罗非鱼皮胶原蛋白肽制备的工艺优化

以罗非鱼鱼皮为原料,研究利用酶法制备胶原蛋白肽制品。测定了罗非鱼皮的基木组成成分,利用低温连续相变萃取技术进行脱脂处理;以水解度、水解产物分子量和感官评定为指标,研究蛋白酶种类对酶解的影响;以水解度为指标,研究酶解条件对水解度的影响,并采用响应面试验对鱼皮胶原肽制备工艺进行优化;用凝胶过滤色谱法测定酶解液分子质量分布。结果表明:采用碱性蛋白酶水解鱼皮效果最好,酶解的最佳工艺条件为:时间7 h、加酶量7%、温度60℃、pH值10.38,在此条件下碱性蛋白酶水解罗非鱼皮的水解度最高可达23.01%。由本法所得胶原肽是以分子质量180~1000 u之间的寡肽(约2~8个氨基酸残基)为主的物质,具有较好的生理活性,可作为功能因子广泛应用于保健食品、化妆品、医药等各个行业当中。     

碱性蛋白酶水解罗非鱼皮提取胶原蛋白肽的最佳条件研究

以罗非鱼皮为原料,采用酶法提取胶原蛋白肽,用正交实验对罗非鱼皮胶原蛋白肽的提取工艺进行优化,并测定了罗非鱼皮的基本组成成分和鱼皮胶原蛋白肽的氨基酸组成.结果表明,碱性蛋白酶添加量为0.5%,固液比1:3,酶解时间为3 h,酶解温度为50℃时鱼皮胶原蛋白肽的提取率最高为13.5%.     

罗非鱼皮胶原蛋白肽亚铁螯合修饰及螯合物性质的研究

以罗非鱼皮为原料制备胶原蛋白肽(TSGP),胶原蛋白肽与亚铁盐进行螯合反应,对TSGP亚铁螯合物的理化性质及功能特性进行研究。实验优化得出最佳螯合反应条件是m多肽∶mFeCl2·4H2O=500∶1,pH为6.0,反应时间50min,温度35℃。通过荧光光谱、紫外光谱和红外光谱测定发现Fe2+与TSGP的羧基与氨基均可发生配位反应。抗氧化活性测定实验表明,螯合物具有较强的清除DPPH自由基和ABTS+自由基的能力。     

固态发酵法制备罗非鱼皮胶原蛋白肽及其抗氧化活性研究

以罗非鱼鱼皮为原料,利用枯草芽孢杆菌固态发酵(solid-state fermentation,SSF)制备胶原蛋白肽。以胶原酶酶活力为评价指标,优化产酶发酵条件,并对发酵产物进行氨基酸组成分析、超滤分离及体外抗氧化活性的研究。结果表明,最佳发酵条件为培养基初始pH值为7,种子液菌龄为14 h,加水量为10 mL,发酵温度为35℃,发酵时间为24 h,在此条件下胶原酶酶活力为90.05 U/mL,水解度高达41.73%。经超滤分离得到3种不同分子质量(molecular weight,MW)范围的胶原蛋白肽组分:TSCP-a(M_W> 10 kDa)、TSCP-b(M_W5 k～10 kDa)、TSCP-c(M_W<5 kDa)。其中TSCP-c的抗氧化活性最高,其羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(·O₂^-)和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1-diphenyl-2-picrylhydrazy,DPPH)自由基清除率的半抑制浓度(half inhhibitory co...     

发酵法制备罗非鱼皮胶原蛋白肽的工艺的研究

目的:研究利用枯草芽孢杆菌进行发酵法生产罗非鱼皮胶原蛋白肽的制备工艺。方法:以罗非鱼皮和水为原料,接入枯草芽孢杆菌进行发酵,对罗非鱼鱼皮浓度、装液量、接种时间、接种量、发酵时间进行了考察,通过单因子实验和正交实验优化确定了最佳发酵工艺。结果:最佳发酵工艺为:罗非鱼鱼皮含量为3%,装液量为90mL/250mL,接种量为5%,接种时间为14h,发酵时间为52h。并且在此发酵工艺下,罗非鱼鱼皮蛋白的水解度高达36.88%。结论:采用枯草芽孢杆菌发酵法制备罗非鱼皮胶原蛋白肽,工艺简单、成本低、不污染环境、水解度高,是值得推广的制备胶原蛋白肽的方法。     

