UPLC-MS/MS法测定黄酒中8 种生物胺

建立黄酒中组胺、酪胺、腐胺、色胺、β-苯乙胺、尸胺、精胺、亚精胺共8?种生物胺的超高效液相色谱-串联质谱检测方法。样品衍生化处理后,经C18色谱柱（100.0?mm×2.1?mm,1.7?μm）分离,0.1%甲酸溶液、0.1%甲酸-乙腈溶液作为流动相梯度洗脱,用多反应监测模式下的电喷雾正离子扫描获得质谱数据,并采用内标法进行定量。结果表明：8?种生物胺可在19?min内分离,且在各自质量浓度范围内线性良好,r2均大于0.995?1;检出限为0.25～0.50?ng/mL,定量限为1～2?ng/mL,日内精密度为0.61%～5.68%,日间精密度为0.82%～5.00%;黄酒样品中生物胺的加标回收率在83.56%～117.45%之间,相对标准偏差均低于6.69%。     

柱前衍生超高效液相色谱-串联质谱法测定三文鱼中9种生物胺

目的 建立液相色谱-串联质谱法检测三文鱼中9种生物胺(β-苯乙胺、组胺、腐胺、尸胺、酪胺、色胺、精胺、亚精胺、去甲基肾上腺素)的分析方法。方法 样品经过5%三氯乙酸提取、正己烷除脂、丹磺酰氯丙酮溶液衍生化后，经BEH Shield RP18柱(2.1 mm×150 mm, 1.7 μm)分离，含0.1%甲酸的50%乙腈水溶液和乙腈为流动相，采用电喷雾正离子(electrosprary ionization，ESI+)扫描、多反应监测模式分析。结果 9种生物胺分别在0~200 mg/L范围内线性良好，相关系数r＞0.996；β-苯乙胺、色胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、亚精胺、精胺、去甲基肾上腺素的平均回收率依次分别为88.23%、84.17%、92.52%、89.45%、88.80%、89.43%、88.45%、87.24%、85.48%，检出限依次分别为0.0605、0.0822、0.0915、0.0244、0.0871、0.151、0.0744、0.0348、0.0750 μg/g。结论 本方法结合衍生化反应和超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry，UPLC-MS/MS)的优势，在实际样品检测中，前处理程序简化，克服基质效应对目标物的影响，目标物分离性、稳定性和峰型良好，可对三文鱼复杂基质中生物胺进行快速、准确、稳定的定量、定性分析。     

超高效液相色谱法测定不同品种桃果酒中8种生物胺含量

摘要：目的 建立一种检测桃果酒中生物胺的超高效液相色谱分析方法, 并对不同品种桃果酒的生物胺组成与含量进行测定。方法 样品采用丹磺酰氯衍生, 乙酸乙酯液-液萃取, Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.7 μm)分离, 柱温35℃, 乙腈-0.1%乙酸水溶液作流动相, 流速0.2 mL/min, 梯度洗脱, 紫外检测波长254 nm,外标法定量。 结果 柱前丹磺酰氯衍生超高效液相色谱-紫外法可在16 min内完成色胺、β-苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、亚精胺、精胺等8种生物胺的测定, 检出限在15.76~21.43μg/L之间, 定量限在53.58~71.07μg/L之间; 日内精密度在0.170.85%~1.883.31%之间, 日间精密度在0.601.02%~2.824.36%之间; 加标回收率在87.8389.71%~108.22104.85%之间, 相对标准偏差RSD≤3.36%。10个品种桃果酒中均可检测到8种生物胺, 其中以色胺、腐胺含量较高, 而酪胺、精胺含量较低。白凤、武汉2号桃果酒中生物胺总胺含量较高, 而春蜜、中桃绯玉桃果酒中总胺含量较低。结论 该方法快速简便、灵敏高效、准确度高、重现性好, 可用于桃果酒中生物胺的分析检测。不同品种桃果酒的生物胺组成与含量差异较大, 选择适宜的原料品种有助于控制桃果酒中生物胺含量。     

