具有抗氧化活性茶多糖TPS- Ⅱ的分离纯化及其性质研究

从六安炒青绿茶水提物中分离纯化得到具有抗氧化作用的茶多糖组分TPS-II,经电泳和FPLC 方法检测TPS-II 为均一组分;其总糖85.3%、糖醛酸28.0%、蛋白2.8%,分子量为1.01 × 105D;气相色谱法分析得知其单糖组成为L- 鼠李糖、L- 岩藻糖、L- 阿拉伯糖、D- 木糖、D- 甘露糖、D- 葡萄糖、D- 半乳糖,摩尔比为2.98:1.58:4.27:1.00:1.82:2.25:6.98;红外光谱分析显示TPS-II 呈现多糖吸收特征峰,β- 消去反应推断TPS-II 中多糖与蛋白的连接为非O- 型糖肽键。     

海带岩藻聚糖硫酸酯降解及基本结构分析

用离子交换色谱法对海带岩藻聚糖硫酸酯粗糖进行分离纯化,然后采用铜-过氧化氢氧化降解法获得低分子量多糖,对降解条件和产物进行研究。得出结论:离子交换色谱中加入一定浓度氯化钠,可以获得高硫酸根和岩藻糖含量的岩藻聚糖硫酸酯。红外光谱和核磁共振分析确定硫酸根的位置在C2或C3上,糖构型属于α-D-吡喃糖。研究表明自由基氧化降解海带岩藻聚糖硫酸酯的降解条件与其硫酸根和岩藻糖含量有关,硫酸根含量越高,多糖越难以降解。最优降解条件:60℃下,500μL 20mg/mL糖溶液,加入0.0267mol/L乙酸铜,F3、F4加10μL 15%H2O2,F5加50μL15%H2O2,反应4h。采用PAGE凝胶电泳方法可以很好的分析氧化降解产物的分子量分布。     

海带中褐藻糖胶LPS-B的分离纯化与分析

海带中的褐藻糖胶经离子交换纤维素层析得到了4种亚组分:LPS-A、LPS-B、LPS-C、LPS-D,并用凝胶介质对其中的一种主要组分(LPS-B)进行进一步的分离纯化,最终得到两种均一多糖(PB-1和PB-21),高效凝胶过滤色谱法(HPGPC)测定分子量。结果表明,PB-1的Mw=5.64×105,Mn=2.97×105,分散度D=1.89;PB-21的Mw=3.54×104,Mn=2.46×104,分散度D=1.44。红外光谱分析表明,所得的两种均一多糖具有多糖的红外吸收峰,且都不含有糖醛酸。     

海带中褐藻糖胶的组成分析

对海带中褐藻糖胶进行了紫外薄层色谱、气相色谱、氨基酸分析等方面的研究.结果表明褐藻糖胶是由鼠李糖、岩藻糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖、葡萄糖醛酸、硫酸根及蛋白质构成的复合物.其中单糖的摩尔比为RhaFUcXylManGalGlU=0.411.723.750.9612.17.褐藻糖胶的葡萄糖醛酸、硫酸根及蛋白质的含量分别为6.2%、8.7%和4.1%.     

余甘多糖分离纯化及其分子结构的研究

分离纯化余甘多糖(Pe Ps),并研究其理化性质和结构特征。采用热水浸提法提取余甘粗多糖,经DEAESephadex A-25柱层析分离得到两种不同多糖组分。综合运用硫酸-苯酚、硫酸-咔唑、碘-碘化钾等化学分析方法对多糖的理化性质进行分析;采用高效液相色谱法鉴定组分的均一性及其分子量(Mw),并用气相色谱法测定组分的单糖组成;利用紫外光谱、红外光谱、旋光度研究多糖组分的结构特征。结果表明:余甘粗多糖经纯化分级后得到两种均一的多糖组分:Pe PsⅠ和Pe PsⅡ。经鉴定,Pe PsⅠ为含有吡喃的中性还原糖,而Pe PsⅡ为含有糖醛酸的吡喃酸性还原糖;两者对热稳定,不溶于有机溶剂,不含蛋白质和氨基酸;比旋光度[α]D20分别为+68°、+108°;分子量分别为1.49×105、1.51×105u。Pe PsⅠ主要是由L-鼠李糖、L-阿拉伯糖、D-木糖等5种单糖构成;而Pe PsⅡ主要是由L-鼠李糖、L-阿拉伯糖、D-半乳糖3种单糖构成。     

