鸡矢藤颗粒剂干预大鼠肝纤维化模型TGF-β1/Smad通路试验

将30只大鼠随机分为正常对照组(A组)、非鸡矢藤治疗模型组(B组)和鸡矢藤模型组(C组)。8周后荧光实时定量法检测TGF-β_1、Smad3和Smad7的mRNA的表达。结果表明:从白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)酶联免疫数据看,C组与A组差异极显著(P0.01),与B组差异显著(P0.05);B组与A组差异极显著(P0.01)。采用鸡矢藤治疗后,可以明显抑制TGF-β_1 mRNA的表达,C组与A组差异显著(t=2.245,P0.05),与B组差异极显著(t=1.142,P0.01);采用鸡矢藤治疗后,可以明显抑制Smad3 mRNA的表达,C组与A组差异显著(t=2.149,P0.05),与B组差异极显著(t=1.206,P0.01);采用鸡矢藤治疗后,可以提升Smad7 mRNA的表达,C组与A组差异显著(t=2.201,P0.05),与B组差异极显著(t=1.007,P0.01)。鸡矢藤可以抑制TGF-β_1 mRNA和Smad3 mRNA的表达,促进Smad7 mRNA的表达。研究表明,在肝纤维化的作用机制中,存在Smad3 mRNA-(TGF-β_1 mRNA)-Smad7 mRNA的轴性作用通道。     

枸杞多糖抑制TGF-β1诱导的心肌成纤维细胞活化作用机制

目的：探究宁夏枸杞多糖对转化生长因子β1（transforming growth factor β1，TGF-β1）诱导的心脏纤维化细胞模型干预作用。方法：分离培养小鼠原代心肌成纤维细胞（cardiac fibroblasts，CFs），用质量浓度10 ng/mL TGF-β1作用于CFs，建立心脏纤维化细胞模型，采用宁夏枸杞多糖进行处理，观察细胞形态；免疫荧光检测α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）的表达水平；Western blot检测TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白表达及其磷酸化水平；实时荧光定量聚合酶链式反应检测Snail、Twist和S100A4 mRNA的表达水平。结果：与对照组相比，模型组加入TGF-β1后，CFs细胞的形态由梭形变得狭长，细胞数目显著增多；α-SMA蛋白相对表达量升高；TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白表达及其磷酸化水平升高；Snail、Twist和S100A4的mRNA表达水平高度显著升高（P＜0.001）；给予宁夏枸杞多糖处理，可高度显著抑制TGF-β1诱导的CFs增殖（P＜0.001），减少CFs细胞中α-SMA及TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白的表达，高度显著下调Snail、Twist和S100A4的mRNA表达（P＜0.001）。结论：枸杞多糖对TGF-β1诱导的CFs纤维化具有改善作用，其作用机制与抑制TGF-β1/Smads信号通路有关。     

CTGF-siRNA对TGF-β1诱导的肝星状细胞胶原分泌的影响

目的:研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)的小RNA(CTGF-siRNA)对TGF-β1诱导的大鼠肝星状细胞(HSC-T6)胶原分泌的影响。方法:实验分为5组:正常组(单纯HSC-T6细胞组)、对照组(TGF-β1诱导组)、siRNA组、非特异siRNA组、lipo组(脂质体组)。培养大鼠HSC-T6细胞,以10ng/mL终浓度的TGF-β1对培养的HSC-T6细胞进行诱导,再通过脂质体法将CTGF-siRNA转染入HSC-T6细胞,通过RT-PCR、Western blotting方法研究各实验组细胞中CTGF、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、I型胶原蛋白(Collagen type I,Col 1a1)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)mRNA及蛋白的表达水平。结果:正常组细胞内CTGF有低水平的表达,在给予TGF-β1诱导后表达水平显著升高(P0.05);TGF-β1刺激24h后,靶向转染入特异性siRNA后,CTGF、Col 1a1、FN及α-SMA的表达均显著下调(P0.05)。结论:本研究提示,通过RNA干扰使CTGF基因沉默后,在体外可明显抑制HSC-T6肝成纤维细胞的表型转化及细胞外基质的合成,进一步提示CTGF是促肝纤维化的关键性细胞因子,而RNA干扰是一种特异高效的很有前途的干预手段,为基因治疗肝纤维化提供实验依据。     