发酵香肠中生物胺的研究

本文采用RP-HPLC法测定了发酵香肠中的生物胺(苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、亚精胺、精胺)的含量。样品经0.4mol/L高氯酸溶液提取,丹磺酰氯衍生,流动相为乙腈和水,采用梯度洗脱,流速为1mL/min,紫外检测波长为254nm。该方法检测限为:腐胺、尸胺、亚精胺、酪胺和精胺为0.1μg/mL,组胺0.5μg/mL,苯乙胺0.05μg/mL。回收率分别为苯乙胺86.71%、腐胺88.88%、尸胺94.55%、组胺87.57%、酪胺83.67%、亚精胺88.55%、精胺94.91%。结果表明发酵香肠中生物胺的种类及含量因香肠的品种而异,7种生物胺平均总量为13.40mg/100g,变异范围为7.83~19.13mg/100g。本法简便、快速、灵敏、可靠。     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定小黄花鱼中9种生物胺

为快速检测水产品中精胺、亚精胺、腐胺、尸胺、组胺、色胺、章鱼胺、酪胺、2-苯乙胺9种生物胺含量,本研究以小黄花鱼为基质,优化了流动相组成和样品提取溶剂,建立了超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱同时检测方法。样品经0.1%三氯乙酸水溶液重复提取两遍,合并上清液过0.22 μm聚四氟乙烯滤膜。以HSS T3为色谱柱,流动相A为0.1%甲酸乙腈,流动相B为10 mmol/L甲酸铵水溶液含0.2%甲酸,在电喷雾正离子电离、多反应监测模式下,9种生物胺在4 min内得到分离。根据响应强度不同,9种生物胺分成酪胺、2-苯乙胺,腐胺、尸胺、组胺、色胺、章鱼胺,精胺、亚精胺三组,以1:5:25浓度比配制多浓度混合标准中间液。该方法对三组生物胺的线性范围分别为1~40 ng/mL、5~200 ng/mL和25~1000 ng/mL;方法定量限依次为0.01、0.05和0.25 mg/kg。低、中、高三个浓度水平加标回收率分别为81.7%~111.2%、80.0%~110.3%、80.0%~99.0%;精密度（n=6）依次为1.7%~7.3%、1.3%~9.1%、0.7%~4.6%。总体而言,该方法简便、快速,具有良好的灵敏度、回收率和精密度,适用于小黄花鱼中生物胺的测定。     

高效液相色谱法测定市售泡凤爪中的生物胺

采用丹磺酰氯为柱前衍生,建立高效液相色谱法同时测定市售泡凤爪中色胺、β-苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、亚精胺、精胺8种生物胺含量的方法。色谱条件:C18色谱柱分离,以水和乙腈为流动相梯度洗脱,流速0.8mL/min,紫外检测器,检测波长:254nm。在此条件下,8种生物胺在23min内实现了良好的分离,该方法标准曲线相关系数均在0.998以上,精密度在可接收范围内(RSD<5%),8种生物胺的平均回收率在90.41%~99.66%之间。结果表明该方法灵敏度高,精密度和重复性好,可快捷、准确地对市售泡凤爪中的生物胺进行检测。检测出生物胺总量范围在72.42~409.67mg/kg,其中,色胺、组胺、腐胺、尸胺、亚精胺的检出率为100%,其平均含量分别为47.53、26.20、35.65、12.94、8.15mg/kg。     

气相色谱-电子捕获检测器分析葡萄酒中的8种生物胺

该研究建立了气相色谱-电子捕获检测器（GC-ECD）分析葡萄酒中8种生物胺（腐胺、尸胺、精胺、亚精胺、酪胺、β-苯乙胺、组胺和色胺）的方法。取0.5 m L葡萄酒样品与0.5 m L 0.2 mol/L碳酸钠溶液以及4 m L二氯甲烷混合,加入20μL衍生剂氯甲酸-2,2,2-三氯乙酯和10μL催化剂三乙胺,于40℃反应10 min进行葡萄酒中生物胺的提取衍生,随后使用HP-5毛细管色谱柱采用升温程序（初始柱温120℃保持1 min,以3℃/min升至270℃,保持1 min）分离目标物并采用GC-ECD进行检测,外标法定量。方法学评价结果表明,8种生物胺的检出限（LOD）为0.2～0.8 mol/L,定量限（LOQ）为0.7～2.0 mol/L,平均加标回收率为91.2%～102.1%,精密度试验结果相对标准偏差（RSD）为1.8%～3.3%。表明该方法具有较高的准确度、精密度和灵敏度。     