罗非鱼皮胶原蛋白肽酶解液的制备及其抗氧化特性研究

以罗非鱼皮为原料,采用直接酶法提取胶原蛋白肽,用正交试验对罗非鱼皮胶原蛋白肽的制备工艺进行优化,并测定了罗非鱼皮的基本组成成分和鱼皮胶原蛋白肽的氨基酸组成。结果表明,碱性蛋白酶添加量为0．5％,固液比1：3,酶解时间为3h,酶解温度50℃时鱼皮胶原蛋白肽的提取率最高为13．5％。并对产品胶原蛋白肽的抗氧化特性进行了分析。     

鳕鱼皮胶原蛋白肽果汁饮料抗紫外线照射引起的皮肤光老化

为研究鳕鱼皮胶原蛋白肽果汁饮料(CJD)对紫外线诱导的皮肤光老化的调节作用,将ICR雄性小鼠随机分为正常组(NC)、模型组(MC)、CJD低剂量组(CJD-L)、中剂量组(CJD-M)和高剂量组(CJD-H),通过观察各组小鼠造模部位皮肤的表观特征、结合HE染色,皮肤中羟脯氨酸和水分的含量来评价CJD对小鼠皮肤光老化的防护作用;通过测定小鼠皮肤组织和血清中的总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力,丙二醛(MDA)的含量,来探究CJD对皮肤光老化的作用途径。结果显示,与MC组相比,CJD中剂量和高剂量组可以显著抑制光老化小鼠皮肤中水分的流失(p<0.05)及胶原含量的降低(p<0.01),显著提高小鼠皮肤组织和血清中T-SOD、GSH-Px、CAT的活力(p<0.05),显著降低MDA的含量(p<0.05)。研究表明,胶原蛋白肽饮料对紫外线引起的皮肤光老化有保护作用,能够有效预防和延缓光老化。     

三酶法制备罗非鱼鱼皮胶原蛋白抗氧化肽及活性研究

为了探索制备罗非鱼鱼皮胶原蛋白抗氧化肽的最佳工艺,在碱性蛋白酶和胰蛋白酶酶解的基础上,以酶解温度、酶解时间、酶解pH值和酶与底物质量比([E]/[S])为试验因素,以水解度和DPPH自由基清除率为响应值,采用响应面分析法优化Orientase 20A酶的酶解条件。结果表明:最优工艺参数为:酶解温度为41.74℃、pH3.97、酶解时间为6h、[E]/[S]为1.5%,酶解液水解度和DPPH自由基清除率的预测值分别为9.42%和35.01%,验证值分别为9.57%和35.21%。响应面对酶解法制备罗非鱼鱼皮胶原蛋白抗氧化肽的酶解条件的优化是可行的,可以用于实际预测。抗氧化活性实验表明,酶解肽具有较强的清除DPPH自由基和ABTS+.能力,其IC50值分别为10.78mg/mL和8.26mg/mL。     

双缩脲法测定罗非鱼源胶原蛋白肽含量的改良及应用评价

为探究罗非鱼源胶原蛋白肽含量的快速测定方法,以罗非鱼皮胶原蛋白肽为对照品,改良双缩脲比色法测定肽含量的操作方法,考察显色络合物最大吸收波长、线性拟合度高的肽和三氯乙酸（trichloroacetic acid,TCA）用量范围、pH值;在优化条件下对标准曲线进行重复性、精密度评价以及加样回收率实验;研究本方法对不同分子质量罗非鱼皮及鱼鳞胶原蛋白肽体系检测的适用性。结果显示,当胶原蛋白肽（标称分子质量3 kDa）质量浓度在0.3～1.5 mg/mL范围内,使用13% TCA溶液,调整体系pH 12.5,在波长545 nm处检测,吸光度与肽质量浓度线性拟合好（R2=0.999）,标准曲线方程为y=0.144 9x＋0.001 5;重复性和精密度实验得到相对标准偏差（relative standard deviation,RSD）分别为1.86%和1.84%,加样回收率分别为113.9%、109.7%,RSD分别为1.39%、1.00%;线性范围宽、重复性好、准确度高。将本法应用于不同种类罗非鱼肽产品体系的检测,加样回收率相差不大,偏差均较小,说明本法简便、快捷,适用于罗非鱼源肽含量的检测。     