桑叶生物碱对肝纤维化小鼠的改善作用及机制

目的：观察桑叶生物碱对转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）/Smads信号通路及基质金属蛋白酶-13（matrix metalloproteinase-13，MMP-13）、基质金属蛋白酶抑制剂-1（inhibitor of metalloproteinase-1，TIMP-1）mRNA表达的调节作用，探讨桑叶生物碱改善小鼠肝纤维化的作用机制。方法：采用腹腔注射体积分数10% CCl4 橄榄油溶液（5 mL/kg mb）联合高脂饮食诱导小鼠肝纤维化模型。造模8 周后，正常对照组和模型组给予蒸馏水，低、中、高剂量组分别灌胃50、100、200 mg/kg mb剂量的桑叶生物碱，阳性药物组给予100 mg/kg mb水飞蓟宾，持续45 d。采用酶联免疫试剂盒测定各组小鼠肝组织α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）、I型胶原蛋白（collagen I，Col I）及III型胶原蛋白（collagen III，Col III）含量；采用实时定量聚合酶链式反应测定肝组织TGF-β1、Smad3、Smad4、Smad7、MMP-13、TIMP-1 mRNA表达水平。结果：与模型组比，灌胃高剂量桑叶生物碱（200 mg/kg mb）的小鼠肝组织中α-SMA、Col I、Col III含量分别降低19.55%、19.93%、13.84%（P＜0.05）；TGF-β1、Smad3、Smad4、TIMP-1 mRNA表达水平分别下降59.04%、56.73%、50.70%、49.09%（P＜0.05），Smad7、MMP-13 mRNA表达水平分别上升48.29%、25.72%（P＜0.05）。结论：桑叶生物碱能改善小鼠肝纤维化，其机制可能是对TGF-β1/Smads信号通路相关因子和TIMP-1、MMP-13的基因表达具有调控作用。     

黄芪多糖对2型糖尿病大鼠心肌细胞钙通道基因表达的影响研究

目的：研究黄芪多糖（astragaluspolysaccharide,APS）对2型糖尿病（2-DM）大鼠心肌细胞L型ca^2＋通道蛋白mRNA表达的影响,探讨APS对2-DM的治疗作用。方法：将Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、APS治疗组。治疗8周后采用RT—PcR检测3组大鼠心肌细胞L型Ca2＋通道蛋白mRNA表达量。结果：糖尿病组、治疗组大鼠心肌组织L型Ca2＋通道蛋白mRNA表达量均显著高于正常组,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：APS可以降低2DM大鼠心肌细胞L型Ca外通道蛋白mRNA的表达,对2-DM有一定的治疗作用。     

尿石素A对转化生长因子-β1诱导的人近端肾小管上皮细胞纤维化的影响

为探究尿石素A(urolithin A,UA)对人近端肾小管上皮细胞（HK-2）纤维化的干预效果和潜在作用机制，本研究建立转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的HK-2纤维化模型，考察对照组、TGF-β1模型组（4 ng/mL处理48 h）、UA低浓度组（5μg/mL UA+4 ng/mLTGF-β1）、UA高浓度组（10μg/mL UA+4 ng/mLTGF-β1）对HK-2细胞的影响。试验结果表明：UA干预能改善TGF-β1引起的HK-2形态变化并显著降低细胞纺锤体指数（P <0.01）；降低纤维化标物Col I、Col III、Vimentin、Snail和Slug和炎症标志物IL-1β、IL-6、MCP-1、NLRP3的表达（P <0.01）；下调MAPK和TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白的相对表达（P <0.01）。上述研究表明UA能减轻TGF-β1诱导的HK-2细胞纤维化，其作用的机制可能是通过下调MAPK和TGF-β1/Smads信号通路来实现的。本研究能为开发天然活性成分UA用于延缓...     

