北五味子多糖提取工艺优化及其对LPS刺激巨噬细胞线粒体膜电位的保护作用

目的:提取北五味子多糖,研究其体外抗氧化活性及对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞线粒体膜电位的保护作用。方法:通过热水浸提法及四因素三水平正交分析法L₉(34)提取北五味子多糖,对比北五味子多糖与维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(V_E-TPGS)的体外抗氧化活性,利用LPS构建巨噬细胞损伤模型,通过活性氧(ROS)、JC-1细胞染色实验研究北五味子多糖对ROS的抑制作用及对细胞线粒体膜电位的保护作用。结果:北五味子多糖提取工艺为:料液比1:40 g/mL,提取次数3次,提取时间3.0 h,提取温度为90 ℃,在此条件下多糖最高得率为10.72%,北五味子多糖总糖含量为84.28%±2.03%,葡萄糖含量为30.26%±1.12%;北五味子多糖清除DPPH自由基的IC₅₀值为602.52 μg/mL,清除羟自由基的IC₅₀值为34.24 μg/mL,北五味子多糖1600 μg/mL时,总抗氧化能力达到(0.28±0.01) mmol/mg。细胞实验表明北五味子多糖能够降低LPS诱导巨噬细胞的活性氧的水平,抑制细胞线粒体膜电位下降。结论:北五味子多糖在体外具有较强的抗氧化活性,能够抑制LPS诱导巨噬细胞中活性氧水平进而发挥其对线粒体膜电位的保护作用。     

皂荚多糖超声波提取工艺优化及体外抗氧化活性研究

以皂荚多糖为研究对象,在单因素实验的基础上,采用响应面法对皂荚多糖的超声波提取工艺进行优化,并对多糖进行体外抗氧化活性的研究。结果表明:最佳提取工艺条件为:提取温度50 ℃,液料比35:1 (mL/g),提取时间30 min,超声功率285 W,提取3次,多糖得率为30.65%±0.25%。抗氧化实验表明,皂荚多糖具有一定的抗氧化能力,其对超氧阴离子自由基、DPPH自由基、羟自由基清除作用的IC₅₀分别为:10.3、6.9、1.5 mg/mL。     

铁皮石斛多糖复合酶法提取工艺及其抗氧化性

探讨复合酶法提取铁皮石斛多糖的最佳工艺以及酶解多糖的抗氧化活性。利用单因素及L₁₈(37)正交实验研究了酶配比、酶浓度、酶解温度、酶解时间、料液比及pH对多糖得率的影响,并通过清除DPPH、ABTS自由基研究酶解多糖的抗氧化活性。结果显示酶解最优条件:中性蛋白酶与纤维素酶比例为2:1,酶浓度为10%,料液比为1:120,酶解温度为55 ℃,pH6.0,酶解时间为3 h,在此条件下多糖得率为43.85%±1.8%;酶解多糖对DPPH、ABTS自由基的IC₅₀分别为1.331、0.467 mg/mL,说明酶解石斛多糖具有较好的抗氧化活性。     

荷叶离褶伞多糖提取工艺优化及抗氧化活性研究

本研究以荷叶离褶伞多糖为对象,采用单因素与响应面法对多糖提取温度、提取时间、液料比、次数进行优化,进一步研究了荷叶离褶伞多糖的抗氧化活性。结果表明:在提取温度为89 ℃,时间为3 h,液料比为30:1 (mL/g),提取2次时,荷叶离褶伞多糖得率为5.35%±0.12%,与预测值相近。荷叶离褶伞多糖的抗氧化活性与多糖浓度在0~1.0 mg/mL范围内呈现剂量依赖关系,多糖浓度在1.0 mg/mL时,DPPH和ABTS自由基清除率分别达到45.87%±2.12%和76.49%±1.56%。荷叶离褶伞多糖对DPPH和ABTS自由基半抑制浓度IC₅₀分别为1.40、0.44 mg/mL,说明荷叶离褶伞多糖具有较好的抗氧化能力。     

