乳品中黄曲霉毒素M1残留检测方法研究进展

黄曲霉毒素M1(aflatoxin M_1,AFM_1)具有强致癌性和致突变性,主要存在于动物的肉、尿、乳汁、肝脏、肾脏、肌肉、血液中,其中以乳汁中最为常见。本文综述了薄层色谱法、高效薄层色谱法、高效液相色谱法、液相色谱-串联质谱法、免疫亲和柱-荧光光度法、酶联免疫吸附法、放射免疫法、免疫胶体金法、电化学法、化学发光法等检测残留在乳制品中AFM_1方法的研究进展,概述了各方法优缺点,并对未来检测方法进行了展望,为保证乳品安全和提高我国AFM_1的检测能力提供技术支持。     

黄曲霉毒素M1 ELISA试剂盒的检测效果研究

目的为验证本公司生产的黄曲霉毒素M1酶联免疫法(ELISA)检测试剂盒的检测效果。方法用ELISA检测试剂盒对牛奶、酸奶、奶粉和干酪等4种样品中黄曲霉毒素M_1的残留量进行检测,并与高效液相色谱荧光检测法进行对照。结果该试剂盒对4种样品的最低检测限分别为0.039、0.192、0.306、0.199μg/kg(L),试剂盒板内板间变异系数均小于5%;对4种样品做加标回收试验,其回收率均在93%~120%之间,变异系数均小于10%;该方法与高效液相色谱法检测实际样品的阴、阳性判断结果一致。结论该方法稳定、可靠、灵敏,可满足食品中黄曲霉毒素M_1残留快速检测的需要。     

食用油中黄曲霉毒素B1快速检测试剂盒的质量评价

依据食药监办科\[2017\]43号《食品快速检测方法评价技术规范》和KJ 201708《食用油中黄曲霉毒素B1的快速检测 胶体金免疫层析法》制定评价方案,对目前福建省内应用较广的4种食用油中黄曲霉毒素B1快速检测胶体金试剂盒产品进行质量评价。结果表明： 4个品牌产品中,只有2个品牌产品符合要求,不同品牌产品的黄曲霉毒素B1检测效果存在差异。为确保食用油中黄曲霉毒素B1的快检监管效果,结合试剂盒评价结果和市场调研情况,建议快检试剂盒产品须经质量评价合格再投入使用,并不定期对产品进行跟踪评价。     

食品中黄曲霉毒素M1的间接竞争酶联免疫法的建立

该文建立一种间接竞争酶联免疫法（indirect competitive enzyme?linked immunosorbent assay,ic?ELISA）快速测定食品中黄曲霉毒素M1（aflatoxin M1,AFM1）的分析方法。AFM1标准品用甲醇稀释,AFM1标准品与AFM1全抗原竞争结合AFM1单克隆抗体,利用3,3′,5,5′?四甲基联苯胺（3,3′,5,5′?tetramethylbenzidine,TMB）单组分显色液显色后,酶标仪测定吸光度。在优化好的条件下,浓度范围为9.743～2.605×103 pg/mL 时具有良好的线性关系,相关系数（determi?nation coefficient,R2）为0.992 7,检出限IC10为3.84 pg/mL,加标回收率为88.43%～105.75%。该方法适用性好、操作简单、灵敏度高,满足食品中AFM1分析检测的需求。     

三元超分子荧光增敏快速检测黄曲霉毒素M1

根据黄曲霉毒素M1（aflatoxin M1,AFM1）的荧光特性,研究β-环糊精（β-cyclodextrin,β-CD）及其衍生物（β-CDs）、金属盐（Hg2＋）与AFM1形成的三元超分子体系及对AFM1荧光增强作用,并探索超分子包合物形成的机理。甲基-β-CD-Hg2＋-AFM1三元体系中,当溶剂组成为体积分数20%甲醇溶液,Hg2＋、M-β-CD与AFM1物质的量比分别为6.6×104∶1、5.80×105∶1时,荧光增强倍数可达到4.5 倍。光谱法、热力学方法表明AFM1能进入M-β-CD空腔,从而减少荧光淬灭,增强荧光检测的灵敏度。利用Benesi-Hildebrand双倒数法和Van’t Hoff热力学方程研究超分子体系的包合常数与热力学常数,初步探讨超分子反应机理。该荧光增敏技术检测AFM1,在0.01～2.00 μg/L范围内分析线性良好,相关系数R2为0.999 2,检出限为0.002 6 μg/L。这种衍生方法具有灵敏、简单、高效、经济等优点,乳品中除铁元素以外的大多数强化微量元素对测定无干扰作用,可应用于奶制品中AFM1的快速检测。     

全脂加糖炼乳中黄曲霉毒素M1的检测方法

研究全脂加糖炼乳中黄曲霉毒素M1的检测方法.本方法测定的基础是抗原抗体反应.微孔板包被有针对黄曲霉毒素M1的特异性单克隆抗体.加入黄曲霉毒素M1标准品或样品溶液,抗体与样品结合,其余未结合部分抗体与黄曲霉毒素M1酶标记物相结合.没有结合的酶标记物在洗涤步骤中被除去.将基质/发色剂加入到孔中并且孵育.结合的酶标记物将基质/发色剂转化为蓝色的产物.加入反应停止液后颜色由蓝转变为黄色.在450nm处测量,吸收光强度与样品中的浓度成反比.本方法为半定量检测,灵敏度是5pg/mL(ppt),试剂盒标准曲线检测范围是5～ 100pg/mL.     

