响应面优化枯草芽孢杆菌发酵豆粕制备ACE抑制肽条件

以豆粕为原料,对枯草芽孢杆菌发酵制备血管紧张素转化酶(Angiotensin I-converting enzyme,ACE)抑制肽发酵条件进行研究。以多肽得率和ACE抑制率为指标,通过单因素试验研究起始物料含水率、接种量、发酵温度、发酵时间对枯草芽孢杆菌发酵豆粕制备ACE抑制肽的影响,通过响应面试验对发酵条件进行优化。结果表明:最佳发酵条件为起始物料含水率59.5%,接种量4.7%,发酵温度38℃,发酵时间48 h。在此条件下,ACE抑制率达到61.43%。     

瑞士乳杆菌发酵乳制备ACE 抑制肽的条件优化

本研究以脱脂乳为主要原料,对瑞士乳杆菌发酵产生血管紧张素转化酶(angiotensin I-converting enzyme,ACE)抑制肽工艺条件进行研究。通过单因素试验和响应面试验设计,确定瑞士乳杆菌发酵脱脂乳生产ACE 抑制肽的最佳工艺条件为：脱脂乳浓度9.67%(m/V)、底物灭菌时间30min、接种量3%(V/V),温度38.82℃、发酵时间6.26h,测得ACE 抑制率为92.26%。研究结果证实利用发酵法生产乳源ACE 抑制活性肽对控制高血压具有重要意义。     

混菌固态发酵榛仁粕制备降血压肽工艺优化研究

为探索固态发酵榛仁粕制备降血压肽的最佳工艺条件,以蛋白酶活力、水解度和粗多肽得率为指标,从枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、植物乳杆菌、米曲霉、酿酒酵母中筛选出3株蛋白酶产量较高的菌株,再将其分别两两组合以ACE抑制率、水解度和粗肽得率为指标进行混菌筛选,通过单因素实验和正交实验,优化降血压肽制备工艺条件。结果表明:枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、米曲霉更适合固态发酵榛仁粕制备降血压肽。枯草芽孢杆菌和米曲霉按2:3比例混合,接种量15%,含水量60%,发酵温度40℃,发酵时间72 h,在此条件下所得发酵产物的ACE抑制率、水解度及粗多肽得率分别为45.24%,30.13%和25.53%,ACE抑制率提高了104.61%。     

液态发酵法制备菜籽ACE抑制肽发酵条件优化

以菜籽粕为原料,通过枯草芽孢杆菌液态发酵生产菜籽ACE抑制肽。先以肽得率、ACE抑制率为指标通过单因素试验得到液态发酵的发酵条件,再以响应面法分析法,优化了枯草芽孢杆菌液态发酵的工艺条件,确定枯草芽孢杆菌液态发酵生产菜籽ACE抑制肽的最佳发酵工艺条件为发酵时间,发酵温度和接种量,最佳工艺条件分别为20 h、38℃和1×108个/mL。优化后的菜籽ACE抑制肽抑制率达到70.95%。     

响应面优化米曲霉固态发酵豆粕制备A C E抑制肽条件

以多肽得率和血管紧张素转化酶(Angiotensin I-converting enzyme,ACE)抑制率为指标,考察发酵时间、发酵温度、接种量和含水量单因素对米曲霉固态发酵豆粕制备ACE抑制肽的影响,确定发酵时间为60 h。在此基础上通过响应面分析法进行优化,得到最优发酵条件为:发酵温度30℃,接种量7%,含水量56%,该条件下ACE抑制率达到56.03%。     

