酸性电解水冰理化指标变化对副溶血性弧菌杀菌效果的影响

为探究不同时间下电解水冰的理化特性变化对杀菌效果的影响,作者将5种不同质量浓度电解液(NaCl质量浓度为0.75、1、1.25、1.5、1.75 g/L)制备的电解水于-36℃下制成电解水冰,分别于0、2、4、6、8、10 h测定其pH值、氧化还原电位(ORP)及有效氯浓度(ACC),并研究了相应保存时间下电解水冰对副溶血性弧菌的杀灭能力。结果表明:0~6 h内,不同质量浓度间电解水冰的pH值变化不显著;而6 h后,NaCl质量浓度≤1 g/L制备的电解水冰,其pH变化速率小于NaCl质量浓度>1 g/L的冰。不同浓度电解水冰的ORP、ACC随时间的增加而减少,但ORP变化几乎遵循同一趋势;相比NaCl质量浓度≤1.5 g/L制备的电解水冰,NaCl质量浓度>1.5 g/L的ACC损失率较大。0~10 h内,NaCl质量浓度为1.5g/L及1.25 g/L的电解水冰对副溶血性弧菌的杀菌量差值最大,与其它所有相邻浓度间杀菌量差值相比,最高比值可达117.6倍。根据相关性分析可得,电解水冰的pH、ORP、ACC对杀菌量的相关系数r分别为0.831、0.787和0.944。     

脉冲强光对大肠杆菌的灭活效果及其动力学模型的建立

为研究脉冲强光对大肠杆菌的杀菌效应,试验以大肠杆菌ATCC 8739为对象,研究了不同生长期、pH和温度对脉冲强光杀菌效果的影响,并对其杀菌动力学进行Linear和Weibull模型拟合。结果表明:培养了6 h的对数期大肠杆菌对脉冲强光处理最为敏感,处理1 s能够降低(2.31±0.16)lg cfu/mL。pH和温度对脉冲强光杀菌效果有很大影响,介质温度在35~45 ℃,pH4.0~6.0或pH8.0都能促进脉冲强光的灭活作用。不同脉冲距离和时间下,Linear和Weibull模型都能够很好地拟合脉冲强光对大肠杆菌的杀菌效果(R²>0.99),且Weibull模型更为精确,但杀菌效果最终取决于辐射通量(可通过调节脉冲距离和脉冲时间改变)。总之,脉冲强光技术可以作为一种有效杀灭大肠杆菌的非热杀菌技术,其杀菌过程符合Linear和Weibull模型,且Weibull更为精确,该模型可以为饮用水消毒提供参考。     

脉冲强光对煎饼中细菌的杀菌效果的研究

煎饼在包装和贮藏过程中易受微生物的二次污染,严重影响其食用安全性,采用脉冲强光杀菌技术可有效杀死煎饼中的微生物。结果表明:脉冲能量为400J、次数20次、距离10.9cm、频次2次/s,在此优化条件下脉冲强光对煎饼中细菌杀菌率达到99.4%。      

脉冲强光对煎饼中细菌的杀菌效果的研究

煎饼在包装和贮藏过程中易受微生物的二次污染,严重影响其食用安全性,采用脉冲强光杀菌技术可有效杀死煎饼中的微生物。结果表明:脉冲能量为400J、次数20次、距离10.9cm、频次2次/s,在此优化条件下脉冲强光对煎饼中细菌杀菌率达到99.4%。     

酸性电解水对副溶血性弧菌和单核细胞增生李斯特氏菌杀菌效果的比较研究

目的研究不同浓度酸性电解水对副溶血性弧菌和单核细胞增生李斯特氏菌单增李斯特菌的杀菌作用,比较酸性电解水对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的杀菌效果。方法采用传统的平板计数法进行细菌计数,扫描电镜观察细菌细胞的形态变化,琼脂糖胶电泳检测细菌DNA变化和BSA法进行细菌蛋白质泄露测定。结果酸性电解水对副溶血性弧菌和单核细胞增生李斯特氏菌均具有很强的杀灭效果,其杀菌效果随着电解水浓度的增加而增强。较高浓度的电解水处理后,副溶血性弧菌几乎全部杀灭,单核细胞增生李斯特氏菌菌落总数降低了1.45 log CFU/mL。扫描电镜实验表明,经酸性电解水处理的副溶血性弧菌坍塌明显,且随着酸性电解水浓度的升高,细胞形态崩解严重,细菌形状模糊。结论相较于单核细胞增生李斯特氏菌,酸性电解水对革兰氏阴性菌副溶血性弧菌有明显的杀菌效果     