大蒜素对小鼠酒精性肝纤维化的预防作用研究

研究大蒜素对酒精性肝纤维化的预防作用。选用SPF级昆明小鼠40只,分为正常对照组、酒精性肝纤维化组、护肝片组、大蒜素高和低浓度组,各组灌服0.2 m L相应药物30 d后使用红星二锅头建立酒精性肝纤维化模型,测定肝功能相关指标,免疫印迹法检测肝组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)和饰胶蛋白聚糖(Decorin)的蛋白表达。大蒜素能够降低小鼠ALT、AST活性和MDA、LDL-C含量,增加SOD、GSH-PX活性和GSH含量。Western blotting显示大蒜素组肝组织中TNF-α和TGF-β1的表达水平显著降低,而Decorin表达水平升高。大蒜素能够增强酒精性肝纤维化小鼠肝脏抗氧化酶活力,降低其肝脏的脂质过氧化水平,干预TNF-α、TGF-β1和Decorin等肝纤维化相关蛋白的表达,对小鼠肝脏具有一定的保护作用。     

枸杞中绿原酸对转化生长因子-β1诱导心肌成纤维细胞纤维化的影响

目的：考察枸杞中分离得到的绿原酸对转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）诱导心肌成纤维细胞（cardiac fibroblasts，CFs）纤维化的干预效果。方法：质量浓度10 ng/mL TGF-β1诱导CFs建立心肌纤维化细胞模型，用不同质量浓度绿原酸处理纤维化细胞，细胞毒性实验（cell counting kit-8，CCK-8）检测绿原酸对CFs增殖的影响；酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）检测纤维化标志蛋白胶原蛋白（collagen，Col）I、Col III和免疫荧光检测α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）的表达；实时荧光定量聚合酶链式反应（quantitative real-time polymerase chain reaction，qPCR）检测Twist1、Acta2、Snail2及纤维化蛋白S100A4等mRNA表达水平；Western blot检测TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白及其磷酸化表达水平。结果：CCK-8检测表明枸杞中分离得到的绿原酸能抑制细胞异常增殖；ELISA和免疫荧光检测表明，枸杞中分离得到的绿原酸能下调纤维化标志蛋白Col I、Col III和α-SMA的表达；qPCR检测表明枸杞中分离得到的绿原酸能高度显著下调纤维化转录调控因子Acta2、Twist1、Snail1、Snail2、Smad4及纤维化蛋白S100A4的mRNA表达（P＜0.001）；Western blot检测表明枸杞中分离得到的绿原酸能高度显著下调TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白的表达（P＜0.001）。结论：在本研究质量浓度范围内，枸杞中分离得到的绿原酸抑制TGF-β1诱导的CFs纤维化过程，其机制可能与TGF-βl/Smads信号通路有关。     

染料木黄酮对β淀粉样肽25-35介导的PC12细胞凋亡过程相关基因表达的影响

目的 研究不同剂量的染料木黄酮(Gen)对β淀粉样肽25-35(Aβ25-35)介导的PC12细胞凋亡的保护作用,并探讨了可能的分子调控机制.方法 PC12细胞传代培养48 h后,选取生长良好的同批次细胞,随机分为5组,即对照组、Aβ模型组(20 μmol/L),Gen干预组(25,50和100 μmol/L),Gen预处理2h后,经Aβ25-35染毒,建立细胞损伤模型;24 h后,收集细胞,用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)法检测PC12细胞caspase-3,caspase-9,bcl-xl,bad和LRP5基因的表达.结果 与对照组相比,Aβ组细胞caspase-3,caspase-9和bad mRNA表达上调,其差异具有统计学意义(P <0.05),bcl-xl,LRP5 mRNA表达下调,差异具有统计学意义(P<0.05);与Aβ组相比,Gen高剂量组可显著下调PC12细胞caspase-3,caspase-9和bad mRNA表达(P <0.05);Gen高剂量组可显著上调bcl-xl,LRP5 mRNA,差异有统计学意义(P<0.01).结论 Gen可能是通过下调细胞凋亡促进基因caspase-3,caspase-9和bad mRNA表达,上调细胞凋亡抑制基因bcl-xl,LRP5 mRNA表达,拮抗Aβ诱导的神经细胞凋亡,从而发挥神经细胞保护作用.     

