亚麻籽粕抗氧化肽制备工艺的响应面法优化

以亚麻籽粕蛋白为原料,酶解制备抗氧化肽。以DPPH自由基清除率为实验指标,通过单因素实验,筛选最佳蛋白酶并考察底物浓度、酶添加量、温度、pH及时间等对酶解物抗氧化能力的影响。在单因素实验基础上,采用响应曲面法进行酶解工艺条件的优化。结果表明:采用胰蛋白酶作为最适酶,酶解的最佳工艺条件为:底物浓度2%,温度37 ℃,酶解时间3.00 h,加酶量为4000 U/g,pH8.5,在该条件下,1 mg/mL酶解产物的DPPH自由基清除率及超氧阴离子自由基清除率分别为(63.64%±0.023%)和(19.98%±0.098%),0.5 mg/mL酶解产物的ABTS自由请清除率为(88.11%±0.059%)。说明亚麻籽粕抗氧化肽具有良好的抗氧化活性。     

不同酶改性豌豆蛋白的泡沫性能比较

以淀粉生产的副产物豌豆蛋白粉为原料,采用中性蛋白酶、碱性蛋白酶和风味蛋白酶对豌豆蛋白粉进行限制性水解,对酶解产物的泡沫性能进行评价.在单因素实验的基础上采用响应面分析方法优化酶解改性工艺条件.结果表明,改性效果最好的是碱性蛋白酶,优化条件为:加酶量0.16％、酶解时间29 min、pH8.0、温度55.4℃、底物浓度0.08 g/ml,在此条件下改性后豌豆蛋白起泡能力为315.69％,泡沫稳定性为63.47％,与改性前豌豆蛋白粉的起泡能力185.50％和泡沫稳定性15.65％相比,改性后的豌豆蛋白起泡性能明显提高.     

两步酶解法制备小龙虾副产物多肽及其抗氧化性研究

该研究采用两步酶解法制备小龙虾副产物多肽,先用碱性蛋白酶水解提取小龙虾副产物中粗蛋白,利用单因素和正交试验确定粗蛋白的最佳制备条件：2%碱性蛋白酶,酶解2 h,料液比1∶20（g/mL）,酶解温度55℃、pH8.5,虾副产物蛋白得率最高为64.32%;胰蛋白酶二次酶解虾副产物粗蛋白制备多肽,以蛋白水解度为标准,利用正交试验优化得到酶解制备多肽的工艺条件：2%胰蛋白酶、酶解4 h,料液比1∶15（g/mL）,酶解温度37℃、pH8.0的条件下,虾副产物蛋白水解度为45.2%。二次酶解产物比一次酶解产物的总抗氧化能力强;Tricine-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE）图谱显示二次酶解多肽的分子质量主要集中在3.3 kDa以下;多肽中含有18种氨基酸,其中必需氨基酸占总氨基酸的64.36%。小龙虾副产物多肽可用于功能食品及调味品的开发。     

胰蛋白酶对猪血红蛋白酶解脱色条件优化

以酶解液水解度（hydrolysis degree,DH）、三氯乙酸（trichloroacetic acid,TCA）可溶性氮含量及血红素残留量为评定指标,采用单因素试验比较胰蛋白酶和碱性蛋白酶对猪血红蛋白的酶解脱色效果。在单因素试验基础上,进行4因素3水平正交试验。结果表明：胰蛋白酶水解脱色的效果更好,最佳酶解工艺参数为酶底比7500 U/g、酶解温度45 ℃、pH 7.5、底物质量浓度8 g/100 mL,在此条件下,酶解液DH为25.67%,TCA可溶性氮含量为80.05%,血红素残留量为18.34%,猪血红蛋白多肽粉蛋白含量83.17%;对此条件下制备的猪血红蛋白多肽粉进行分子质量分布分析,分子质量在1 000 Da以下的小肽占比94.20%;最佳酶解脱色条件下,猪血红蛋白多肽粉中TCA可溶性氮含量为80.05%的蛋白占猪血红蛋白多肽粉蛋白含量的96.25%,这与分子质量分布结果比较符合。     

