紫色马铃薯花色苷稳定性研究

探讨pH、光照、温度、氧化剂、还原剂、金属离子、防腐剂对紫色马铃薯花色苷理化稳定性的影响。结果表明:紫色马铃薯花色苷只有在酸性条件下才可以稳定存在;对光、热敏感,稳定性差;氧化剂和还原剂对紫色马铃薯花色苷有较大的破坏作用;Na^+、Fe^(2+)对紫色马铃薯花色苷有破坏作用,Mg^(2+)、Mn^(2+)、Cu^(2+)可起到一定辅色作用;苯甲酸钠对紫色马铃薯花色苷稳定性影响不大,抗坏血酸具有减色作用。在今后的加工或贮藏中,应尽量选择避免对紫色马铃薯花色苷具有破坏性的条件。     

紫色马铃薯花色苷抗氧化活性研究

从紫色马铃薯中提取出花色苷,对其抗氧化活性进行了研究。对紫色马铃薯花色苷的总还原力、清除DPPH·、抗脂体抗氧化活性和清除羟自由基能力的试验结果表明:紫色马铃薯花色苷的总还原力与抗坏血酸相当;当紫色马铃薯花色苷浓度达500μg/mL时,抗脂体抗氧化活性的抑制率为88.34%,DPPH·清除能力达到94.98%。紫色马铃薯花色苷浓度在低于400μg/mL时清除羟自由基能力的明显高于抗坏血酸,当高于400μg/mL时清除羟自由基能力低于抗坏血酸。     

异鼠李素调控AKT-FOXO1通路改善胰岛素抵抗HepG2细胞糖代谢作用机制

目的:研究异鼠李素通过AKT-FOXO1信号通路改善Hepg2细胞胰岛素抵抗机制。方法:使用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法筛选异鼠李素安全剂量;通过高浓度胰岛素处理诱导Hepg2细胞胰岛素抵抗(IR)模型;使用葡萄糖氧化酶法测得培养基中葡萄糖含量,衡量异鼠李素对胰岛素抵抗Hepg2细胞葡萄糖代谢水平影响;通过Western blot 检测细胞中AKT(蛋白激酶B),p-AKT(磷酸化的蛋白激酶B),FOXO1(叉头转录因子O亚家族1),p-FOXO1(磷酸化的叉头转录因子亚家族1),G6pase(六磷酸葡萄糖酶),PEPCK(磷酸烯醇式丙酮酸激酶)这六个蛋白表达水平的变化。结果:异鼠李素对Hepg2细胞的安全剂量为1~3.8 μg/mL;与模型组相比,低浓度异鼠李素显著的增加了胰岛素抵抗Hepg2葡萄糖消耗量(P<0.05),显著促进了胰岛素抵抗Hepg2细胞的AKT、FOXO1蛋白磷酸化(P<0.05),从而显著抑制了G6pase和PEPCK的蛋白表达(P<0.05),其作用效果与二甲双胍相当。结论:异鼠李素可有效改善胰岛素抵抗Hepg2细胞,并通过调节AKT-FOXO1信号通路达到这一作用效果。     

贻贝多糖对胰岛素抵抗HepG2细胞糖代谢的影响

为了探究贻贝多糖对胰岛素抵抗（Insulin resistance,IR）HepG2细胞糖代谢影响的潜在分子机制,以贻贝多糖（Mussel polysaccharides,MP）为研究材料,采用CCK8法检测HepG2细胞的增殖情况,同时筛选不同浓度胰岛素构建细胞胰岛素抵抗模型,检测MP对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗的影响。结果显示：当胰岛素浓度处于10-6 mol/L时,HepG2细胞的葡萄糖含量最高,对葡萄糖的消耗能力最弱,是构建胰岛素抵抗模型的最佳浓度。此外,MP(100～1000μg/mL)对HepG2细胞无毒性,能促进细胞增殖。与IR-HepG2细胞相比,200、400、600μg/mL的MP能明显提升糖原含量,分别为17.20%、22.95%和32.50%。同时,高剂量MP能显著上调PI3K和GLUT2的相对基因表达量,并能降低GSK-3β的表达量。为后续MP降血糖提供实验基础,同时有助于促进MP的开发利用。     