乌贼墨汁黑色素对糖尿病肾病小鼠肾脏的保护作用

目的：探究不同剂量的乌贼墨汁黑色素对链脲佐菌素（streptozocin,STZ）诱导的糖尿病肾病模型小鼠肾 脏的保护作用及其机制。方法：采用腹腔注射STZ方法建立糖尿病肾病小鼠模型,将实验小鼠分为正常组、模型 组、阳性治疗组（盐酸二甲双胍120 mg/kg,以体质量计,下同）、黑色素低（120 mg/kg）、中（240 mg/kg）、高 （480 mg/kg）剂量组,连续灌胃4 周,测定肾脏指数、肾功能、肾脏抗氧化体系相关酶活力;组织切片观察肾脏形 态变化;实时荧光定量聚合酶链式反应（real time polymerase chain reaction,RT-PCR）测定诱发肾脏纤维化细胞因 子的mRNA表达量。结果：与模型组相比,乌贼墨汁黑色素中、高剂量组能极显著增强肾功能（P＜0.01）,提高 抗氧化酶活性（P＜0.05或P＜0.01）,减少丙二醛含量（P＜0.05或P＜0.01）,降低肾纤维化转化生长因子及其受 体mRNA的表达（P＜0.01）,上调抗炎性因子过氧化酶体增殖物活化受体mRNA表达量（P＜0.01）;高剂量组肾 小管基底及系膜区细胞外基质积聚减轻,肾小管间质纤维化程度下降;低剂量组无显著差异。结论：中、高剂量的 乌贼墨汁黑色素能减轻糖尿病肾病的肾发炎,增强肾功能,其作用机制可能与提高肾脏抗氧化能力,抑制肾纤维化 细胞因子的过度表达相关。     

红枣多糖提取、分离与纯化研究进展

研究小檗碱对肥胖小鼠脂肪组织纤维化及肠道菌群的调节作用。选用SPF级昆明小鼠40只,分为正常对照组、肥胖模型组、小檗碱高和低剂量组。除正常对照组外,其他组小鼠连续灌服高脂乳剂12周,建立肥胖模型,之后各组小鼠给予相应药物9周。免疫印迹法检测脂肪组织中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、转化生长因子-β1(transforming growth factor beta1,TGF-β1)和腺自酸活化蛋白激酶-α1(adenosine 5'-monophosphate-activated protein kinase-α1,AMPK-α1)的表达。肠杆菌基因间重复共有序列基因扩增和聚合酶链式反应--变性梯度凝胶电泳分析小檗碱对肥胖小鼠肠道菌群的影响。小檗碱能够降低脂肪组织中TNF-α和TGF-β1的表达,增加AMPK-α1的表达。肥胖小鼠肠道菌群失调,致病菌费克蓝姆氏菌(Facklamia iqnava)增加,毛螺科菌和乳酸杆菌减少,小檗碱给药后毛螺科菌和嗜酸乳杆菌增加,成为优势菌群。小檗碱对肥胖小鼠脂肪组织纤维化的减轻和肠道菌群的调节作用不仅与激活AMPK,抑制TNF-α和TGF-β1有关,还与调节肠道菌群失调,促进益生菌生长有关。     

