同时检测9种姜黄酚酸物质的方法建立

比较不同来源姜黄提取物对水杨酸、间羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸、藜芦酸、阿魏酸、丁香酸、肉桂酸、芥子酸和绿原酸9种酚酸物质的高效液相色谱法检测及姜黄来源对其酚酸物质含量的影响。采用APOLLO C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相A相为0.25%乙酸水溶液,流动相B相为85%甲醇水溶液,梯度洗脱,流速0.9m L/min,VWD检测波长283 nm,柱温30℃。检测方法显示,9种酚酸物质的检测线性范围为0.05~200 mg/L;检出限(S/N=3)在0.003~0.07 mg/kg,在加标浓度2.0~100.0 mg/kg条件下,加标回收率(N=6)在91.01%~103.09%,检测方法灵敏有效。检测结果表明,不同来源姜黄提取物得到的姜黄提取物中水杨酸、间羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸、藜芦酸、阿魏酸、丁香酸、肉桂酸、芥子酸和绿原酸9种姜黄提取物酚酸物质总含量以四川乐山产姜黄提取物最高。     

采用HPLC法同时检测白术中酚酸类物质

试验比较不同来源白术提取物对水杨酸、间羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸、对香豆酸、阿魏酸、丁香酸、肉桂酸、芥子酸和绿原酸9种酚酸物质的高效液相色谱法检测及白术来源对其酚酸物质含量的影响。试验采用ACQUITY UPLC?BEH C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A相为0.3%乙酸水溶液、流动相B相为90%甲醇水溶液,梯度洗脱,流速为1.0 m L/min,DAD检测波长为285 nm,柱温为40℃。检测方法显示:9种酚酸物质的检测线性范围为0.02~500 mg/L;检出限(S/N=3)在0.002~0.01 mg/kg之间;在加标浓度为10~80 mg/kg条件下,加标回收率(N=9)在77.78%~100.47%之间,检测方法灵敏有效;标准品进样6次的结果RSD均小于5%,表明精密度良好。检测结果表明,不同来源白术提取物得到的白术提取物中水杨酸、间羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸、对香豆酸、阿魏酸、丁香酸、肉桂酸、芥子酸和绿原酸9种白术提取物酚酸物质的总含量以浙江新昌产白术提取物最高。     

不同来源辛夷花酚酸类物质的HPLC同时检测

试验采用PHENOMENEX LUNA C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A相为0.5%乙酸水溶液,流动相B相为80%甲醇水溶液,梯度洗脱,流速为0.8 m L/min,DAD检测波长为285 nm,柱温为30℃。研究比较不同来源辛夷花提取物对原儿茶酸、间羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸、对香豆酸、阿魏酸、丁香酸、肉桂酸、芥子酸和绿原酸9种酚酸物质的HPLC检测及辛夷花来源对其酚酸物质含量的影响。检测方法显示:9种酚酸物质的检测线性范围为0.05~200 mg/L;检出限(S/N=3)在0.001~0.05 mg/kg之间,在加标浓度为5.0~20.0 mg/kg条件下,加标回收率(N=9)在95.18%~107.68%之间,精密度为0.98%~3.24%(n=6),检测方法灵敏、有效。检测结果表明,不同来源辛夷花提取物得到的辛夷花提取物中原儿茶酸、间羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸、对香豆酸、阿魏酸、丁香酸、肉桂酸、芥子酸和绿原酸9种辛夷花提取物酚酸物质的总含量以陕西渭南产辛夷花提取物最高。     