乙醇/(NH_4)_2SO_4双水相体系提取红景天多糖及抑菌抗氧化活性研究

利用乙醇/(NH_4)_2SO_4在水溶液中形成的分相体系作为多糖提取试剂,采用响应曲面结合BBD中心组合试验设计软件,选择优化多糖提取率与响应因素之间的最佳提取模型参数;以琼脂法结合滤纸片扩散半径作为抑菌活性考察指标;采用硫酸亚铁-过氧化氢-水杨酸氧化法和邻苯三酚(焦性没食子酸)自氧化化法考察红景天多糖对活性自由基的清除能力。试验结果表明,在最佳提取条件下[1∶22.5(g∶mL),50℃,37.5 min],红景天多糖提取率16.64%;抑菌试验结果表明,红景天多糖对金黄色葡萄球菌的抑菌直径(21.1±0.09)mm,属于抑菌极敏感型,对大肠杆菌的抑制直径(16.4±0.02)mm,属于抑菌高敏感度型,对枯草芽孢杆菌的抑菌直径为(12.6±0.04)mm,属于抑制中度敏感型;红景天多糖对3种菌的抑制作用说明,多糖具有一定的抑菌活性,且对于不同的菌种的抑制作用具有特异选择性。抗氧化活性研究结果表明,红景天多糖具有清除自由基的能力,参考VC阳性对照组的清除率,红景天多糖对羟基自由基(·OH)及过氧负离子自由基(O_2~-·)的相对清除率分别为65.1%和51.2%,对应的极限浓度分别为2.0 mg/mL和2.5 mg/mL。以上试验结果说明,通过响应曲面优化结合BBD试验设计,能够确定红景天多糖提取因素与提取率之间的二次函数模型,为多糖的人工提取提供了定性与定量评价指标;同时红景天的体外抑菌抗氧化活性结果表明,开发具有抑菌抗氧化活性的食品及药品防腐剂具有一定的实际应用价值,为红景植物资源的合理配置及相关产品的多元化应用提供技术指导与试验数据参考。     

黄秋葵超微粉多糖提取工艺的优化及其抗氧化活性测定

以黄秋葵为原料,制备黄秋葵超微粉,利用响应面设计法优化黄秋葵超微粉多糖的提取工艺,并测定其对DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟自由基的清除能力和还原力。结果表明:最优工艺条件为料液比1:100(g/mL)、微波时间2 min、超声波时间14 min、超声波功率800 W,此条件下黄秋葵超微粉多糖的得率为27.68%±0.42%。黄秋葵超微粉多糖的体外抗氧化活性在四种体系中的IC₅₀值分别是1.53、4.12、6.38、2.49 mg/mL,具有较好的抗氧化活性。     

北虫草多糖提取工艺优化及其细胞氧化损伤保护作用

目的:优化北虫草多糖的提取工艺,研究北虫草多糖对血管平滑肌细胞氧化损伤的保护作用。方法:采用L₉(34)正交实验法优化多糖提取工艺,利用羟自由基法、DPPH自由基法和FRAP法检测北虫草多糖清除自由基的能力。在细胞水平上构建过氧化氢诱导细胞氧化损伤模型,采用MTT法、ROS细胞染色法评估北虫草多糖对过氧化氢诱导大鼠主动脉平滑肌细胞氧化损伤的保护作用。结果:北虫草多糖的最佳提取条件为:提取温度90 ℃,料液比1:30 g/mL,提取次数3次,提取时间3.0 h,最高得率为7.94%±0.16%。在多糖浓度为1.6 mg/mL时对羟自由基和DPPH自由基的清除能力以及总抗氧化能力分别为75.57%±1.39%、80.23%±2.75%和(0.22±0.01) mmol/mg。细胞实验表明北虫草多糖可显著抑制过氧化氢诱导细胞内ROS生成,提高细胞存活率。结论:成功优化北虫草多糖提取工艺,北虫草多糖具备良好的体外清除自由基的活性,对由氧化应激所导致的心血管疾病中起到很好的防治意义。     

