不同金黄色葡萄球菌选择性分离平板效果比较及探讨

针对GB 4789.10-2010中Baird-Parker平板对金黄色葡萄球菌特异性低,选择性弱等问题,文章引入金黄色葡萄球菌显色平板进行补充和改进,结果显示显色平板上金黄色葡萄球菌菌落形态典型,颜色特异,具有良好的特异性和较强的抗干扰能力。定量比对结果显示Baird-Parker平板与显色平板上金黄色葡萄球菌数值无显著性差异,将显色平板应用于金黄色葡萄球菌的定量检测具有良好的适用性和较高的可行性。     

Baird-Parker琼脂上被抑制的金黄色葡萄球菌的筛选与特征研究

目的对在Baird-Parker琼脂平板上被抑制的金黄色葡萄球菌(以下简称金葡菌)的遗传特征进行深入研究,并提出针对性检验措施。方法通过对127株不同来源的金葡菌和8株金葡菌标准菌株在Baird-Parker琼脂平板上进行测试,筛选在Baird-Parker琼脂平板上被抑制的金葡菌,并对菌株的遗传特征进行分析,同时检测Baird-Parker琼脂平板中的抑菌成分对金葡菌的抑制作用。结果 3株分离自北京猪肉馅中的菌株和金葡菌标准菌株(CMCC 26112)在Baird-Parker琼脂上生长率低于万分之一,Baird-Parker琼脂基础培养基中添加甘氨酸(12.0 g/L)可明显抑制这4株金葡菌的生长,而六水合氯化锂(5.0 g/L)、丙酮酸钠(10.0 g/L)和卵黄亚碲酸钾(50 ml)的添加对这4株金葡菌的生长没有明显影响;这4株菌在高盐甘露醇琼脂和科马嘉显色平板上的生长率均高于60%;脉冲场电泳(PFGE)分析发现,北京来源的3株金葡菌为同一PFGE型别,与标准菌株(CMCC 26112)存在明显差异。结论为保证食品安全国家标准检验方法 GB 4789.10—2010对不同金葡菌计数的覆盖性,计数检验过程中应使用两种或两种以上金葡菌选择性平板。     

甘露醇氯化钠琼脂培养基成分对鉴定金黄色葡萄球菌的影响

目的 探究甘露醇氯化钠琼脂培养基成分中氯化钠和胰酪胨对甘露醇氯化钠琼脂培养基质量的影响,同时考察市售5个国产品牌和1个进口品牌的甘露醇氯化钠琼脂培养基的产品质量。方法 采用不同品牌不同浓度的氯化钠和胰酪胨配制成甘露醇氯化钠琼脂培养基,应用平板涂布计数、半定量划线法探究氯化钠和胰酪胨对甘露醇氯化钠琼脂培养基质量的影响;对不同种金黄色葡萄球菌和大肠杆菌在5个国产品牌和1个进口品牌的甘露醇氯化钠琼脂培养基上的生长情况进行定量测定。参照GB 4789.28—2013比较不同品牌培养基对不同菌株的生长率、生长指数和菌落大小的影响,对培养基质量进行评价。结果 实验菌株在使用不同种类、不同浓度的氯化钠或胰酪胨配制的甘露醇氯化钠琼脂培养基上的生长率、生长指数存在较大差异;不同品牌的甘露醇氯化钠琼脂培养基非目标菌生长指数均合格,但目标菌的生长率和菌落生长大小存在显著差异。结论 氯化钠和胰酪胨对于甘露醇氯化钠琼脂培养基质量影响较大,会直接决定培养基的质量是否合格,市售的国内外不同品牌甘露醇氯化钠琼脂培养基质量存在较大差异,国产甘露醇氯化钠琼脂培养基的质量优于进口培养基。     

用呋喃唑酮琼脂快速鉴别葡萄球菌和微球菌

呋喃唑酮琼脂是鉴别微球菌和葡萄球菌合适的培养基。７株革兰氏阳性,接触酶阳性的微球菌,２株葡萄球菌,４株片球菌（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ）分别培养在含２０～５０μｇ／ｍｌ呋喃唑酮的琼脂和ＭＲＳ培养基ｔ,同时以标准的氧化／发酵试验（Ｏ／Ｆ）以及其他有关的试验作比较,结果认为使用２０～３０μｇ／ｍｌ呋喃唑酮的琼脂效果最好。含红霉素的琼脂基上分解甘油试验的结果与咐喃唑酮琼脂的结果一致。     

