复合酶法制备大鲵多肽的研究

为了制备具有生物活性的大鲵多肽,本研究以大鲵肌肉为原料,采用单因素实验与响应面分析法,以水解度和多肽得率为指标,对不同蛋白酶及其不同组合、酶添加量、酶解时间、温度、料液比和初始p H对大鲵肌肉酶解的影响进行了研究。结果表明,风味蛋白酶和中性蛋白酶为最佳酶解组合;最佳酶解工艺条件为:风味蛋白酶和中性蛋白酶添加量均为6000 u/g,酶解温度55℃,酶解时间3 h,料液比(w/w)1∶8,初始p H=6.86。优化条件下多肽得率为90.28%。      

核桃雄花多肽酶解法制备工艺

为优化核桃雄花多肽酶解法制备工艺,该试验以响应面法对核桃雄花多肽制备工艺进行研究。对中性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶和风味蛋白酶进行酶种类筛选及复配,以多肽得率为指标,通过单因素试验及响应面法研究复合酶添加总量、酶解时间、酶解温度、液料比对核桃雄花多肽得率的影响。结果表明,影响核桃雄花蛋白的多肽得率的因素顺序依次为酶解温度>酶解时间>复合酶添加总量>液料比。核桃雄花的最优酶解工艺为液料比8∶1(mL/g)、复合酶添加总量51 500 U/g（木瓜蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶质量比为25∶6∶20）、酶解温度45℃、酶解时间3.0 h,实际多肽得率达到30.00%。     

超声辅助复合酶酶解制备大豆多肽工艺的优化

以大豆分离蛋白为原料,采用超声辅助复合酶酶解制备大豆多肽,以单因素实验为基础,选择复合酶添加量、酶解时间、酶解温度以及酶解p H为自变量,大豆多肽得率为响应值,采用响应面分析法研究各自变量及其交互作用对大豆多肽得率的影响,并对大豆多肽的相对分子质量分布进行测定。结果表明,影响大豆多肽得率的各因素强弱顺序为:酶解温度复合酶添加量酶解时间酶解p H;超声辅助复合酶酶解制备大豆多肽的最佳工艺条件为超声功率180 W、超声时间10 min、超声温度35℃、碱性蛋白酶与中性蛋白酶质量比3∶1、复合酶添加量2.04%、酶解时间4.0 h、酶解温度59℃、酶解p H 8.0,在此条件下大豆多肽得率为63.27%,相对分子质量大部分集中在1 000以下。     

核桃多肽的制备及其体外抗氧化性研究

以核桃蛋白为原料,以水解度为指标,通过单因素和正交试验优化了碱性蛋白酶酶解核桃蛋白制备抗氧化肽的工艺参数。得到碱性蛋白酶最佳酶解条件为酶添加量5%,底物浓度3%,酶解温度55℃,酶解p H为9.0,酶解时间6 h;在各酶最佳条件下获得的核桃多肽具有一定的抗氧化性。     

酶解条件对核桃多肽抗氧化活性的影响

以核桃蛋白粉为原料制备核桃蛋白抗氧化活性肽,分别采用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶对核桃蛋白进行酶解,测定了不同酶作用下的核桃多肽抗氧化活性,确定碱性蛋白酶是酶解核桃蛋白的最适蛋白酶。研究了酶解温度、酶解时间、酶解pH、底物浓度、酶添加量等酶解条件对酶解产物抗氧化活性的影响。结果表明:不同的酶解条件对酶解产物核桃多肽的抗氧化活性有显著影响,最佳酶解条件为:温度50℃,时间120 min,pH8,底物浓度3%,酶添加量3%,在此酶解条件下制得的核桃多肽对羟基自由基和超氧阴离子的清除率分别为53.8%和50.0%,还原能力为51.7%。     