蛹虫草对糖尿病大鼠肾脏病程发展的抑制作用

目的：研究蛹虫草(Cordyceps militaris)对糖尿病大鼠肾脏病程发展的抑制作用。方法：采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法建立糖尿病大鼠模型。经蛹虫草(400mg/kg,以体质量计)灌胃8周后,分别检测大鼠空腹血糖值和肾脏指数;并收集大鼠24h尿液,检测尿液中微量白蛋白( mAlb)、β-N乙酰葡萄糖苷酶(NAG)含量;测定血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)含量;通过RT-PCR法测定肾脏中转化生长因子β1(TGF-β1)及其Ⅱ型受体(TβRⅡ)、结缔组织生长因子(CTGF)mRNA表达;Western blotting检测肾脏中TGF-β1蛋白表达;免疫组化法检测肾脏中Ⅳ型胶原表达。结果：蛹虫草能显著降低糖尿病大鼠空腹血糖(P＜0.05)、肾脏指数(P＜0.01)、24h排尿量(P＜0.01)、尿微量白蛋白排泄率(UAER) (P＜0.01)和NAG排泄率(P＜0.01);同时能够降低血清中BUN、Cr、UA含量(P＜0.05);下调TGF-β1、TGFβRⅡ和CTGF的mRNA表达(P＜0.01),减少TGF-β1及Ⅳ型胶原的蛋白表达(P＜0.01)。结论：蛹虫草具有良好的降血糖及改善肾脏滤过功能的作用,其机制可能与抑制TGF-β1、TGFβRⅡ和CTGF等基因表达,减少胶原物质在肾脏中的积累有关。     

桑叶多糖对DN大鼠肾脏CTGF表达的影响

目的:观察桑叶多糖(mulberry leaves polysaccharide,MLP)对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾组织结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)基因表达的影响,探讨MLP抗肾纤维化的作用机制。方法:将Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、MLP高、中、低剂量治疗组。采用一次性腹腔注射STZ的方法建立DN大鼠模型。给予不同剂量MLP进行治疗8w后,检测24h UAlb和尿蛋白含量;通过RT-PCR法测定肾脏中CTGF mRNA表达。结果:MLP能显著降低DN大鼠24h UAlb和尿蛋白含量(P0.01),下调CTGF mRNA表达(P0.01)。结论:MLP可减少DN大鼠尿蛋白、24h UAlb,降低肾脏CTGF mRNA的表达。     

南瓜多糖对2型糖尿病大鼠PDX-1mRNA表达的影响

目的：研究南瓜多糖对2型糖尿病（2-diabetes mellitus,2-DM）大鼠胰腺一十二指肠同源盒（PDX-1）基因表达的影响。方法：将Wistar大鼠随机分为5组,A：正常对照组;B：模型组;C、D、E：南瓜多糖高、中、低剂量治疗组。8周后,半定量RT-PCR检测PDX．1mRNA的表达水平。结果：与A组大鼠相比,2-DM模型组大鼠PDX．1mRNA基因表达减少（P〈O．01）;与B组相比,南瓜多糖治疗组大鼠PDX-lmRNA基因表达增加（P〈0．05）。结论：南瓜多糖能上调2-DM大鼠PDX-1基因的表达。     

消瘀散贴膏治疗膝骨关节炎的临床疗效研究

目的 观察消瘀散贴膏治疗膝骨关节炎的临床疗效及安全性.方法 将符合纳入标准的膝骨关节炎患者40例,按就诊顺序随机分为两组,治疗组26例,给予消瘀散贴膏外敷治疗;对照组14例,给予扶他林胶剂治疗,疗程为6周.疼痛评分和关节功能用视觉模拟量表(VAS)量表和WOMAC指数;通过ELISA试验测血清中软骨代谢指标人软骨寡聚基质蛋白(COMP)和Ⅱ型胶原C端肽(CTX-Ⅱ)的浓度.结果 治疗组治疗前后VAS (t=11.7,P＜0.001)、WOMAC (t=6.1,P＜0.001)、COMP(t=7.2,P＜0.001)、CTX-Ⅱ(t=1.2,P=0.24);对照组治疗前后VAS (t=7.3,P＜0.001)、WOMAC (t=5.1,P＜0.001)、COMP(t=8.8,P＜0.001)、CTX-Ⅱ (t=0.82,P=0.43).两组治疗前后疼痛和关节功能均明显改善,VAS、WOMAC、CTX-Ⅱ两组间比较差异无统计学意义,COMP两组间比较差异有统计学意义(t=2.3,P=0.03).治疗过程中两例出现皮疹,未见其他不良反应.结论 消瘀散贴膏能够明显改善膝骨关节炎患者的临床症状和关节功能,且无严重的不良反应,有一定的临床应用价值.     