紫色马铃薯中花色苷提取工艺的研究

目的:研究紫色马铃薯中花色苷的最佳提取工艺。方法:以紫色马铃薯River John Blue基因型为原料,对其花色苷提取工艺条件(粉末浸泡时间,乙醇体积分数,提取温度,提取时间,料液比)进行优化,以p H示差法测定花色苷的含量作为评价指标。在单因素的基础上,再进行正交实验分析得到优化组合条件。结果:紫色马铃薯花色苷最佳提取工艺条件为:提取前用提取溶剂浸泡粉末1 h,乙醇体积分数50%,提取温度60℃,提取时间120 min,料液比1∶10mg/m L,在此条件下花色苷的含量可达到542.3 mg/kg。结论:此优化方法可行,为紫色马铃薯花色苷的提取提供了参考数据。     

知母水溶性小分子提取物对胰岛素抵抗HepG2细胞体外糖代谢的影响

目的 研究知母水溶性小分子提取物的制备及其对胰岛素抵抗HepG2 (IR-HepG2)细胞糖代谢的作用.方法 采用水提取,膜分离方式制备知母提取物;采用高浓度胰岛素持续作用于HepG2细胞24 h建立胰岛素抵抗模型,加入知母水溶性小分子提取物保温24 h后,测定对照组和加药组细胞内葡萄糖消耗量、肝糖原含量及己糖激酶(hexokinase,HK)、丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)的活性.结果 知母水溶性小分子提取物明显增加细胞的葡萄糖消耗、提高IR-HepG2细胞HK、PK活性,增加肝糖原含量.结论 知母水溶性小分子提取物可明显改善胰岛素抵抗状态下HepG2细胞对葡萄糖的利用,提高肝HK、PK活性,促进葡萄糖进入肝细胞,增加肝糖原合成,促进糖代谢.     

紫色马铃薯花色苷理化性质研究

采用溶剂浸提法提取紫色马铃薯花色苷,研究pH 值、温度、光照对色素的影响,探讨在金属离子、氧化还原剂、防腐剂、食盐、葡萄糖等存在的条件下花色苷的稳定性。结果表明：紫色马铃薯花色苷在可见光范围内的最大吸收波长为536nm,为水溶性色素;70℃以内比较稳定;pH 值对色素有显著影响,在酸性条件下较为稳定;金属离子Al3+、Zn2+、Na+、Ca2+ 对色素色泽无不良影响,而Sn2+、Fe3+ 影响显著;色素耐氧化性、耐还原性差,且光照能加速色素降解;防腐剂、食盐及葡萄糖等常用添加剂对色素无影响。     

紫色马铃薯花色苷的浸提工艺研究

采用浸提法提取紫色马铃薯中的花色苷,考察了不同溶剂、乙醇体积分数、浸提温度、浸提时间、pH和液料比等因素对浸提效果的影响,确定了最佳单因素水平.通过正交试验,确定了紫色马铃薯中花色苷提取的最佳工艺条件为:乙醇体积分数70%,提取温度50℃,提取时间90 min,pH 1.00,液料比10:1(mL/g).在此条件下,紫色马铃薯中花色苷的一次提取得率为3.4%.液料比和乙醇体积分数是影响紫色马铃薯中花色苷提取率的主要因素,其中,液料比影响最大,达到极显著水平,其次是乙醇体积分数,也达显著水平,时间和温度有一定影响,均不显著.     

苦瓜皂苷对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗量的影响

采用高浓度的胰岛素诱导HepG2细胞出现葡萄糖代谢异常,从胰岛素的添加量和作用时间角度探讨建立胰岛素抵抗细胞(HepG2/IR)模型的最佳条件;分别设立阴性对照组、胰岛素抵抗模型组、盐酸吡格列酮阳性对照组以及苦瓜皂苷干预组(100、300、500、700μg/mL),利用葡萄糖测定试剂盒检测各组葡萄糖消耗量,同时MTT法评价苦瓜皂苷对HepG2/IR细胞活性的影响。结果表明,30μg/mL胰岛素诱导处理HepG2细胞36h是产生胰岛素抵抗的最适条件。与HepG2/IR模型组相比,300μg/mL的苦瓜皂苷不仅可以显著改善HepG2/IR细胞的葡萄糖消耗量,还能提高其细胞活性。     

