葵花籽ACE抑制肽的体内降压活性初步研究

以自发性高血压大鼠(SHR)建立试验模型,探讨葵花籽ACE抑制肽的体内降压活性。试验结果表明:一次性给药后,葵花籽ACE抑制肽各剂量组对SHR收缩压的降低作用存在明显的量效关系,且降压活性具有时效性;长期灌胃葵花籽ACE抑制肽,SHR体重均呈增加趋势,空白组增加最大,阳性对照组增加最小;在为期4周的长期给药实验中,除低剂量组和空白组的收缩压无显著差异外,其余各组均与对照组相比有显著的差异;各试验组SHR的心率值之间无显著差异性,表明葵花籽ACE抑制肽对SHR心率无显著的副作用。     

葵花籽ACE抑制肽的体内降压活性初步研究

以自发性高血压大鼠(SHR)建立试验模型,探讨葵花籽ACE抑制肽的体内降压活性。试验结果表明:一次性给药后,葵花籽ACE抑制肽各剂量组对SHR收缩压的降低作用存在明显的量效关系,且降压活性具有时效性;长期灌胃葵花籽ACE抑制肽,SHR体重均呈增加趋势,其中剂量组大鼠体重的增加量居于对照组和阳性对照组之间;在为期4周的长期给药试验中,除低剂量组外,其余各组均与对照组相比有显著的差异;各试验组SHR的心率值之间无显著差异性,表明葵花籽ACE抑制肽对SHR心率无显著的副作用。     

酶法制备刺参内脏ACE抑制肽的工艺优化及产物鉴定

刺参内脏作为海参初加工的主要副产物，具有良好的营养和开发利用价值。文章研究了利用酶解法从刺参内脏中制备ACE抑制肽的工艺。通过单因素实验和响应面优化法确定了胰蛋白酶酶解制备海参内脏ACE抑制肽的最佳条件为：温度37℃、pH8.5、料液比1:1.98、加酶量2.56%、酶解时间1.0 h，所得内脏多肽ACE抑制率为56.80%。通过超滤分级、Sephadex G-25分子筛层析柱层析，对活性肽进一步纯化，得到最优组分ACE抑制率为50%时抑制浓度0.535 mg/mL，通过高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)分析鉴定，得到多肽氨基酸序列组成和分子质量等信息。该研究为刺参内脏综合利用和食源性ACE的开发提供了基础。     

乳源ACE抑制肽的制备及应用

近年来高血压成为威胁人类健康的第一大慢性病,由于常规降压药物对人体的损害,食源性降压肽成为研究的热点。目前研究发现了多种乳源ACE抑制肽,并得到应用。本文综述乳源ACE抑制肽的制备、纯化及应用现状。     

仿刺参不同部位ACE抑制活性分析及活性肽制备工艺优化

本文对仿刺参具有高降血压活性部位进行筛选并优化其活性肽制备工艺。采用酶解法对仿刺参不同部位(体壁、肠、卵)进行水解,以血管紧张素转换酶(Angiotensin converting enzyme,ACE)抑制率为指标筛选最适蛋白酶,通过对各酶解物ACE抑制率的半数抑制浓度(IC₅₀)测定比较筛选出最优抑制活性部位。经单因素实验与响应面试验优化确定活性肽最佳酶解制备条件,对蛋白酶解物进行分子量测定确定其分布范围,经超滤膜分离后对不同组分的ACE抑制活性分析。结果显示,选用碱性蛋白酶为最适水解酶,体壁、肠、卵各蛋白酶解物的ACE抑制率的IC50分别为1.11、4.02、0.65 mg/mL,仿刺参卵具有更好的ACE抑制效果,为最优抑制活性部位。其最佳的酶解制备工艺参数为：酶解时间5 h,加酶量3.5 U/mg,酶解温度65.26℃,底物浓度3.51%,酶解pH9.02,在该条件下仿刺参卵酶解产物的ACE抑制率为80.65%±0.52%,与预测值接近。蛋白酶解产物的分子量集中分布在3000 Da以下,占总含量的98.37%,其中1000～3000 Da占比9.50%,小...     

蚕蛹源ACE抑制肽的稳定性和抑制ACE动力学

研究了温度、pH、干燥方式和体外肠道酶消化对蚕蛹源ACE抑制肽稳定性的影响,并通过Lineweaver-Burk双倒数曲线作图和紫外光谱初步探讨了蚕蛹源ACE抑制肽对ACE的抑制机理。结果表明:蚕蛹源ACE抑制肽在高温、酸性和碱性条件下不稳定,易失活;冷冻干燥和喷雾干燥对蚕蛹源ACE抑制肽的活性影响较小;蚕蛹源ACE抑制肽对胃蛋白酶、胰蛋白酶和α-胰凝乳蛋白酶具有较强的抗消化能力,经胃蛋白酶、胰蛋白酶和α-胰凝乳蛋白酶共同消化后,蚕蛹源ACE抑制肽仍能保留初始活性的94.0%;蚕蛹源ACE抑制肽竞争性抑制ACE,其抑制常数(Ki)为0.06 mg/mL;ACE被蚕蛹源ACE抑制肽抑制后,ACE在240～280 nm附近的紫外吸光值明显增加,初步揭示了蚕蛹源ACE抑制肽抑制ACE活性时,ACE的分子结构发生了改变。     