益生菌发酵藜麦制备ACE抑制肽

目的:探究利用益生菌发酵藜麦制备血管紧张素转换酶(ACE)抑制发酵液潜在的能力及发酵工艺对其的影响。方法:以藜麦为原料,ACE抑制率为指标,对18株乳酸菌和12株酵母制备具有ACE抑制能力的发酵液进行了筛选,并对接种量、发酵温度、发酵时间进行了正交优化;对发酵液中的肽进行液质鉴定,并对筛选出的肽进行体内试验评价降压效果。结果:30株菌中Lactobacillus paracasei L2(副干酪乳杆菌)作用效果最好,发酵藜麦制备的发酵液ACE抑制率高达(86.50±0.25)%;Lactobacillus paracasei L2菌株发酵藜麦制备具有ACE抑制活性的发酵液最佳发酵条件为接种量5%,发酵时间48 h,发酵温度34℃,该条件下ACE抑制率最高,为(90.41±0.16)%;通过对液质鉴定结果比对数据库得到两条ACE抑制效果较好的两条肽NIFRPFAPEL和AALEAPRILNL,它们均能够在自发性高血压大鼠(SHR)体内显现出显著的降血压作用,均在灌胃4 h时达到最佳降压效果。收缩压(SBP)分别降低(2.67±0.21),(3.46±0.01) kPa,舒张压(DBP)分...     

复合菌液态发酵米糠制备ACE抑制肽的预处理

探寻复合菌液态发酵米糠制备ACE抑制肽的原料预处理方法,以提高ACE抑制肽产率及产物ACE抑制活性。对米糠原料进行膨化预处理以及除淀粉预处理,以枯草芽孢杆菌1389与黑曲霉AS3.350按2∶1接种为发酵菌株,在接种量10.0%、发酵温度30℃、转速200 r/min发酵条件下,以发酵过程中的pH值、氨基酸态氮、还原糖含量、蛋白酶活性、肽转化率、ACE抑制活性为考察指标。结果表明:最佳原料预处理方法为膨化法,处理条件为米糠水分15.0%、挤压温度140℃、螺杆转速140 r/min。经膨化预处理后,复合菌液态发酵米糠制备ACE抑制肽,肽转化率可达38.86%;ACE抑制活性最高为64.48%,各项指标均好于除淀粉预处理。     

瑞士乳杆菌发酵乳清产物抗氧化活性的条件优化

应用产蛋白酶活力强的瑞士乳杆菌发酵乳清,讨论了发酵时间、发酵温度、发酵初始pH值和瑞士乳杆菌接种量等条件对产物抗氧化活性的影响。在单因素实验的基础上,进行正交实验,得到抗氧化活性最高产物的发酵条件为发酵温度37℃、乳清初始pH值为6.0、瑞士乳杆菌接种量(体积分数)5%和连续培养18 h。在此条件下,发酵产物的羟自由基清除能力达到54.73%。证明了瑞士乳杆菌发酵乳清产物具有优于未发酵乳清的较强抗氧化活性,在现有酶解法的基础上开辟了制备乳清源抗氧化肽的新途径。     

纳豆菌发酵扇贝裙边制备ACE抑制肽的工艺优化

为了开发安全、无副作用的食物源ACE(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽,本文采用纳豆菌(Bacillus natto)发酵扇贝裙边,以多肽含量和ACE抑制率为指标,通过单因素试验对发酵时间、发酵温度、接种量和液料比等工艺参数进行研究,并采用Box-Behnken响应面分析法优化工艺条件,建立二次多项数学模型。结果表明回归模型能较好地反应各因素水平与响应值之间的关系,各因素对多肽含量的影响顺序为时间液料比接种量温度,各因素对ACE抑制率的影响顺序为时间液料比接种量温度,纳豆菌发酵扇贝裙边制备ACE抑制肽的最佳工艺条件如下:发酵时间38.4 h,发酵温度39.9℃,接种量6.0%,液料比22.5。在上述发酵条件下制备的冻干品多肽含量高达238.91 mg/g,ACE抑制率达到83.70%。本文研究结果为扇贝加工废弃物的高值化利用和食物源ACE抑制肽的研究与开发提供了理论依据。     

瑞士乳杆菌发酵乳清蛋白制备ACE抑制肽的条件优化

对瑞士乳杆菌发酵乳清蛋白产生血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽的发酵条件进行探讨。通过单因素分析和响应面试验设计,确定发酵乳清蛋白制备ACE抑制肽的最佳工艺条件：发酵时间为17.52h,发酵温度为37.07℃,乳清质量浓度为114.1g/L,其ACE抑制率可达89.337%。     

