香菇柄多糖乙酰化修饰及其抗氧化活性

以香菇柄为原料,采用乙酸酐法制备乙酰化香菇柄多糖,考察不同乙酸酐用量在NaOH体系和甲酰胺体系中对多糖乙酰化修饰取代度以及多糖结构特性的影响,并对多糖及其乙酰化多糖的抗氧化活性进行评价。结果表明,在NaOH体系和甲酰胺体系中,香菇柄多糖乙酰化修饰取代度与乙酸酐用量均呈正相关,在乙酸酐用量为5 mL时,取代度分别为0.31和0.14。红外光谱表明,乙酰化修饰香菇柄多糖除具有多糖特征峰外,还出现了乙酰基的特征吸收峰,说明香菇柄多糖的乙酰化修饰成功。NaOH体系乙酰化修饰后多糖仍然具有三螺旋结构,而甲酰胺体系乙酰化修饰后多糖的三螺旋结构被破坏。抗氧化结果表明,香菇柄多糖乙酰化修饰前后均具有一定的抗氧化能力,并呈现一定的量效关系,且NaOH体系乙酰化多糖的抗氧化活性强于香菇柄多糖和甲酰胺体系乙酰化多糖,宜采用NaOH体系对香菇柄多糖进行乙酰化修饰。     

马齿苋多糖的乙酰化修饰及其抗氧化活性

以马齿苋为原料,采用热水浸提法提取马齿苋多糖（Polysaccharides from Portulaca oleracea L.,POP）,采用乙酸酐法制备乙酰化马齿苋多糖（actylated polysaccharides from Portulaca oleracea L.,Ac-POP）。以取代度为指标,通过单因素实验方法考察了反应时间、反应温度和料液比对马齿苋多糖乙酰化修饰取代度的影响,进一步优化了乙酰化修饰马齿苋多糖的工艺条件,并研究了POP和Ac-POP的抗氧化活性。实验结果表明：马齿苋多糖乙酰化修饰的最佳反应时间为2.78 h、反应温度为51.90 ℃、料液比为1:28.15（g/mL）,在该优化条件下,POP乙酰化取代度达到0.60。通过对原多糖和乙酰化多糖的红外光谱检测,显示乙酰化马齿苋多糖制备成功。马齿苋多糖修饰前后对自由基均有一定的清除作用,且呈现一定的剂量关系。在0.05~5.0 mg/mL范围内,修饰前后的马齿苋多糖对DPPH自由基的最大清除率分别为69.73%和64.54%;对?OH的最大清除率分别为43.48%和25.04%;对O2-?的最大清除率分别为78.86%和79.16%。随着浓度的增加,乙酰化马齿苋多糖的抗氧化活性逐渐增大。抗氧化研究表明,与未修饰多糖相比,乙酰化马齿苋多糖对DPPH自由基和?OH的清除能力减弱,但对O2-?的清除能力有较大的增强。     

猴头菇多糖的乙酰化修饰及其抗氧化活性研究

以猴头菇为原料,采用传统水提法提取猴头菇多糖,并制备乙酰化猴头菇多糖。以乙酰基取代度为实验指标,研究料液比(即多糖与乙酸酐的比例(g/mL))、反应时间和反应温度对HEP乙酰化修饰取代度的影响。在单因素实验的基础上,通过响应面实验设计对乙酰化实验的工艺参数进行优化,并比较修饰前后HEP的抗氧化活性。结果表明,HEP乙酰化的最佳工艺条件为:料液比为1:34 g/mL,反应时间3 h,反应温度30 ℃,在此条件下测得猴头菇多糖乙酰化的取代度为0.609,与修饰前的HEP相比,A-HEP的抗氧化性均有显著提高。乙酰化修饰是一种能够有效提高猴头菇多糖抗氧化活性的一种方法。     

青钱柳多糖的乙酰化修饰及抗氧化活性

以青钱柳多糖为原料,使用乙酸酐法制备得到乙酰化青钱柳多糖样品。以乙酰化多糖取代度为评价指标,采用正交试验考察乙酸酐-多糖比例、反应时间、反应温度对乙酰化修饰的影响。在此基础上,选择取代度为0.681的乙酰化多糖样品进行1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除实验。结果表明,青钱柳多糖乙酰化最优反应条件为：m（多糖）∶V（乙酸酐）＝1∶60、反应时间2 h、反应温度40 ℃,同时,乙酰化修饰可以显著提高青钱柳多糖的DPPH自由基清除活性,乙酰化修饰可作为青钱柳多糖改性的方法之一,为青钱柳资源的进一步开发利用提供新的方向。     