HPLC-DAD法测定4种夏枯草中的9种酚酸类物质

比较不同来源夏枯草提取物中水杨酸、间羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸、对香豆酸、阿魏酸、丁香酸、肉桂酸、芥子酸和3-咖啡酰奎尼酸9种酚酸物质的高效液相色谱法检测及夏枯草来源对其酚酸物质含量的影响。试验采用ZORBAX ECLIPSE PLUS C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相A,0.6%乙酸水溶液;流动相B,75%甲醇水溶液;梯度洗脱,流速1.2 mL/min,DAD检测波长285 nm;柱温45℃。检测方法显示,9种酚酸物质的检测线性范围为0.02~200 mg/L;检出限(S/N=3)在0.002~0.06 mg/kg之间,加标回收率(n=6)在88.02%~105.98%之间,检测方法灵敏有效。检测结果表明,不同来源夏枯草提取物中水杨酸、间羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸、对香豆酸、阿魏酸、丁香酸、肉桂酸、芥子酸和3-咖啡酰奎尼酸9种酚酸物质的总含量以江苏镇江产夏枯草提取物最高。     

UPLC-MS/MS同时测定铁皮石斛茎、叶、花中酚类组分的含量

建立超高效液相色谱-串联质谱同时、快速分析18 种酚类物质的方法,测定比较铁皮石斛茎、叶、花部位含量差异。样品用甲醇-水溶液提取,提取液中的目标化合物经Waters T3 C18柱梯度洗脱分离,电喷雾串联三重四极杆质谱仪正、负离子扫描方式多反应监测模式检测。结果表明：以18 种酚类物质标准品作为对照,在铁皮石斛样品中共检出15 种酚类组分,分别为3,5-二羟基苯甲酸、橘皮素、绿原酸、槲皮素、芦丁、对羟基苯甲酸、咖啡酸、丁香酸、香草酸、山柰酚、对香豆酸、芥子酸、阿魏酸、3-羟基肉桂酸、水杨酸。铁皮石斛不同部位多酚组分含量为花＞叶＞茎,相对于其他酚类组分,芦丁在铁皮石斛茎、叶、花中的含量均为最高。铁皮石斛不同部位主要酚类组分表现出一定的差别：铁皮石斛花中主要含有芦丁、咖啡酸、阿魏酸和对羟基苯甲酸,铁皮石斛叶中芦丁和阿魏酸的含量相对较高,而铁皮石斛茎部主要酚类组分则为芦丁、阿魏酸与香草酸。实验结果可为铁皮石斛不同部位酚类组分的利用提供一定的科学依据。     

不同成熟期蜜桔中酚酸的组成与分布

酚酸具有多种生理功能,在植物中广泛存在.柑橘可能是膳食酚酸的重要来源.采用HPLC-PDA测定了不同成熟期温州蜜桔中八种酚酸的含量,即绿原酸、咖啡酸、对香豆酸、阿魏酸、芥子酸、原儿茶酸、对羟基苯甲酸和香草酸.结果显示,果肉中酚酸含量随成熟度提高而减少,果皮酚酸含量在半成熟期最高;果皮中酚酸含量大大高于果肉;果皮果肉中都以肉桂酸型酚酸为主,苯甲酸型酚酸含量较少;蜜桔果实中绿原酸和阿魏酸是所测八种酚酸中含量最高的.对柑橘中酚酸组成与分布的研究可望应用于食品营养标识、柑橘品种的识别或加工果汗掺假的识别等.     

蓝莓酒发酵过程中酚类物质动态变化及其抗氧化活性研究

以兔眼蓝莓为对象,研究其发酵过程中酚类物质和抗氧化活性的变化。结果表明:蓝莓酒发酵过程中,总酚、总黄酮和花色苷含量以及铁还原力、DPPH自由基清除率和羟自由基清除率呈先增加后减少的趋势;颜色分析显示L*值先增加后减少,后酵阶段波动上升,a*值逐渐上升,后酵期间波动下降,a*值变化正相关于花色苷含量的变化,b*值变化正相关于总酚、总黄酮含量的变化;蓝莓酒发酵过程中p-羟基苯甲酸未检出,香草酸含量显著上升(p0.05),而没食子酸、原儿茶酸、龙胆酸、绿原酸、咖啡酸、丁香酸、p-香豆酸、阿魏酸、芥子酸等9种酚酸含量主发酵期间均显著上升(p0.05),发酵结束时含量均显著下降(p0.05),但显著高于各自初始含量(p0.05),对羟基苯甲酸、对羟基肉桂酸和总酚酸含量均呈先增加后减少的趋势。     

