碱性蛋白酶对蛹虫草蛋白质水解的工艺技术优化研究

以蛹虫草蛋白粉为原料,利用碱性蛋白酶进行酶解处理,并对其酶解工艺进行优化研究。以水解度和酶解得率为评价指标,采用正交试验结果对蛹虫草水解工艺进行优化。当底物浓度为8%、碱性蛋白酶的加酶量为1.3%、酶解时间10 h、酶解温度为53 ℃时的水解度最高,为15.01%;当底物浓度为8%、碱性蛋白酶的加酶量为1.9%,酶解时间8 h、酶解温度为56 ℃时的酶解得率最高,为75.27%。经碱性蛋白酶酶解、过滤、干燥等工艺处理后,酶解产物的分子质量小,酶解剩余物少,酶解得率高,可以进行产业化推广应用。     

采用木瓜蛋白酶制备乌鸡蛋白肽的研究

探讨了各单因子对木瓜蛋白酶酶解乌鸡蛋白质的影响及水解度与肽得率、总氮得率之间的关系。结果表明,pH变化对肽得率影响很小;随着时间延长,水解度和总氮得率不断升高,肽得率3h后达到平衡阶段;温度<70℃,随着温度的提高、酶用量的增加,水解度、肽得率和总氮得率均增加,但总氮得率增加明显;随着底物浓度的减少,水解度几乎不变,而肽得率和总氮得率均增加。综合考虑,最佳水解条件为温度70℃,酶用量E/S4000U/g,底物浓度7%。酶解3h后,酶解液中必需氨基酸37.41%,氨基酸总量61.01mg/mL,其中游离氨基酸9.89%,肽含量90.11%。     

双酶水解法制备鹿胎盘活性多肽

采用双酶水解的方法制备鹿胎盘生物活性肽。以水解度和酸溶性肽得率为指标,确定了木瓜蛋白酶与胰蛋白酶为最优酶系组合。通过正交实验得出酶解工艺条件为:pH 7.0、温度52℃、酶活添加量6 000u/g(料)、底物浓度10%、酶比为1∶1,水解时间3 h,在此条件下对鹿胎盘进行水解,水解度为34.5%,酸溶性多肽得率为81.56%。     

酶解脱脂虾粉制备多肽最佳工艺条件的研究

对酶法水解脱脂虾粉制备多肽的工艺进行了研究,试验以水解度(DH/%)和酸溶性肽得率(YASP/%)为指标,确定了用胰蛋白酶-木瓜蛋白酶混合酶法水解脱脂虾粉制取多肽的最佳酶解工艺条件为:胰蛋白酶-木瓜蛋白酶的酶量比为 1:2(W/W),总酶量为6000U,脱脂虾粉底物浓度为 4%,pH7.0,温度 60℃,反应时间 6h 的条件下,可使水解度和酸溶性肽得率分别达到 25.91%和 38.46%。     

贻贝蒸煮液酶解工艺的优化

为研究酶法水解贻贝蒸煮液的最佳条件,以水解度为指标,分别研究风味蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、复合蛋白酶4种酶水解贻贝蒸煮液的效果,结果表明风味蛋白酶水解贻贝蒸煮液的效果最好。以水解度和风味为指标,采用响应面分析法和气相色谱-质谱联用技术优化风味蛋白酶水解贻贝蒸煮液的条件,结果最佳酶解条件为加酶量0.63%,温度51 ℃,时间3.26 h,pH 6.87。在此条件下水解度为13.98%。     

高压蒸煮法在玉米胚芽蛋白提取中的作用

以提油后的玉米胚芽粕为原料,用高压蒸煮法处理原料后,再利用纤维素酶进行酶解处理,通过测定离心液中的糖量,残渣中纤维素水解率及浓缩后蛋白质含量等指标,考察采用高压蒸煮法后对蛋白提取效果的影响。结果表明,经高压蒸煮处理后,蛋白质提取效果与浸泡48h再酶解的效果相当。处理后蛋白质含量均可达到42%。而高压蒸煮法处理大大缩短了处理时间,优于浸泡法处理原料。     