杏鲍菇多糖羧甲基化修饰工艺及其抗氧化活性

以杏鲍菇多糖(PEP)为原料,采用碱性氯乙酸法制备羧甲基杏鲍菇多糖(CM-PEP),研究杏鲍菇多糖羧甲基化修饰工艺及其抗氧化活性。以羧甲基取代度为指标,通过单因素试验考察Na OH用量、氯乙酸用量、反应时间和反应温度对取代度的影响,采用响应面Box-Benhnken试验设计对羧甲基化工艺进行优化,并采用清除·OH、O2-·和DPPH·模型对CM-PEP和PEP抗氧化活性进行评价。结果表明:杏鲍菇多糖羧甲基化最佳工艺为Na OH用量为2.98 g,氯乙酸用量为2.51 g,反应时间为4 h,反应温度为60℃。在最佳羧甲基化修饰工艺条件下,羧甲基杏鲍菇多糖取代度达0.891。杏鲍菇多糖经过羧甲基化修饰改变了多糖的结构,相对分子质量变小。CM-PEP单糖主要由阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖组成,其中阿拉伯糖和半乳糖含量较高。抗氧化研究表明:与未修饰杏鲍菇多糖相比,羧甲基杏鲍菇多糖对·OH和O2-·的清除能力增强,对DPPH·的清除能力减弱。     

不同纯化程度香菇柄多糖的乙酰化修饰及降血糖活性

以香菇柄为原料,采用乙酸酐法制备乙酰化香菇柄多糖,考察不同纯化程度对多糖乙酰化修饰取代度以及多糖结构特性的影响,并对多糖及其乙酰化多糖的降血糖活性进行评价。结果表明,经纯化后,香菇柄多糖及其对应乙酰化多糖纯度分别由纯化前的36.42%和41.87%提高到88.57%和81.27%,多糖得率则分别由纯化前的83.25%和48.83%显著降低到21.85%和35.42%。纯化对多糖乙酰化修饰的乙酰基取代度无显著影响,不同纯化多糖的乙酰基取代度均在0.3左右。傅里叶红外光谱表明,纯化未造成多糖结构的破坏,且多糖经乙酰化修饰后具有乙酰基的特征吸收峰。刚果红实验结果表明,经不同程度纯化后香菇柄多糖及其对应的乙酰化多糖均具有三螺旋结构,但其红移幅度随着纯化的不断进行而逐渐减小。香菇柄多糖及其乙酰化多糖对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶具有剂量依赖性抑制活性,且乙酰化可显著提高多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制活性,表明乙酰化修饰可提高多糖的降血糖活性。研究结果表明,纯化可显著提高香菇柄多糖及其对应乙酰化多糖的多糖纯度,而对多糖结构无显著影响,乙酰化修饰可进一步提高多糖的降血糖活性。     

松树蕈多糖乙酰化修饰工艺及其抗氧化活性

以松树蕈多糖为原料,采用乙酸酐法制备乙酰化松树蕈多糖,以乙酰化取代度为指标,通过单因素实验考察料液比、反应温度和反应时间对取代度的影响,在单因素的基础上,采用响应面Box-Benhnken试验设计乙酰化工艺进行优化,并通过乙酰化松树蕈多糖对·OH、DPPH自由基和O_2~-·的清除作用探讨其抗氧化活性。结果表明:松树蕈多糖乙酰化最佳工艺为,料液比1∶34.07(g∶mL),反应时间为2.8 h,反应温度为42.42℃。在该优化条件下,乙酰化松树蕈多糖取代度达0.587。抗氧化研究表明,与未修饰多糖相比,乙酰化松树蕈多糖对·OH和DPPH自由基的清除能力减弱,但对O_2~-·的清除能力有较大的增强。     

