姬松茸多糖提取物对高脂血症大鼠降血脂作用研究

为探讨姬松茸多糖对高脂血症大鼠降血脂作用及机制,采用水提醇沉法提取姬松茸粗多糖,并用DEAE-纤维素离子交换柱对多糖进行层析分级,采用高效液相色谱法分析单糖组成,并测定多糖含量;高脂饮食诱导建立高脂血症大鼠模型,将大鼠随机分成4组(空白对照组、模型组、辛伐他汀阳性对照组、姬松茸多糖组),同时对大鼠口服灌胃给药,连续42...     

苦荞多糖的分离纯化及单糖组成测定

采用水提醇沉法获得苦荞多糖,经离子交换柱分离,高效凝胶过滤色谱法(HPGFC)纯度鉴定并测定多糖的相对分子质量。硫酸水解后,用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生水解后的单糖,衍生物采用反相高效液相色谱法测定单糖组成。结果表明：苦荞经水提醇沉,用Sevag 法脱蛋白后,获得苦荞多糖(TBP);DEAE-纤维素柱层析获得3个苦荞多糖组分TBP-1、TBP-2和TBP-3,相对分子质量分别为144544、445656和636795。柱前衍生液相色谱分析可知：TBP-1、TBP-2是由葡萄糖组成的均一多糖;TBP-3由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成的杂多糖,其物质的量比为4.32:2.41:1.00:39.8:9.64:2.02。     

柱前衍生高效液相色谱法检测8种枣水溶性多糖的单糖组成

建立了柱前衍生高效液相色谱法,对金丝小枣、大荔龙枣、晋枣、赞皇大枣、宣城圆枣、梨枣、无核小枣和骏枣中水溶性多糖的单糖组成及其比例进行分析比较。样品经清洗、烘干、粉碎、石油醚脱脂后,采用水提醇沉法得到水溶性多糖,经低温干燥后备用。水溶性多糖经三氟乙酸充分水解后,以1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)作为衍生剂,HPLC法分析枣水溶性多糖的单糖组成。结果表明:柱前衍生高效液相色谱法检测水溶性多糖的单糖组成衍生方法简单、线性关系好,检测灵敏度高,单糖的最低检出限为0.14~0.33 nmol。8种枣多糖均由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖6种单糖组成,其单糖组成比例存在很大差异。其中,甘露糖在各多糖中含量均较低,半乳糖醛酸含量普遍较高,葡萄糖除了在赞皇大枣和金丝小枣两种制干型枣中含量较低以外,在其余6个品种中含量较高。     

低分子量南瓜多糖的提取、纯化及结构初步研究

采用水浸提法提取低分子量南瓜粗多糖.通过DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析和sephacryl s-100 HR凝胶过滤层析得到南瓜低分子量多糖(LwPP-Ia),通过高效液相色谱测定了LWPP-Ia的纯度,显示为单一峰,分子量为6267Da.运用高效液相离子色谱测定了单糖组成,为葡萄糖(27.75%)、果糖(7.70%)、半乳糖(9.12%).紫外扫描显示无蛋白、核酸杂质.红外光谱鉴定表明含有多糖的特征吸收峰,并含有吡喃糖环.     

柱前衍生化HPLC法分析枸杞多糖中单糖组成

利用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生化高效液相色谱（high?performance?liquid?chromatography,HPLC）法,建立6?种常见单糖的色谱分离条件,并用于10?种不同产地的自制枸杞多糖的单糖组成分析和8?种市售枸杞多糖的分析鉴定。该HPLC方法简便、灵敏度高、重复性好,可用于枸杞多糖的组分分析和质量控制。对自制枸杞多糖的单糖组成分析结果表明,自制枸杞多糖由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖及阿拉伯糖6?种单糖组成,平均物质的量比为1.00∶1.38∶0.63∶92.37∶1.18∶3.55。对市售枸杞多糖的分析鉴定结果表明,其中6?种枸杞多糖的含量在正常范围内,另外2?种多糖含量高于均值,其中葡萄糖相对物质的量比为自制枸杞多糖的2～3?倍。     