海带多糖的分类提取,鉴定及理性特性研究

建立了一套简便有效的提取方案,可从海带（Ｌａｍｉｎａｒｉａ ｊａｐｏｎｉｃａ Ａｒｅｓｃｈ）中分类提取同时得到褐藻酸钠、褐藻糖胶、褐藻淀粉三类多糖粗品。将含量较高的前二者进一步纯化,乙酸纤维膜电泳和葡萄糖凝胶Ｇ－７５柱层析的结果表明纯化后的褐藻酸钠、褐藻糖胶是均一的。将二者与市售海藻酸钠试剂的光谱行为和理性特性进行了对比实验,结果表明市售海藻酸钠试剂与褐藻酸钠的紫外和红外图谱特征一致,分子量、特性     

南海鸢乌贼墨汁多糖分离纯化及组分分析

目的:从南海鸢乌贼墨汁中分离纯化多糖,并分析其多糖组分。方法:利用水提醇沉法得粗多糖,通过固相萃取层析法除色素对多糖进行纯化,纯化多糖依次经DEAE-52离子交换柱、Sephacryl HR-300凝胶柱分级纯化,按峰收集得单一组分,采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone,PMP)衍生化方法,通过超高效液相色谱分析多糖组分。结果:粗多糖经DEAE-52离子交换柱、Sephacryl HR-300凝胶柱后收集得到3个糖组分,分别为SIP1、SIP2、SIP3;通过PMP衍生化方法分析单糖组成,得:SIP1是由D-甘露糖、D-葡萄糖、D-半乳糖3种单糖缩合而成;SIP2和SIP3分别是由D-甘露糖、鼠李糖、D-葡萄糖、D-半乳糖及L-(-)-岩藻糖5种单糖按照不同比例缩合而成。     

钝顶螺旋藻多糖的分离纯化及组成分析

目的：对钝顶螺旋藻多糖进行提取、分离纯化和热降解,并对不同多糖组分的基本化学性质和糖链的精细组成进行分析。方法：采用蛋白酶酶解、醇沉、阴离子交换色谱法和热降解,从钝顶螺旋藻中提取和分离纯化出P0、P0.2、P0.4、P0.6、P0.8五种多糖组分及其热降解产物。采用高效凝胶排阻色谱法、离子色谱法、1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生-高效液相色谱法和亲水液相色谱-高分辨傅里叶转换质谱（hydrophilic interaction liquid chromatography-Fourier transform mass spectrometry,HILIC-FTMS）联用技术,分析比较不同多糖组分的化学性质和糖链精确组成。结果：钝顶螺旋藻多糖中P0、P0.2、P0.4和P0.6组分硫酸根质量分数在6%～7%,而P0.8组分硫酸根质量分数最高（14.46%）。单糖组成分析结果说明,P0组分是1 种葡聚糖,P0.2组分是主要由葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、岩藻糖等中性糖组成的杂多糖;而P0.4、P0.6和P0.8组分主要是由鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、木糖和半乳糖组成的结构非常复杂的硫酸鼠李聚糖。采用HILIC-FTMS分析多糖组分热降解产物中的寡糖组成,发现P0.2糖链主要是由己糖单糖、戊糖二糖、脱氧己糖-戊糖寡糖、脱氧己糖-糖醛酸的寡糖片段组成,硫酸根在脱氧己糖、戊糖和己糖上,糖链组成复杂。而P0.4和P0.6组成相似,主要鼠李糖-戊糖寡糖、鼠李糖-葡萄糖醛酸寡糖、戊糖二糖和三糖寡糖片段组成,硫酸根连接在鼠李糖和戊糖上。结论：钝顶螺旋藻中有多种不同结构的复杂硫酸多糖,其中葡萄糖醛酸-鼠李聚糖是钝顶螺旋藻中特有的一种硫酸多糖。     