飞行时间质谱即用型金黄色葡萄球菌质控样品研究

目的评估即用型金黄色葡萄球菌质控样品在飞行时间质谱技术中的应用价值。方法将金黄色葡萄球菌质控样品分别在37℃和室温环境25℃进行运输稳定性实验,在4及-20℃条件下进行储藏稳定性实验,并评价其稳定性。对保存在-20℃条件下不同时间的金黄色葡萄球菌质控样品进行质谱鉴定,并做VITEK全自动微生物分析系统鉴定及血浆凝固酶试验鉴定。结果即用型金黄色葡萄球菌质控样品稳定,质谱图相近,所得蛋白峰信息仅存微小差异,匹配度良好。VITEK全自动微生物分析系统及血浆凝固酶实验结果均为金黄色葡萄球菌,满足飞行时间质谱技术所需质控样品条件。结论基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术直接检测金黄色葡萄球菌具有简单快速、准确性高等优点,相较传统方法操作简单,检验结果更加直观,为飞行时间质谱技术鉴定金黄色葡萄球菌提供及时、准确的依据。     

琼脂平板与管碟快速测定法 有机酸产生菌的检出(二)

目的及原理:检出产乳酸的细菌。在琼脂平板上,产乳酸的细菌能使菌落周围基质中的CaCO3溶解（形成乳酸钙）形成透明圈。以透明圈直径与菌落直径的比值大小示菌株的产乳酸能力。在含有指示剂--溴甲酚紫 ...     

琼脂平板与管碟快速测定法——酶产生菌的检出(一)

一、细胞壁溶解酶目的及原理;检出产掷孢酵母(SPorobolo－myces rCberrimus)细胞壁溶解酶的细菌。某些细菌的掷孢酵母细胞壁溶解酶,在以干燥处理后的掷孢酵母或红酵母(Rhodotoru－la)细胞物质为诱导底物时,能分解底物产生透...     

金黄色葡萄球菌两种检测方法的比较研究

目的比较Baird-Parker平板计数法和3M Petrifilm~(TM)测试片法检测金黄色葡萄球菌的优缺点。方法采用GB 4789.10-2010《食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》、SN/T 1895-2007《食品中金黄色葡萄球菌的快速计数法Petrifilm~(TM)测试片法》检测金黄色葡萄球菌菌悬液,并对结果进行分析比较。结果在高浓度菌液(102 CFU/mL)时,国标法和测试片法检测金黄色葡萄球菌有显著差异,测试片法计数较困难,国标法检测结果值更准确,但测试片法在简便性、检测时间等方面都优于Baird-Parker法。结论对不同样品进行检测时应注意根据实际金黄色葡萄球菌污染程度选择合适的方法。     

金黄色葡萄球菌定量检测结果的不确定度评定

目的评定质控样品中金黄色葡萄球菌计数结果的不确定度。方法通过分析测量过程,确定并简化不确定度来源,运用统计学方法,分析不确定度分量、量化合成不确定度和扩展不确定度。结果金黄色葡萄球菌计数结果的不确定度来源较多,其中对不确定度贡献较大的为均质袋与样品稀释管及其稀释过程引入的不确定度、样品加样体积引入的不确定度、不同人员重复实验引入的不确定度。血浆凝固酶阳性实验,同样是构成偏差不可忽视的因素。金黄色葡萄球菌计数结果可表示为(10~(3.5778±0.095))CFU/g,k=2。结论该方法适用于质控样品中金黄色葡萄球菌计数结果的不确定度评定。     

改良琼脂扩散法鉴定麦卢卡蜂蜜

目的改良Allen等提出的测定麦卢卡蜂蜜非过氧化氢抑菌活性的琼脂扩散法。方法参照Allen等提出的琼脂扩散法,研究以下3个方面对琼脂扩散法的影响:使用恒温箱或在杂交炉中混匀蜂蜜水溶液,使用不同代的金黄色葡萄球菌菌株和培养基的倾斜程度。结果麦卢卡蜂蜜样品溶液使用恒温箱和杂交炉静置法混匀,测得样品的独麦素(Unique Manuka Factor,)UMF值没有显著差异;随着金黄色葡萄球菌传代数的增加,样品的UMF值也没有显著差异;培养基倾斜后同一麦卢卡蜂蜜位于中间样孔的样品UMF值明显高于边际样孔。结论杂交炉混匀蜂蜜的方法操作简单,更有利于麦卢卡蜂蜜非过氧化氢活性的检测,25代以内的任何1代菌株均可用于测定麦卢卡蜂蜜样品的非过氧化氢活性,培养基倾倒时要尽量避免过度倾斜。     