麦麸发酵前后不同存在形态酚类物质中酚酸含量的变化及其抗氧化活性分析

以小麦麦麸为培养基,采用三株泡盛曲霉进行固态发酵,分别提取并采用高效液相色谱法测定麦麸发酵前后不同存在形态(游离型、酯苷结合型、糖苷结合型、碱解束缚型和酸解束缚型)的酚类物质中酚酸的含量,并通过DPPH自由基清除试验、还原力试验以及抗脂质过氧化试验,研究这些酚类物质的抗氧化活性。结果表明:未经过发酵的麦麸,束缚型酚酸在总酚酸含量中约占总量的80%,其酚酸类成分主要包括对香豆酸、阿魏酸、丁香酸、对羟基苯甲酸、咖啡酸、绿原酸、没食子酸、香草酸和肉桂酸等。发酵后的麦麸,游离型酚类物质的含量显著提高。抗氧化试验的结果显示,麦麸中碱解束缚型的酚类物质和发酵后麦麸的游离型酚类物质的抗氧化性较强。试验结果说明泡盛曲霉能促使被束缚的阿魏酸游离出来,使游离型酚类物质的含量及抗氧化性显著提高;而且抗氧化活性与酚酸的种类及含量有关,咖啡酸、丁香酸和阿魏酸含量高的酚类物质,其抗氧化性也较强。     

高效液相色谱-质谱检测赣南脐橙幼果中酚酸

通过优化色谱分离条件和质谱条件,建立了基于高效液相色谱-串联质谱测定赣南脐橙幼果中酚酸的测定方法。以咖啡酸、对香豆酸、阿魏酸、芥子酸、没食子酸和对羟基苯甲酸6种酚酸化合物标准品,对赣南脐橙幼果6种酚酸进行定量分析。色谱柱为Agilent-C_(18) column(2.1mm×100 mm,1.8μm),流动相为0.1%甲酸水溶液(A)/乙腈(B)进行梯度洗脱,柱温35℃,流速0.3 m L/min;质谱以负离子模式进行多反应监测模式(MRM)扫描。结果表明:利用该方法可同时对赣南脐橙幼果中的咖啡酸、对香豆酸、阿魏酸、芥子酸、没食子酸和对羟基苯甲酸6种酚酸进行定量分析;采用外标法建立了6种酚酸的定量方法,6种酚酸的标准物质在各自质量浓度范围内具有良好线性关系,相关系数为0.991~0.999,检出限为(0.04~8.92)μg/g,平均回收率为85.5%~103.9%,相对标准偏差(RSD)小于2.8%。该方法简便、快速、准确,不仅适合脐橙中酚酸化合物的含量测定,而且对于其他柑橘属植物中酚酸化合物含量的测定也具有一定参考价值。     

南丰蜜桔幼果功能性成分的分析及酚酸的检测

南丰蜜桔幼果的功能成分中,除了VC、VE、类胡萝卜素等以外,黄酮与酚酸等酚类物质也具有重要生物活性,为了深入了解南丰蜜桔幼果的价值,以6种不同产地的南丰蜜桔幼果样品为原料,对其总酚含量、总黄酮含量进行分析。酚酸具有多种生理功能,并广泛存在于植物组织中,采用HPLC-MS测定了南丰蜜桔幼果中6种酚酸的含量,即咖啡酸、对香豆酸、阿魏酸、芥子酸、没食子酸和对羟基苯甲酸。结果显示:南丰蜜桔幼果中以肉桂酸型酚酸为主,苯甲酸型酚酸含量较少;南丰蜜桔幼果中阿魏酸是所测6种酚酸中含量最高的,其次主要是咖啡酸,且可溶性酚酸含量要远远大于束缚酚酸的含量。     