岩藻多糖中硫酸根含量的测定

岩藻多糖(fucoidan)是褐藻细胞产生的粘性物质,存在于褐藻间组织或粘液中,是一系列组成相似的多糖混合物,主要组分是L-岩藻糖-4-硫酸酯。近年来国内外研究表明,岩藻多糖有抗凝血的活性,能提高人体免疫力,具有抗肿瘤、抗艾滋病和抗病毒病等功效。所以对岩藻多糖的研究开发就显得十分重要,而岩藻多糖的活性经实验表明是源于岩藻多糖中的L-岩藻糖和有机硫酸根,硫酸根含量的高低,直接体现岩藻多糖功效的好坏。     

红阳猕猴桃多糖组分的分离纯化、单糖组成及其抑制癌细胞活性

研究红阳猕猴桃果实多糖组分的分离纯化、单糖组成及其对癌细胞增殖的抑制作用。用水提取总多糖,层析法分离纯化多糖组分;高效凝胶渗透色谱测定组分的纯度和分子质量;高效液相色谱法测定多糖纯组分的单糖组成;傅里叶变换红外(Fourier transform-infrared,FT-IR)光谱鉴定多糖纯组分的特征官能团;用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐法测定多糖纯组分对肺癌、乳腺癌、肝癌、胃癌和结肠癌这5种癌细胞的体外抑制活性。总多糖分离出ACP-1、ACP-2、ACP-3、ACP-4这4种单组分多糖;其中ACP-3纯度最高,分子质量为2 663 k D,主要含有L-鼠李糖(17.78%,物质的量分数,后同)、D-半乳糖醛酸(25.25%)、D-半乳糖(25.45%)、L-阿拉伯糖(20.51%)、D-葡萄糖(6.14%)、D-甘露糖(2.13%)、D-木糖(1.03%)、D-葡萄糖醛酸(0.97%)及少量D-岩藻糖(0.74%);其FT-IR光谱图有多糖特征官能团的吸收峰。ACP-3对5种癌细胞增殖的半数最大抑制浓度依次为0.646、0.310、0.642、0.281、0.575μmol/L,对癌细胞增殖有抑制活性。     

淡红侧耳子实体多糖的分离纯化及结构探析

以淡红侧耳子实体为原料,采用水提醇沉法进行提取,大孔阴离子交换树脂D315脱色,Sevage法脱蛋白,得到淡红侧耳子实体粗多糖;利用DEAE-纤维素-52和Sephadex G-150对粗多糖进行纯化;采用高效凝胶过滤色谱法和柱前衍生高效液相色谱法进行分子质量测定和单糖组成分析;通过紫外光谱扫描、红外光谱扫描及刚果红实验对其结构进行初步测定;并对其理化性质进行研究。结果表明,经纯化后得到3种组分PDP-1-1、PDP-2-1和PDP-3-1;相对分子质量分别为12. 9、10. 6和2 753. 7 k Da; PDP-1-1由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和岩藻糖5种单糖组成,PDP-2-1由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖和岩藻糖6种单糖组成,PDP-3-1由甘露糖、葡萄糖、半乳糖和岩藻糖4种单糖组成;紫外扫描三组分均不含蛋白质和核酸,红外扫描均显示具有多糖特征吸收峰; PDP-1-1和PDP-3-1具有三股螺旋结构。     

蜜环菌多糖Am -Ⅰ的部分理化性质及结构研究

液体培养的蜜环菌水溶性胞外粗多糖经纯化得Am-Ⅰ,再经Sephadex G-200柱层析和醋酸纤维薄膜电泳鉴定Am-Ⅰ为均一性组分。采用凝胶色谱法得Am-Ⅰ相对分子量约为6.65×105Dal,旋光法得[α]D25为+100°,苯酚-硫酸法、Folin-酚法、Dische反应法测其糖含量、蛋白质含量和糖醛酸含量分别为91.51%、4.78%和2.81%。气相色谱分析表明:Am-I的单糖组成为D-葡萄糖、D-岩藻糖、D-阿拉伯糖、D-甘露糖、D-鼠李糖、D半乳糖、摩尔比为:17.05:0.33:0.36:1:0.42:13.67。红外光谱、纸色谱、Smith降解分析表明:Am-I是一种含半乳糖醛酸的酸性多糖,其结构主要由吡喃型单糖通过β(1→4)键和β(1→6)键连接而成。β-消去反应表明这种糖蛋白是非O-型糖肽键。     