miRNA在牛乳过敏小鼠模型中的表达及嗜酸乳杆菌的干预作用

观察β-乳球蛋白(β-Lg)过敏小鼠模型中miRNA的异常表达和Th17相关细胞因子分泌的相关性,同时研究嗜酸乳杆菌的干预作用,探究益生菌缓解牛乳过敏的分子机制。BALB/c小鼠随机被分为正常对照组,β-Lg过敏模型组和低、中、高剂量嗜酸乳杆菌干预组,以ELISA法检测过敏小鼠血清中Th17相关细胞因子的分泌,RT-PCR法检测过敏小鼠脾脏组织CD4+T细胞中与炎症相关的miRNA基因表达,并对两者进行相关性分析。在此基础上研究嗜酸乳杆菌干预过敏模型对miRNA表达的影响。与正常对照组比较,过敏组小鼠血清IgE,ILI7,IL-6,TNF-α及IL-21水平显著增高(P0.05);其脾脏组织CD4+T细胞中miR-155,miR-21,miR-9和miR-146a mRNA表达量明显上调(P0.05),与Th17细胞的RORγt及IL-17mRNA表达水平呈正相关(P0.05)。嗜酸乳杆菌干预可显著下调过敏小鼠Th17细胞亢进,以及上述miRNA基因的异常表达(P0.05),具有剂量依赖性。以上结果显示,miRNA在β-Lg过敏中发挥重要作用,嗜酸乳杆菌缓解过敏的作用可能与其调节miRNA表达密切相关。     

蒙古扁桃不同极性部位对肝纤维化大鼠的保护作用及机制研究

探讨蒙古扁桃不同极性部位对四氯化碳致肝纤维化大鼠的作用及可能机制。雄性SD大鼠分为7组,每组10只。以四氯化碳建立肝纤维化大鼠模型,将成模大鼠分为模型组、水飞蓟素组(0.05 g/kg)阳性药组和蒙古扁桃石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水部位提取物组,同批未给四氯化碳的大鼠为正常对照组。给药8周后,测血清中的丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性及丙二醛（malondialdehyde,MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、透明质酸（hyaluronic acid, HA）、层粘连蛋白（laminin,LN）、Ⅲ型前胶原（type Ⅲ collagen,PC-Ⅲ）和Ⅳ型胶原（type Ⅳ collagen ,Col-Ⅳ）含量并计算肝指数和脾指数;同时测肝组织中MDA、SOD、羟脯氨酸（hydroxyproline,HYP）含量及转化生成因子β1（Transforming growth factor β1 protein,TGF-β1）、Smad3（mothers against decapentaplegic homolog）和Smad7的表达。与模型组比较,蒙古扁桃药材各极性部位大鼠的体质量显著增加（P<0.05）,血清和组织中MDA显著降低（P<0.05）,血清中SOD显著升高（P<0.05）,石油醚、水部位大鼠肝指数显著降低（P<0.05）;病理学检查结果显示,蒙古扁桃药材各部位给药组大鼠肝纤维化有明显改善;蒙古扁桃石油醚部位和正丁醇部位可显著降低血清中AST、ALP、HA、PC-Ⅲ含量（P<0.05）及下调组织中HYP、TGF-β1和Smad3的水平（P<0.05）;蒙古扁桃正丁醇部位可显著降低血清中ALT含量（P<0.05）。蒙古扁桃药材石油醚、正丁醇提取物对肝纤维化有显著改善作用,是保护肝纤维化的优选活性部位,其机制可能是通过调节胶原合成异常及TGF-β1/Smad 信号通路来发挥作用。     