藻蓝色素对胰岛素抵抗HepG2细胞糖代谢的影响

为探究藻蓝色素(phycocyanin, PC)体外改善胰岛素抵抗的作用机制,采用胰岛素体外诱导方式,分别设置5个胰岛素浓度梯度(10-9、10-8、10-7、10-6 、10-5μmol/L)以及6个时间梯度(0、12、24、36、48、72h)处理HepG2细胞,以葡萄糖消耗量和细胞存活率为指标,确定建立胰岛素抵抗型HepG2细胞模型的较佳作用浓度及时间。检测PC干预后HepG2细胞葡萄糖消耗量、糖原合成和存活率,利用RT-qPCR和Western blot探讨PC可能的作用机制。实验结果表明:胰岛素抵抗型HepG2细胞模型最佳诱导时间和浓度为36h、10-7μmol/L;不同浓度的PC可以提升胰岛素抵抗型HepG2细胞的葡萄糖消耗量;PC能够上调正常HepG2和胰岛素抵抗型HepG2细胞中IRS1、IRS2、GLUT1、GLUT4基因的转录水平,并且增加细胞中IRS1、AMPK、GSK-3β以及AKT蛋白的磷酸化水平。研究结果表明,PC能够显著提升胰岛素抵抗型HepG2细胞的葡萄糖消耗量,通过激活胰岛素调节相关的IRS1/AKT信号通路,增加AMPK的磷酸化和葡萄糖转运蛋白GLUT1、GLUT4基因表达,加速HepG2细胞对葡萄糖的利用和改善细胞胰岛素抵抗。研究结果显示,PC在预防或改善2型糖尿病肝脏胰岛素抵抗方面有潜在作用。     

高糖高脂诱导胰岛素抵抗HepG2细胞模型的建立及活性成分的功能评价

胰岛素抵抗是导致Ⅱ型糖尿病发生的主要机制之一,它会导致高血糖,最终引发糖尿病发病。目前胰岛素抵抗的细胞模型多样,但是以单一因素诱导造模为主。利用高糖联合高脂诱导HepG2细胞模型,更符合人体发病时高血糖高血脂的状态。实验采用25mmol/L葡萄糖联合不同浓度的油酸软脂酸(摩尔浓度比2:1),于36h测定细胞的糖吸收、糖原含量以及甘油三酯含量,以确定合理的造模浓度。最终用0.5mmol/L的游离脂肪酸联合诱导液建立了胰岛素抵抗HepG2细胞模型,并利用此模型对4种成分改善胰岛素抵抗进行了评价。结果发现,葛根素、甜菊苷、熊果酸和表儿茶素均能有效地改善HepG2细胞模型的胰岛素抵抗,相比较甜菊苷和表儿茶素的效果较好。     

紫甘薯花色苷对高脂膳食氧化损伤仓鼠的保护作用机制

实验研究紫甘花色苷对高脂膳食诱导氧化损伤仓鼠的保护作用机制。40只仓鼠随机分为对照组,0.2%、0.4%、0.8%紫甘薯花色苷组(n=10),测定血清、脑及肝脏中总SOD、GSH-PX、CAT酶活力及氧化产物MDA含量,荧光定量PCR(RT-PCR)法检测肝脏中抗氧化酶基因的表达水平。血清及脑中氧化产物MDA含量紫甘薯花色苷组较对照组显著减少(P0.05),紫甘薯花色苷组血清中GSH-PX、CAT肝脏中总SOD酶活力及较对照组显著升高(P0.05);RT-PCR结果显示,紫甘薯花色苷显著上调仓鼠肝脏中Cu ZnSOD、GSH-PX酶m RNA的表达(P0.05),0.2%、0.8%组血红素加氧酶1(HO-1)基因的表达水平较对照组显著升高(P0.05)。紫甘薯花色苷对仓鼠氧化损伤有保护作用,其机制可能上调抗氧化酶的表达水平,从而增加抗氧化酶活力实现的。     

甜玉米芯多糖对胰岛素抵抗HepG2细胞糖代谢功能的影响

目的：探讨甜玉米芯多糖（sweet corncob polysaccharide,SCP）组分SCP-80-I对胰岛素抵抗HepG2（insulin resistant HepG2,IR-HepG2）细胞糖代谢功能的影响。方法：确立IR-HepG2细胞模型建立的最佳条件,并由此建立IR-HepG2细胞模型;分别以50、100、200、400 μg/mL剂量的SCP-80-I孵育细胞24 h,评价其对细胞葡萄糖消耗的影响,同时利用噻唑蓝法评价其细胞毒性;检测氧化应激标志物超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）及活性氧（reactive oxygen species,ROS）的水平,测定细胞内糖原积累水平及糖酵解关键限速酶己糖激酶（hexokinase,HK）、丙酮酸激酶（pyruvate kinase,PK）的活力。结果：确立以1×10－6 mol/L胰岛素处理24 h作为诱导IR-HepG2细胞形成的最佳条件,并成功建立IR-HepG2细胞模型;在孵育实验中,SCP-80-I能极显著增加IR-HepG2细胞的葡萄糖摄取量（P＜0.01）,细胞活力随SCP-80-I质量浓度的增加呈先上升后下降的趋势;200 μg/mL SCP-80-I处理组与模型对照组相比,胞内MDA含量极显著下降,SOD活力极显著提高,ROS水平极显著下降（P＜0.01）;胞内糖原含量极显著增加（P＜0.01）,HK与PK活力极显著增加（P＜0.01）。结论：推测SCP-80-I的降血糖功效与其缓解氧化应激所造成的肝脏细胞损伤,改善胰岛素抵抗肝脏细胞的糖代谢功能有关。     