海带多糖的分类提取、鉴定及理化特性研究

建立了一套简便有效的提取方案,可从海带(Laminaria japonica Aresch)中分类提取同时得到褐藻酸钠、褐藻糖胶、褐藻淀粉三类多糖粗品。将含量较高的前二者进一步纯化,乙酸纤维膜电泳和葡聚糖凝胶G—75柱层析的结果表明纯化后的褐藻酸钠、褐藻糖胶是均一的。将二者与市售海藻酸钠试剂的光谱行为和理化特性进行了对比实验,结果表明市售海藻酸钠试剂与褐藻酸钠的紫外和红外图谱特征一致,分子量、特性粘度、电导率及pH值等数值均很接近而与褐藻糖胶的性质有较大差异。     

羊栖菜褐藻糖胶的分离纯化和组成性质研究

对羊栖菜褐藻糖胶的7种组分进行了分离纯化和性质研究。首先以羊栖菜为原料,通过CaCl2法和酸法抽提褐藻糖胶,然后经DEAE-Cellulose52离子交换柱层析和SephadexG-100凝胶柱层析,分离得到了7个组分,经纸层析和紫外扫描证实均为单一组分。其次对7个组分的性质进行了研究,经GPC凝胶排阻色谱、气相色谱和红外光谱对各组分的相对分子质量、单糖组成、结构性质等进行了测定;经HIO4氧化法和比浊法对各组分的岩藻糖和硫酸根含量进行了测定;最后通过MTT法,研究了各组分对DU-145和SPC-A1细胞的作用,结果表明各组分对该二种癌细胞的增殖均有抑制作用。     

南瓜多糖的提取及纯化

南瓜是一种具有药用价值的食品,实验用热水浸提、醇析、Severge法除蛋白,水相透析得到南瓜粗多糖,通过DEAE-Sepharose和SephadexG-100柱的分离纯化得到2种水溶性多糖,经酸解,纸色谱分析得组分1的单糖组成为D-葡萄糖、L-阿拉伯糖、D-半乳糖和葡萄糖醛酸,组分2的单糖组成为D-葡萄糖、D-半乳糖、D-木糖和葡萄糖醛酸。     

万寿菊多糖的纯化、组成分析及其体外抗氧化和抗肿瘤活性研究

对万寿菊多糖(Tagetes erecta L.polysaccharides,TEPs)提取工艺进行优化并对粗多糖进行分离纯化,对得到的多糖组分进行单糖组成及体外抗氧化和抗肿瘤活性分析。响应面法优化万寿菊多糖最佳提取工艺为:提取温度80℃、提取时间2 h、料液比1∶21(g∶mL),此条件下提取率为3.7%。利用DEAE-52纤维素和Sephadex G-150柱层析分离纯化TEPs得2种均一多糖(TEPs-1和TEPs-2);利用高效体积排阻色谱法测定2种均一多糖重均分子量分别为4.69和5.73 k Da;利用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone,PMP)-柱前衍生HPLC法测定其单糖组成,TEPs两种组分均由7种单糖组成,其中甘露糖、半乳糖、葡萄糖和阿拉伯糖4种单糖含量较高。1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、羟基自由基、超氧阴离子、2,2’-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(2,2’-azino-bis 3-ethylbenzthiazol...     