中性蛋白酶酶解缢蛏制备多肽工艺条件优化

本实验利用中性蛋白酶对缢蛏进行酶解制备多肽,以多肽含量为指标,在单因素实验基础上采用正交实验对鲜缢蛏的酶解工艺进行优化。结果表明,中性蛋白酶最优酶解工艺条件为:p H7、酶添加量1200 U/g、料液比(m∶v)为1∶2.5、温度40℃、时间2 h,在此工艺条件下多肽含量为(79.2±0.7)mg/g。      

微波辅助分步酶解紫苏饼粕蛋白制备鲜味肽

在微波辅助的条件下,利用碱性蛋白酶和风味蛋白酶分步对紫苏饼粕蛋白进行水解,应用正交试验确定了最佳的酶解条件。通过Sephadex G-15凝胶层析、反相高效液相色谱(reversed phase-high performance liquid chromatography,RP-HPLC)法和电子舌技术对酶解液成分与鲜味的变化进行了表征。结果表明,在微波功率400 W条件下,第1步碱性蛋白酶最佳酶解条件为酶添加量1 600 U/g、p H 10.0、微波温度60℃、微波时间35 min;第2步风味蛋白酶的最佳酶解条件为酶添加量1 600 U/g、p H 6.5、微波温度65℃、微波时间40 min,分步酶解最终水解度为44.86%。最后通过凝胶层析、RP-HPLC与电子舌表征,证明微波辅助分步酶解法快速、高效,且与单独酶解所得产物相比,其产物鲜味改善明显。     

响应面法优化苜蓿蛋白酶解工艺

以苜蓿为原料,采用响应面法优化酶解苜蓿多肽的工艺条件。对中性蛋白酶添加量、酶解时间、酶解温度、酶解p H这4个因素进行单因素试验,通过响应面法对苜蓿多肽的酶解工艺进行优化,获得最佳酶解工艺条件:加酶量3 750 U/g,酶解pH 6.88,酶解温度49.9℃,酶解时间4.1 h。该优化工艺合理可行,具有较高的应用价值。     

水酶法同时提取核桃仁油脂及水解蛋白的工艺研究

本试验主要研究了水酶法提取核桃油的酶解工艺。试验首先对α-淀粉酶、中性蛋白酶、以及淀粉酶与中性蛋白酶组成的复合酶的酶解效果进行了比较,确定中性蛋白酶的酶解效果最佳。在确定中性蛋白酶的作用下,研究了酶解温度、pH、酶的添加量、固液比对油脂提取率的影响。最后通过正交试验得出水酶法提取核桃油脂的最佳工艺条件为:酶解温度60℃,蛋白酶添加量为1.5%(m/m),酶解pH为6.0,料液比1∶4,核桃的油脂提取率可达到34.0%,各因素对油脂提取率的影响主次顺序为:固液比酶解pH酶解温度酶的添加量。在油脂提取的最佳工艺条件下,核桃水解蛋白的提取率可达12.37%。     

响应面法优化核桃降压肽的酶解工艺研究

本研究以低温脱脂核桃粕为原料,采用碱溶酸沉提蛋白后,分别用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶制备核桃多肽,以血管紧张素转化酶（Angiotensin-I-Converting Enzyme,ACE）抑制率和水解度为指标,选出酶解效果最好的酶,并且对其底物质量浓度、加酶量、酶解温度、酶解时间和p H进行单因素实验,在此基础上采用响应面实验优化其制备核桃降压肽的最佳水解工艺。结果表明:在底物质量浓度30g/L、加酶量8000U/g、酶解温度57℃和p H8.6的条件下水解3h,ACE抑制率可达64.32%,此时酶解液的水解度为21.57%。      