酸法脱酰胺结合酶解制备米蛋白肽及其与亚铁螯合工艺研究

采用米蛋白为原料,经酸法脱酰胺、蛋白酶酶解后,以FeCl_2作为铁源制备米蛋白肽亚铁螯合物。结果表明,碱性蛋白酶对米蛋白的水解效果最好,经4 h酶解后蛋白的水解度和蛋白肽得率分别达到23.4%和73.4%。酸法脱酰胺处理能有效提高米蛋白肽的得率。采用0.4 mol/L HCl在95℃处理3 h制备的脱酰胺米蛋白,其水解度和蛋白肽得率分别达到27.1%和92.6%;单因素试验表明反应温度、pH和质量比均对米蛋白肽亚铁螯合物的产品得率和螯合能力有显著影响;米蛋白肽与亚铁盐的最佳螯合工艺条件为:反应温度50℃、蛋白肽与亚铁盐的质量比2:1、pH 6.5;在此条件下其产品得率为65.2%,亚铁螯合能力最大为21.6 mg/g。     

双酶分步水解牛骨蛋白工艺的优化

以新鲜牛骨为原料,探讨牛骨粉的制备工艺。选用枯草杆菌中性蛋白酶与胰蛋白酶分步水解牛骨蛋白,以水解度为特征性指标,采用L9(34)正交试验设计优化双酶水解牛骨粉的工艺条件。结果表明：牛骨粉蛋白质含量高达30.72%,约为鲜骨蛋白质含量的3倍;采用胰蛋白酶先水解,中性蛋白酶后水解的方式分步水解牛骨蛋白,其效果优于两种酶同时水解及中性蛋白酶先水解,胰蛋白酶后水解;中性蛋白酶与胰蛋白酶分步水解牛骨蛋白的最佳工艺条件：固液比1:2,起始pH8.0,胰蛋白酶2000U/g蛋白质于45℃、150r/min振荡水解3h,然后用中性蛋白酶2000U/g蛋白质于45℃以150r/min振荡水解3h,水解度达18.34%;粒径小的活性炭对酶解液脱苦、脱色及除腥效果优于粒径大的活性炭。     

多酶水解棉籽分离蛋白制备低苦味肽的研究

以水解度为指标,采用酶法水解制备棉籽生物活性肽,在单酶水解的基础上探讨双酶水解工艺.确定碱性蛋白酶和胰蛋白酶为最佳的双酶组合,其最佳酶解条件为:温度50℃,pH8.2,底物浓度5%,水解时间3.5h.酶活添加量6000μ/g(蛋白),酶活比3:1,进行验证实验水解度能达到26.67%,肽得率为87.35%.采用风味酶继续水解,有效降低了苦味,肽得卒为85.26%.     

用制糖米渣制备脱苦蛋白肽的研究

采用胰蛋白酶和含有外切酶的复合蛋白酶同时酶解脱糖米渣,制得脱苦蛋白肽产品。采用凯氏定氮法测定所得脱苦蛋白肽的蛋白质含量,并用甲醛滴定法测定其水解度。结果表明,脱苦蛋白肽产品中蛋白质含量大于88%,水解度达19%。     

非糊化条件对小麦蛋白肽酶法制备的影响

为了探讨联合制备小麦蛋白肽和小麦淀粉的新方法,以小麦面粉为原料,以小麦蛋白肽的纯度、得率、水解度、还原糖质量分数为评价指标,研究了淀粉非糊化状态下不同处理条件对两种蛋白酶制备小麦蛋白肽的作用效果。结果表明：与浸泡前加酶相比,浸泡后加酶生产的蛋白肽纯度高,还原糖质量分数低,但两者得率相差较小。最佳浸泡条件为：温度50℃,时间2.5 h。此条件下,中性蛋白酶水解得到的小麦蛋白肽纯度为27%,得率为75%,水解度为17.6%,还原糖质量分数为5.9%;碱性蛋白酶水解得到的小麦蛋白肽纯度为25%,得率为85%,水解度为23.7%,还原糖质量分数为9%。预处理过程中,宜采用浸泡后加酶。可根据需要选择不同蛋白酶生产,但碱性蛋白酶中淀粉酶含量较高会产生相对多的淀粉糖。     