杏鲍菇多糖组分的分离纯化及结构鉴定

目的 对含有岩藻糖(fucose, Fuc)的杏鲍菇多糖进行分离纯化, 并分析其结构。方法 通过水提分级醇沉得到60%乙醇醇沉杏鲍菇多糖(Pleurotus eryngii polysaccharides, PEP)。杏鲍菇多糖经离子交换层析和凝胶层析分离纯化, 采用凝胶渗透色谱法(gel permeation chromatography, GPC)测定PEP各组分的相对分子质量; 高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)检测岩藻糖; 傅里叶变换红外光谱(fourier transform infrared spectrum, FT-IR)、X-射线衍射(x-ray diffractometer, XRD)分析、原子力显微镜(atomic force microscope, AFM)观察等方法对PEP各组分进行结构表征。结果 PEP经分离纯化得到PEP-1、PEP-2和PEP-3共3种多糖组分, 分子量依次为1.585×106、4.266×104和1.995×103 Da。岩藻糖存在于PEP-1组分中; FT-IR显示PEP-1和PEP-2存在C-O-C键拉伸和吡喃环构型; PEP-2存在β型糖苷键, PEP-3为β-葡聚糖。XRD结果显示3个组分多糖结晶指数分别为38.89%、47.22%和20.00%。AFM观察结果显示, PEP-1整体呈现流星状结构, 多糖粒子聚集; PEP-2为链状螺旋结构且以小球状体聚集; PEP-3呈现小螺旋棒状结构。结论 PEP分离纯化得到3个组分多糖, 岩藻糖存在PEP-1组分中。     

海黍子褐藻糖胶的分离及抗氧化与保湿活性

采用酸提法从海黍子中提取得到海黍子粗多糖,经60%醇沉得褐藻糖胶粗多糖,经去褐藻酸、蛋白质及小分子等杂质后,通过epherose-6B分级纯化得到三个组分(SKP1,SKP2和SKP3),其相对分子质量分别为837,271和610k Da。对其结构组成及抗氧化与保湿活性进行测定,结果表明:三种多糖均是硫酸化多糖,均主要由不同比例的岩藻糖、半乳糖和甘露糖组成,另含有少量的阿拉伯糖、木糖和鼠李糖等;三种多糖还原能力与VC接近,且均表现出明显的清除自由基活性,且活性大小与相对分子质量和糖醛酸含量成反比,与硫酸基含量成正比;SKP1和SKP2的吸湿活性分别高出透明质酸钠22.32%和2.38%,三种褐藻糖胶的保湿率分别比甘油大35.88%,27.96%和22.31%,且随相对分子质量越大,保湿与吸湿活性越大。     

石花菜多糖的分离纯化及单糖组成分析

以石花菜为原料,对石花菜多糖进行分离纯化,并对纯化后多糖组分的理化性质及单糖组成进行分析。利用复合酶法提取石花菜多糖并采用Sevage法脱蛋白,通过DEAE-52离子交换柱层析及Sephadex G-200凝胶柱层析对粗多糖进行分离纯化,按峰收集主要的多糖组分GAP1,对其总糖、蛋白质、糖醛酸及硫酸基质量分数进行测定,并采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone,PMP)对多糖进行衍生化,通过高效液相色谱法测定其单糖组成。结果表明:石花菜粗多糖经柱层析后收集得到主要多糖组分GAP1,其总糖质量分数为92. 56%,糖醛酸质量分数为44. 53%,硫酸基质量分数为6. 92%,不含蛋白质; PMP柱前衍生高效液相色谱法测得GAP1主要由鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖和L-岩藻糖6种单糖按照不同比例缩合而成,各单糖物质的量比为1. 00∶1. 00∶4. 45∶27. 31∶2. 27∶1. 88。     

蛹虫草多糖的纯化及其分子量的测定

以蛹虫草子实体为材料,对水提醇沉、硫酸锌盐去蛋白后获得蛹虫草粗多糖（CP）进行分离纯化。采用膜分离技术、DEAE．52柱层析及SephadexG-100柱层析对CP进行分离纯化,并使用高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）测定各组分多糖分子量,以表征不同路径所得多糖的分子量分布。结果表明：CP经膜过滤、DEAE-52柱层析及SephadexG-100进一步柱层析得到多糖组分CP2-c2-s2,经HPGPC法鉴定,CP2-c2-s2为均一多糖组分,其平均分子量为20200Da。