自动控制脉冲强光杀菌装置的研制

采用单片机控制技术，研制了自动控制脉冲强度杀菌装置。每个光脉冲的输入能量可达６００～２２００Ｊ；光脉冲宽度经测定小于８００μＳ。３０个光脉冲能使大肠杆菌减少５个数量级，４０个光脉冲以使蛋白酶的活力钝化９０％，脉冲强光杀菌可事负透明塑料薄膜包装的切片面包的保存期延长１倍以上，脉冲强光杀菌是一种很有发展前途的冷杀菌技术。     

脉冲强光对黄曲霉菌孢子的杀菌效果、微观结构及动力学的影响

脉冲强光是一种新兴的非热杀菌技术。为研究和预测脉冲强光对黄曲霉菌孢子的杀菌作用,在强度2.86,1.60,1.08,0.93 W/cm2脉冲强光下对固体培养基中黄曲霉菌孢子处理1~60 s,并对处理前、后孢子的微观形态进行扫描电镜分析。运用Log-linear模型、Weibull模型和Weibull+tail模型对杀菌致死曲线进行动力学分析。研究表明,随着照射强度增加和时间的延长,脉冲强光对黄曲霉菌孢子的杀菌效果增强。初始菌落数为5.15 lg(CFU/mL)的孢子在2.86 W/cm2下处理19 s可被全部杀死。电镜照片显示脉冲强光处理后孢子细胞结构崩溃。Weibull模型和Weibull+tail模型较Log-linear模型能更好地拟合脉冲强光处理黄曲霉菌孢子的杀菌曲线(R2>0.95)。其中Weibull+tail模型能更加精确地拟合杀菌动力学过程(R2=0.9727)。     

响应面优化脉冲强光对煎饼表面大肠杆菌的杀菌效果

采用脉冲强光对煎饼表面进行杀菌处理,研究脉冲强光对煎饼表面大肠杆菌的杀菌效果。在单因素试验基础上,利用响应面分析方法建立大肠杆菌数量降低对数值的二次多项数学模型,利用模型对脉冲能量、脉冲次数和脉冲距离及其交互作用进行分析。结果表明：脉冲强光可有效杀死煎饼表面的大肠杆菌,优化条件为脉冲能量500 J、次数40 次、距离10.9 cm,此时脉冲强光对煎饼表面大肠杆菌的数量可减少2.15 个对数值,提高了煎饼的货架期及食用安全性。     

脉冲高电压对副溶血性弧菌病原性的影响

本实验运用布鲁姆林式脉冲成形网络系统对副溶血性弧菌菌悬液进行处理,发现该系统对副溶血性弧菌有较强的灭菌效果,同时细胞毒性有所下降,且随电压升高而降低;而三型分泌系统相关的基因表达随电压升高而增强,表明脉冲高压电场对细菌病原性有一定的影响,可为液体食品灭菌、生物制品以及疫苗制备过程中抗原灭活提供一定的理论依据。     

脉冲强光杀菌装置设计的初步研究

脉冲强光杀菌是一种新兴的冷杀菌技术，本试验设计脉冲强光杀菌的发生电路，对电路进行了初步的设计研究，使用双电源脉冲发生电路提供能量，使电路简单化，并达到预期效果。     

沙门氏菌及副溶血性弧菌的共增菌培养基的研制

为研制一种可同时富集沙门氏菌和副溶血性弧菌的增菌培养基,参照GB 4789.4-2016及GB 4789.7-2013规定的增菌培养基成分,并根据目标菌不同的营养需求,筛选适宜抑制剂和促进剂,进行单因素实验,确定共增菌培养基的配方,并验证该培养基的增菌效果。结果表明:研制出用于沙门氏菌和副溶血性弧菌的共增菌培养基成分为:蛋白胨10.0 g,磷酸二氢钾1.5 g,氯化钠7.5 g,硫代硫酸钠5.0 g,牛胆盐0.1 g,柠檬酸钠2.5 g,甘露醇2.5 g,葡萄糖2.5 g,蒸馏水1000 mL。目标菌初始接种量为10² CFU/mL,在37 ℃下培养16 h后,两种目标菌的菌浓度可达到10⁷~10⁸ CFU/mL。结果表明,共增菌培养基可用于沙门氏菌和副溶血性弧菌的富集培养,培养基配制简易,节约成本,具有良好的市场前景。     