蛹虫草固体发酵培养基多糖的分离纯化及组成分析

为研究蛹虫草固体发酵培养基中多糖的分离纯化及组成,本实验利用水提醇沉法与Sevage法相结合,得到蛹虫草固体发酵培养基粗多糖(CMSMP).经DEAE-cellulose 52柱层析分离得到纯化蛹虫草固体发酵培养基多糖组分(CMSMPI)后,采用紫外光谱、醋酸纤维素薄膜电泳和Sephadex G-150凝胶柱层析鉴定其纯度,高效液相色谱及红外光谱分析其组成、结构.结果表明,CMMSP1为均一多糖,且由木糖、阿拉伯糖和葡萄糖三种单糖组成.同时红外光谱显示,CMSMP1具有典型多糖吸收峰.     

姬松茸多糖的微波辅助提取与含量测定

采用提取时间、微波功率、液料比的单因素试验和三因素三水平正交试验优化了微波辅助提取姬松茸多糖的条件,并用苯酚—硫酸法对姬松茸多糖含量进行了测定。结果表明:以水为溶剂,姬松茸多糖最佳提取条件为:提取时间30min,微波功率640W,液料质量比20∶1。姬松茸多糖换算因子为1.479,多糖含量为13.095%,用该方法测定糖含量的相对标准偏差(RSD)为2.329%。     

生姜皮多糖的分离纯化及其结构组成分析

以生姜皮为原料,经热水浸提法,乙醇醇沉得到生姜皮粗多糖。再经DEAE-纤维素-52阴离子交换柱和Sephadex?G-100凝胶柱对所得粗多糖进行层析纯化,得到3种水溶性生姜皮多糖(GE-1、GE-2、GE-3)。利用高效液相色谱与蒸发光散射检测器联用测定各多糖组分的分子质量,利用柱前衍生高效液相色谱法分析各多糖组分的单糖组成,通过紫外光谱扫描、红外光谱扫描进一步分析各组分多糖结构。结果表明3种纯化多糖组分总糖含量分别为(98.06±0.15)%、(97.41±0.42)%、(97.89±0.22)%,分子质量分别为462、194 k D和376 k D。GE-1的单糖组成主要为甘露糖、葡萄糖、木糖,含有微量的半乳糖,其物质的量比为1.25∶6∶1;GE-2的单糖组成主要为甘露糖、葡萄糖和岩藻糖,其物质的量比为2.51∶9.25∶1;GE-3的单糖组成主要为甘露糖、核糖、半乳糖、阿拉伯糖,其物质的量比为17.39∶1∶1.89∶1.23。紫外光谱扫描结果显示3种多糖组分无明显的核酸和蛋白质吸收峰,红外光谱结果分析得出GE-1、GE-2和GE-3含有多糖类物质的特征吸收峰。     

酸菜发酵液多糖的分离纯化及结构分析

以醇沉法提取的酸菜发酵液粗多糖为原料,研究了酸菜发酵液多糖的分离纯化工艺,并对其结构及单糖组成进行了初步鉴定。比较了Sevag法、TCA﹣正丁醇法、TCA与木瓜蛋白酶结合法及Sevag与木瓜蛋白酶结合法4种脱蛋白方法,利用DEAE-52纤维素柱和Sephadex-50葡聚糖凝胶柱层析精制得到了SJPⅡ-1,通过红外光谱(infrared spectroscopy,IR)和高效液相色谱(high performance liguid chromatography,HPLC)分析SJPⅡ-1的结构及单糖组成。试验结果表明,TCA与木瓜蛋白酶结合法是较佳脱蛋白方法,蛋白质的清除率为94.86%,多糖的损失率为19.77%;IR检测结果显示,SJPⅡ-1具有多糖特征结构;HPLC分析结果表明,SJPⅡ-1主要由果糖、甘露糖、鼠李糖、葡萄糖4种单糖组成。     