响应曲面法优化酶解条件制备乳源ACE抑制肽

采用响应曲面法优化胰蛋白酶(PTN6.0S)酶解酪蛋白酸钠的工艺条件,制备高活性的血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽。利用准确度更高的RP-HPLC法测定酶解产物的ACE抑制率,通过单因素和响应面试验设计,分别考察pH值、温度、时间、底物质量浓度、酶与底物比等因素对ACE抑制肽活性的影响。结果显示：响应曲面法优化酶解条件得到数学模型为：抑制率/%＝－11.21347＋4.32902A－1.45953B＋3.42928C－0.20303D＋0.050303AB＋0.047422AD＋0.14955BC＋0.12486BD－0.054526A2－0.079754B2－0.53587C2－0.28096D2,确定最佳工艺条件为pH7.0、温度52.31℃、时间19.44h、底物质量浓度5.91g/100mL、酶与底物比8.37‰,此时ACE抑制率达97.11%。     

响应曲面法优化小黄鱼ACE抑制肽的酶解条件

以小黄鱼为原料,利用酶解技术制备高活性的ACE抑制肽。通过单因素及响应曲面分析,确定胰蛋白酶(PTN6.0S)的酶解工艺,利用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定酶解产物(0.05g/L)的ACE抑制率,研究pH值、温度、时间、底物质量浓度、酶与底物比等因素对ACE抑制肽活性的影响。结果显示：最佳工艺条件为pH7.0、温度50℃、时间16.5h、底物质量浓度5.6g/100mL、酶与底物比9‰,酶解产物ACE抑制率达87.36%。     

益生菌发酵制备金针菇血管紧张素转化酶抑制肽

为了获得高活性的金针菇血管紧张素转化酶（ACE）抑制肽,该研究对益生菌发酵制备金针菇ACE抑制肽的工艺条件进行了优化,并采用超滤法对ACE抑制肽进行了分级分离和活性鉴定。试验以ACE抑制率为评价指标,对枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）和黑曲霉（Aspergillus niger）三种益生菌进行了筛选,优选出沉淀分离活性肽的最适pH,然后采用单因素和响应面设计对发酵条件进行了考察。结果表明,确定枯草芽孢杆菌为最适菌种;沉淀ACE抑制肽的最适pH为6;最佳发酵条件为蒸馏水与金针菇粉液料比5∶1(mL∶g)、发酵时间16 h、发酵温度37℃、金针菇粉用量35 g/500 mL三角瓶,于此条件下ACE抑制率实测值为（51.25±1.02）%;截留分子质量<3 kDa的ACE抑制肽活性最强。     

响应面法优化黄粉虫蛋白制备ACE抑制肽的条件

以黄粉虫蛋白粉为原料,利用酶解技术对制备血管紧张素转换酶（angiotensin converting enzyme,ACE）抑制肽进行优化。通过单因素及响应面试验,确定木瓜蛋白酶的酶解工艺,利用酶标法测定酶解产物的ACE抑制率,研究底物质量浓度、加酶量、pH值、酶解时间、酶解温度对ACE抑制肽活性的影响。结果表明：当底物质量浓度为7 g/100 mL、加酶量1%、pH 6.5、酶解时间7 h、酶解温度55 ℃时,黄粉虫蛋白粉酶解产物的ACE抑制率达到58.86%。     

挤压和发酵对小米多肽ACE抑制活性及抗氧化作用的影响

以小米为原料,制备具有血管紧张素转换酶(ACE)抑制作用的食源性活性多肽。采用挤压和发酵的方法对小米粉进行处理,研究其对小米蛋白消化率的影响,同时对在胃蛋白酶-胰酶水解条件下得到的小米多肽进行ACE抑制活性和抗氧化能力分析。结果表明,相比于原粉,挤压和发酵对小米多肽的ACE抑制活性和抗氧化能力都有显著的影响(P<0.01);挤压对小米蛋白消化率的影响较大(53.11%);挤压小米蛋白水解肽具有较强的ACE抑制活性(IC50=0.057 mg肽/mL)、DPPH自由基清除能力(10.99μmol/g肽)和铁离子还原能力(82.92μmol/g肽)。     