副溶血弧菌耐药及其机制的研究进展

副溶血弧菌是引起食源性疾病的主要致病菌之一,也给水产品养殖业造成重大经济损失。临床和养殖业者一般使用抗菌药物治疗副溶血弧菌引起的感染,但由于抗菌药物的不规范使用,导致耐药性副溶血弧菌的大量出现。耐药性副溶血弧菌可以通过食物链传播给人类,严重威胁人民群众的食品安全和身体健康。目前,文献报道关于副溶血弧菌耐药谱分析的较多,但关于耐药基因和相关移动元件、耐药机理的研究较少。本文综述了世界上多个国家副溶血弧菌耐药性的情况及其耐药机理的研究现状,并对发展前景进行了分析。     

双层平板直接定性定量法检测海产品中副溶血性弧菌

目的:建立一种直接定量定性检测海产品中副溶血性弧菌的方法。方法:参照国标菌落计数方法,筛选具备计数和显示副溶血性弧菌典型菌落颜色功能的培养基,将人工染菌样品分别置于50、4和-18℃温度下并分别进行测试。结果:在NaCl NA双层平板上副溶血性弧菌菌落呈淡紫色,在人工染菌样品实验中与NaCl NA平板计数无显著差异;NaCl NA双层平板直接定量检测4℃冷藏处理和-18℃冷冻的样品中副溶血性弧菌浓度分别是对照组的68.9%和21.7%。结论:NaCl NA双层平板法具备操作简便、检验周期短、结果稳定、灵敏度高等特点,适合应用于-18~50℃温度环境下放置的海产品中副溶血性弧菌直接定性定量检测,能如实反映样品受污染的情况。     

双重实时荧光PCR检测副溶血性弧菌毒力基因方法的建立和应用

目的 建立一种同时检测副溶血性弧菌两种毒力基因tdh和trh的双重荧光聚合酶链式反应(PCR)方法,并对我国2 771株食源性副溶血性弧菌携带的毒力基因进行全面检测.方法 针对副溶血性弧菌tdh和trh毒力基因分别设计荧光PCR引物和探针,优化荧光PCR反应体系及反应程序,建立可同时检测两种毒力基因的双重荧光PCR检测...     

Predictive model of Vibrio parahaemolyticus growth and survival on salmon meat as a function of temperature

The growth and survival curves of a strain of pandemic Vibrio parahaemolyticus TGqx01 (serotype O3:K6) on salmon meat at different storage temperatures (range from 0 °C to 35 °C) were determined. In order to model the growth or inactivation kinetics of this pathogen during storage, the modified Gompertz and Weibull equations were chosen to regress growth and survival curves, respectively, and both equations produced good fit to the observed data (the average R² value equals to 0.990 for modified Gompertz and 0.920 for Weibull equation). The effect of storage temperature on the specific growth rate (μ) was modeled by square root type equation, and the relationship between μ and lag time (λ) was described by a rule of μ × λ = constant. The shape factor (n) and scale factor (b) values of the Weibull equations versus the temperature (°C) were plotted and the temperature effects on these parameters were described by two linear empirical equations. The predicted growth and survival curves from the model were compared to real enumeration results, using the correlation coefficient (R²), bias factor (B_f) and accuracy factor (A_f), to assess the performance of the established model. The results showed that the overall predictions for V. parahaemolyticus TGqx01 growth or inactivation on salmon at tested temperatures agreed well with observed plate counts, and the average R², B_f and A_f values were 0.958, 1.019 and 1.035, respectively.     

副溶血性弧菌毒性相关因子及其外分泌蛋白的研究进展

副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是一种重要的食源性致病菌,已成为我国沿海地区微生物性食物中毒事件的首要风险因子。该菌主要通过分泌胞外蛋白和毒性因子进入胞外环境或者直接注入宿主靶细胞内,从而使宿主致病。本文主要从副溶血性弧菌毒性相关因子及其分泌系统相关分泌蛋白进行概述,概括阐明近年来针对该菌毒性及分泌蛋白的相关研究进展,并对今后分泌蛋白的研究方向进行了初步探讨。     