牛乳酪蛋白源ACE抑制肽对大鼠的降血压作用

为了考察牛乳酪蛋白源血管紧张素转化酶抑制肽(Angiotensin I-converting enzyme inhibitory peptides,ACEI)的降血压作用,以自发性高血压大鼠(Spontaneously hypertensive rats,SHR)为动物模型,给予样品30 d后,检测大鼠的血压、心率、血清及尿液。与模型对照组相比,ACE抑制肽高、低剂量组和阳性对照组的收缩压分别为175、175、172 mm Hg,差异具有统计学意义(p0.01);ACE抑制肽高剂量组的降钙素基因相关肽(Calcitoningenerelatedpeptide,CGRP)浓度升至10.09pg/m L,差异具有统计学意义(p0.05);ACE抑制肽高剂量组的总钙(TCa)、内皮素-1(Endothelin-1,ET1)、血糖(Glucose,GLU)、总胆固醇(Cholesterol,CHOL)、高密度脂蛋白胆固醇(High density liptein cholesterol,HDL-C)、血尿酸(Uric acid,UA)浓度明显降低,分别降至2.06 mmol/L、8.69 pg/mL、6.41 mmol/L、1.13 mmol/L、0.29 mmol/L、108.20μmol/L,差异具有统计学意义(p0.05)。结果说明,在本实验条件下,ACE抑制肽不仅具有缓解大鼠心率过速与明显的降血压作用,也有助改善肾血管性高血压大鼠血清生化指标及肾功能指标,同时对血糖、血尿酸以及胆固醇有一定控制作用。ACE抑制肽可能通过升高血液CGRP、抑制ET1、降低血钙水平起到降血压作用。     

利用海洋生物蛋白制备ACE抑制肽的研究进展

血管紧张素转化酶(angiotensin convert enzyme,ACE)在血压调节方面起着重要作用,当其受到抑制时血压就会降低。本文综述了A C E抑制肽的降压原理、活性检测方法、分离提纯和海洋生物蛋白源A C E抑制肽的国内外最新研究进展,并对其应用前景进行了展望。     

米糠蛋白ACE抑制肽在大鼠体内降压效果的研究

采用灌胃和静脉注射的方法,观察了米糠蛋白ACE抑制肽对应激性高血压(SHR)大鼠的降压效果,并与卡托普利的降压效果进行了比较。分别以50、100、150 mg/kg·bw剂量的米糠蛋白ACE抑制肽一次性给药后,每2 h测量大鼠血压,连续测量8 h;实验持续4周,每天灌胃一次,每周测量血压及体重一次。SHR大鼠给予米糠蛋白ACE抑制肽后,血压均显著下降(p<0.05),并均在灌胃后2 h达到最低值,血压下降最大幅度为(31±6.8)mm Hg;而正常大鼠灌胃米糠蛋白ACE抑制肽后血压无显著变化,灌胃卡托普利则会明显降低其血压;长期灌胃米糠蛋白ACE抑制肽可使SHR大鼠血压下降明显(p<0.05),且降压效果稳定。      

ACE抑制肽研究进展

该文对目前国内外有关ACE抑制肽研究进展进行综述,重点介绍制备ACE抑制肽原料、分离提取方法、结构与活性关系、活性测定方法和功能性评价方法,并简介其在食品中应用及发展前景,以期为对ACE抑制肽进一步研究提供参考。     

Classification and Antihypertensive Activity of Angiotensin I-Converting Enzyme Inhibitory Peptides Derived from Food Proteins

ABSTRACT: Angiotensin I-converting enzyme (ACE)-inhibitory peptides from the thermolysin digest of chicken muscle and the peptic digest of ovalbumin were isolated. However, some of them failed to show antihypertensive activity in spontaneously hypertensive rats (SHR). To clarify this discrepancy, ACE-inhibitory peptides from various sources were preincubated with ACE before measurement of ACE-inhibitory activity and classified into 3 groups: (1) inhibitor type, IC₅₀ values of peptides that are not affected after preincubation with ACE; (2) substrate type, peptides that are hydrolyzed by ACE to give peptides with weaker activity; and (3) prodrug-type inhibitor, these peptides are converted to true inhibitors by ACE or gastrointestinal proteases. Peptides belonging to the 1st and the 3rd groups exert antihypertensive activities even after oral administration in SHR.     