鹿茸多糖分离纯化及抗氧化活性研究

采用DEAE-52离子交换层析和Sepharose CL-6B凝胶排阻层析对鹿茸粗多糖进行分离纯化,并通过对DPPH自由基、羟基自由基（·OH）、超氧阴离子自由基（O2-·）清除能力和还原能力的测定,研究了粗多糖及纯化后多糖的抗氧化能力。结果表明:DEAE-52离子交换层析和Sepharose CL-6B凝胶排阻层析对鹿茸多糖分离效果较好,可以分离纯化得到一种单一多糖;粗多糖和纯化后多糖对DPPH·、·OH、O2-·均有清除作用,且具有一定的还原能力,纯化后多糖抗氧化活性和还原能力均大于粗多糖。      

辽东楤木芽多糖乙酰化修饰工艺及其抗氧化活性研究

以辽东楤木芽为原料,采用超声波辅助提取法提取辽东楤木芽多糖,制备辽东楤木芽乙酰化多糖(Ac-AEBP)。以乙酰基取代度为指标,研究反应温度、反应时间和液料比(mL/g)对AEBP乙酰化修饰取代的影响。在单因素实验的基础上,运用Box-Behnken设计响应面实验对乙酰化工艺参数进行优化,并比较乙酰化修饰前后的辽东楤木芽多糖对·OH、·O^2-、DPPH·、ABTS⁺·的清除作用以及还原能力,探讨其抗氧化活性。结果表明辽东楤木芽多糖乙酰化最佳工艺条件为：反应温度52℃,反应时间4 h,液料比43∶1(mL/g),在此条件下,乙酰化辽东楤木芽多糖的取代度为0.4596。抗氧化研究表明,与未经修饰的AEBP相比,Ac-AEBP的抗氧化活性有较大的增强。该研究可为进一步开发利用辽东楤木芽提供科学依据。     

苦荞茶多糖的体外抗氧化活性及其分离纯化

对苦荞茶多糖(tartary buckwheat tea polysaccharide,TBTP)进行分离纯化和活性分析,为苦荞的进一步推广和应用提供理论依据。采用水提醇沉法获得TBTP,利用苯酚-硫酸法测定粗多糖中的糖含量,通过体外抗氧化评价体系研究TBTP对DPPH自由基、羟基自由基(·OH)、超氧阴离子(O2-·)的清除活性以及TBTP的总还原能力,并利用DEAE-52纤维素和G-150葡聚糖凝胶柱对获得的粗多糖进行纯化、分组。结果表明:TBTP的多糖含量为58.75%;在质量浓度为8.0 mg/m L时,对DPPH·的清除率为94.16%,对·OH的清除率为82.25%;在质量浓度为4.0 mg/m L时,对O2-·的清除率为98.05%。同时经DEAE-52纤维素和G-150葡聚糖凝胶柱对TBTP进行分离纯化后,将TBTP分为3个成分均一的组分,分别为TBTP-1、TBTP-2、TBTP-3。苦荞茶作为食源性物质,其多糖有明显的抗氧化活性。DEAE-52纤维素和G-150葡聚糖凝胶柱对该多糖有很好的分离、纯化效果。     

杏鲍菇多糖组分的分离纯化及结构鉴定

目的 对含有岩藻糖(fucose, Fuc)的杏鲍菇多糖进行分离纯化, 并分析其结构。方法 通过水提分级醇沉得到60%乙醇醇沉杏鲍菇多糖(Pleurotus eryngii polysaccharides, PEP)。杏鲍菇多糖经离子交换层析和凝胶层析分离纯化, 采用凝胶渗透色谱法(gel permeation chromatography, GPC)测定PEP各组分的相对分子质量; 高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)检测岩藻糖; 傅里叶变换红外光谱(fourier transform infrared spectrum, FT-IR)、X-射线衍射(x-ray diffractometer, XRD)分析、原子力显微镜(atomic force microscope, AFM)观察等方法对PEP各组分进行结构表征。结果 PEP经分离纯化得到PEP-1、PEP-2和PEP-3共3种多糖组分, 分子量依次为1.585×106、4.266×104和1.995×103 Da。岩藻糖存在于PEP-1组分中; FT-IR显示PEP-1和PEP-2存在C-O-C键拉伸和吡喃环构型; PEP-2存在β型糖苷键, PEP-3为β-葡聚糖。XRD结果显示3个组分多糖结晶指数分别为38.89%、47.22%和20.00%。AFM观察结果显示, PEP-1整体呈现流星状结构, 多糖粒子聚集; PEP-2为链状螺旋结构且以小球状体聚集; PEP-3呈现小螺旋棒状结构。结论 PEP分离纯化得到3个组分多糖, 岩藻糖存在PEP-1组分中。     