酶法制备黄粉虫蛋白粉工艺研究

选用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶对黄粉虫进行单酶水解以制备蛋白粉。结果表明,胰蛋白酶为最佳酶制剂,采用混合水平正交试验优化工艺,得出最佳酶解条件为酶用量1.8%,温度55℃,固液比1:15,时间5 h,pH值为8.0。此条件下,水解液中可溶性蛋白酶解物含量为0.9728g/100mL,水解率73.8%。酶解液经活性炭脱色、喷雾干燥后得蛋白粉。     

华贵栉孔扇贝富硒蛋白粉的酶法制备工艺优化及其营养评价

通过酶解法利用华贵栉孔扇贝制备富硒蛋白粉,并对其进行营养评价。以水解度和硒溶出率为指标,筛选蛋白酶后,应用响应面优化得到最佳酶解工艺,制备富硒蛋白粉,从分子质量分布、肽质谱、氨基酸组成及矿物质组成对其进行营养评价。以中性蛋白酶进行工艺优化,最佳酶解工艺为：酶解温度53℃、料液比1∶3.8、加酶量4 885 U/g;肽质谱结果显示0～1 200 m/z的肽种类随酶解时间延长而显著增多,酶解6 h,水解度达46.95%,硒溶出率达97.02%,分子质量低于3 kDa组分占酶解产物的67%。所制备的富硒蛋白粉蛋白质含量达82.58%,必需氨基酸含量占总氨基酸量的37.57%,必需氨基酸指数为122.01%,第一限制氨基酸为缬氨酸,硒含量为1.80μg/g远高于食品富硒标准(0.15μg/g),必需微量元素Mn、Cu、Zn等含量较高。华贵栉孔扇贝富硒蛋白粉富含易于人体吸收的小分子肽,矿物质含量丰富,特别是硒含量高,可用于富硒食品或保健品的开发。     

基于胆酸盐吸附作用的藜麦蛋白质酶解工艺研究

以藜麦蛋白质为研究对象,研究具有胆酸盐吸附作用的生物活性肽酶解工艺。以水解度(Degree of Hydrolysis,DH)和胆酸盐吸附作用为指标综合评价,筛选酶解反应蛋白酶,进一步在单因素实验的基础上通过正交试验优化酶解工艺。结果表明,选用风味蛋白酶为最佳反应蛋白酶,最佳酶解工艺为pH7.0,底物浓度3%(w/v),酶解温度55 ℃,酶添加量6000 U/g,酶解时间2 h。此酶解条件下,水解度(DH)为38.22%±0.65%,酶解获得的活性肽吸附胆酸盐的量为(7.56±0.11) mg/mL,结果表明该酶解工艺稳定可行,可制备胆酸盐吸附作用较好的生物活性肽。     

碱性蛋白酶改性对豌豆蛋白乳化性影响

以淀粉生产副产物豌豆蛋白粉为原料,采用碱性蛋白酶(Alcalase)对豌豆蛋白进行限制性水解。以酶改性豌豆蛋白产物的乳化特性为评价指标,在单因素实验基础上采用响应面分析方法优化酶解改性工艺条件,综合考虑乳化活性指数(EAI)和乳化稳定性(ES)两个响应值,根据响应面优化得到最佳酶解条件,在实验室条件下进行适当调整,在加酶量0.07%、时间40.0min、pH 8.0、温度57.7℃、底物浓度8%的条件下得到水解产物EAI为(29.55±0.45)m2/g,ES为(41.88±0.63)min。在此条件下回归方程预测值为:EAI 29.35 m2/g,ES 41.97 min,实验值与预测值吻合良好,可见该模型能较好预测酶改性产物乳化特性。     