松乳菇多糖提取工艺优化及抗氧化活性评价

为了探索松乳菇菌丝体多糖的最佳提取工艺,并对其多糖进行体外抗氧化活性初步研究。采用超声波辅助浸提的方法,以温度、时间、料液比和次数进行单因素实验;在此基础之上,利用Box-Benhnken方法进行四因素三水平实验设计,以多糖得率为响应值,进行响应面分析;通过测定多糖清除DPPH自由基、OH自由基和O₂-自由基的能力来评价其抗氧化活性,并与维生素C进行对比。结果表明,松乳菇多糖最佳提取工艺条件为:提取温度92.8 ℃、提取时间1.6 h、料液比1:28 (g:mL)和提取次数3次,此条件下松乳菇多糖得率预测值为10.60%,实测值为10.41%,与预测值相对误差为1.79%,说明优化工艺可行。松乳菇多糖对DPPH自由基、OH自由基和O₂-自由基都具有一定的清除能力,其IC₅₀值分别为0.855,1.147,1.126 mg/mL;但与维生素C比较,其抗氧化活性较弱。热水浸提法提取松乳菇多糖高效、简单、低成本,可用作松乳菇多糖的提取工艺;松乳菇多糖具有明显的体外抗氧化活性。     

微波辅助提取陕产瞿麦挥发油工艺优化及其抗氧化活性

以陕产瞿麦挥发油得率作评价指标,在单因素实验基础上,应用响应曲面法,优选出了微波辅助提取陕产瞿麦中挥发油的最佳工艺,并对其抗氧化性进行研究。结果表明,微波辅助提取挥发油的最佳工艺为:微波功率500 W,液料比20:1 mL/g,提取温度46℃,在此条件下得到的挥发油得率达3.19%±0.46%,与模型预测值3.27%基本相符,说明该模型合理可靠。体外抗氧化试验表明:微波法提取的挥发油和同等条件下超声法(功率120 W)提取的挥发油对DPPH·和O₂-·清除能力呈较好的量效关系。微波法和超声法提取的挥发油在实验浓度范围内对DPPH·自由基清除的IC₅₀值分别为0.82、0.73 mg/mL,对超氧阴离子自由基清除的IC₅₀值分别为0.68、0.81 mg/mL,说明陕产瞿麦中挥发油具有一定的抗氧化活性,不同的提取方法得到的挥发油对不同自由基的清除能力略有不同。     

蕨麻多糖提取及抗氧化活性研究

通过水提法探讨蕨麻多糖适宜的提取工艺,并研究其抗氧化活性。考察料液比、浸提温度、浸提时间对蕨麻多糖含量的影响,在单因素试验的基础上做L9(34)正交试验优化提取工艺参数。通过测定蕨麻多糖总抗氧化能力,清除DPPH、·OH、O2-·自由基的能力来评价其抗氧化活性。研究结果表明,蕨麻多糖适宜的提取工艺参数是:浸提温度90℃、浸提时间2 h、料液比1∶30。在此条件下蕨麻多糖含量为2.54%。蕨麻多糖具有较好的抗氧化能力,对DPPH、·OH、O2-·自由基的IC50分别为5.47,2.62,27.53 mg/mL。本研究结果为蕨麻开发利用奠定理论基础。     

桂七青芒果皮多糖提取工艺的响应面优化及其体外抗氧化活性

以桂七青芒的果皮为原料,参考单因素实验结果,设立多糖得率为响应值,采用响应面法优化超声波辅助提取桂七青芒果皮中多糖的工艺,测定桂七青芒果皮多糖对自由基的清除效果及总还原力以衡量其抗氧化活性。结果表明,超声波辅助提取桂七青芒果皮多糖的最佳工艺参数:提取温度68 ℃,液料比73:1 mL/g,超声功率620 W,超声时间20 min。在此条件下实测多糖得率为13.64%±0.12%,与模型预测值14.06%的相对误差<3%,说明该工艺可行。多糖的抗氧化活性体外测试表明:当多糖浓度为4.3 mg/mL时,对羟基自由基、超氧阴离子自由基、ABTS自由基的清除率可达52.41%、83.47%、59.10%,总还原力达到0.455,说明桂七青芒果皮多糖具有较好的抗氧化活性,且其抗氧化能力与多糖浓度成正向线性关系。     

