全脂牛乳粉中糖基化酪蛋白分析

研究全脂牛乳粉中糖基化酪蛋白,探讨其酶解特性。重点考察了不同pH、酸及提取方法对酪蛋白提取质量百分数的影响,并通过SDS-PAGE电泳分析酪蛋白,高碘酸—希夫碱染色法及莫氏试验鉴定糖基化酪蛋白,木瓜蛋白酶水解酪蛋白,测定其氨基酸含量。结果表明,pH 4.6时提取酪蛋白的质量百分数显著高于其他组(P0.05);质量百分数为2%的乙酸(pH 3.58)提取酪蛋白的质量百分数为(40.45±0.66)%,显著高于其他组(P0.05);鞣酸提取酪蛋白的质量百分数为(46.13±0.46)%,显著高于其他方法(P0.05);酪蛋白SDS-PAGE电泳结果表明,不同酸、不同方法提取的酪蛋白均有3条带,其分子量均分别为34,24,60ku;高碘酸—希夫碱染色结果表明,分子量为34,24ku的酪蛋白是糖基化酪蛋白;莫氏试验结果表明,乳粉酪蛋白中存在糖基化酪蛋白;酶解结果表明,乳粉酪蛋白经木瓜蛋白酶水解后游离氨基酸含量显著高于鲜乳酪蛋白(P0.05)。说明全脂牛乳粉中有糖基化酪蛋白,其分子量分别为34,24ku,易于水解。     

脱脂牛乳体系中乳蛋白葡萄糖美拉德反应程度及产物功能性质研究

以脱脂牛乳为研究对象,以葡萄糖为还原糖,对乳蛋白进行美拉德反应修饰,研究葡萄糖添加量为0~9 g/100 mL脱脂乳时反应体系的糖基化程度、pH、中间产物含量、褐变程度、粒径,以及产物乳化性、发泡性和吸油性。结果显示,脱脂乳体系糖基化程度在葡萄糖添加量为3 g/100 mL时达到最大值,之后迅速降低;中间产物和褐变程度均在该添加量下达到最低值,之后迅速上升。反应体系pH并未随葡萄糖添加量的增加而显著变化。糖基化反应后,酪蛋白胶束粒径增加。糖基化修饰改善了脱脂乳体系的乳化性,当葡萄糖添加量为3 g/100 mL时,乳化活性和乳化稳定性均达到最大值。糖基化修饰后,脱脂乳体系的发泡性并未显著提高,但该体系10和30 min泡沫稳定显著增加(p<0.05)。糖基化修饰后乳蛋白的吸油性降低。研究结论可为脱脂乳体系中乳蛋白美拉德反应产物的应用提供基础数据。     

牛乳中乳糖低温水解的研究

主要探讨了鲜牛乳中乳糖的低温水解?试验表明生奶中加入0．15U／kg的乳糖酶，在5℃、水解18h，可使生鲜牛乳中的乳糖降解55％左右，从而可以克服乳糖不耐症的问题。     

鲜牛乳中掺杂非蛋白氮及非乳蛋白的检测研究

利用氨基酸分析仪对鲜牛乳中的游离氨基酸及水解氨基酸进行分析,以确定牛乳中氨基酸质量浓度及比例组成,选出1种或多种氨基酸作为特征氨基酸,结合凯氏定氮法测定鲜牛乳中的粗蛋白质量浓度,用以辨别鲜牛乳中的蛋白质来源。     

胰蛋白酶水解降低乳蛋白过敏的研究

为获得低致敏的婴儿配方食品原料,对乳蛋白中的主要过敏原在水解过程中抗原抑制率的变化情况进行研究.采用间接竞争EUSA法检测水解过程中主要过敏蛋白——β-乳球蛋白(β-LG)、酪蛋白和牛血清白蛋白(BSA)的抗原抑制率的变化情况.结果表明:胰蛋白酶水解的最适条件为温度45℃,E/S 0.5%,水解时间1 h.在此水解条件下乳蛋白的总致敏性降低最多,其中β-乳球蛋白下降(55.93±3.63)%,酪蛋白下降(90.53±5.27)%和牛血清白蛋白下降(57.44±5.02)%.用胰蛋白酶水解乳蛋白可获得低致敏性的婴儿配方食品原料.     

