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶、糜蛋白酶7种蛋白酶进行酶解,以酶解物的总抗氧化能力和水解度为评价指标,确定最佳的蛋白酶;采用单因素试验方法和正交试验方法对温度、pH和酶解时间等因素进行优化;采用Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳分析羊血浆蛋白抗氧化肽分子量分布。结果表明,碱性蛋白酶酶解羊血浆蛋白过程中,其酶解物的总抗氧化能力均显著高于其他6种蛋白酶,水解度仅次于风味蛋白酶,显著高于其他5种蛋白酶(p0.05);影响碱性蛋白酶酶解羊血浆蛋白获得抗氧化肽的因素主次顺序为温度酶解时间pH;结论:碱性蛋白酶是制备羊血浆蛋白抗氧化肽的最佳蛋白酶,碱性蛋白酶酶解羊血浆蛋白获得羊血浆蛋白抗氧化肽的最佳工艺条件为酶解6 h,温度55℃,pH11,且其组成复杂,由多种小分子肽组成。     

小麦蛋白双酶酶解制备高抗氧化性小麦肽研究

小麦肽是小麦蛋白的主要酶解产物,抗氧化性是小麦肽的主要功能特性。为制备高抗氧化性小麦肽,选择碱性蛋白酶和风味蛋白酶分步酶解方式,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除率、超氧阴离子自由基(O2-·)清除率、羟自由基(·OH)清除率等为指标,采用响应面法优化两种酶的最佳酶解工艺参数,并对最终酶解物进行超滤分级分离。结果表明,高抗氧化性小麦肽制备的最佳工艺参数:第1步碱性蛋白酶在底物含量11.2%、酶含量2 200 U/g、pH 8.5、温度55℃条件下酶解4.3 h;第2步风味蛋白酶在酶含量1 070 U/g、pH6.5、温度50℃条件下酶解2.2 h。最终酶解物DPPH自由基清除率为75.36%,O2-·清除率为74.51%,·OH清除率为76.29%,其中分子质量小于1 000 u组分自由基清除率最高。研究结果说明小麦蛋白酶解物具有良好的抗氧化活性,这可为小麦蛋白的深加工利用提供理论参考。     

鲢鱼皮抗氧化肽水解用酶的筛选研究

采用鲢鱼鱼皮为原料提取明胶,研究了碱性蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶水解鲢鱼皮明胶的进程特性,比较了4种蛋白酶水解物对O_2~-·、·OH清除率和脂质氧化抑制率的影响。结果表明碱性蛋白酶是制备鲢鱼鱼皮抗氧化肽的最适水解酶,且其最佳酶解时间为3 h,得到的酶解物对O_2~-·和·OH清除率分别为(68.51±2.94)%、(67.10±1.12)%,脂质氧化抑制率为(47.28±1.07)%,其相对分子质量小于1000的组分所占比例达到51%。为鲢鱼皮的开发利用及其抗氧化肽的制备提供了参考。     

鸭蛋清蛋白多肽体外抗氧化活性的研究

对经"蛋清水解专用蛋白酶-碱性蛋白酶"和"碱性蛋白酶-胰蛋白酶"双酶分步酶解鸭蛋清蛋白得到的多肽的抗氧化活性进行了研究。结果表明,当"蛋清水解专用蛋白酶-碱性蛋白酶"酶解蛋清蛋白的水解度为21%时,多肽的抗氧化活性最高,其对二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)、羟基自由基(·OH)、超氧阴离子(O2-·)的清除率和对大豆卵磷脂过氧化作用的抑制率分别为75.76%、84.17%、72.73%和47.59%;当"碱性蛋白酶-胰蛋白酶"酶解蛋清蛋白的水解度为15%时,多肽的抗氧化活性最高,其对DPPH·、·OH、O2-·的清除率和对大豆卵磷脂过氧化作用的抑制率分别为75.15%、93.84%、58%和40.51%。产物肽的分子量均分布在小于5300D的范围内。     

中性蛋白酶水解螺旋藻制备抗氧化肽的工艺研究

试验研究了采用中性蛋白酶水解螺旋藻制备抗氧化性肽的最佳工艺。将螺旋藻破壁离心后,用中性蛋白酶水解,以·OH清除率、DPPH·清除率和总还原力为评价指标,在单因素试验基础上,进行了正交试验,确定了最佳酶解工艺条件。试验结果表明,中性蛋白酶水解螺旋藻制备抗氧化肽的最佳工艺条件为:酶解温度为60℃、[E]/[S]为3%、p H为7.3,时间为4 h。此条件下螺旋藻中性蛋白酶的水解物的·OH的清除率是92.790%、DPPH·的清除率为18.941%,代表总还原力大小的吸光度为1.507。     

响应面优化紫花芸豆蛋白水解及多肽抗氧化研究

研究碱性蛋白酶水解紫花芸豆蛋白的工艺条件及其水解产物的抗氧化特性分析。采用响应面分析法,以水解度为响应值,对碱性蛋白酶水解紫花芸豆蛋白工艺条件中的温度、酶添加量、p H值和水解时间进行优化。研究结果表明:最佳水解工艺条件为温度62℃、酶添加量7.4%、p H 9.2、水解时间3.6 h,此时水解度达到36.5%。此条件下制得的紫花芸豆肽具有显著的羟自由基和超氧自由基清除能力,分别在水解时间为3.0 h、3.5 h时,对羟自由基和超氧自由基清除能力达到最高为28.2%、26.9%,综合评价,当水解时间为3.0 h作为制备抗氧化肽的最佳水解时间。     