具有α-淀粉酶抑制活性的白芸豆多肽的制备及其热稳定性研究

以白芸豆为原料,酶法制备多肽。以α-淀粉酶抑制率为指标,比较酸性、中性和碱性蛋白酶的酶解效果。结果表明:3.350酸性蛋白酶的酶解效果最好。通过加酶量、酶解p H值、酶解温度和酶解时间的单因素试验和正交试验,得到制备白芸豆多肽的最佳工艺条件为:加酶量3 200 U/g、酶解p H 2.2、酶解温度55℃、酶解时间60 min,此条件下白芸豆多肽α-淀粉酶抑制率为80.82%。热稳定性研究表明,白芸豆多肽的热稳定性高于α-淀粉酶抑制剂(α-amylase inhibitor,α-AI)粗提液,该多肽在85、90℃条件下的α-淀粉酶抑制活性能保持更长时间。凝胶电泳分析表明白芸豆多肽的分子质量为7.53~9.09 ku。     

蛋壳内膜酶解液抑菌活性的工艺研究

为了研究蛋壳内膜酶解液的抑菌活性,以蛋壳内膜为原料,用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶和木瓜蛋白酶分别对其酶解得酶解液,检测不同酶解液对鸡大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、鼠伤寒沙门氏菌、痢疾志贺氏菌、嗜水汽单胞菌、产肠毒大肠杆菌和禽多杀性巴氏杆菌的抑菌效果,并对抑菌效果较好的中性蛋白酶酶解的条件进行了单因素试验和正交试验分析。结果表明:用中性蛋白酶酶解蛋壳内膜效果优于其他3种酶,中性蛋白酶酶解蛋壳内膜的最佳条件为预处理Na OH的添加量为质量浓度3%,酶添加量为4 g/L,酶解温度为35℃,酶解时间2 h,pH为6.5。研究结果为蛋壳内膜酶解液应用于食品防腐奠定了理论基础,也为蛋壳内膜的充分利用提供了新思路。     

亚麻籽多肽制备工艺优化及生物活性研究

该文以亚麻籽饼粕为原料,通过对8种蛋白酶的筛选,经过单因素试验研究酶添加量、酶解温度、酶解pH值、料液比、酶解时间对亚麻籽饼粕酶解液黄嘌呤氧化酶抑制活性和多肽得率的影响。采用响应面分析法对亚麻籽多肽制备工艺条件进行优化。结果表明,最佳制备工艺优化条件为碱性蛋白酶添加量4 060.17 U/g、酶解pH10.5、酶解温度49.59℃、酶解时间5.18 h、料液比1∶20（g/mL）,此条件下酶解多肽得率为67.24%,对黄嘌呤氧化酶抑制活性为60.04%,·OH清除率为90.65%,ABTS+自由基清除率为92.68%。对比常用抗氧化剂,在ABTS+自由基清除能力方面,亚麻籽多肽低于维生素C,在·OH清除能力方面,亚麻籽多肽已接近维生素C水平。通过抗氧化活性和黄嘌呤氧化酶抑制活性试验结果表明,碱性蛋白酶酶解制备的亚麻籽多肽具有较好的抗氧化活性和黄嘌呤氧化酶抑制活性。     

影响双酶复配同步酶解制备核桃多肽的因素

为寻求核桃多肽的最佳制备方法,采用双酶水解核桃饼粕,以水解度为考察指标,研究复合酶质量配比、温度、pH值、底物质量浓度、时间、酶添加量对酶解的影响。通过单因素和正交试验对双酶水解核桃饼粕制备核桃多肽的影响因素进行研究。结果表明:复合酶质量配比为2∶1、温度为40℃、pH值为7.2、底物质量浓度为40 g/L、时间为4 h、酶添加量为5%。在最佳条件下,核桃饼粕的水解度为26.72%。     

酶解条件对鹰嘴豆多肽抗氧化活性的影响

以鹰嘴豆蛋白粉为原料制备鹰嘴豆蛋白抗氧化活性肽,采用中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶分别对鹰嘴豆蛋白进行酶解,测定了不同酶作用下的鹰嘴豆多肽抗氧化活性,确定木瓜蛋白酶是酶解鹰嘴豆蛋白的最适蛋白酶。研究了温度、p H、底物浓度、酶添加量等酶解条件对产物抗氧化活性的影响。结果表明,不同的酶解条件对鹰嘴豆多肽的抗氧化活性具有显著影响,最优酶解条件为:温度60℃,p H 6.0,底物浓度3.0%,酶的添加量3.0%,在此条件下酶解180 min,制得的鹰嘴豆多肽具有较高的抗氧化活性,其多肽含量高达71.31%。     