高效液相色谱法测定香芽蕉酒发酵过程11种酚酸和槲皮素的变化

为了解香芽蕉酒发酵过程中酚酸和槲皮素成分的变化,为工业化生产香芽蕉酒提供常见酚类物质的监控方法,对11种酚酸和槲皮素高效液相检测方法进行了研究,并对香芽蕉典型酿造过程进行了跟踪。采用Bridge C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,以含有1%乙酸的超纯水和甲醇为流动相,梯度洗脱,流速1 mL/min,检测波长为280 nm或320 nm;该方法的检出限为0.01～0.08mg/L,R2为0.995～0.996,加标回收率范围85.50%～117.15%,相对标准偏差为2.27%～2.83%。香芽蕉酒发酵期间主要酚酸为绿原酸、芥子酸、香草酸和水杨酸;原儿茶酸、阿魏酸、p-羟基苯甲酸、咖啡酸的含量呈先上升后下降的趋势,其他化合物含量整体均呈上升趋势。该研究可为香芽蕉酒的工厂化生产提供理论支撑。     

野生蓝莓酚酸成分鉴定及其清除细胞内自由基活性研究

酚酸具有良好的自由基清除活性,能有效降低非酒精性脂肪肝、心血管疾病、糖尿病等疾病发生风险。酚酸是大兴安岭野生蓝莓的主要酚类物质之一,其成分尚不清楚。本文采用柱层析法纯化蓝莓中的酚酸组分,用高效液相色谱法进行成分鉴定与含量检测。以AAPH诱导Hep G-2细胞氧化损伤模型评价酚酸清除细胞内自由基活性。从物质结构特性出发,通过循环伏安法分析酚酸的氧化-还原能力,探讨酚酸清除细胞内自由基活性机理。结果表明:蓝莓酚酸主要由咖啡酸、绿原酸、肉桂酸、阿魏酸、没食子酸、对香豆酸和原儿茶酸7种酚酸组成,含量较多的为绿原酸(21.2%)、阿魏酸(8.3%)、对香豆酸(7.0%)和咖啡酸(4.6%)。4种主要酚酸对细胞内自由基清除能力为咖啡酸绿原酸阿魏酸对香豆酸,其失电子能力依次为绿原酸咖啡酸阿魏酸对香豆酸。酚酸是蓝莓的主要抗氧化成分之一,其失电子能力是影响酚酸清除细胞内自由基活性的主要原因。     

氧化·疾病·抗氧化(二十二)

<正>5.3葡萄多酚葡萄是一种仅次于香蕉的世界第二大水果作物,2000年世界产量约6,000万吨。一般采摘葡萄,果梗约占2%-6%,果皮5%-12%,果汁80%-90%,果籽0%-5%(平均4.4%)。它们都含有较丰富多酚类物质,统称葡萄多酚,同时也存在于叶子和葡萄酒、葡萄干等加工制品中。据测定,葡萄浆果和葡萄酒中主要酚类物质,包括:酚酸:对羟基苯甲酸、邻羟基苯甲酸、水杨酸、没食子酸、肉桂酸、咖啡酸、香豆酸、奎宁酸、绿原酸等:酚酸酯:咖啡酰和阿魏酰酒石酸酯;香豆酸、阿魏酸和香豆酰酒石酸葡萄糖酯;花色苷:矢车菊色素、飞燕草色素、锦葵色素、牵牛花色素、天竺葵色素和芍药色素的-3-葡糖苷,-3-乙酰     

荞麦蜜酚酸含量的高效液相色谱测定及其抗氧化作用的研究

以中国产荞麦蜜为原料,采用高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-ECD)测定其中的原儿茶酸、没食子酸、咖啡酸、丁香酸、p-香豆酸、绿原酸、阿魏酸和鞣花酸等8种酚酸的含量。结果表明,中国荞麦蜜中含有原儿茶酸、没食子酸、咖啡酸、p-香豆酸、阿魏酸等五种酚酸,其含量分别为没食子酸为461μg/100g蜂蜜,p-香豆酸为150μg/100g蜂蜜,咖啡酸为79μg/100g蜂蜜,原儿茶酸为30μg/100g蜂蜜,阿魏酸为39μg/100g蜂蜜。本文还对荞麦蜜酚酸提取物的抗氧化作用进行了研究,结果显示荞麦蜜酚酸提取物对超氧阴离子自由基、羟基自由基、DPPH自由基和脂质过氧化均有抑制作用。     