牛乳粉中掺入大豆蛋白的特异氨基酸分析研究

在蛋白质含量保持一致的情况下,脱脂牛乳粉中分别加入0,5%,10%,20%,50%和100%大豆粉,通过氨基酸分析仪进行17种氨基酸检测,结果表明Asp(天门冬氨酸)、Gly(甘氨酸)、Lys(赖氨酸)、Arg(精氨酸)、Leu(亮氨酸)和Val(缬氨酸)都有显著线性关系,相关系数分别为91.74%,92.53%,92.42%,93.12%,68.25%和75.38%,且均为添加量20%后有明显变化。选取Asp、Gly、Lys和Arg建立4项综合曲线,其R2=0.947 8,为牛奶粉鉴伪提供技术参考。     

牛乳蛋白酶水解特性的研究

本论文初步探讨了牛乳蛋白酶水解的特性,得出了最适酶和酶解条件。双酶水解较之单一酶水解效果更好,以Protamex酶+Flavourzyme酶水解效果为最佳。并对双酶水解进行正交实验设计,分析影响酶水解的因素水平,并得出了最佳因素组合。     

蛋白酶水解牛乳蛋白的研究

探讨了几种不同的蛋白酶对牛乳蛋白的最佳酶解条件。通过对蛋白酶水解度和苦味值的比较，确定了胰蛋白酶和复合风味蛋白酶作为复配酶。其最佳酶解参数为：酶解温度55℃、时间4h、加酶量6g(每千克蛋白质中)、复合风味蛋白酶与胰蛋白酶的质量比为2：1，水解度可达25％以上，苦味值较小，满足了蛋白酶水解改性的要求。     

牛乳体细胞数与乳蛋白含量相关性的研究

对呼和浩特郊区一牧场30头荷斯坦乳牛进行6个月单个采样，共得427个有效样本，检测乳样中体细胞数、酪蛋白（包括α-酪蛋白、β-酪蛋白、κ-酪蛋白）、乳清蛋白、总蛋白、游离氨基氮、酪蛋白／总蛋白和乳清蛋白／总蛋白。结果表明，乳中总蛋白、游离氨基氮含量及乳清蛋白／总蛋白与SCC呈显著正相关；酪蛋白／总蛋白与SCC呈显著负相关；乳清蛋白含量与SCC呈极显著正相关。酪蛋白、α-酪蛋白／酪蛋白、β-酪蛋白／酪蛋白、κ-酪蛋白／酪蛋白与SCC的相关性不显著。酪蛋白含量与总蛋白含量呈极显著的正相关，与游离氨基氮含量、乳清蛋白／总蛋白呈极显著的负相关。乳清蛋白含量与游离氨基氮、总蛋白含量呈极显著正相关。     

水解牛乳蛋白技术及其产物的功能特性

牛乳舍有丰富的蛋白质，是人类食品中重要的营养成份来源。然而与人乳相比，牛乳中酪蛋白含量比例较高，而且牛乳中的αs-酪蛋白(αs-CN)和β-乳球蛋白(β-LG)是人乳中没有的，因此以牛乳直接喂养的婴儿可能会出现消化不良和过敏症状。对牛乳蛋白进行水解的研究消除过敏引起了人们极大的关注。牛乳蛋白的水解主要是通过各种酶，此外还有化学水解(如酸水解)，物理水解(如加热、高压)等方法。蛋白质水解后易产生苦味，通过控制水解度或包埋等方法可将苦味降低到不易感觉到的水平。本文还描述了牛乳蛋白水解率测定方法、牛乳蛋白水解产物分析技术，水解牛奶蛋白产物的功能特性及在婴儿配方产品及功能食品中的应用前景。     