高效液相色谱法同时测定酱油中的8种生物胺

本文建立了高效液相色谱法同时检测酱油中色胺、苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、亚精胺和精胺的方法。采用5%三氯乙酸溶液为样品提取溶剂,提取液经丹璜酰氯柱前衍生30 min,最终HPLC进行定性和定量分析。本方法中8种生物胺的线性范围为1.0~50μg/mL,相关系数R2大于0.99,检出限(S/N=3)为0.075~0.3μg/mL。在添加水平为1.00和5.00μg/mL时,样品的平均回收率在83%~111%之间,相对标准偏差为0.43%~19.0%。本方法具有线性范围广,灵敏度和准确度高等优点,适用于酱油中生物胺的检测。采用本方法对市售10种酱油进行检测,总生物胺含量的范围为50.82~1898.17μg/mL,其中酪胺、腐胺和苯乙胺是酱油样品中含量最多的生物胺。     

白酒和黄酒中生物胺的高效液相色谱分析法

本研究建立了1种检测某白酒与黄酒中常见的9种生物胺(尸胺、组胺、酪胺、色胺、盐酸吡哆胺、精胺、亚精胺、腐胺和2-苯乙胺)的柱前衍生-高效液相色谱法,并对其实际运用可行性进行验证与讨论。以丹磺酰氯(Dns-Cl)作为衍生试剂,采用Thermo Hypersil GOLD C18色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm)分离,以乙腈和含0.1%甲酸的0.01 mol/L乙酸铵水溶液作为流动相A与B,流速0.8 mL/min,紫外检测器波长254 nm。分析结果显示,9种生物胺在质量浓度0.5～50 mg/L范围,生物胺浓度与峰面积间线性相关性良好(R20.998)。选取1.0,5.0,10.0 mg/L 3个水平加标,得到加标回收率83.30%～114.7%,相对标准偏差均低于4.56%,9种生物胺检出限为0.07～0.22 mg/L。采用柱前衍生-高效液相色谱法分离、检测白酒与发酵酒——黄酒中的生物胺,实现了白酒与黄酒中生物胺含量的准确检测。     

两种柱前衍生RP-HPLC法测定酱腌菜中生物胺的比较

本研究分别采用4-氟-3-硝基三氟甲苯(FNBT)柱前衍生RP-HPLC紫外检测分析方法(简称FNBT衍生法)和丹磺酰氯柱前衍生RP-HPLC紫外检测分析方法(简称DNS-Cl衍生法)测定酱腌菜中生物胺含量,并比较这两种方法对酱腌菜中8种生物胺(组胺、色胺、β-苯乙胺、腐胺、酪胺、尸胺、亚精胺及精胺)检测的差异。结果表明,在浓度范围1~100mg/L内,两种方法对8种生物胺的检测呈现良好的线性相关性,相关系数R~2均大于0.999,FNBT衍生法的检出限(0.016~0.071mg/L)优于DNS-Cl衍生法(0.066~0.191 mg/L)。方法的精确度试验表明:FNBT衍生法的加标平均回收率(92.87%~100.18%)略优于DNS-Cl衍生法的加标平均回收率(83.52%~102.33%),两种方法的测量精密度RSD%均小于5%。DNS-Cl衍生法衍生试剂消耗大、操作繁琐,对生物胺检测的灵敏度低,而FNBT衍生法衍生试剂消耗少、操作简便、快速、灵敏度及准确性更高,适用于大批量食品中微量生物胺的快速、准确分析。用两种方法检测酱腌菜中8种生物胺的含量存在显著差异(p0.05)。     

超高效液相色谱-荧光法测定蜂蜜中百里香酚的残留量

建立了超高效液相色谱-荧光检测法测定蜂蜜中百里香的残留量的检验方法。用40%乙腈-水溶液提取蜂蜜中的百里香酚,经离心、上清液过滤后,以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,采用Accucore aQ色谱柱(150 mm×2.1 mm,2.6μm)分离,荧光检测器检测(激发波长274 nm,发射波长297 nm),外标法定量。结果表明,百里香酚在0.01～3.00μg/mL范围内线性关系良好,决定系数(R²)为0.9999,在蜂蜜基质中的平均加标回收率在87.4%～106.9%之间,变异系数在0.7%～7.3%之间,定量限为0.10 mg/kg。利用该方法测定了48份市售蜂蜜样品,仅有1份样品存在百里香酚残留。本研究建立的方法简单、迅速、可靠,适用于蜂蜜中百里香酚残留的批量筛查和定量测定。     