金黄色葡萄球菌定性定量检测中显色培养基的效果评价

目的 评估显色培养基对金黄色葡萄球菌定性定量的检测效果。方法 对金黄色葡萄球菌标准菌株、食品样本分离菌株：30株金黄色葡萄球菌、30株其他葡萄球菌,5株常见食源性致病菌分别用金黄色葡萄球菌显色培养基和Baird-Parker培养基进行培养试验,并用国标法和全自动微生物鉴定药敏分析系统对培养结果进行确证鉴定。结果 试验定性结果显示金黄色葡萄球菌在显色培养基上呈紫红色,30株其他葡萄球菌呈蓝色或乳白色,5株常见食源性致病菌其中单核细胞增生李斯特氏菌呈蓝绿色、表皮葡萄球菌呈乳白色、其余3株不生长,可在直观上对几种食品中常见葡萄球菌进行有效区别,而且目标菌在显色培养基和Baird-Parker培养基上计数值无显著差异(P＞0.05),确证结果显示全自动微生物鉴定药敏分析系统结果与GB 4789.10-2016方法结果一致。结论 显色培养基能快速锁定疑似目标菌落,为溯源调查指明方向,定量计数直观有效,配合全自动微生物鉴定药敏分析系统更提高了对目标菌的鉴定效率,更适用于金黄色葡萄球菌定性定量检测。     

Rambach agar as a new plate differential medium for the identification of some enteric pathogens in meat products

 An investigation of the efficacy of both Rambach agar and xylose-lysine-desoxycholate (XLD) agar as media for isolation of some enteric pathogenic bacteria from raw meat and ready-to-eat meat products was conducted. For this purpose, 50 samples representing 20 and 30 samples of raw and ready-to-eat meat products respectively were examined and the growth characteristics of various Gram-negative bacteria on XLD and Rambach agars were compared. In the case of raw meat products 33.3% of suspected salmonella colonies showing growth on XLD agar and not on Rambach agar gave false results in biochemical and serological examinations. In contrast, all suspected salmonella colonies on Rambach agar were positive biochemically and serologically. Furthermore, suspected salmonella colonies isolated from ready-to-eat meat products on XLD agar showed 83.3% false positive cases while in case of Rambach agar no false positive cases were detected. Therefore, Rambach agar excelled XLD agar in the isolation of salmonella from both raw and ready-to-eat products. Received: 13 November 1997     

津沪地区原料奶中金黄色葡萄球菌的污染情况研究

金黄色葡萄球菌是影响原料奶质量的微生物之一,它能产生高温灭菌被破坏的肠毒素。近年来,由金黄色葡萄球菌肠毒素引发的食物中毒事件屡见不鲜,严重影响到消费者的身体健康。本研究是利用黄色葡萄球菌金标特异性单克隆检测试板和金黄色葡萄球菌快速检验测试片对天津周边地区及上海共84个原料奶样品进行检测和调查。结果表明,原料奶市场的微生物污染状况不容乐观。通过本研究确定金黄色葡萄球菌金标特异性单克隆抗体快速检测试板是一种快速、简便、准确的检测产品,值得在原料奶市场大力推广。     

食品菌落总数检测人员检测过程与结果比对分析

目的对实验室食品菌落总数检测人员检测过程与结果进行比对,加强实验室质量控制。方法根据内部质量控制的技术要求,按照GB 4789.2-2016《食品微生物学检验菌落总数测定》进行检测,对4名实验人员测定结果进行分析,评价其质量控制。结果 4名检验人员的测定结果均允许范围内,但A人员的测定结果普遍偏低,log值接近于满意范围临界值。结论检验人员严栺觃范地按照有兲操作觃程及标准觃定进行实验,定期进行人员比对,为实验室质量控制及管理提供可靠的数据及保障。     

Isolation of salmonellae using two forms of Rappaport-Vassiliadis medium and brilliant green agar

The relative efficiencies of Rappaport-Vassiliadis medium containing tryptone (RV medium) or soya peptone (RV-soya) were compared for the isolation of salmonellae from 518 naturally contaminated chicken livers. RV-soya (299 of 518) gave slightly better recoveries than the standard RV medium (295 of 518) although the difference was not statistically significant (P> 0.05). 60% of the samples which were found to be positive after 24 h enrichment in RV-soya were also positive after just 6 h incubation. It was shown that the use of 14 cm plates of brilliant green agar gave better Salmonella recoveries than did 9 cm plates of the same medium. However, when sulphamandelate supplement was incorporated into the medium, recoveries were further increased. We conclude that RV-soya is an effective alternative to the standard RV medium for the isolation of salmonellae from poultry and would recommend a protocol of pre-enrichment in buffered peptone water, enrichment in RV-soya for 24 h at 43°C and plating on brilliant green agar containing sulphamandelate supplement.