基于两阶段氨基酸添加的谷胱甘肽发酵高产方法

为提高产朊假丝酵母(Candida utilis SZU 07-01)发酵生产谷胱甘肽(glutathione,GSH)的产量,分别考察L-蛋氨酸和L-半胱氨酸在GSH分批发酵和流加发酵中的作用,结果发现L-蛋氨酸提升了酵母细胞在生长期的GSH合成能力,而L-半胱氨酸显著提高了细胞生长结束后的GSH产量。在此基础上,提出了两阶段氨基酸添加策略,即在分批发酵初始时(0 h)添加60 mmol/L L-蛋氨酸,在流加发酵过程中细胞干质量达到最大值时(第27小时)一次性添加30 mmol/L L-半胱氨酸。最终,GSH产量和胞内GSH含量进一步提高,分别达到1 247.1 mg/L和24.1 mg/g。该两阶段氨基酸添加策略在GSH发酵高产中的成功应用,对其他类似化合物的高效生产具有一定的借鉴意义。     

酵母细胞中谷胱甘肽的微波辅助提取

采用微波辅助方法提取了酵母细胞中的谷胱甘肽。研究表明 ,在 65 0W功率下对酵母泥直接微波处理 1 2s ,再以 2 0mL/g的物料比提取 1 0min ,或者物料比为 1 5mL/g的酵母悬浮液在 65 0W下处理 60s,都能有效地提取谷胱甘肽 ,提取率分别达到 2 0 89mg/g和 2 1 1 7mg/g。和其他提取方法比较 ,微波辅助提取是一种节省能源、快速、简便、有效的方法。     

提高产朊假丝酵母富硒能力的工艺条件研究

在5L发酵罐水平上研究不同培养条件对富硒产朊假丝酵母细胞生长、谷胱甘肽合成和富硒能力的影响,通过分批发酵试验确定较优的培养方案:在发酵培养的第18小时加入20mg/L亚硒酸钠,发酵罐转速450r/min,L-蛋氨酸的添加浓度10mmol/L.该条件下,酵母细胞干重为11.32g/L,胞内谷胱甘肽和有机硒含量分别达到11.5mg/g和1352μg/g,该方案为高性能(高胞内谷胱甘肽含量、高有机硒含量)富硒产朊假丝酵母的高效制备奠定了基础.     

高性能富硒产朊假丝酵母的制备

在5 L发酵罐上,分别考察了亚硒酸钠添加时间和L-蛋氨酸对富硒产朊假丝酵母制备过程中的细胞量、谷胱甘肽合成、胞内谷胱甘肽含量以及硒有机转化率的影响。以高性能(高有机硒含量、高GSH含量)富硒酵母的制备为目标,得到一种比较有效的发酵培养策略,即发酵初期(0 h)添加L-蛋氨酸以及葡萄糖耗尽时(15h)添加亚硒酸钠,最终硒有机转化率达到87.5%。     

热水提取酵母中谷胱甘肽的条件优化

谷胱甘肽常采用发酵法生产,其存在于细胞内,要得到谷胱甘肽常常采用一定的破壁手段,包括化学、物理、酶等方法。本文报导了采用热水直接抽提的方法,并且采用响应面分析方法对抽提的条件进行了优化,得到优化条件:温度83℃、时间14.4min,水∶干细胞8.5mL/g,搅拌速度210r/min。与其它方法相比,该方法是一种简便、快速、经济、有效的方法。     

热水提取酵母中谷胱甘肽的条件优化

谷胱甘肽常采用发酵法生产,其存在于细胞内,要得到谷胱甘肽常常采用一定的破壁手段,包括化学、物理、酶等方法。本文报导了采用热水直接抽提的方法,并且采用响应面分析方法对抽提的条件进行了优化,得到优化条件:温度83℃、时间14.4min,水∶干细胞8.5mL/g,搅拌速度210r/min。与其它方法相比,该方法是一种简便、快速、经济、有效的方法。      

产朊假丝酵母富硒及产谷胱甘肽的培养工艺

为生产高生物活性（高谷胱甘肽、高有机硒含量）的富硒产朊假丝酵母,在100 L发酵罐规模水平研究了菌体培养、无机硒的添加工艺,结果表明指数连续流加是富硒酵母最佳的培养方法,在补料的同时添加125 mg/L的无机硒（Na₂SeO₃）和3 mmol/L的半胱氨酸,菌体浓度、胞内谷胱甘肽浓度及无机硒转化率分别达到72 g/L、1080 mg/L和86%,胞内有机硒含量达到1493 μg/g,研究结果对富硒酵母大规模工业化生产具有一定的实践指导意义。      

大孔吸附树脂分离纯化谷胱甘肽的初步研究

以产朊假丝酵母提取液作为试验样品进行了大孔吸附树脂sp-207对谷胱甘肽吸附性能的研究,得到分离纯化的最佳条件:上样pH2.0、流速0.5BV/h、70%甲醇解吸,流速1.0BV/h。在最佳条件下回收率78.84%。     