糖基化对罗非鱼皮胶原蛋白肽热滞活性及结构特征的影响

为提高罗非鱼皮胶原蛋白肽作为绿色抗冻剂的实用性,采用湿法糖基化反应对其热滞活性进行改良。以糖基化接枝度为指标,利用正交试验对糖基化反应进行工艺优化,并对糖基化前后胶原蛋白肽的热滞活性及结构特征进行比较分析。结果显示,罗非鱼胶原蛋白肽葡萄糖糖基化最佳工艺为温度70℃、胶原蛋白肽质量浓度90 g/L、糖肽比4∶1、反应时间90 min,该条件下糖基化接枝度达(52.06±1.50)%;与胶原蛋白肽相比,糖基化产物的热滞活性上升了1.1℃,提高47.8%,冰晶含量降低29.94%,属于“极度活跃”抗冻肽;糖基化后胶原蛋白肽的质荷比由300～700变化为400～800,二级结构的大部分β-转角转变为β-折叠,且增加了羟基的含量。葡萄糖糖基化对罗非鱼皮胶原蛋白肽的热滞活性具有显著的增强作用,葡萄糖糖基化罗非鱼皮胶原蛋白肽具有开发成新型、高效绿色抗冻剂的潜力。     

胶原蛋白肽与弹性蛋白肽对改善皮肤光老化的研究进展

皮肤光老化是紫外线通过损伤皮肤真皮层和表皮层而诱导的皮肤衰老,主要体现在3个方面：皱纹与松弛、屏障功能受损及干燥粗糙、色斑与晒斑。由于生活压力和环境污染程度日益增加,现代人群的皮肤衰老速度逐渐加快,如何改善皮肤衰老已经成为了人们的关注热点。胶原蛋白肽（collagen peptide,CP）与弹性蛋白肽（elastin peptide,EP）是由胶原蛋白和弹性蛋白制得的低分子活性肽,能够从上述三方面展现出优良的抗光老化活性。该文对CP和EP制备工艺进行探讨,同时从CP和EP如何减少皱纹、保湿、美白的角度出发,对两种肽抗皮肤光老化的机理进行综述,以期为CP和EP的日常食用及蛋白肽产品的开发提供科学参考。     

Antioxidant and hypoglycaemic effects of tilapia skin collagen peptide in mice

In this study, tilapia collagen peptide (TCP) was prepared by alcalase hydrolysis of tilapia skin, and the antioxidant and hypoglycaemic effects of TCP were investigated. The results showed that TCP possessed DPPH and ABTS+ free radicals‐scavenging activities. In diabetic mice in which diabetes was induced by injection of alloxan (50 mg kg^?1 bw), high‐dose TCP (1.7 g kg^?1 bw) and the drug metformin (1.0 g kg^?1 bw) were found to reduce 31.8% and 30.3% of blood glucose levels in 25 days, respectively. Moreover, in diabetic mice receiving high‐dose TCP, antioxidant enzymes SOD and CAT were increased by 23% and 59.2%, respectively, and MDA was decreased by 39.1%. Comparing the treated high‐dose TCP group with the metformin group, there were similar SOD (61.5 U mg^?1 vs. 60.2 U mg^?1) and MDA (1.4 nmol mg^?1 vs. 1.3 nmol mg^?1), but more (~7%) CAT (359.8 U g^?1 vs. 336.1 U g^?1). Together, the present data, for the first time, demonstrated that TCP possessed hypoglycaemic effects in mice.     

香蕉皮多糖的提取及其在护手霜中的应用

采用水提醇沉法提取香蕉皮多糖,选择苯酚—硫酸法测定香蕉皮多糖含量,并评价其保湿性能,进而用于制备香蕉皮多糖护手霜。结果表明,香蕉皮多糖含量为3.99%,24h内保湿性能良好,保湿率均在80%以上,且保湿性能明显强于甘油。此外,所制备的香蕉皮多糖护手霜其理化指标、感官指标及卫生指标均符合中国轻工行业标准(QB/T1857—2004),具有推广价值。     

鱼鳞鱼皮制备胶原蛋白肽研究进展

鱼类加工副产物——鱼鳞鱼皮富含胶原蛋白肽,其来源丰富、价格低廉、加工简单,是鱼源肽加工企业的首选原料。该文对鱼鳞鱼皮制备胶原蛋白肽的提取方法、分离过程、鉴定及功能方面的研究进展进行综述,并对以鱼鳞鱼皮为主要原料制备美白保湿肽的发展前景进行展望,为其进一步的高值化利用提供参考。     