利用荧光免疫层析卡测定黄曲霉毒素M1的研究

将量子点与抗黄曲霉毒素M1(AFM1)的单克隆抗体偶联,以AFM1-BSA偶联物包被于NC膜作为检测线,山羊抗鼠二抗包被于NC膜上作为质控线,构建了直接竞争检测AFM1的荧光定量免疫层析检测卡体系,在0.156μg/L~1.25μg/L范围内能够准确定量黄曲霉毒素B1,灵敏度达到0.156μg/L。     

黄曲霉毒素B1检测方法的分析

黄曲霉毒素B1是一种致癌物质 ,许多国家已将其限量标准提高 ,黄曲霉毒素B1检测方法的检出限已因其毒性而提高 ,并已成为国际贸易中新的技术壁垒。文中介绍了黄曲霉毒素B1的几种常见检测方法 ,并对其特点及检出限进行了概括性的分析。     

间接竞争ELISA检测试剂盒测定粮油食品中的 黄曲霉毒素B1

目的建立一套适用于食品中黄曲霉毒素B1的快速、简便、准确的检测方法,同时,进一步验证本公司研制的黄曲霉毒素ELISA检测试剂盒的检测效果。方法用酶联免疫法和高效液相色谱法分别对市售的食用油、花生、谷物样品中AFB1的污染程度进行检测分析。结果用ELISA法和HPLC法测定食用油样品的回收率分别为87.1%~92.7%和85.8%~100.8%;花生样品的回收率分别为76.0%~92.8%和76.3%~92.9%;谷物样品的回收率分别为82.6%~92.7%和82.7%~106.4%,花生加标样品6次平行测定的RSD分别为1.29%~2.46%和5.15%~8.70%,11份阳性样品测定结果表明2种方法具有很好的一致性(r2=0.995)。结论 ELISA法和HPLC法均有很好的线性关系,且测定结果相近。本公司研制的黄曲霉毒素ELISA试剂盒可以快速地检测食品中黄曲霉毒素B1,分析周期短,分析效率高。     

食品安全快速检测试剂盒

江苏省微生物研究所有限责任公司是一家专门从事食品安全快速检测试剂盒研制开发的转制民营高科技企业 ,曾经承担过多项“八五”、“九五”、“十五”国家重大课题研究 ,现公司研制的主要产品有黄曲霉毒素B1快速检测试剂盒、罂粟碱酶联免疫检测试剂盒、盐酸克伦特罗 (瘦肉精 )酶联免疫检测试剂盒。1　黄曲霉毒素B1快速检测试剂盒该试剂盒是根据酶联免疫吸附法 (ELISA)原理研制而成的 ,符合国际上AOAC和国家质检总局颁布的有关黄曲霉毒素 ,B1分析方法标准 ,该试剂盒的生产已通过ISO 90 0 1:2 0 0 0版质量体系认证 ,同时 ,每批试剂盒的…     

牛奶及奶粉中黄曲霉毒素M1的快速测定

采用免疫亲和柱－荧光光度法快速测定了牛乳及乳制品中黄曲霉毒素M1。试样经过离心、脱脂、过滤后滤液经过键合有黄曲霉毒素M1特殊抗体的免疫亲和柱净化，此抗体对黄曲霉毒素M1具有专一的识别能力，黄曲霉毒素M1键合在分离柱中的抗体上，用甲醇与水之比为10：90的混合液将免疫亲和柱上杂质除去；以甲醇与水之比为80：20的混合液通过分离柱洗脱；加入溴溶液衍生，以提高测定灵敏度，衍生化后的洗脱液于荧光光度计中测定黄曲霉毒素M1，检测低限为0．1μg/kg；在0．1－1．0μg/kg范围内，回收率为89．6％－96．1％，变异系数为0．52％－5．8％，分析一个样品的时间小于30min，分析过程中不使用黄曲霉毒素M1标准物质，结果表明，本方法具有准确、简单、快速、安全等优点，可以满足少量和批量样品的检测需要。     