酶水解降低牛乳蛋白抗原性的研究

利用胰蛋白酶和风味蛋白酶对牛乳单酶一步或双酶两步酶解,研究两种酶解方法对牛乳中αs-酪蛋白、α-乳白蛋白、β-乳球蛋白抗原降低效果的影响。对酶解过程中3种蛋白抗原降低率进行测定及水解物的蛋白质分布进行分析,结果表明:双酶两步水解法与单酶一步水解法相比,可显著降低牛乳蛋白抗原性。水解液的SDS-PAGE分析显示双酶两步水解液中αs-酪蛋白、α-乳白蛋白、β-乳球蛋白残留量较单酶一步水解液中的这3种蛋白残留量少。水解液的高效液相色谱分析显示双酶两步水解液中有较多相对分子质量低于6 500的肽类,而单酶一步水解液中有较多相对分子质量大于12 300的蛋白。     

胰蛋白酶水解对乳蛋白抗原性影响的研究

以胰蛋白酶为水解用酶,利用小鼠动物模型从体外和体内两个方面研究了水解作用对牛乳蛋白抗原性的影响。结果表明,胰蛋白酶水解的最适条件为50℃,E/S为0.6%下水解1.5 h。此水解条件下乳蛋白的总致敏性降低最多,分别为α-乳白蛋白(α-LA)抗原性降低率为80.16%,β-乳球蛋白(β-LG)抗原性降低率为51.94%,酪蛋白(CN)抗原性降低率为73.26%。动物实验表明:酶解组小鼠过敏症状较未水解的牛乳蛋白组相比明显减轻。与乳蛋白相比,酶解物显著抑制特异性IgE的产生,IgE质量浓度下降了42.36%。血浆组胺实验表明,酶解物降低血浆中组胺的释放,组胺质量浓度比乳蛋白组下降了32.77%。     

牦牛胰酶的制备及其在水解乳蛋白中的应用研究

基于牦牛胰脏提取胰酶,以酶活力和收率作为衡量指标,在单因素实验的基础上通过正交实验,确定牦牛胰酶制备的最佳工艺,最后探讨胰酶水解酪蛋白制备水解乳蛋白的效果。结果表明,牦牛胰酶最佳制备工艺为牦牛胰脏∶25%乙醇(提取剂)=1∶1,提取激活时间为5h,激活p H=6.8,75%乙醇沉淀8h。所得胰酶中胰蛋白酶、胰淀粉酶和胰脂肪酶的酶活力分别为1867、16298和5683 U/g,收率达9.7%;用其在温度40℃,p H7.5,酶与底物比例为1∶5的条件下水解酪蛋白4 h后所得的水解乳蛋白与Hyclone的水解乳蛋白相比较,有19种相同的氨基酸,且氨基酸总含量高于Hyclone的水解乳蛋白,分别为36.111%和27.725%。综上可知,该工艺简单,耗时短,易于产业化,在水解蛋白质领域中具有良好的应用前景。      

磁场稳定流化床反应器水解牛乳中乳糖的研究

在磁场稳定流化床反应器采用固定化β-半乳糖酶对牛乳中乳糖进行水解，研究了各种操作条件对牛奶中乳糖水解的影响，结果表明：在磁场强度14-18mT，牛乳流动速率小于14em^3／min、55℃的条件下水解牛乳120min，乳糖可水解86％。     

糙米粉水解工艺对糙米牛乳复合蛋白饮料的影响

研究糙米粉酶水解工艺对糙米牛乳复合蛋白饮料产品制备的口感和稳定性的影响。经研究发现,糙米粉最佳水解工艺为:α-淀粉酶添加量3%,糖化酶添加量6%,水解时间40 min,水解温度70℃。该酶解工艺条件下生产的糙米牛乳复合蛋白饮料产品的口感和稳定性最好。     