黄瓜多糖的体外抗氧化活性

目的：测定黄瓜中总糖含量,分离制备黄瓜多糖并测定其糖醛酸含量、单糖组成以及评价其体外抗氧化活性。方法：采用苯酚-硫酸法测定黄瓜提取物中的总糖含量;用硫酸-咔唑法测定黄瓜多糖中的糖醛酸含量;采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化高效液相色谱(HPLC)分析单糖组成;并在体外抗氧化评价体系研究黄瓜多糖对DPPH自由基、超氧阴离子自由基(O2－ ·)和羟自由基( ·OH)的清除活性以及总还原力(TRP)。结果表明：黄瓜多糖的总糖含量为63.5%,糖醛酸含量为10.6%。HPLC分析表明：黄瓜多糖由D-甘露糖、L-鼠李糖、D-葡萄糖醛酸、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-木糖、D-半乳糖、L-阿拉伯糖等8种单糖组成,物质的量比为4.08:2.78:1.00:5.82:6.07:2.78:8.48:6.58。黄瓜多糖有明显的抗氧化活性,在质量浓度为20mg/mL时,对DPPH自由基、O2－ ·、 ·OH的清除率分别为92.31%、83.57% 和77.59%,并发现其有明显的还原能力。结论：黄瓜多糖是一种典型的杂多糖,具有较强的抗氧化活性。     

方格星虫多糖的分离纯化及单糖组成

方格星虫多糖经碱法提取、三氯乙酸脱蛋白、DEAE-52纤维素柱层析、Sephadex G-100凝胶柱层析纯化得到精制方格星虫多糖（Sipunculus nudus polysaccharide,SNPS）。测定SNPS的理化性质和单糖组成,结果表明：SNPS为白色粉末状单一组分;经理化性质测定和紫外光谱分析,表明SNPS的多糖质量分数为99.35%,糖醛酸质量分数为22.21%,不含蛋白质和核酸,不含硫酸根;气相色谱分析结果表明方格星虫多糖SNPS主要由阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖组成,其物质的量比为1.16∶9.54∶1。本研究表明SNPS是从方格星虫中得到的均一组分纯多糖。     

核桃隔膜多糖的分离纯化及单糖组成分析

目的：分离纯化核桃隔膜多糖并分析其单糖组成。方法：核桃隔膜经水提醇沉、冷冻干燥得水溶性多糖,经DEAE-纤维素52离子柱和SephadexG-100凝胶柱分离纯化后得到多糖组分PDJL-A11(diaphragma of juglans regiaL. acid polysaccharide)。运用紫外光谱鉴定纯度,气相色谱分析多糖的单糖组成。结果：核桃隔膜多糖PDJL-A11单糖组成为：阿拉伯糖、果糖、甘露糖、鼠李糖和葡萄糖,其物质的量比为2.11:6.52:8.81:12.59:15.58。结论：建立了核桃隔膜多糖分离纯化的方法,确定了其单糖组成及其物质的量比、可为核桃隔膜药理学的研究提供参考。     

辣木叶多糖的分离纯化及其体外降糖活性研究

目的研究辣木叶多糖的制备、单糖组成以及体外降糖活性。方法采用水提醇沉、Sevage法、大孔树脂-阴阳离子交换树脂联用技术得到较高纯度辣木叶粗多糖,再进一步通过二乙氨基乙基纤维素和葡聚糖凝胶柱层析分离得到2个主要多糖组分(MOs-2-a、MOs-2-b),并通过水解衍生化对其单糖组成进行分析。此外,采用HepG2细胞建立胰岛素抵抗模型,以细胞葡萄糖消耗量为指标,考察辣木叶多糖的降糖作用。结果本文采用的制备工艺可以得到较高纯度的辣木叶粗多糖(纯度为73.10%),辣木叶多糖主要由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖及半乳糖组成,其中各单糖摩尔比为0.49:3.65:0.63:1.27。与模型组相比,辣木叶多糖组分MOs-2-a、MOs-2-b均能显著增加胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗量(P0.05)。结论辣木叶多糖MOs-2-a、MOs-2-b具有良好的降糖效果,本文可以为辣木叶多糖作为功能食品发展的提供科学依据。     

九蒸九制对黄精多糖单糖组成及其抗氧化性的影响

研究九蒸九制后的黄精多糖含量变化,以1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)为柱前衍生化试剂,结合高效液相色谱法(HPLC)测定九蒸九制后黄精多糖的单糖组成,并测定其多糖的体外抗氧化活性.结果表明,未蒸制的黄精多糖含量为14.36％,但随着蒸制次数的增加,黄精多糖的含量逐渐减少并趋于稳定,保持在4％左右;HPLC检测...     