A review of the liquid chromatographic methods for the determination of biogenic amines in foods

Biogenic amines (BAs) are biologically active molecules which have aliphatic (putrescine, cadaverine, spermine, spermidine), aromatic (tyramine, phenylethylamine) or heterocyclic (histamine, tryptamine) structures. They can be detected in raw and processed foods which are formed and degraded through several pathways during the metabolic processes of animals, plants and microorganisms. The identification and quantitation procedures of BAs in food samples are very important, because BAs are considered as the indicators of food quality and freshness. The determination of BAs are commonly achieved by separation techniques such as high-performance liquid chromatography (HPLC), gas chromatography (GC) and capillary electrophoresis (CE). In this article, analysis of BAs in foods were reviewed from 2007 to present.     

Determination of biogenic amines in <Emphasis Type="Italic">Cheonggukjang</Emphasis> using ultra high pressure liquid chromatography coupled with mass spectrometry

A rapid and reliable method for the simultaneous determination of 12 biogenic amines (BAs; agmatine, phenylethylamine, tyramine, putrescine, cadaverine, histamine, serotonin, tryptamine, spermidine, noreinephrine, dopamine, and spermine) in cheonggukjang was optimized and validated using ultra high pressure liquid chromatography-electrospray tandem mass spectrometry (UHPLC-ESI-MS/MS). The BAs were dansylated and separated on a C8 column under LC gradient of 7 min duration, and detected by MS/MS with the multiple reaction monitoring mode (MRM). This method exhibited excellent linearity for all of the analytes with correlation determination (R²) higher than 0.98. The limits of detection (LODs) were 10.8–39.6 μg/kg. The precision results were expressed as relative standard deviation (RSD), ranged from 0.3 to 14.3% for intra-day and from 0.9 to 15.4% for the interday. The proposed method will help to ensure for quality control by monitoring of BAs in cheonggukjang.     

Irradiation Effects on Biogenic Amines in Korean Fermented Soybean Paste During Fermentation

ABSTRACT: Irradiation effects on biogenic amines (BAs) and microbiological populations of Korean fermented soybean paste were investigated during fermentation. Soybean paste was prepared and irradiated with doses of 5,10, and 15 kGy, and then fermented at 25 °C for 12 wk. Bacillus spp. and lactic‐acid bacteria decreased by irradiation but increased during fermentation. Biogenic amines detected were putrescine, cadaverine, β‐phenylethylamine, spermidine, spermine, tryptamine, histamine, tyramine, and agmatine. A significant difference was not observed in BA content between control and irradiated samples immediately after gamma irradiation. However, 4 kinds of BAs, putrescine, tryptamine, spermidine, and histamine, showed significant reduction by irradiation during fermentation (P < 0.05).     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定动物源性食品中9种多肽类抗生素残留

建立了动物组织中9种多肽类抗生素残留的固相萃取-超高效液相色谱串联质谱（UPLC-MS/MS）检测方法。样品经甲醇-0.1 mol/L盐酸（7:3,v/v）混合溶剂提取,酸性氧化铝除杂、正己烷去除油脂,亲水-亲脂平衡（hydrophilic-lipophilic balance,HLB）固相萃取柱净化,以0.2%的甲酸水溶液和乙腈为流动相,经过C₈色谱柱（100A, 150 mm×2 mm, 3 μm）梯度洗脱分离,使用电喷雾正离子化和多反应监测模式检测。结果表明,万古霉素和去甲万古霉素、恩拉霉素A、恩拉霉素B、太古霉素在2～200 μg/L范围内,粘杆菌素A、粘杆菌素B、杆菌肽A在5～500 μg/L范围内,维吉尼霉素M1在0.1～20 μg/L范围内,各化合物定量离子的峰面积和样品质量浓度之间呈现良好的线性关系（R2>0.99）,方法的定量限（S/N=10）为1～20 μg/kg,检出限为0.3~6 μg/kg;以鸡肉、猪肉、猪肝、猪肾为基质,在加标水平为1～200 μg/kg时,各个化合物的平均加标回收率为74.2%～96.3%,相对标准偏差为4.3%～14.6%。该方法简便、灵敏、准确,可用于动物组织中多肽类抗生素残留的同时测定。     