罗非鱼皮抗氧化肽联合维生素C对皮肤损伤的愈合作用

该研究利用秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans,C. elegans）皮肤损伤模型,研究了罗非鱼皮抗氧化肽（Tilapia Skin Antioxidant Peptide,TSAP）单独或联合维生素C（Vitamin C,Vc）饲喂线虫对其伤口愈合、生存率、体内活性氧（ROS）含量、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）以及过氧化氢酶（CAT）的影响,并利用分子对接技术解析TSAP与Vc的协同作用机理。结果表明,与皮肤损伤模型组相比,TSAP单独或联合Vc均能显著提高线虫的伤口愈合率和生存率（P<0.05）。其中,TSAP与Vc联合饲喂的线虫在伤口损伤6 h后的愈合率（21.84%）和损伤后144 h的生存率（43.33%）显著高于TSAP或Vc单独饲喂组（其中TSAP组的伤口愈合率为14.11%,生存率为20.00%;Vc组的伤口愈合率为14.40%,生存率为20.00%,P<0.05）。与皮肤损伤模型组、TSAP组和Vc组相比,TSAP与Vc联合饲喂线虫的细胞内ROS（34.28%）和MDA含量（44.47%）显著降低（P<0.05）,SOD（45.24%）和CAT活力（106.57%）显著增加（P<0.05）;分子对接结果表明,TSAP与Vc通过Gly3、Arg8与烯二醇的氢键作用形成复合物,对线虫损伤愈合产生协同作用。综上所述,TSAP和Vc联合饲喂可调控线虫的氧化应激水平,协同促进其伤口愈合。     

罗非鱼皮胶原酶解物对HaCat细胞生长的影响

研究经不同商业酶水解后得到的罗非鱼皮胶原酶解物对人皮肤角质细胞HaCaT生长的影响,并对胶原酶 解物的抗氧化活性与促进细胞生长作用的关系进行探讨。结果表明：罗非鱼皮经中性蛋白酶（neutral enzyme, NE）、碱性蛋白酶、胰蛋白酶水解得到的酶解产物中,NE酶解物（neutral enzymatic hydrolysate,NEH）具有显著的 体外抗氧化活性和促进HaCaT细胞增殖的活性（P＜0.05）;NEH（1～5 ku）在质量浓度为25 mg/mL时对HaCaT细胞 的生长具有显著的促进作用（P＜0.05）,并在24 h内能显著促进细胞划痕处伤口愈合（愈合率（81.10±5.77）%, P＜0.05）。经氨基酸组成分析和凝胶色谱分析发现,NEH（1～5 ku）主要包含2 个肽组分,NEH（1～5 ku）的 抗氧化氨基酸苯丙氨酸、亮氨酸、酪氨酸、赖氨酸、精氨酸和组氨酸的质量分数要显著高于其他分子质量的肽 组分（P＜0.05）。研究认为,经NE水解得到胶原肽分子质量为1～5 ku组分对HaCaT细胞生长具有促进作用,这可 能与肽组分中抗氧化氨基酸质量分数较高有关。     

几种生物大分子对罗非鱼皮Ⅰ型胶原自聚集性的影响

研究海藻酸钠、硫酸软骨素、透明质酸和壳聚糖对罗非鱼皮Ⅰ型胶原自聚集动力学和聚集后微观结构的影响。结果表明:在海藻酸钠、硫酸软骨素、透明质酸和壳聚糖存在的情况下,胶原自聚集过程仍然包含两个阶段:成核阶段和生长阶段,但是各物质对两阶段的动力学参数影响不同。海藻酸钠、透明质酸和壳聚糖均能够降低生长阶段的速率常数,然而对成核阶段的影响各有差异。海藻酸钠对成核阶段的速率常数没有显著影响,但是随着含量的增加能够延长成核时间;壳聚糖能够提高成核阶段的速率常数,同时缩短成核时间;透明质酸对成核阶段的速率常数和成核时间却没有显著影响。而硫酸软骨素对成核阶段和生长阶段均没有显著影响。扫描电子显微镜结果表明海藻酸钠、硫酸软骨素、透明质酸易使胶原纤维横向聚集形成纤维束,影响其直径大小的顺序为硫酸软骨素海藻酸钠透明质酸,而壳聚糖却未表现类似作用。