酶解鸢乌贼组织蛋白制备酸溶性肽的工艺优化

为有效利用鸢乌贼资源,对酶解鸢乌贼组织蛋白制备酸溶性肽的工艺进行了研究。比较了不同蛋白酶对鸢乌贼组织蛋白水解能力的差异,确定胰蛋白酶为水解鸢乌贼组织蛋白的最佳蛋白酶类型。先后采用单因素和响应面试验对酶解工艺条件进行了系统的研究及优化。确定了胰蛋白酶水解鸢乌贼组织蛋白的最佳工艺条件为:蛋白浓度3%,加酶量4210 U/g蛋白,pH9.23,酶解温度52.3 ℃,酶解时间5 h。在优化的工艺条件下,酸溶性肽的得率可以达到(74.02%±0.41%)。此外,氨基酸分析结果表明,经酶解得到的酸溶性肽基本保持了原鸢乌贼组织蛋白的氨基酸组成,8种必需氨基酸含量丰富,约占氨基酸总量的38%。试验结果表明,采用胰蛋白酶水解鸢乌贼制备酸溶性肽的工艺具有可行性。     

鳜鱼副产物源水解物的制备工艺优化及其体外消化分析

为利用鳜鱼加工副产物,本研究以碱性蛋白酶为优选酶,选取水解度为指标,采用单因素实验和响应面试验,确定副产物的最佳酶解工艺,并分析了水解物的体外消化特性。结果表明:其最佳酶解工艺为料液比1:4 g/mL、pH9.1、温度57.0 ℃、加酶量2.02%和酶解时间4 h,得到蛋白水解物的水解度为18.38%。进一步,在模拟胃消化和肠消化阶段,其可溶性肽含量分别减少17.76%和50.97%;模拟胃肠消化后,其DPPH和ABTS自由基清除能力仍有51.36%和48.67%,具有较高的生物活性。研究结果将为鳜鱼加工副产物开发成功能性食品提供科学支撑。     

果胶酶处理对甜玉米芯可溶性糖含量的影响

为提高甜玉米芯总糖产量,对甜玉米芯进行果胶酶水解。采用单因素实验考察酶添加量、pH、温度以及时间对果胶水解度的影响,采用响应曲面法分析建立二次回归模型。结果表明,果胶水解的最佳条件为:酶添加量88 U/g,温度60 ℃,pH5.0,时间90 min,此时果胶水解度为43.82%±0.02%。分别取果胶酶处理前后甜玉米芯进行可溶性糖含量对比分析,果胶酶处理前可溶性糖含量为53.16%±0.02%,果胶酶处理后为62.89%±0.03%,可溶性糖含量提高了9.73%。     

玛咖多肽的制备及抗氧化活性研究

以水解度为考察指标,在单因素实验基础上,利用正交实验优化酶解玛咖粗蛋白制备玛咖多肽的工艺,同时通过·OH、DPPH·及O₂-·清除实验研究提取过程中产生的玛咖醇提液以及在最适条件下制得的玛咖多肽的抗氧化活性,并对玛咖多肽进行氨基酸组成分析。结果表明,酶解玛咖粗蛋白的最适酶是碱性蛋白酶,酶解制备玛咖多肽的最适条件是酶解时间4 h、酶解pH为10.5、酶解温度55℃、加酶量1.6×104 U/g,在此条件下,玛咖粗蛋白的水解度为(31.55%±0.74%)。稀释一倍的玛咖醇提液对各自由基清除率为最大,对DPPH自由基的清除率为94.44%,对·OH的清除率为85.05%,对O₂-·清除率为53.85%。玛咖多肽对·OH、DPPH·及O₂-·的IC₅₀值分别为0.85、0.44、0.86 mg/mL,且表现出一定的量效关系。另外,玛咖多肽中Tyr、His、Lys、Pro四种氨基酸含量为16.98%,其氨基酸组成与抗氧化活性存在一定关系。该结果说明玛咖醇提液及玛咖蛋白均具有一定的抗氧化活性。     