151株副溶血性弧菌的分子分型研究

目的 了解辽宁省副溶血性弧菌的分布规律及流行趋势,为辽宁省副溶血性弧菌引起的食源性疾病的溯源和预警提供基础。方法 对2019年辽宁省151株VP分离株进行血清分型、PFGE、REP-PCR和ERIC-PCR分子分型和聚类分析,评价3种方法间的关联性,同时探讨菌株间的亲缘关系。结果 124株分离株可共分为18个血清型,27株分离株未能分型,血清群以O3群、O1群和O2群为主。PFGE的分辨力（DI）为0.97,REP-PCR的DI为0.95,ERIC-PCR的DI为0.93。血清型O3群菌株与O1群菌株分子型相似度高。结论 2019年辽宁省临床VP分离株流行血清型仍为O3:K6,食品VP分离株流行血清群仍为O2。PFGE、REP-PCR和ERIC-PCR 3种分型方法结果一致,且PFGE分型方法的分辨力和再现性均优于其他两种方法,研究结果可以为副溶血性弧菌所引起食源性疾病的溯源提供新的技术手段。     

副溶血弧菌在低温贮藏过程中的失活动力学特征

本实验对在4℃和-20℃贮藏温度下接种于带鱼样品中的4株副溶血弧菌的失活动力学特征进行了研究,结果表明：在4℃冷藏过程中,60d贮藏期内带鱼样品中副溶血弧菌的残活细胞数降低了6.55～8.22lgCFU,在起始20d内失活速度缓慢,平均下降速率为0.06～0.1lgCFU/d,在第25～35d内失活速度变快,平均下降速率为0.16～0.2lgCFU/d,而在第35～60d的平均下降速率为0.11～0.12lgCFU/d,不同菌株之间下降速度有所差异,其中菌株Vp06001下降速度显著快于其它3个菌株（p〈0.01）。在-20℃冷冻过程中,在开始5d内下降速度最快（0.39lgCFU/d）,在10～60d下降速度缓慢（0.027lgCFU/d）,菌株之间没有显著差异（p〉0.05）。应用线性模型、Weibull模型和Log-logistic模型对残活曲线进行了拟合,通过拟合方程计算分析预测值与实测值之间的精确因子（Af）、偏差因子（Bf）、均方根差（RMSE）和相关系数平方（R2）4个评价参数,结果表明：在4℃冷藏过程中Log-logistic模型拟合的精确度显著高于线性模型和Weibull模型（p〈0.01）;而在-20℃贮藏温度下Weibull模型可以较好的描述Vp的失活动力学特征。     

低温贮藏条件下创伤弧菌和副溶血性弧菌失活模型的建立

为掌握对虾中创伤弧菌和副溶血性弧菌在5℃和一18~C低温贮藏条件下失活动力学特征,分别采用线性模型、Weibull模型、Logistic模型对创伤弧菌和副溶血性弧菌的失活曲线进行拟合。研究结果表明,在5~C条件下,创伤弧茵VvHB09的耐冷力较强;．18℃条件下,副溶血性弧菌ATCC17802和创伤弧菌VvSH09的耐冷力较强。线性模型比weibull模型、Logistic模型更适合拟合创伤弧菌和副溶血性弧菌的失活特征。     

Inactivation of hepatitis A virus and norovirus surrogate in suspension and on food-contact surfaces using pulsed UV light (pulsed light inactivation of food-borne viruses)

This study was conducted to evaluate the inactivation of murine norovirus (MNV-1) and hepatitis A virus (HAV) by pulsed ultraviolet (UV) light. MNV-1 was used as a model for human norovirus. Viral suspensions of about 10⁶ PFU/ml were exposed to pulses of UV light for different times and at different distances in a Xenon Steripulse device (model RS-3000C). Inactivation studies were also carried out on 1-cm² stainless steel and polyvinyl chloride disks with 10⁵ PFU/ml. Inactivation of MNV-1 and HAV at 10.5 cm from the UV source was greater on inert surfaces than in suspension. The presence of organic matter (fetal bovine serum) reduced the effectiveness of pulsed light both in suspension and on surfaces. However, 2-s treatment in the absence of FBS completely inactivated (5 log reduction) the viral load at different distances tested, whether in suspension (MNV-1) or on disks (MNV-1 and HAV). The same treatment in the presence of fetal bovine serum (5%) allowed a reduction of about 3 log. This study showed that short duration pulses represent an excellent alternative for inactivation of food-borne viruses. This technology could be used to inactivate viruses in drinking water or on food-handling surfaces.