双酶分步水解法制备谷氨酰胺活性肽研究

以小麦蛋白为原料,采用碱性蛋白酶和胰蛋白酶分步水解制备谷氨酰胺活性肤.通过单因素实验和正交实验得到的最佳制备条件为:碱性蛋白酶在温度60℃、pH 9.5、底物浓度4%(w/v)、酶用量1.5%(w/w)的条件下水解2h,水解度为21.25%,再用胰蛋白酶在温度40℃、pH 9.0、酶用量1.5%(w/w)的条件下水解2h,水解度提高3.30%.活性肽制品的得率为61.38%,肽中谷氨酰胺的含量为33.14%,三氯乙酸氮溶解指数为83.33%,HPLC法测定谷氨酰胺活性肽由相对分子量为2854和2117的两组分组成,峰面积百分比为35.69%和64.31%.     

辣椒粕分离蛋白酶解工艺条件的优化

从辣椒粕中提取粗蛋白,建立蛋白酶水解辣椒粕分离蛋白制备呈味肽的最佳条件。以水解度和肽得率为指标,对胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、复合蛋白酶4种酶水解辣椒粕分离蛋白的效果进行比较研究。结果表明:复合蛋白酶的水解效果最佳。通过单因素试验选取复合蛋白酶作用的固液比、酶用量、酶解时间、酶解pH值及酶解温度作为试验因素,初步确立复合蛋白酶的水解条件。并通过正交试验优化最终确定复合蛋白酶水解辣椒粕分离蛋白的最佳工艺条件为固液比110(mV),酶用量2.0%,酶解时间4h,酶解pH值6.5,酶解温度50℃。通过实验验证,在该条件下,复合蛋白酶对辣椒粕分离蛋白具有较好的水解效果,其水解度为19.60%,肽得率为6.30%。     

蛹虫草胞外酶水解蛋清工艺优化

为优化蛹虫草胞外酶水解鸡蛋蛋清工艺条件,制备虫草蛋清粉,通过对蛹虫草菌丝体培养基的选择和响应面法对水解条件的优化,得到最佳培养基为液体PDA培养基,培养天数为6天,最佳水解条件为:加酶量为8.71%,底物浓度为5.06%,p H为6.08,反应时间为6.13h,反应温度为30.79℃。最高水解度为29.8677%。最后通过SDS-PAGE实验进行水解结果验证,最终证明蛋白质分子量减小,蛋清发生水解。     

酶解脱脂虾粉制备多肽最佳工艺条件的研究

对酶法水解脱脂虾粉制备多肽的工艺进行了研究，试验以水解度(DH/%)和酸溶性肽得率(YASP／％)为指标，确定了用胰蛋白酶—木瓜蛋白酶混合酶法水解脱脂虾粉制取多肽的最佳酶解工艺条件为：胰蛋白酶—木瓜蛋白酶的酶量比为1：2(W／W)，总酶量为6000U，脱脂虾粉底物浓度为4％，pH7．0，温度60℃，反应时间6h的条件下，可使水解度和酸溶性肽得率分别达到25．91％和38．46％。     

水解面筋蛋白高效制备谷氨酰胺结合肽的研究

采用食品级胃蛋白酶、胰蛋白酶、Protamex复合酶双酶组合对面筋蛋白进行水解制备Gln结合肽。先确定三种单酶各自对面筋蛋白适宜的初始pH、温度、酶浓度和底物浓度。并以双酶进行两两组合水解。在进行水解度控制实验时取样,分析水解液中氨基氮的含量,计算平均肽链长度,并用高效液相色谱分析水解液中Gln的得率。实验结果表明胰蛋白酶和胃蛋白酶联合水解的效果最好,条件为:胰蛋白酶在pH8.0,50℃,S%=12.8%(W/V),E%=9%(W/W)水解6h,再用胃蛋白酶pH2.0,40℃,E%=5%(W/W)条件下水解5h,可得到平均肽链长度为2.20个氨基酸残基的蛋白水解液,Gln得率最高,为60.43%。认为胰蛋白酶和胃蛋白酶组合是面筋蛋白中高效制备谷氨酰胺结合肽的最佳组合。     