响应面优化碎米蛋白水解及多肽抗氧化研究

为研究碎米蛋白水解工艺条件及其水解产物的抗氧化特性,实验以碎米为原料,以水解度为指标,筛选最适酶解大米蛋白的酶,在单因素的基础上以温度、底物质量分数、酶添加量、pH为响应因子,以碎米蛋白的水解度为响应值,采用Design-Expert 8.0.6.1软件对水解工艺进行优化,并对米蛋白肽的抗氧化活性进行研究。结果表明:碱性蛋白酶是生产米蛋白肽的最适合酶类;碎米蛋白最佳水解工艺为:温度63.7℃、底物质量分数4.4%、酶添加量6.8%、pH为8.5,水解度预测值为24.56%,得到水解度的实际值为25.2%。此条件下得到的碎米蛋白肽具有显著的羟自由基和超氧自由基清除能力,在水解180min、210min时羟自由基和超氧自由基清除率出现最高值为28%、33%,因此,水解180min为制备抗氧化肽的最佳时间。     

不同酶对藜麦蛋白肽制备的影响及其抗氧化活性研究

本实验以藜麦蛋白为原料,采用碱性蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶分别对藜麦蛋白进行水解,制备藜麦蛋白肽。通过单因素实验对五种酶水解制备的藜麦蛋白肽以蛋白水解度、DPPH自由基清除能力、·OH自由基清除能力、ABTS+自由基清除能力、·O2-自由基清除能力为测定指标,研究五种蛋白酶对藜麦蛋白的水解能力和抗氧化活性影响,选出效果相对较佳的酶水解工艺。综合各指标的结果表明,碱性蛋白酶和复合蛋白酶水解能力较强,制备的藜麦蛋白肽抗氧化活性较其他两种酶更好。碱性蛋白酶和复合蛋白酶最佳酶解工艺分别为:酶与底物比0.5%(w/w),底物与水为1∶25(w/v),水解温度50℃,水解时间5h,pH10.0;酶与底物比0.5%(w/w),底物与水为1∶25(w/v),水解温度55℃,水解时间5h,pH8.0。本研究为藜麦蛋白的后期的深加工利用提供一定理论依据。     

玉米蛋白环(组氨酸-脯氨酸)二肽前体的制备及其鉴定（英文）

以玉米蛋白为原料,制备活性环(组氨酸-脯氨酸)二肽(cyclo(His-Pro))前体——His-Pro和Pro-His二肽。分别采用碱性蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶和木瓜蛋白酶对提取的玉米γ-醇溶蛋白进行单酶和双酶分步水解,筛选出最佳酶解工艺。采用碱性蛋白酶和风味蛋白酶分步水解的水解产物中cyclo(His-Pro)前体的含量比其他水解产物要高。采用响应面和L_(16)(4~5)正交试验对碱性蛋白酶和风味蛋白酶分步水解γ-醇溶蛋白的工艺进行了优化,最佳水解条件为:底物质量浓度32 mg/m L,先加入12 100 U/g的碱性蛋白酶水解6.5 h,再加入17 000 U/g的风味蛋白酶于p H7.5、55℃条件下水解6 h。采用超高效液相色谱法和电喷雾质谱法对cyclo(His-Pro)前体进行定量和定性分析,结果表明水解产物中含有较高含量的脯氨酸-组氨酸二肽(6.88 mg/g)。     

双酶复合水解对玉米肽醒酒活性的影响

采用碱性蛋白酶与风味蛋白酶复合水解玉米蛋白粉制备玉米醒酒肽。研究水解温度,水解时间,酶底比与pH 4个因素对玉米蛋白在水解过程中羟基自由基(·OH)抑制率的影响,通过响应曲面分析方法优化其水解工艺,结果表明:最佳酶解条件为温度55℃、底物质量浓度5g/100mL、pH8.5,按3%的酶与底物比加碱性蛋白酶水解2h后,调整pH至6.95,温度为49.3℃,之后再按4.11%的酶与底物比加风味蛋白酶水解1.6h,·OH抑制率为55.45%。     

麦胚蛋白的双酶分步水解及其产物的抗氧化活性研究

前期实验确定中性蛋白酶为水解麦胚蛋白制备抗氧化肽的最适单酶,在此基础上进行了双酶组合水解麦胚蛋白的酶解工艺及酶解产物的抗氧化活性的探讨性研究。结果表明,双酶最佳组合为中性蛋白酶和碱性蛋白酶。经中性蛋白酶酶解270min的酶解液加入碱性蛋白酶后,水解至300min和420min时酶解产物还原能力和肽含量有不同程度增加,但DPPH·清除率始终是呈下降趋势。因此双酶水解比单酶水解麦胚蛋白没有明显优势。