杏鲍菇多糖的分离纯化及生物活性的研究

以杏鲍菇(Plenrotuseryngii)子实体为材料,采用葡聚糖凝胶SephadexG-200分离纯化出两种杏鲍菇多糖即PEP-I和PEP-II。紫外光谱检测表明两种多糖均不含核酸和蛋白质;红外光谱测定结果表明,PEP-I和PEP-II均为含有葡萄糖醛酸的葡聚糖;对力竭小鼠抗氧化、抗损伤的影响研究,结果表明:杏鲍菇多糖对力竭小鼠具有明显抗氧化作用,对肝脏、骨骼肌有明显抗损伤作用。     

小米多糖分离纯化及抗氧化活性研究

以河峪黄小米为原料,通过响应面实验考察料液比、超声时间、提取温度、纤维素酶量对小米多糖提取量的影响,并对小米多糖进行分离纯化和体外抗氧化活性研究。结果表明：超声辅助酶法提取小米多糖的最佳工艺：料液比为1:22（g/mL）,加酶量1%,超声时间21 min,提取温度60 ℃,此时小米多糖提取量为 30.34 mg/g。木瓜蛋白酶法-Sevag法蛋白脱除率为78.23%,多糖保留率为89.42%。用D315树脂法脱色率为88.00%,多糖保留率为80.20%。DEAE-52纤维素色谱柱和Sephadex G-100柱色谱纯化得到多糖组分MP-1。MP-1对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子清除率最高分别为75.33%、70.69%、68.62%,对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子半抑制浓度分别为1.105 mg/mL、0.200 mg/mL、1.371 mg/mL,表明小米中多糖具有较好的抗氧化能力。     

银杏叶多糖分离纯化、结构鉴定及抗氧化活性研究

目的:分离纯化银杏叶多糖(GBLP)并对其结构进行表征及抗氧化活性研究。方法:超声辅助提取制备银杏叶粗多糖,经精制除杂和阴离子交换柱分离获得多糖级分,采用高效凝胶过滤色谱(HPGFC)、气相色谱法(GC)分析相对分子质量和单糖组成;采用体外抗氧化方法评价银杏叶多糖抗氧化活性。结果:GBLP经分离后获得三个级分GBLPⅠ、GBLPⅡ、GBLPⅢ,其相对分子质量(Mw)分别为41861、361352、637533。GBLPⅠ由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成;GBLPⅡ和GBLPⅢ由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖组成,但其摩尔比不同。体外抗氧化实验表明GBLPⅢ对羟自由基的清除能力最强,其次为GBLPⅡ、GBLPⅠ、GBLP;而GBLPⅡ和GBLPⅢ对超氧阴离子清除能力相对较好,其次为GBLPⅠ、GBLP。结论:银杏叶多糖各级分的单糖组成比例、相对分子质量有差异;对羟自由基的清除作用强于对超氧阴离子的清除作用,对羟自由基的清除作用差异可能与Mw及结构相关。      

杏鲍菇多糖的单糖组成分析及其抗氧化活性研究

采用水提醇沉法提取杏鲍菇多糖,通过苯酚-硫酸法测定多糖总含量,利用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）柱前衍生化高效液相色谱（HPLC）分析单糖组成。在体外抗氧化评价体系研究杏鲍菇多糖的总还原力及对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基清除活性。其多糖的总糖含量达62.9%,分别由D-甘露糖、D-核糖、D-鼠李糖、D-葡糖醛酸、D-葡萄糖、D-木糖、D-半乳糖、D-岩藻糖组成,其相对摩尔百分比分别为9.8%、1.6%、0.15%、0.8%、62.8%、0.05%、24.4%、0.4%。结果表明,杏鲍菇多糖是一种典型的杂多糖,具有较强的抗氧化活性。      

杏鲍菇碱溶性多糖的酶法提取及其结构的初步分析

以杏鲍菇子实体为原料提取并分离纯化,得到碱溶性多糖组分,通过采用正交实验得到了提取碱溶性多糖的最佳方案。该多糖经层析方法和Smith降解等反应,证实其为单一组分,该组分多糖由葡萄糖为单一糖基组成;并证实了该多糖具有β(1→3)及β(l→6)连接的糖苷键。     

