铜螯合亲和层析分离抗氧化活性蚕豆蛋白酶解物

采用铜离子螯合亲和层析柱对不同铜螯合能力的蚕豆蛋白酶解物组分进行分离,并探讨其抗氧化活性机制与铜螯合能力之间的关系。结果表明,金属亲和层析的最优条件为:平衡缓冲液为p H 5.0,浓度为0.05 mol/L的Na Ac-HAc;上样量为20 mg/m L的蚕豆蛋白酶解物1 m L;洗脱剂为0.04 mol/L咪唑。洗脱得到不能螯合铜的蚕豆蛋白酶解物组分F_1及能螯合铜的组分F_2,测定其总还原力、抑制羟自由基能力与铜螯合量,发现抗氧化活性的关系为F_2蚕豆蛋白酶解物F_1(P0.05),铜螯合量的关系也为F_2蚕豆蛋白酶解物(未经分离)F_1(P0.05),表明蚕豆蛋白酶解物的铜螯合活性越高,其抗氧化活性越高。     

复合酶解带鱼蛋白制备亚铁螯合多肽的工艺优化

以带鱼下脚料蛋白为原料,以水解度及亚铁螯合率为考察指标,采用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶及胃蛋白酶进行单一酶解筛选试验,然后进行复合酶解试验.采用二次正交旋转组合设计,以水解度及亚铁螯合率为指标,研究酶制剂种类、加酶方式、复合酶比例、总加酶量、酶解时间、pH值及温度对制备亚铁螯合多肽工艺的影响.综合考虑水解度和螯合率因素,最终确定复合酶解带鱼蛋白制备亚铁螯合多肽的最佳工艺条件为:总加酶量22 000 U/g,并以碱性蛋白酶与木瓜蛋白酶的酶活力配比4:6先后加入;酶解时间为碱性蛋白酶9h、木瓜蛋白酶8 h;pH值为碱性蛋白酶8.0、木瓜蛋白酶6.0;酶解温度为45℃.该条件下制备的带鱼蛋白亚铁螯合多肽产物水解度和螯合率分别为52.22％、82.31％.     

灰树花液态发酵菌丝体工艺优化及其体外抗氧化活性

以葡萄糖、蛋白胨、KH₂PO₄、果蔬汁用量为影响因素,应用响应面分析法探讨灰树花液体发酵的最优条件,并以菌丝体生物量为指标,测定体外抗氧化活性。实验结果表明,100 mL液体培养基,接种量10%时,最优培养基的配方:葡萄糖2.5%(w·v^-1),蛋白胨0.5%(w·v^-1),KH₂PO₄ 0.1%(w·v^-1),果蔬汁15%(v·v^-1)。在此条件下菌丝体生物量预测值为19.06 mg·mL^-1,与实际测量值(18.12±0.214)mg·mL^-1在误差范围内。抗氧化结果表明,灰树花菌丝体具有较强的清除能力,当质量浓度为1.5 mg·mL^-1时,DPPH自由基的清除率达到69.78%±6.17%;ABTS自由基的清除率达到82.11%±7.24%;羟基自由基清除率达到59.73%±3.15%。因此,灰树花液体发酵培养的菌丝体可以作为潜在的抗氧化剂。     

响应面法优化杏仁蛋白酶解工艺及其抗氧化活性研究

研究了杏仁蛋白的酶解工艺及其抗氧化活性。在单因素试验基础上,通过Box－Behnken中心组合设计优化酶解条件,确定出最佳酶解条件为pH14．72、温度54℃、底物浓度2．8％、酶底比1．2％,在此最优条件下水解度（DH）为27．12％。杏仁蛋白酶解液对DPPH·自由基的清除能力最强,其次为0：一‘自由基,最弱的为·OH自由基,清除率分别为85．92％、73．97％和65．92％．     