不同胎次奶牛乳中乳蛋白含量的近红外光谱定量分析

对不同胎次奶牛的牛奶样品进行近红外光谱扫描,并用多功能乳制品分析仪对牛奶样品中蛋白质的含量进行测定。利用正交实验设计,分别采用主成分回归法(PCR)、偏最小二乘法(PLS)、改进偏最小二乘法(MPLS)三种定量校正方法和多种光谱预处理方法建立模型,利用目标函数法对模型进行评定,结果表明:一胎、二胎奶牛乳样中乳蛋白的最优模型相同,其校正相关系数(R2)、定标标准差(SEC)和预测标准差(SEP)分别为:0.9626、0.0531、0.0630和0.9377、0.0810、0.1100;建立了三胎及以上奶牛乳样中乳蛋白的最优模型,R2、SEC和SEP分别为:0.9406、0.0461和0.0500;同时,建立了所有乳样中乳蛋白的最优模型,R2、SEC和SEP分别为:0.9351、0.0687和0.0790。所建模型对于快速、准确、无损、定量检测原料奶中乳蛋白的含量是可行的,该方法为快速检测混合原料奶中乳蛋白含量提供了理论依据。      

不同胎次奶牛乳中乳蛋白含量的近红外光谱定量分析

对不同胎次奶牛的牛奶样品进行近红外光谱扫描,并用多功能乳制品分析仪对牛奶样品中蛋白质的含量进行测定。利用正交实验设计,分别采用主成分回归法(PCR)、偏最小二乘法(PLS)、改进偏最小二乘法(MPLS)三种定量校正方法和多种光谱预处理方法建立模型,利用目标函数法对模型进行评定,结果表明:一胎、二胎奶牛乳样中乳蛋白的最优模型相同,其校正相关系数(R2)、定标标准差(SEC)和预测标准差(SEP)分别为:0.9626、0.0531、0.0630和0.9377、0.0810、0.1100;建立了三胎及以上奶牛乳样中乳蛋白的最优模型,R2、SEC和SEP分别为:0.9406、0.0461和0.0500;同时,建立了所有乳样中乳蛋白的最优模型,R2、SEC和SEP分别为:0.9351、0.0687和0.0790。所建模型对于快速、准确、无损、定量检测原料奶中乳蛋白的含量是可行的,该方法为快速检测混合原料奶中乳蛋白含量提供了理论依据。     

米曲霉蛋白酶水解乳蛋白产肽工艺研究

以肽质量浓度为主要指标,确定酶添加量,且分别考察了温度、时间对酶解乳蛋白产生肽的影响.通过正交实验确定了酶解乳蛋白的最佳工艺条件:即酶解在自然pH值状态下、加酶量5%、酶解温度50 ℃、酶解时间16 h,在此条件下肽质量浓度达2.38 g/L.     

水解乳蛋白产生肽及降低蛋白过敏性研究

以蛋白酶水解后的肽含量为评定指标,考察不同温度、pH、加酶量对酶解乳蛋白产生肽的影响。先通过单因素试验初步得到水解工艺条件,再根据Box-Benhnken中心组合实验设计原理,采用三因素三水平响应面分析法,建立多肽含量与各影响因子的回归方程,得出酶水解乳蛋白产生多肽的最佳工艺条件是:温度55.83℃,pH7.08,加酶量0.17%。在此条件下,肽含量达到2.3773mg/mL。通过ELISA试剂盒检测最佳工艺条件水解前、后的主要致敏蛋白,其中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白致敏性分别下降70.2%、89.8%。     

谷朊粉糖基化改性及其工艺优化

该实验以谷朊粉和果糖为主要原料,采用干法制备其接枝耦联产物,从而提高谷朊粉的功能特性和应用价值。实验分析了反应时间、反应温度、谷朊粉/果糖(W/W)对糖基化接枝物的溶解度的影响。并利用响应面法优化了谷朊粉与果糖接枝反应的工艺参数。研究结果表明:最佳反应条件为反应温度51℃,谷朊粉/果糖(W/W)90%,反应时间2.5 d(60 h),此时的平均溶解度为4.21 mg/m L,比天然谷朊粉提高了约12倍。