双酶分步水解牛骨蛋白工艺的优化

以新鲜牛骨为原料,探讨牛骨粉的制备工艺。选用枯草杆菌中性蛋白酶与胰蛋白酶分步水解牛骨蛋白,以水解度为特征性指标,采用L9(34)正交试验设计优化双酶水解牛骨粉的工艺条件。结果表明：牛骨粉蛋白质含量高达30.72%,约为鲜骨蛋白质含量的3倍;采用胰蛋白酶先水解,中性蛋白酶后水解的方式分步水解牛骨蛋白,其效果优于两种酶同时水解及中性蛋白酶先水解,胰蛋白酶后水解;中性蛋白酶与胰蛋白酶分步水解牛骨蛋白的最佳工艺条件：固液比1:2,起始pH8.0,胰蛋白酶2000U/g蛋白质于45℃、150r/min振荡水解3h,然后用中性蛋白酶2000U/g蛋白质于45℃以150r/min振荡水解3h,水解度达18.34%;粒径小的活性炭对酶解液脱苦、脱色及除腥效果优于粒径大的活性炭。     

基于深度酶解花生蛋白制备增咸酶解液的工艺优化

摘 要：目的 基于深度酶解花生蛋白制备增咸酶解液，并对其最佳制备工艺进行探究。方法 采用复合酶分步酶解法制备花生蛋白增咸酶解液，以单因素实验和响应面法确定最佳酶解条件，并通过对酶解产物的相对分子量分布、氨基酸含量、游离氨基酸含量和电子舌进行分析，解析酶解产物的增咸特性。结果 花生蛋白增咸酶解液的最佳工艺参数为：花生蛋白混合料液（料液比1:10，g:mL），95°C下热处理20 min，调节pH 6.5，木瓜蛋白酶加酶量：3020 U/g底物，55°C酶解2.8 h，风味蛋白酶加酶量：610 U/g底物，55°C继续酶解3.8 h。在此条件下花生蛋白水解度高达16.65%。经感官评价和电子舌分析结果表明：当0.5%（m/m）的花生蛋白酶解物加入到0.5%（m/m） NaCl溶液时，咸味增强率可达76.21%。结论 经深度酶解作用后，酶解产物分子量均在3000 Da以下，同时鲜味氨基酸占比较高，赋予酶解产物增咸的呈味特性，此研究为花生蛋白在减盐食品的应用提供了理论依据。     

分步酶解法制备黄浆水活性肽

黄浆水是传统豆制品点脑成型过程压榨出的废弃物,富含低聚糖、蛋白质等营养成分。该研究通过比较酶种类及用量、酶解温度、酶解时间对黄浆水蛋白质水解度的影响,采用正交试验优化获得黄浆水短肽最佳分步酶解工艺：（1）酸性蛋白酶加酶量2 000 U/g,pH 4.0,温度55 ℃,水解2 h;（2）中性蛋白酶8 000 U/g,pH 6.0,温度50 ℃,水解6 h。在此条件下进行验证,水解度可达25.95%,血管紧张素转化酶体外抑制活性达92.0%。采用酸性蛋白酶和中性蛋白酶分步酶解黄浆水制备短肽,制备条件温和,水解度高,可为豆制品加工废弃物的高值化利用奠定基础。     

响应面法优化近江牡蛎多糖多肽联产的酶解工艺

利用响应面法优化近江牡蛎(Ostrea rivularis)多糖多肽联产的酶解工艺条件。通过单因素实验,研究酶解时间、酶配比、料液比对水解度、多肽含量、酸性糖含量以及总糖含量的影响,在此基础上,应用响应面试验建立数学模型,以多肽含量、酸性糖含量和总糖含量为响应值,进行三因素三水平的响应面分析。结果表明,酶解法联产制备近江牡蛎多糖多肽的最佳工艺为时间2.0 h,添加配比为3:1的alcalase和胰蛋白酶(总质量分数为0.8%),料液比1:3.6 g/mL。此条件下进行重复试验,得到近江牡蛎酶解液中多肽含量(251.70±5.73) mg·50 g-1,酸性糖含量(8.17±0.29) mg·50 g-1,总糖含量(380.66±15.14) mg·50 g-1。并按此工艺酶解近江牡蛎全脏器匀浆,得粗多糖21.29%±0.77%,含85.18%±1.00%总糖,20.02%±0.38%酸性糖以及10.84%±0.12%多肽;粗多肽得率为31.41%±0.47%,含84.03%±0.85%多肽,0.11%±0.01%酸性糖以及5.68%±0.15%总糖。与回归方程预测值相近,说明近江牡蛎多糖多肽联产工艺是可行的。