苜蓿多肽制备工艺优化及其抗氧化活性

以苜蓿(Medicago sativa)为原料,对碱性蛋白酶添加量、酶解时间、酶解温度、酶解pH四个因素进行单因素实验,通过响应面法对苜蓿多肽的酶解工艺进行优化。结果表明,最佳酶解工艺条件为:加酶量3000 U/g,酶解pH8.79,酶解温度49.9 ℃,酶解时间4.9 h,得到多肽含量为4.94 mg·mL^-1。在该条件下,1 mg·mL^-1样品对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除能力较强,分别为74.61%和72.14%,对DPPH自由基清除能力较弱,为61.53%,说明苜蓿多肽具有良好的抗氧化活性,为苜蓿进一步开发利用提供理论依据。     

羊肺蛋白酶解工艺优化及体外抗氧化活性研究

为优化羊肺酶解工艺及探讨酶解物体外抗氧化活性,采用中性蛋白酶酶解羊肺,以水解度为评价指标,在单因素试验的基础上,运用响应面法优化酶解工艺。结果表明:羊肺的最佳酶解条件为酶解温度50℃,加酶量1 700U/g,水料比2∶1(mL/g),酶解时间4h。在最优条件下,进行3次验证性实验,测得实际水解度为18.89%,与理论水解度(18.19%)相比误差较小。体外抗氧化结果表明:羊肺酶解产物具有一定的抗氧化活性,其还原力的吸光值为0.472,清除DPPH·、·O_2~-和·OH的IC_(50)值分别为67.00,40.07,31.88mg/mL。     

灰树花菌丝体多肽的制备及其体外抗氧化活性研究

以中性蛋白酶作为水解酶用酶,用单因素试验考察其相应的酶解条件,正交试验得出最佳水解条件为:pH值8.0.温度50℃,底物浓度10%,酶浓度0.6 mg/g,水解时间2 h,在此条件下的水解度为33.45%.该条件下制备的灰树花多肽对超氧自由基和羟基自由基的清除率分别为55.6%和90.2%.     

鳕鱼皮复合肽螯合钙的制备及抗氧化活性研究

利用木瓜蛋白酶与风味酶组合成的复合酶对鳕鱼皮蛋白进行酶解,制得酶解液,以氯化钙为钙源,与多肽酶解液反应制备多肽螯合钙,并对其抗氧化性进行了研究。结果表明,制备多肽螯合钙的最佳条件是:氯化钙与多肽的质量比为0.3:3,pH值为7.0,反应温度为25℃,反应时间为20min,在此条件下钙离子的螯合率为58.85%,产物对羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O2-·)均有较强的清除作用。     

响应面法优化南极磷虾亚铁螯合肽制备工艺及其理化性质

以南极磷虾为原料,酶解制备亚铁螯合肽。以亚铁螯合率为主要指标,水解度为辅助指标,在单因素实验基础上,利用响应面优化制备南极磷虾亚铁螯合肽(Antarctic krill iron-chelating peptides,AKIP),并对其理化性质进行分析。结果表明:Alcalase 2.4 L是南极磷虾酶解的最适用酶,最佳酶解条件为:酶解温度57.6 ℃,加酶量5.5%,pH8.8,酶解时间5 h,在此条件下酶解液的亚铁螯合率为77.77%±0.72%,水解度为23.22%±0.16%,实测结果与预测值符合良好。氨基酸组成分析表明,南极磷虾亚铁螯合肽具有良好的亚铁螯合活性位点。AKIP的相对分子质量主要分布在180~1000 Da之间,约占89.28%。体外抗氧化实验表明,AKIP对DPPH自由基和羟自由基均有良好的清除能力(IC₅₀分别为1.92、2.09 mg/mL),且呈现较好的量效关系,在食源性螯合肽和天然抗氧化剂领域具有一定的开发利用价值。     