产朊假丝酵母高产GSH发酵条件优化研究

对产朊假丝酵母发酵产GSH进行研究,考察了胞内GSH的抽提方法、培养基组成及补加葡萄糖对GSH产量的影响。结果显示:最佳的抽提方法为乙醇法;酵母粉与硫酸铵对胞内谷胱甘肽含量影响最大,以硫酸铵为氮源时GSH含量可达到25.48mg/g;补加葡萄糖的时间为接种后10h、补加量为16mL时。最佳条件下得到菌体干重为8.14g/L,通过摇瓶发酵GSH产量为113.45mg/L,GSH产量提高了2.89倍。     

产S-腺苷蛋氨酸酵母菌的诱变选育

以选育产S-腺苷蛋氨酸的高产酿酒酵母菌株为目标,利用常温常压等离子体和137Csγ-射线对菌株进行诱变。通过5轮常温常压等离子体诱变和4轮γ-射线诱变,结合乙硫氨酸、制霉菌素抗性筛选,获得突变株AC-10,摇瓶发酵48 h,其S-腺苷蛋氨酸产量达到1.15 g/L,与出发菌株相比提高了130.0%。摇瓶发酵最适条件为30℃、初始p H 5.5。经5 L发酵罐分批补料发酵68 h,S-腺苷蛋氨酸产量达到5.62 g/L。     

弱酸胁迫提升富硒产朊假丝酵母性能及其作用机理

以一株耐亚硒酸钠的产朊假丝酵母为研究对象,考察了该菌株在不同p H环境下的富硒和谷胱甘肽（GSH）合成能力及抗氧化性能。结果表明,在弱酸胁迫（p H3.5）条件下,富硒产朊假丝酵母胞内有机硒和GSH含量均达到最高水平,分别为1.08 mg/g和18.48 mg/g。通过对酵母胞内γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶的活性以及丙二醛含量进行测定,发现弱酸胁迫不仅有利于增强GSH的合成能力,也有助于提高酵母细胞的抗氧化能力。该研究结果为发酵法制备高性能富硒产朊假丝酵母提供了可行的技术参考。      

鱼精多肽的生理功能和作用机理

鱼精多肽(Protaminehydrolyzate)是鱼精蛋白由酶水解作用后形成的多肽片段,易消化吸收,在抗氧化、抗疲劳和性保健方面都有明显作用。根据国内外文献报道和研究工作,对鱼精多肽的生理功能和作用机理进行了概述。     

β-隐黄素的生理活性及其机理研究进展

β-隐黄素是由多个异戊烯单元构成的一种复合物,属于氧化类胡萝卜素的一种,广泛存在于柿子、柑橘等植物中,亦可由微生物发酵产生。文章就β-隐黄素的吸收、生理活性及其机理进行综述,旨在为提高β-隐黄素的研发及临床应用提供一定参考。     

植物性食品原料中单萜类化合物形成机理及生物活性综述

单萜类化合物具有独特的香味和生物活性,其广泛应用于食品、化妆品、医药等众多领域,但是目前天然存在的含量较少,因此,单萜类化合物的形成机理成为急需解决的问题。该文对植物性食品原料中单萜类化合物的分类、香气特征、形成机理及其生物活性进行了综述。对其应用前景进行了展望,以期为单萜类化合物的应用和生产提供理论基础。     

磷脂酰胆碱的生理功能和作用机理

综述了磷脂酰胆碱在改善脑神经功能、降低体内脂肪和胆固醇水平、修复肝细胞以及增强体力、耐力和抗疲劳等方面的生理功能,并对它们的作用机理进行了探讨。     

Isolation of the YAP1 homologue of Candida utilis and its use as an efficient selection marker

The industrially important yeast Candida utilis is widely used in the production of food and medical materials, but its practical host-vector system has not been well developed. In order to construct a food-grade host-vector system, we isolated the YAP1 homologue, CuYAP1, of C. utilis IAM4264 and evaluated its use as a selection marker in transformation. A DNA probe was obtained by PCR using degenerate primers and the CuYAP1-encoding 438 amino acid protein was isolated by hybridization. Although the amino acid identity of Yap1 and CuYap1 was 28.7% as a whole, the characteristic bZip region and two cysteine-rich domains (CRDs) showed a higher homology. CuYAP1 was inserted in a CuGAP1 expression cassette of the C. utilis ARS vector pRI177, and C. utilis AHU3053 was transformed with this plasmid. A number of transformant colonies grew in the presence of cycloheximide, which indicated that CuGAP1-CuYAP1 is an effective selection marker. The transformant also showed higher resistance to other agents, including cadmium and fluconazole. The overexpression of CuYAP1 in S. cerevisiae also resulted in increased resistance to various types of drugs.