超声辅助酸解-超高效液相色谱-电雾式检测器测定灵芝多糖的单糖组成

目的:建立超声辅助酸解-超高效液相色谱-电雾式检测器(UAH-UPLC-CAD)法测定灵芝多糖的单糖组成的方法,为药食两用真菌多糖的单糖组成研究提供快速分析方法支持。方法:以赤芝为研究对象,对灵芝多糖超声辅助酸解条件进行系统优化,采用Waters ACQUITY UPLC Amide柱(3.0 mm×100 mm,1.7 μm),梯度洗脱(A为0.8%甲酸水溶液,B为乙腈),流速:0.4 mL·min-1,柱温:25 ℃,采用CAD检测器,其中:雾化器温度35 ℃,N₂压力61.2 Psi。结果:获得了最佳的超声辅助酸解工艺条件:超声功率270 W、水解温度70 ℃、水解时间1 h;在优化的UPLC-CAD条件下,各化合物分离较好、灵敏度较高,方法具有较好的精密度、重现性和稳定性;应用该方法测定了灵芝多糖酸解产物中的7种单糖(摩尔比为:鼠李糖∶岩藻糖∶木糖∶阿拉伯糖∶甘露糖∶葡萄糖∶半乳糖=5.90∶5.34∶72.64∶31.96∶1.00∶1.89∶5.24),其中,木糖和阿拉伯糖的含量较高,其值分别为27.25±0.67和11.99±0.29 mg/g;而甘露糖和葡萄糖的含量则较低,其值分别为0.45±0.01和0.85±0.04 mg/g。结论:该方法简单、快速、灵敏度高,为药食两用真菌多糖的单糖组成研究提供了方法支持。     

茶叶酸性多糖的分离、纯化及其理化性质研究

采用水提醇沉法从采自江西婺源的粗老绿茶中提取茶叶多糖,通过Sevag法脱蛋白得到精制茶叶多糖,应用高效凝胶渗透色谱法（high performance gel permeation chromatography,HPGPC）分析茶叶多糖纯度并测定其分子质量,进一步测定茶叶多糖的糖含量、蛋白质含量、单糖组成、糖醛酸组成等理化指标,同时对其进行紫外和红外光谱扫描,考察其光谱性质。结果表明：该茶叶多糖组分为均一性高的酸性多糖组分,分子质量约为289 734 D,糖含量为55.1%,蛋白质含量为1.8%。该茶叶多糖酸性组分主要由鼠李糖、核糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,其物质的量比为1.26∶3.18∶4.08∶1.00∶1.52∶3.92,该茶叶多糖酸性组分中含有大量半乳糖醛酸,含量为33.5%。     

南瓜皮多糖PP1的提纯、组分分析及原子力显微镜技术观测研究

采用热水浸提法及十六烷基三甲基溴化铵法(CTAB法)提取南瓜皮多糖PP1,紫外分光光度法和高效液相色谱法检测纯度,红外光谱分析其结构及气相色谱测定南瓜皮多糖PP1的单糖组分;通过乙醇固定、Ni2+搭桥固定两种制样方法,原子力显微镜(AFM)观测南瓜皮多糖PP1微观形貌。结果表明：热水浸提及CTAB法分离纯化南瓜皮多糖PP1的纯度较高,不含核酸及蛋白质,红外光谱分析证实南瓜皮多糖PP1具有糖类物质的特征吸收峰,存在吡喃环,由果糖、阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖组成,物质的量比为0.92:2.76:5.52:2.24,AFM观测其结构呈单链形排列,无分支状结构,采用乙醇固定法得到的多糖结构形态较细长,Ni2+搭桥固定法得到的多糖结构形态相对短粗。     