猪血多肽亚铁螯合盐的体外抗氧化作用研究

研究了猪血多肽亚铁螯合盐对超氧阴离子自由基（O2-·）和过氧化氢（H2O2）的清除作用,并比较了维生素C、猪血多肽亚铁和猪血多肽对二者的清除能力。实验结果表明:猪血多肽亚铁螯合盐能清除超氧阴离子自由基（O2-·）和过氧化氢（H2O2）,维生素C、猪血多肽亚铁和猪血多肽这三种物质对超氧阴离子自由基（O2-·）和过氧化氢（H2O2）清除能力的强弱顺序为维生素C>猪血多肽亚铁>猪血多肽,故猪血多肽亚铁螯合盐具有较强的清除超氧阴离子自由基（O2-·）和过氧化氢（H2O2）的能力。      

均匀设计法优化灰树花多糖超声波辅助提取工艺及其抗氧化活性分析

采用均匀设计法优化灰树花多糖超声波辅助提取工艺参数,为其多糖资源开发利用提供参考.以灰树花多糖提取率和β-葡聚糖提取率为评价指标,以超声功率、提取时间、提取温度和水料比为因素,通过均匀设计法优化提取工艺,同时对灰树花多糖抗氧化活性进行初步研究.结果表明:灰树花多糖超声波辅助提取最佳条件为,超声功率500 W、提取时间6...     

灰树花多糖的分离纯化及其体外抗肿瘤活性

探究低温提取的灰树花多糖的结构及其体外抗肿瘤活性。利用低温(4℃)水提醇沉法提取灰树花粗多糖,采用Sevage法除去粗糖中的蛋白,透析除去盐类、寡糖等小分子物质,得到多糖组分命名为GFP,其得率为2.13%;离子色谱检测其主要单糖为葡萄糖、半乳糖和甘露糖;高效液相色谱分析结果表明GFP为混合物,含有两个主要的大分子群体,分子量分别为1700.00 ku和34.12ku,其组分峰面积分别为66.57%和28.23%;红外光谱显示GFP可能为α-吡喃多糖。GFP的抗肿瘤活性研究表明:在一定的浓度范围内,GFP能显著抑制人肝癌HepG2细胞的增殖;通过JC-1染色检测线粒体膜电势的变化发现GFP会引起线粒体膜电位降低,这说明GFP诱导的细胞凋亡伴随着膜电位的改变;经过GFP处理的HepG2细胞出现了典型的细胞凋亡的形态变化,细胞收缩,形成微核。以上均说明GFP诱导HepG2细胞凋亡。     

硫酸酯化灰树花多糖的制备与分析

利用碱提酸沉淀法从灰树花(Grifola frondosa)发酵菌丝体中获得碱提水不溶性多糖GAP,氯磺酸-吡啶法对GAP进行硫酸化修饰后,即制得能溶于水的硫酸化灰树花多糖.通过DEAE-Sepharose F.F.离子交换柱层析精制为一种相对分子量为2.8×10~4,硫酸基质量分数为16.4％的硫酸酯化灰树花多糖(S-GAP).琼脂糖电泳显示,S-GAP可被甲苯胺蓝染色且着色较深.S-GAP的紫外光谱和红外光谱分析表明,在波长208,264,268,286 nm以及波数1 230 cm-1、810 cm-1处有硫酸酯键的特征吸收峰.     

Antioxidant and antitumour activities of exopolysaccharide from liquid‐cultured Grifola frondosa by chemical modification

Grifola frondosa is a popular edible mushroom for its tasty flavour and can be used as a dietary supplement for its functional substances. In this study, an exopolysaccharide (EPS), purified from the submerged culture of G. frondosa, was chemically modified to obtain its carboxymethylated (CM‐EPS) and selenising derivatives (Se‐EPS). The chemical characteristics of these polysaccharides were determined based on high‐performance liquid chromatography (HPLC) and infrared analysis (IR). The antioxidant and antitumour activities of EPS and its derivatives were further investigated, respectively. The results showed that the antioxidant capacity of CM‐EPS and Se‐EPS were much better than that of EPS. Moreover, the Se‐EPS could significantly inhibit the proliferation of Hela cells compared with EPS. This study demonstrated that the carboxymethylation and selenylation played a great influence on enhancing the antioxidant and antitumour activities of exopolysaccharides from G. frondosa.     