响应面法优化金带细鲹鱼肉蛋白质双酶酶解工艺

选用木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、酸性蛋白酶、胰蛋白酶和菠萝蛋白酶对金带细鲹鱼蛋白质进行水解,以蛋白质的水解度为指标,筛选出酶解效果最好的酶类。通过响应面法对影响酶解效果的主要因素进行研究,并确定金带细鲹的最适酶解工艺。结果表明:对金带细鲹鱼酶解效果最好的方法是采用胰蛋白酶和木瓜蛋白酶进行双酶酶解,双酶最适酶解条件为:先加入胰蛋白酶,在45℃,p H8.0,加酶量2.0%(g/g),固液比1∶5(g/g)条件下酶解5h后,再加入木瓜蛋白酶,其加酶量1.6%(g/g)、温度60.76℃,p H 6.27,时间3.52h,在此条件下,实际测得蛋白质水解度可达43.23%。比胰蛋白酶单酶水解蛋白质水解度提高了12.72%。利用双酶法水解金带细鲹鱼蛋白质,能缩短生产周期,提高原料的利用率。     

大豆粕蛋白酶酶解条件和产物分析研究

以水解度为衡量指标,通过正交试验设计,对木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和As1.398蛋白酶酶解大豆粕的最佳水解条件进行了筛选.试验结果表明:木瓜蛋白酶水解大豆粕的最佳条件为pH7.0、温度60℃、时间5 h、酶浓度5%.胰蛋白酶水解大豆粕的最佳条件为pH7.0、温度50℃、时间7 h、酶浓度5%;As1.398蛋白酶水解大豆粕的最佳条件为pH6.5、温度50℃、时间7 h、酶浓度5%.对酶解产物进行超滤和SDS-PAGE电泳分析表明,因酶解条件不同,大豆粕酶解产物中蛋白质和肽的组成及其数量也不同;酶的种类不同,大豆粕酶解产物组成也不同;大豆粕水解度越高,其酶解产物中小分子肽数量越多.     

超声波辅助分步酶解法制备菜籽肽及复合酶筛选

以反胶束法萃取得到的菜籽粕蛋白液为原料,以酶解产物的水解度、三氯乙酸氮溶解指数和肽得率为评价指标,并参照酶解液肽的分子量分布,考察超声波辅助分步酶解法对原料水解的影响。从木瓜蛋白酶、复合蛋白酶、碱性蛋白酶、复合风味酶、胰蛋白酶组成的6 个复合酶中,筛选出制备优质小分子量菜籽肽的适宜复合酶。结果表明,木瓜蛋白酶与复合风味酶、胰蛋白酶与复合风味酶组成的两种复合酶均比较适合酶解此种菜籽粕蛋白,它们的酶解产物水解度和多肽得率较高,所含小分子量肽也较多。     

酶法水解真鲷鱼皮和鱼鳞制取胶原蛋白肽

以真鲷鱼鱼皮、鱼鳞为材料,研究了酶法制取胶原蛋白肽工艺。以水解度为指标,研究蛋白酶种类、酶解条件对水解度的影响,并采用正交试验对鱼皮、鱼鳞胶原肽制备工艺进行优化。结果表明,采用胰蛋白酶水解鱼皮,在加酶量950 U/g,pH 7.0,温度55℃,料液比1︰8,酶解反应6 h的优化条件下,胶原蛋白时水解度最高,达到29.73%;高压液相色谱(HPLC)分析表明,水解液中甘氨酸含量最高,不含色氨酸,符合胶原蛋白氨基酸特征。