分级醇沉发酵麸皮多糖的成分分析与抗氧化活性研究

以不同浓度乙醇(50%、60%、70%和80%)分级沉淀发酵麸皮多糖,得到4种多糖组分(WPB_S-50、WPB_S-60,WPB_S-70和WPB_S-80),通过分析纯度、多酚、残留蛋白含量、单糖组成和抗氧化活性,探究了4种多糖的组成、抗氧化活性差异及原因。结果表明,4种多糖组分的纯度均在70%以上,WPB_S-50组分多糖纯度最高,达79.95%;各组分中均含有多酚和蛋白,WPB_S-80组分中多酚和残留蛋白含量显著高于其他组分(P<0.05);4种多糖均由阿拉伯糖、木糖、甘露糖和葡萄糖等十种单糖组成,但组成比例存在差异;抗氧化活性表明:4种多糖组分均有一定的抗氧化活性,且与其中多酚及蛋白含量存在显著的正相关(P<0.05)。     

不同提取方法对小麦麸皮多糖化学组分及免疫调节活性的影响

目的:以小麦麸皮超微粉为实验材料,分别用酸法、碱法、水提和酶法提取获得多糖,研究不同提取方法对小麦麸皮多糖得率、提取后麸皮残渣微观形态、糖醛酸含量、硫酸根含量、蛋白质含量、单糖组成及免疫调节活性的影响。方法:采用苯酚-硫酸法测定多糖含量,硫酸-间羟基苯酚法测定糖醛酸含量,BaCl₂-明胶法测定硫酸根含量,气相色谱法测定单糖组分;采用MTT检测细胞毒性,Griess法测定细胞上清液中NO含量,Western Blot法检测细胞诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)和环氧合酶-2(COX-2)蛋白表达。结果:碱提法获得的粗多糖得率最高,为31.73%,测定提取的粗多糖中多糖含量为57.79%;小麦麸皮多糖中糖醛酸和硫酸根的含量依次为:碱提法>酶提法>酸提法>水提法;不同提取方法的小麦麸皮多糖组分中所含单糖的种类为阿拉伯糖、木聚糖及葡萄糖;MTT法检测四种小麦麸皮多糖对细胞均无毒性,其中水提多糖能促进RAW264.7细胞分泌NO因子并能促进细胞诱导型一氧化氮合成酶和环氧合酶-2蛋白的表达。结论:四种不同提取方法所得到的小麦麸皮多糖的得率、化学组成成分及生物活性各不相同,采用传统水提法工艺提取多糖更利于维持多糖的免疫调节活性。     

黄皮疣柄牛肝菌多糖结构鉴定及对小鼠盲肠与粪便中短链脂肪酸的影响

本实验采用水提醇沉法从黄皮疣柄牛肝菌中提取粗多糖，经脱色、脱蛋白后得到黄皮疣柄牛肝菌多糖（polysaccharides from Leccinum crocipodium (Letellier.) Watliag，LCP），凝胶渗透色谱法测定LCP分子质量，高效液相色谱法测定LCP单糖组成，紫外光谱鉴定LCP纯度，红外光谱分析LCP结构，动物实验研究LCP对小鼠盲肠内容物及粪便中短链脂肪酸的影响。结果表明，该多糖单糖组成为甘露糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、岩藻糖，其物质的量之比为4.34∶0.35∶0.08∶13.39∶3.35∶0.75∶1.80；重均分子质量为1.540×105 Da；红外光谱分析表明LCP是含有α-(1→6)糖苷键以及β-型糖苷键的吡喃型多糖；动物实验表明LCP对小鼠盲肠及粪便中乙酸、丙酸、正丁酸、异丁酸、正戊酸、异戊酸的产生都有较大影响，不同的灌胃剂量对小鼠产生短链脂肪酸的影响有较大差异，以高剂量LCP对短链脂肪酸的产生影响最大。