芝麻蛋白酶解液抗氧化性能

以黑芝麻为原料,制备芝麻蛋白;分别用中性蛋白酶、木瓜蛋白酶及碱性蛋白酶对芝麻蛋白进行水解制得酶解液,然后对酶解产物进行抗氧化性能研究。以对自由基的清除率为考察指标,筛选出较优单酶,并通过正交试验对酶解条件进行优化。结果表明：中性蛋白酶为最优单酶,其酶解液具有良好的抗氧化性能,能有效清除体外自由基,其中对羟自由基(·OH)的清除率最高可达到94.84%,对超氧阴离子自由基(O2·)清除率最高可达到74.78%,而对脂过氧化自由基(ROO·)清除率为43.63%;酶解时的pH 值、酶解温度是影响酶解效果的主要因素。     

鹅肉蛋白酶解条件优化及酶解产物抗氧化活性研究

运用响应面(RSM)分析对鹅肉蛋白酶解工艺条件进行优化。在单因素试验基础上,以抗氧化活性为主要指标,水解度为辅助指标,研究酶解时间、酶解温度、pH值、固液比、酶添加量对鹅肉蛋白水解度和抗氧化活性的影响。结果表明:鹅肉蛋白最佳酶解条件为酶解温度53℃、酶解液pH10.5、固液比1:3(m/V)、酶解时间7.2h,加酶量1200U/g,在此条件下,酶解液对Fe3+还原力为0.402,水解度可达34.74%。     

灰树花抗氧化活性多酚的提取纯化及其鉴定

以抗氧化活性为指标,通过单因素试验和正交试验对灰树花多酚提取工艺进行优化,确定最佳提取条件为提取时间2.5 h,提取温度70 ℃,料液比1∶50（g∶mL）。提取的多酚经大孔树脂NKA-Ⅱ动态吸附和解吸得到3个不同多酚组分,分别为体积分数为20%、40%及60%乙醇洗脱物。以DPPH自由基清除率、羟基自由基清除率以及总还原力为指标测定不同组分的抗氧化活性,结果表明,体积分数为40%乙醇洗脱物的抗氧化作用最强。采用高效液相色谱-串联质谱对体积分数为40%乙醇洗脱物多酚组分进行分离鉴定,通过对应的质谱结果分析可推测其中的多酚组分包括2-羟基丁二酸、香豆酸、3-羟基白藜芦醇、白藜芦醇、二羟基苯乙酸、咖啡酸和4-羟基苯甲酸等物质。     

响应面试验优化裙带菜蛋白酶解工艺及酶解液抗氧化活性

运用响应面分析方法对裙带菜蛋白酶解工艺条件进行优化。经单酶筛选,在单因素试验基础上,以亚铁离子螯合率和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率为主要指标,水解度为辅助指标,研究酶解时间、酶解温度、p H值、底物质量浓度、加酶量对裙带菜蛋白酶解产物抗氧化活性和水解度的影响,并比较优化条件下的酶解液与常用天然抗氧化剂抗坏血酸、合成抗氧化剂丁基羟基茴香醚(butyl hydroxyanisole,BHA)的抗氧化活性。结果表明:复合蛋白酶是裙带菜蛋白酶解的最适用酶,酶解液螯合亚铁离子能力和清除DPPH自由基的最优条件为酶解时间8.1 h、酶解温度50℃、p H 7.0、底物质量浓度15 g/L、加酶量0.2%(0.3 AU/g裙带菜粉末)。在此条件下,酶解液的亚铁离子螯合率为88.58%,DPPH自由基清除率为59.22%,水解度为29.72%。对比常用抗氧化剂,在亚铁离子螯合能力方面,酶解液显著高于0.01%抗坏血酸和0.01%BHA(P0.05),而在DPPH自由基清除能力和还原能力方面,酶解液低于0.01%抗坏血酸和0.01%BHA(P0.05)。