紫薯花青素体外抗氧化及对H2O2诱导HepG2细胞氧化损伤的保护作用

目的：研究紫薯花青素的体外抗氧化作用,建立H2O2诱导HepG2细胞氧化损伤模型,初步评价紫薯花青素的抗氧化应激作用。方法：紫薯干粉经过提取、纯化制得紫薯花青素干粉,分别测定紫薯花青素的总还原力、对羟自由基（·OH）、超氧阴离子自由基（O2－•）的清除能力以及对大鼠红细胞溶血的保护作用。建立H2O2诱导HepG2细胞氧化损伤模型,采用四甲基偶氮唑蓝（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）法检测不同质量浓度紫薯花青素对HepG2细胞氧化损伤的保护作用。结果：紫薯花青素的还原力和VC基本相当;紫薯花青素对·OH有很好的清除效果,在实验浓度范围内有明显的剂量-效应关系;随紫薯花青素浓度的升高,对O2－•的清除作用增强,呈现良好的量-效关系,单位浓度的紫薯花青素对O2－•的清除作用比2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚（butylated hydroxytoluene,BHT）效果好。不同质量浓度的紫薯花青素均可抑制H2O2诱导的大鼠红细胞溶血,且随着紫薯花青素质量浓度的升高,大鼠红细胞的溶血度降低,呈现良好的量-效关系。H2O2诱导的HepG2细胞氧化损伤模型中,50～1 600 μg/mL的紫薯花青素均能够抑制H2O2引起的HepG2细胞凋亡,当紫薯花青素质量浓度达到800 μg/mL时,HepG2细胞存活率为（88.03±7.48）%。结论：紫薯花青素具有良好的体外抗氧化作用,并对H2O2诱导HepG2细胞氧化损伤具有明显的保护作用,研究初步揭示了紫薯花青素具有体外抗氧化作用。     

苦荞清蛋白酶解物对高糖诱导的HepG2细胞胰岛素抵抗的保护作用

目的:建立胰岛素抵抗HepG2细胞模型,观察苦荞清蛋白酶解物(tartary buckwheat albumin hydrolysate,TBAH)对HepG2细胞胰岛素抵抗的影响.方法:采用碱性蛋白酶水解苦荞清蛋白制备TBAH,超滤法截留分子质量小于3 kDa的TBAH;利用高糖高胰岛素诱导HepG2细胞36 h建立...     

苦瓜水提物和醇提物对HepG2细胞胰岛素抵抗的调节作用

为研究苦瓜水提物(BMWE)和醇提物(BMEE)调节胰岛素抵抗的异同点,本文采用棕榈酸诱导HepG2细胞建立胰岛素抵抗(IR)细胞模型,测定了BMWE和BMEE对HepG2-IR细胞葡萄糖消耗量、糖原、甘油三酯(TG)、ATP及胰岛素抵抗信号通路相关基因mRNA表达水平的影响。结果表明,BMWE和BMEE均可显著增加IR细胞的葡萄糖消耗量和胞内糖原含量;BMEE还能显著降低细胞中TG含量(112.08%vs.132.97%)、增加细胞中ATP含量(80.62%vs.48.44%);同时BMWE和BMEE均能显著提高IR细胞中IRS1(胰岛素受体1)、PI3K(磷脂酰肌醇-3-激酶)、AMPK(腺苷酸活化蛋白激酶)和CPT1(肉毒碱棕榈酰转移酶1)mRNA的表达水平,降低ACC2(乙酰辅酶A羟化酶2)mRNA的表达水平;BMWE还可增加细胞中AKT(蛋白激酶B)mRNA的表达水平。在mRNA水平,BMWE通过激活IR细胞的IRS1-PI3K-AKT信号通路改善胰岛素抵抗;而BMEE则通过调节AMPK-ACC2-CPT1信号通路改善IR细胞的糖脂代谢,二者的作用途径有所不同。