免疫法快速检测食品中黄曲霉毒素的研究进展

黄曲霉毒素(aflatoxin)是由霉菌黄曲霉和寄生曲霉感染后产生的次生代谢产物,是自然界中毒性最强的化合物之一,被世界卫生组织的癌症研究机构(IARC)划定为I类致癌物质,与肝癌的发生密切相关。黄曲霉毒素很容易污染谷物、坚果、香料、植物油脂、乳类及其制品等多种食品。因此,研究出快速、准确、高效的食品中黄曲霉毒素的检测方法是政府、企业和研究者们一直以来的共同目标。本文综述了近年来基于免疫技术发展的各种快速检测黄曲霉毒素方法,主要包括酶联免疫吸附测定法、胶体金免疫层析法、免疫传感器、免疫亲和柱-高效液相色谱法、免疫荧光法、放射免疫法、时间分辨荧光免疫分析法和量子点探针法的基本原理、适用范围、检测效果、优缺点及国内外应用等方面进展,为今后研发更优的检测黄曲霉素新方法提供借鉴。     

抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体细胞株的筛选

研究筛选到抗黄曲霉毒素M1的单克隆抗体细胞株,用AFM1-oxim e-BSA偶联物免疫Balb/C小鼠后,取小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,经过3次克隆和亚克隆得到两株稳定分泌抗黄曲霉毒素M1抗体的杂交瘤细胞株,经过检测两株均为IgG1亚类,并且经过鉴定其各项性质均符合标准。     

乳品中黄曲霉毒素M1检测方法研究进展

黄曲霉毒素M1是动物摄入黄曲霉毒素B1后的代谢产物,主要分布在动物的乳汁、尿液中。黄曲霉毒素M1毒性很大,经乳制品摄入会对人体产生巨大的危害。本文主要对乳品中黄曲霉毒素M1毒性、危害、检测方法进行综述。对主要检测方法的特性及适用范围进行分析与概括,并且对未来黄曲霉毒素M1的检测方法的发展进行了合理展望。     

基于群青蓝纳米粒子的免疫层析法快速检测牛奶中的黄曲霉毒素M1

目的 建立一种基于群青蓝纳米粒子的免疫层析法(immunochromatographic assay, ICA),用于快速检测黄曲霉毒素M1(aflatoxin M1,AFM1)。方法 通过离心筛选出合适粒径的群青蓝纳米粒子,经羧基化修饰后与AFM1单克隆抗体通过碳二亚胺法共价偶联,制备免疫探针,用于AFM1检测。实验结果通过肉眼观察并结合Image J 软件进行定性定量分析,对所建立方法的灵敏度、特异性、准确性等进行评价。结果 经条件优化后,该方法定性视觉检测限为0.30 ng/mL,定量检测限(limit of detection, LOD)为0.051 ng/mL,与其他真菌毒素无交叉反应。结论 该方法可应用于牛奶样品中AFM1检测,检测结果符合国家限量标准,同时操作简单易于判断、特异性好,适用于现场快速初步筛查。     

Fate of aflatoxin M1 in cheese whey processing

Aflatoxin M₁ (AFM₁) is an important mycotoxin frequently found in milk and in dairy products. It is a minor metabolic product of Aspergillus flavus and A parasiticus. However, it occurs in dairy products as a metabolite formed in cows from aflatoxin B₁ contained in animal feeds. In cheese production, AFM₁ distributes between curd and whey, being present in products derived from cheese whey processing. In this study, cheese whey from dairy processing was artificially contaminated with the mycotoxin at about 0.1 µg l⁻¹. Ultra‐filtration experiments of whey were carried out in order to determinate AFM₁ distribution between retentate (protein‐rich fraction) and permeate (lactose‐rich fraction). Recoveries of AFM₁ in retentate were 72.6–86.4% while, in permeate, recoveries were in the range 2.4–14.7%. Partition coefficients of AFM₁, lactose and protein were calculated to determine whether there was an interaction between AFM₁ and protein. In all experiments, AFM₁ partition coefficient was lower than 1, whilst for lactose coefficients close to 1 were determined, showing an affinity of aflatoxin M₁ to the protein‐rich fraction (retentate). Copyright © 2005 Society of Chemical Industry     

酶联免疫法测定婴幼儿配方乳粉中黄曲霉毒素M1的方法研究

采用酶联免疫法建立婴幼儿配方奶粉中黄曲霉毒素M1的测定方法。样品经冷冻离心、脱脂棉去脂等简便的前处理操作,采用黄曲霉毒素M1的酶联免疫试剂盒进行分析。结果显示,黄曲霉毒素M1在0～0.08 μg/L范围内线性关系良好,方法检出限为0.05 μg/kg,回收率为90.0%～105.0%,精密度相对标准偏差（RSD）为8.1%。该方法快速、简便、特异、可靠,适于现代批量检测的需求,为保证乳制品的质量安全提供了一可靠的筛选方式,将更好地配合液相色谱-质谱法作定性和定量分析。