酶法生产大豆蛋白ACE抑制肽的研究

研究了Alcalase碱性蛋白酶、Neutrase中性蛋白酶、Protames复合蛋白酶、Flavourzyme风味蛋白酶对大豆分离蛋白的水解效果和ACE(血管紧张素转化酶)的抑制活性。水解能力用pH-start法检测,水解度大小依次为:Alcalase碱性蛋白酶>Protames复合蛋白酶>Neutrase中性蛋白酶>Flavourzyme风味蛋白酶;ACE抑制活性用高效液相法检测,ACE抑制率强弱依次为:Alcalase碱性蛋白酶>Flavourzyme风味蛋白酶>Protames复合蛋白酶>Neutrase中性蛋白酶。综合考虑,选定Alcalase碱性蛋白酶为生产大豆ACE抑制肽的最适酶,并对其酶解条件进行了优化,确定生产大豆ACE抑制肽的最佳条件为:温度60℃、pH8.0、[S]=4%、[E]/[S]=4%,这时的水解度为14.4%。     

酶解虾壳蛋白制备ACE 抑制剂的工艺优化

以虾壳粉为原料,以水解度和ACE抑制率为指标,利用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶进行酶解,其中中性蛋白酶和碱性蛋白酶有较高的ACE抑制活性,因此对碱性蛋白酶和中性蛋白酶的工艺条件进一步优化。结果表明：碱性蛋白酶酶解工艺优化条件为：温度60℃、pH9.5、底物质量浓度2.5g/100mL、加酶量4000U/g、酶解时间2.5h,在此条件下ACE抑制率最高,为67.70%,水解度为69.79%;中性蛋白酶酶解工艺优化条件为：温度50℃、pH7.0、底物质量浓度2.5g/100mL、加酶量2000U/g、酶解时间2h,在此条件下ACE抑制率最高,为84.04%,水解度为26.76%。提示中性蛋白酶酶解能够产生更多的ACE抑制肽,是酶解虾壳蛋白制备ACE抑制肽的较优酶。     

三斑海马蛋白ACE抑制肽的制备及其二级结构的研究

以三斑海马为原料,经碱性蛋白酶酶解,获得富含血管紧张素转化酶(angiotensin I-converting enzyme,ACE)抑制肽的酶解液。酶解液经透析、Sephadex G-25凝胶过滤色谱和反相高效液相色谱得到进一步分离纯化。结果表明,透析产物的IC50值为(0.44±0.26)mg/mL,相比酶解液(0.81±0.12)mg/mL,其ACE抑制活性更强。透析产物经Sephadex G-25凝胶柱分离纯化后,得到3种组分,其中组分F2的ACE抑制活性最强,IC50值为(0.11±0.08)mg/mL。F2经反相高效液相色谱进一步分离后,得到6个具有ACE抑制活性的组分峰,其中组分F2-4的ACE抑制活性最强,IC50值为(0.005 7±0.000 9)mg/mL。经过3步分离纯化后,成功从三斑海马蛋白中分离得到一种活性较强ACE抑制肽:ProAla-Gly-Pro-Arg-Gly-Pro-Ala(PAGPRGPA),多肽分子量为721.39 Da。圆二色谱分析多肽二级结构表明其主要含无规则卷曲。因此,从三斑海马蛋白中分离得到的多肽可能成为营养保健品和抗高血压药品及相关疾病的一种有益成分,且对海马蛋白资源的开发利用具有重要意义。     

鱼降压肽的大孔吸附树脂分离及其活性稳定性

采用大孔吸附树脂对碱性蛋白酶水解、水解度为34.52% 的鱼降压肽进行分离。结果表明,DA201-C 型大孔吸附树脂对鱼降压肽吸附性最好,乙醇体积分数为75% 时洗脱下来的组分具有最高的ACE 抑制活性,其IC50为1.52mg/ml。鱼降压肽中灰分由分离前的9.47% 减少到分离后的2.34%,肽和蛋白质含量分别由分离前的72.81%和81.26% 增加到分离后的80.24% 和92.42%。活性稳定性分析显示,胃蛋白酶和胰酶、中性和低酸性pH 值、55℃以下温度以及1000mmol/L 以内的NaCl 浓度对鱼降压肽的ACE 抑制活性影响较小。     

高粱碱溶蛋白ACE抑制肽的制备及其稳定性研究

以高粱为原料,通过碱法提取制备高粱碱溶蛋白,利用不同蛋白酶对其进行酶解,结果表明Alcalase碱性蛋白酶水解高粱蛋白得到的水解产物水解度和血管紧张素转化酶(ACE)抑制率最高。在此基础上进一步考察了碱性蛋白酶酶量、pH值、温度、反应时间这4个因素对水解产物ACE抑制率的影响,并通过响应面实验优化酶解条件,得到Alcalase碱性蛋白酶水解高粱碱溶蛋白制备ACE抑制肽最优工艺为:酶解温度55.5℃,酶解时间1.68 h,pH值7.95,酶量2 360 U/g,此条件下实测ACE抑制率达到75.98%,该ACE抑制肽具有良好的热稳定性和酸碱稳定性,并且在体外经胃肠道酶系消化酶解后,依然能保持良好的抑制活性。