Detection of ten biogenic amines in Chinese commercial soybean paste by HPLC

This paper aimed to develop a high-performance liquid chromatography (HPLC) method that can simultaneously detect ten biogenic amines (BAs) in commercially available soybean paste and to determine the contents of BAs in these products. Heptylamine (Hep) was used as the internal standard reagent and benzoyl chloride as the sample derivatization reagent; Inertsil ODS-3 chromatographic column was set as the stationary phase while the acetonitrile and 5 mmol/L ammonium acetate solution as the mobile phases; the samples were treated with gradient elution and detected at 254 nm (UV). Perchloric acid solution (0.4 mol/L) was employed as the sample extraction solvent to determine the contents of ten BAs in soybean paste products. All BAs were separated within 20 min. The methodological validation suggested good linearity, whereas the linear correlation coefficient of all standards was greater than 0.99 with the linear range of 0.1–80 μg/g, detection limits of 0.01–0.03 μg/g, and quantitation limits of 0.03–0.10 μg/g. For 17 commercially available soybean paste products involved in our study, different samples were distinguished from each other not only by the dramatic differences in the contents of BAs but also by the variance in BA types. Of these BAs, tyramine (Tyr) and agmatine (Agm) were found to be the highest contents in soybean paste products; the contents of histamine (His), 2-phenylethylamine (Phe), serotonin (Ser), spermidine (Spd), and putrescine (Put) were lower, followed by cadaverine (Cad), tryptamine (Try), and spermine (Spm). This method proved to be highly sensitive and effective in determining the contents of BAs in soybean paste products; there was a dramatic difference in the contents of ten BAs among different soybean paste products.     

高效液相色谱-串联质谱法测定畜禽肉及其制品中工业松香

为建立高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）检测畜禽肉及其制品中工业松香的分析方法。样品经乙腈溶液超声提取,经C₁₈固相萃取柱净化,定容过滤膜后采用HPLC-MS/MS对目标物脱氢松香酸进行分析,内标法定量。采用Waters ACQUITY HSS T3色谱柱（2.1 mm×100 mm, 1.8 μm）分离,以0.1%甲酸（v/v）水溶液和乙腈（30:70）为流动相进行等度洗脱,采用电喷雾电离（ESI）源、多反应监测（MRM）、正离子扫描模式进行检测。结果表明,在5～400 ng/mL的范围内目标化合物呈现较好的线性关系（相关系数r>0.99）,检出限（LOD）和定量限（LOQ）分别为80和200 μg/kg。目标化合物在200、400和2000 μg/kg 3个水平下的加标平均回收率为96.05%~104.17%,相对标准偏差（RSD）为0.62%～3.68%（n=6）。实际样品检测分析结果显示,脱氢松香酸阳性样品数量占样品总量的16.67%,残留含量范围为390.15～1850.03 μg/kg。该法简便快捷,准确可靠,可适用于畜禽肉及其制品中工业松香的快速准确测定。     

液相色谱-串联质谱法测定畜禽表皮中松香酸和脱氢松香酸

采用液相色谱-串联质谱法对畜禽表皮组织中的松香酸和脱氢松香酸含量进行检测。样品中的松香酸和脱氢松香酸用乙腈提取,经HLB固相萃取柱净化,采用液相色谱-串联质谱进行检测。色谱柱：反相C18柱（100 mm×2.1 mm,2 μm）;流动相：0.1%甲酸溶液和0.1%甲酸-甲醇溶液（10∶90,V/V）;流速：0.3 mL/min;质谱分析采用电喷雾电离正离子模式检测,扫描方式为多反应监测。结果表明：松香酸线性范围为2.0～100 μg/L,检出限为1.1 μg/kg,定量限为3.6 μg/kg;脱氢松香酸线性范围为5.0～250 μg/L,检出限为3.9 μg/kg,定量限为13 μg/kg。在5.0～200 μg/kg添加量范围内松香酸和脱氢松香酸的回收率为81.7%～93.7%,相对标准偏差均在12%以内。方法用于实际样品分析,多个畜禽表皮样品中检出松香酸及脱氢松香酸,采用松香甘油酯进行脱毛的鸭皮中也检出了一定含量的松香酸及脱氢松香酸。本实验建立的分析方法简便快捷,具有较好的灵敏度和可靠性,可用于畜禽表皮组织中松香酸和脱氢松香酸的定量确证分析。