HPLC法同时检测5种龙胆草黄酮类物质

比较不同来源龙胆草提取物对芦丁、槲皮素、木犀草素、山奈酚、异鼠李素5种黄酮物质的高效液相色谱法检测及龙胆草来源对其黄酮物质含量的影响。试验采用REPROSIL-PUR BASIC C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A相为0.30%乙酸水溶液;流动相B相为85%甲醇水溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,VWD检测波长283 nm;柱温40℃。检测方法显示,5种黄酮物质的检测线性范围为0.02~200 mg/L;检出限(S/N=3)在0.003~0.050mg/kg之间,加标回收率(N=6)在86.03%~105.39%之间,检测方法灵敏有效。检测结果表明,不同来源龙胆草提取物得到的龙胆草提取物中芦丁、槲皮素、木犀草素、山奈酚、异鼠李素5种龙胆草提取物黄酮物质的总含量以内蒙古呼伦贝尔产龙胆草提取物最高。     

高效液相色谱法测定枸杞中9种酚酸化合物含量

以乙醇为提取剂,通过冷凝回流、盐酸酸化、乙酸乙酯萃取提取枸杞中酚酸成分,优化并建立宁夏枸杞中9种酚酸化合物的高效液相色谱检测方法。采用Ultimatepagenumber_ebook=156,pagenumber_book=148 LP-C1（8250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,在流速1.0 mL/min、检测波长为280 nm、柱温30℃条件下对没食子酸、香豆酸、原儿茶醛、儿茶素、绿原酸、咖啡酸、表儿茶素、丁香酸、阿魏酸进行分离,9种酚酸在46 min内完全分离。各组分的质量浓度与其峰面积具有良好的线性关系,相关系数均大于0.993 0,方法的平均回收率在73.6%～99.8%,相对标准偏差小于8%。该方法可用于枸杞中酚酸化合物含量的测定,能够为枸杞质量控制提供一定技术支撑。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定红美人中8种酚酸化合物

建立超高效液相色谱－串联质谱（ultra performance liquid chromatograph tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS）同时测定红美人中没食子酸、原尔茶酸、对羟基苯甲酸、绿原酸、香草酸、对香豆酸、阿魏酸、芥子酸8种酚酸化合物的方法,分析各酚酸在红美人中的组成和含量。选用2 mol/L氢氧化钠水解提取样品中游离型酚酸、游离酯型酚酸和结合酯型酚酸,提取液经固相萃取小柱净化后,采用Waters ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱、乙腈/0.01%甲酸水流动相梯度分离,UPLC-MS/MS多反应监测模式进行测定,外标法定量。结果显示：8种酚酸在5 μg/L～5 000 μg/L浓度范围内线性关系良好（r≥0.999 1）,检出限为 0.05 μg/L～0.73 μg/L,定量限为 0.17 μg/L～2.44 μg/L,回收率为 85.7%～103.9%,重复性为0.92%～5.28%。6个产地红美人中8种酚酸均有检出,总酚酸含量在68.82 μg/g～98.96 μg/g之间,其中阿魏酸含量最高,在 38.02 μg/g～53.79 μg/g之间,绿原酸含量次之,在 15.84 μg/g～25.90 μg/g 之间;各产地红美人中的酚酸组成比例基本稳定,其中阿魏酸占比均在51.10%～57.51%,绿原酸占比均在22.29%～27.86%。     