桦褐孔菌多糖的分离纯化及体外抗氧化活性研究

目的 分离纯化桦褐孔菌多糖(Inonotus obliquus polysaccharide, IOP),分析其结构并对其抗氧化活性进行评价。方法 以桦褐孔菌为原材料,采用水提醇沉工艺,经大孔树脂吸附法除杂脱色得到IOP;通过DEAE-52纤维素柱对IOP进行分离纯化,得到4个多糖组分:IOP-1、IOP-2、IOP-3和IOP-4,通过Sephadex G-100凝胶柱纯化得率较高的组分IOP-1,得到均一多糖IOP-1a。对IOP-1a进行结构鉴定,并考察其体外抗氧化能力。结果 IOP-1a相对分子质量为12040Da;由7种单糖组成:葡萄糖、半乳糖、木糖、甘露糖、鼠李糖、阿拉伯糖和岩藻糖(0.341:0.246:0.150:0.102:0.842:0.559:0.213),红外光谱显示IOP-1a含有β型糖苷键、羰基、羟基等官能团。体外抗氧化实验表明,IOP和IOP-1a均有较好的抗氧化能力。结论 从IOP中分离纯化得到的中性组分IOP-1a具有较好的抗氧化活性。     

Extraction,isolation, characterisation,antioxidant and anti-fatigue activities of Pleurotus eryngii polysaccharides

Pleurotus eryngii polysaccharide (PEP) was obtained using hot water extraction and ethanol precipitation. Three purified polysaccharide fractions (namely PEP1-A, PEP2-A and PEP3-A) were obtained from PEP using DEAE-cellulose-52 chromatography and a gel permeation Sephadex G-100 column. Firstly, this paper examined the characterisation of PEP1-A, PEP2-A and PEP3-A. The corresponding molecular weights were 5.378 × 10⁵, 9.506 × 10⁶ and 4.975 × 10⁵ Da, respectively. PEP1-A, PEP2-A and PEP3-A had similar monosaccharide compositions. PEP1-A was β-configuration, and PEP2-A and PEP3-A were α-configuration. PEP1-A, PEP2-A and PEP3-A had pyran-type rings, (1 → 3) glucose and (1 → 6) galactose linkages. Secondly, PEP, PEP1-A, PEP2-A and PEP3-A possessed antioxidant activities, and PEP was best. Therefore, only PEP was used to study its anti-fatigue activity in vivo. The result proved that PEP had anti-fatigue activity. PEP could be used as a valuable natural food supplement for preventing anti-fatigue or functional food.     

红曲霉菌胞外多糖的分离纯化、结构鉴定及抗氧化活性测定

目的:分离纯化红曲霉菌胞外多糖（Exopolysaccharide,EPS）,测定各组分的抗氧化活性并对其结构进行初步表征。方法:红曲霉菌发酵液经乙醇沉淀获得胞外多糖,经精制除杂和DEAE-纤维素柱层析法分离纯化获得多糖组分,再分别用高效凝胶过滤色谱法（HPGFC）、柱前衍生PMP-HPLC法测定相对分子质量（Mw）和单糖组成,测定多糖组分清除DPPH和羟自由基的能力,评价其体外抗氧化活性。结果:EPS经分离得到三个组分EPS-1、EPS-2和EPS-3,相对分子质量分别为8673、143537、238742 Da。EPS-1、EPS-2均由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖组成,摩尔比为1∶0.301∶2.052∶3.614和1∶2.475∶1.950∶1.532,EPS-3由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖组成,摩尔比为1∶0.401∶0.066∶0.307∶2.974。三个多糖组分对DPPH·和羟自由基均有清除能力,并与多糖浓度呈现正相关。当多糖浓度为1 mg/m L时,三个组分对DPPH清除率分别为16.4%、15.9%和14.8%;对清除羟自由基的清除率分别为40.4%、39.6%、63.8%。结论:红曲霉菌胞外多糖各组分的相对分子质量和单糖组成比例均有差异;对羟自由基、DPPH·的清除作用也存在差异,这种活性差异可能与各组分Mw及结构差异相关。