复合蛋白酶水解核桃粕制备血管紧张素转化酶抑制肽工艺优化

以低温榨油后的核桃饼粕为原料提取核桃蛋白,采用复合酶水解法制备得到具有降血压活性的血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽。在优选复合蛋白酶种类的基础上,以ACE抑制活性为评价指标,通过单因素试验和正交试验进行复合酶酶解参数的优化。结果表明,核桃粕制备ACE抑制肽的最优条件为:复合酶添加质量比1∶2(碱性蛋白酶:中性蛋白酶)、底物浓度4%、酶解温度45℃、pH 8.0、酶添加量8 000 U/g、酶解时间60 min。该条件下制备获得的降血压肽的ACE抑制活性为(63.42±0.70)%,IC50值为(0.838±0.015)mg/mL,多肽相对分子质量主要为0～2 k Da,具有良好的常温贮藏性和消化率。     

碱性蛋白酶酶解荷叶蛋白制备多肽的工艺

为开发荷叶蛋白资源,提高荷叶的附加值。研究以荷叶为原料,采用响应面法优化酶解荷叶多肽的工艺条件。对碱性蛋白酶添加量、酶解时间、酶解温度、酶解p H这4个因素进行单因素试验,通过响应面法对荷叶多肽的酶解工艺进行优化,获得最佳酶解工艺条件为:加酶量2 000 U/g,酶解p H 8.78,酶解温度54.9℃,酶解时间4.9 h。该优化工艺合理可行,具有较高的应用价值。     

分步酶解牛血红蛋白制备血红素多肽

为制备低苦味血红素多肽产物,以牛血红蛋白为原料,在木瓜蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶的最适温度及p H下,通过L16(45)正交试验进行单酶酶解,筛选出分步酶解用酶,并采用L9(34)正交试验考察了分步酶解过程中底物质量分数、酶添加量比例、水解时间、水解时间比例等因素对水解度、苦味值、血红素含量等指标的影响。结果表明:分步酶解法酶解效果优于单酶酶解法;采用碱性蛋白酶和风味蛋白酶进行分步酶解,条件在底物质量分数6%,酶添加量比例5︰5,酶解时间10 h,酶解时间比例1︰1时可获得苦味值较低的富血红素多肽产物。     

影响单酶法制备核桃多肽的因素研究

为寻求核桃多肽的最佳制备方法,以酶法水解核桃蛋白为基础,通过单因素和正交试验对核桃多肽制备工艺进行优化。结果表明,在酶解时间3 h、酶解温度38℃、p H 6.8、酶添加量4%、底物浓度为2.4%时,核桃多肽的抗氧化活性最佳,此时DPPH清除率可达92.35%。     

响应面法优化水酶法提取核桃油工艺及其细胞形态研究

为了研究水酶法提取核桃油的最佳工艺,以新疆薄皮核桃温185为原料,分别研究酶种类(中性蛋白酶、果胶酶、α-中温淀粉酶、纤维素酶)、酶添加量、酶解温度、酶解时间、p H对提取率的影响,并对提取后残渣的细胞形态进行了扫描电镜观察。结果表明,水酶法提取核桃油的最佳工艺为:采用中性蛋白酶,酶添加量8 000 U/100 g底物、p H7.7,酶解温度61℃,酶解时间2.2 h,液料比值5 m L/g,在此条件下提油率为81.12%。扫描电镜图片显示,酶处理破坏了原料的细胞壁及细胞膜,促进油脂迅速溶出。水酶法提取的核桃油具有色浅,皂化值、酸值和过氧化值低的特点。