在红枣汁中乳酸菌、酵母菌单一及偶联发酵特征物质差异分析

该试验以红枣为原料,研究乳酸菌、酵母菌单一及偶联发酵对枣汁总糖、总酸、总酚、黄酮和酒精含量的影响,使用液相色谱-质谱联用（Liquid Chromatograph-Mass Spectrometer,LC-MS）技术进行游离型酚酸差异分析,气相色谱-离子迁移谱联用（Gas Chromatography-Ion Migration Spectrum,GC-IMS）技术进行挥发性有机物差异分析。结果表明,原枣汁无论是单一菌种发酵还是混合菌种发酵,总糖、黄酮含量降低,总酸、总酚含量、酒精度均增加,反式阿魏酸、4-羟基苯甲酸、氢化肉桂酸、香草酸、苯甲酸、丁香酸增加;酵母菌发酵枣汁总酚、黄酮、酒精度、苯丙氨酸、儿茶素、表儿茶素、丁香酸 、芥子酸含量均高于乳酸菌发酵枣汁,总酸含量低于乳酸菌发酵枣汁;经混菌偶联发酵,糖类物质降解效率、产酸效率、总酚生成率、黄酮留存率以及产酒精效率更高;游离型酚酸反式阿魏酸、反式肉桂酸、香草酸、没食子酸、对香豆酸、苯甲酸、原儿茶酸、咖啡酸、丁香酸较单菌发酵样品高;挥发性成分53种,包括11种醇类化合物、9种酯类化合物、8种酮类化合物、8种醛类化合物、2种酸类化合物、2种吡嗪吡嗪类化合物,混菌发酵样品中风味物质酯类、醇类、醛类分别占17.2%、58.2%、和1.3%,酯类和醛类显著高于乳酸菌发酵样品、酵母菌发酵样品及原枣汁,香味浓烈,因此采用酵母菌、乳酸菌混合发酵,可以有效地增强发酵枣汁的品质,丰富口感,该研究为推动混菌发酵在红枣酵素发酵生产行业的应用,提供相应的理论基础和科学实践依据。     

异金雀花素等5种大青叶黄酮的同时检测

比较不同来源大青叶提取物对芦丁、槲皮素、木犀草素、山奈酚和异金雀花素5种黄酮物质的高效液相色谱法检测及大青叶来源对其黄酮物质含量的影响。采用DIAMONSIL 5MM C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A相为0.33%乙酸水溶液;流动相B相为85%甲醇水溶液,梯度洗脱,流速0.80 mL/min,VWD检测波长280 nm;柱温30℃。检测方法显示,5种黄酮物质的检测线性范围为0.02~500 mg/L;检出限(S/N=3)在0.002~0.02 mg/kg;在加标浓度为10.0~90.0 mg/kg条件下,回收率(N=6)在97.99%~103.73%,检测方法灵敏有效。表明不同来源大青叶得到的大青叶提取物中芦丁、槲皮素、木犀草素、山奈酚和异金雀花素5种大青叶提取物黄酮物质的总含量以内蒙古巴彦淖尔产大青叶提取物为最高。     

HPLC法同时测定采后莲雾果实木质素代谢途径中5种酚酸的含量

为探讨采后莲雾果实贮藏期间酚酸含量变化对果实木质化代谢的影响,建立高效液相色谱法同时测定采后木质素代谢途径中5种酚酸(肉桂酸、对香豆酸、咖啡酸、阿魏酸、芥子酸)的方法。采用InfinityLab Poroahell C18色谱柱为固定相,以甲醇和乙酸溶液(p H 2.4)为流动相进行梯度洗脱,流速为0.8 mL/min,柱温25℃,紫外检测器于波长279 nm和320 nm处进行检测。各酚酸组分的线性范围较宽,相关系数均大于0.999 4,检出限为0.01～0.03 mg/kg,定量限为0.03～0.09 mg/kg,相对标准偏差小于5%,加标回收率为86.18%～99.05%。该方法准确度、灵敏度高,操作简便,适用于采后莲雾果实木质素代谢途径中5种酚酸的同时测定。测得莲雾贮藏期间肉桂酸、对香豆酸、咖啡酸、阿魏酸和芥子酸的含量范围分别为11.46～24.69、0.92～1.45、2.31～5.32、8.86～20.58 mg/kg和9.48～22.62 mg/kg。