乳源血管紧张素转移酶抑制肽在乳酸乳球菌中的表达

在乳酸乳球菌中表达乳源血管紧张素转移酶抑制肽。选取了4种不同的来源于牛酪蛋白的血管紧张素转移酶(ACE)抑制肽,为了确保能够在人体消化液作用下正常发挥它们的ACE抑制活性,4种短肽以串联多肽(TP)的形式进行表达,并在各短肽单体间引入了人体内主要消化酶的酶切位点。根据TP的氨基酸序列和乳酸乳球菌的偏爱密码子,人工合成TP基因。然后将TP基因和绿色荧光蛋白(GFP)基因串联于载体pSEC-E7,从而构建了pSEC-TP:GFP质粒,实现了2种蛋白在乳酸乳球菌中的共表达。经电击转化,将该重组质粒转入乳酸乳球菌NZ9000中,获得重组菌株NZ9000(pSEC-TP:GFP)。用Nisin诱导TP:GFP蛋白表达。RT-PCR、激光共聚焦扫描显微镜和SDS-PAGE鉴定表达产物。RT-PCR结果表明,TP:GFP蛋白在RNA水平表达成功;SDS-PAGE表明目标产物是35 ku的条带。在乳酸乳球菌中实现了乳源血管紧张素转移酶抑制肽的表达。     

酶法制备牦牛乳酪蛋白源血管紧张素转换酶抑制肽

应用6种商业蛋白酶水解牦牛乳酪蛋白,研究其水解产物的血管紧张素转换酶抑制活性,结合蛋白水解度及蛋白回收率的结果,蛋白酶C适用于制备牦牛乳酪蛋白源血管紧张素转换酶抑制肽。     

ACE抑制肽的研究进展

随着高血压患者的大幅增加和人们对健康的重视,血管紧张素转换酶（ACE）抑制肽作为有效的降血压多肽,又因无毒副作用,使其成为近些年的研究热点。文章综述了ACE抑制肽的作用机理和研究历史,从植物及动物方面介绍了多肽的来源,并阐述了直接酶解法、发酵法、固相合成法制备ACE抑制肽方法,以及从体外活性检测和体内活性检测介绍ACE抑制肽检测方法,希望为ACE抑制肽的深入研究提供依据。     

血管紧张素转化酶抑制剂产生菌的筛选及发酵条件优化

以大豆分离蛋白为基质,以血管紧张素转化酶（ACE）抑制活性和多肽含量为评价指标,筛选高产ACE抑制剂的菌株,并以 ACE和蛋白水解度（DH）为考察指标对其产ACE抑制剂的发酵条件进行单因素优化。 通过微生物发酵法筛选出一株具有高ACE抑制 活性的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）BS90。 经单因素试验确定最优发酵条件为：采用液态发酵,大豆蛋白含量5%,初始pH值9.0,培 养温度35 ℃,培养时间40 h。 在此发酵条件下,DH和ACE抑制活性分别达到89.1%和81.8%,较优化前分别提高69.5%、13.4%。 为后续 ACE抑制肽的分离制备奠定了基础。     

猪血红蛋白酶解制备ACE抑制肽的研究

本实验选用碱性蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶等六种商业蛋白酶在各自最适反应条件下分别水解猪血红蛋白12h,研究其水解产物对血管紧张素转换酶抑制率和蛋白水解度的影响。结果显示:采用胃蛋白酶酶解获得的产物ACE抑制率最高。胃蛋白酶的酶解条件为底物5%(质量分数),酶与底物浓度比E:S=3%,温度37℃,pH2.0,水解4h后其ACE抑制率为81.10%,水解度为6.64%。