杨树口蘑多糖的超声波辅助提取工艺及其抗氧化活性

研究杨树口蘑多糖的提取工艺及其抗氧化活性。在单因素超声时间、超声功率和料液比实验的基础上,以多糖得率为指标,利用响应面分析法优化超声波辅助提取杨树口蘑多糖工艺,同时测定杨树口蘑多糖对DPPH自由基、羟基自由基及超氧离子自由基的清除能力。结果表明:超声波辅助提取杨树口蘑多糖的最佳提取工艺:超声时间27 min、超声功率410 W、料液比1∶29 (g/mL),在此条件下多糖得率为8.58%±0.02%。超声提取的杨树口蘑多糖具有一定的抗氧化活性,在质量浓度0.05 mg/mL时,对DPPH自由基、羟基自由基和超氧离子自由基的清除率分别为52.25%、49.72%和58.24%,且其质量浓度与抗氧化活性呈量效依赖关系。该实验结果为杨树口蘑多糖的提取以及多糖的性质研究提供理论依据。     

血红铆钉菇多糖超声微波联合提取工艺优化及其抗氧化活性

本文主要研究超声微波联合提取法提取血红铆钉菇最佳工艺条件及其抗氧化活性。通过单因素结合响应面试验,以多糖得率为衡量指标,确定超声微波联合提取法提取血红铆钉菇多糖的最佳工艺条件,并与传统水提法和超声提取法所得多糖的抗氧化活性进行比较分析,从而探究3种提取方法对多糖提取效果的影响。结果表明:超声微波联合提取法提取血红铆钉菇多糖的最佳提取工艺条件为:超声时间8 min、微波时间6 min、微波温度92 ℃、液料比29:1 mL/g,得率为8.69%±0.19%,与传统水提法相比,得率提高12.89%,时间缩短88.33%;与超声提取法相比,得率提高8.63%,时间缩短30.00%;不同提取方法对·OH、DPPH·、ABTS+·、O₂-·清除能力以及总还原力具有显著影响(P<0.05),3种提取方法所得多糖体外抗氧化活性由强至弱依次为:超声微波联合提取法>超声提取法>传统水提法。因此,采用超声微波联合提取法可明显提高血红铆钉菇多糖的抗氧化活性。     

中国蛤蜊多糖的抗氧化性及抑菌性

以中国蛤蜊全脏器为材料,碱提醇沉法进行多糖的提取,采用Sevag 法去除多糖中的蛋白,分别测定提取物中多糖的含量、清除羟自由基( ·OH)能力、清除超氧阴离子自由基(O2－ ·)能力及抑菌活性。结果表明：碱提法所提多糖含量较高,提取率为15.45%(以中国蛤蜊干粉计)。中国蛤蜊多糖具有较强的抗氧化能力,多糖质量浓度为0.8mg/mL时对O2－ ·的清除率达86.49%;对 ·OH清除率达49.31%。中国蛤蜊多糖对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌均有抑制作用,其最小抑菌质量浓度分别为12.5、25、25mg/mL,对金黄色葡萄球菌抑制作用最明显、枯草芽孢杆菌次之、大肠杆菌最不明显,。由此可知,中国蛤蜊多糖对 ·OH 和 O2－ ·具有一定的体外抗氧化性能,在一定实验质量浓度范围内,随着多糖质量浓度的增大,其抗氧化活性逐渐增强。多糖对革兰氏阳性菌的抑制效应强于革兰氏阴性菌。     

刺果番荔枝叶多酚提取工艺优化及其体外抗氧化活性

本试验选用原料为刺果番荔枝叶,使用乙醇溶剂提取其中的多酚类物质,分别比较乙醇体积分数、提取温度、液料比、提取时间4个要素对多酚提取量的影响,并采用响应面法中的Box-Benhnken中心组合试验确定最优提取工艺。采用DPPH自由基、羟自由基(·OH)法研究刺果番荔枝叶多酚抗氧化活性,比较在最优工艺条件下提取的刺果番荔枝叶多酚与抗坏血酸的清除能力。结果表明:乙醇体积分数55%、液料比50:1 (mL/g)、提取时间96 min、提取温度60 ℃时,多酚提取量最大,达到(20.37±0.34) mg/g。刺果番荔枝叶多酚对DPPH自由基、羟自由基(·OH)的半抑制浓度(IC₅₀)分别为133.33、264.65 μg/mL,样品在试验范围内的最大清除率分别为(51.34%±2.68%)、(52.50%±2.29%)。综上表明,刺果番荔枝叶多酚具有较好的抗氧化能力。