染料木黄酮对β淀粉样肽介导的脑血管内皮细胞损伤的保护作用研究

目的研究染料木黄酮(Gen)对β淀粉样肽25-35(Aβ25-35)介导的脑血管内皮细胞损伤的调节作用。方法脑血管内皮细胞(b End.3细胞系)传代48 h后,分为4组(对照组、Aβ组、Gen组、Gen+Aβ组)。Gen预处理2 h后,Aβ25-35染毒建立细胞损伤模型;24 h后收集细胞进行指标检测。采用ELISA法检测脑血管内皮细胞8-OHd G水平;酶法试剂盒检测GSH-Px水平;RT-PCR和Western blot法检测Bcl-2、Bax基因和蛋白表达的改变。结果与对照组比较,Aβ组8-OHd G水平明显升高,GSH-Px活性明显下降,且差异均有统计学意义(P0.05);与Aβ组比较,Gen组和Gen+Aβ组8-OHd G水平明显下降,GSH-Px活性明显升高,且差异均有统计学意义(P0.05);同时,Aβ组Bcl-2基因和蛋白表达水平较对照组明显下调,Bax基因和蛋白表达水平明显上调,且差异均有统计学意义(P0.05);与Aβ组比较,Gen+Aβ组和Gen组Bcl-2基因和蛋白表达水平明显上调,Bax基因和蛋白表达水平明显下调,且差异均有统计学意义(P0.05)。结论 Gen可能通过拮抗Aβ25-35介导的脑血管内皮细胞氧化损伤,进而发挥对脑血管的保护作用。     

复方胶原蛋白肽粉对皮肤慢性紫外线损伤小鼠的改善作用及机制研究

目的：观察复方胶原蛋白肽粉对小鼠皮肤慢性紫外线损伤的改善作用,并探讨其作用机制。方法：ICR雌性小鼠随机分成正常组、模型组、复方胶原蛋白肽粉组、鱼胶原蛋白肽组。使用紫外光疗仪模拟日光照射小鼠背部皮肤建立皮肤慢性紫外线损伤模型。每周对小鼠皮肤表观进行评分,每3周拍照记录一次小鼠皮肤外观,9周后采用干燥法测定小鼠皮肤含水量;苏木精-伊红（HE）染色法观察小鼠皮肤组织病理形态学变化;采用FRAP法检测小鼠皮肤组织中总抗氧化能力（T-AOC）水平;酶联免疫吸附（ELISA）法检测皮肤组织中I型胶原蛋白（Col I）、弹性蛋白（ELN）、透明质酸（HA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）、糖基化终末产物（AGEs）水平;采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测皮肤组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、转化生长因子β受体2(TGF-βR2)、Smad2、Smad3、Smad7蛋白表达水平;采用实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）检测皮肤组织中TGF-β1、TGF-βR2、Smad2、Smad3、Smad7 mRNA表达水平。结果：与...     

β-胡萝卜素对人膀胱癌T24细胞凋亡和细胞间隙连接蛋白43表达的影响

目的探讨β-胡萝卜素抑制人膀胱癌T24细胞的分子生物学机制。方法不同浓度的β-胡萝卜素作用于T24细胞,利用MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测其凋亡指数,半定量RT-PCR检测Cx43、Bcl-2、Bax mRNA的变化,Western blot检测Cx43、Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果 10和20μmol/L组β-胡萝卜素均能明显抑制T24细胞的生长和诱导细胞凋亡,其抑制率分别为28.83%、63.02%,并且呈明显的剂量-效应关系(P<0.05),凋亡率分别为0.126±0.022和0.190±0.024(P≤0.01),随β-胡萝卜素浓度增加,细胞凋亡率增大,呈剂量依赖性关系(P=0.002)。与对照组相比,10和20μmol/L组β-胡萝卜素上调Cx43 mRNA及其蛋白的表达,增强细胞间的细胞间隙连接通讯(GJIC)功能(P<0.05),并且呈剂量依赖关系(P≤0.01);下调Bcl-2 mRNA及其蛋白的表达,并且呈剂量依赖关系(P≤0.01);Bax mRNA及其蛋白的表达有上调趋势,但与对照组比较,差异无显著性。结论β-胡萝卜素(10,20μmol/L)能通过有效下调Bcl-2 mRN...