光学免疫传感器的表面等离子体共振研究

论述了用于检测甲肝的表面等离子体供振免疫传感器的检测原理及方法，使用瞬息波技术的光学免疫传感器具有满足选择市场的要求，可以提供常规检测甲肝技术所不具备的一些优点，检测迅速，系统易于实现自动操作这种免疫传感器是基于检测血清中回旋体膜的抗体，使用了有关的抗原，它与有机体中有关的ＩｇＧ抗体发生反应，而此ＩｇＧ抗体存在于肝炎病人的血清中，用夹层表面等离子体振子共振方法，可以得到重复的结果，在键结合发生作用     

酪氨酸酶特异性卵黄抗体Fab’片段的制备及其对酶活力的抑制性能

针对导致黑色素沉淀的酪氨酸酶,制备了特异性卵黄抗体Fab’片段,研究其对酶活力的抑制效果并从动力学角度进行分析。结果表明,胃蛋白酶法制备Fab’片段的最适条件为：pH?4.0、反应比（卵黄抗体-胃蛋白酶）1∶150（mg/U）、反应时间8?h。经免疫亲和柱纯化后可得理化性质稳定、纯度大于95%的Fab’片段;该片段通过非竞争性结合抑制酪氨酸酶活力,IC50为11.16?μmol/L,结合常数为5.79×105,抑制效果相比完整的卵黄抗体分子大大提高。本研究可为卵黄抗体Fab’片段作为潜在的酶活力抑制剂在食品、化妆品和医药等行业中应用提供理论参考。     

表面等离子体共振技术在纺织等消费品检测中的应用

表面等离子体共振(SPR)生物传感技术是一种具有良好发展前景的新兴生物化学检测技术,具有灵敏度高、快速、无需标记等优点,广泛应用于材料化学、医药检测、环境监测和食品安全等领域。文章对SPR生物传感器进行了简要介绍,并着重对其在有毒有害残留检测中的应用进行了分析,最后对SPR生物传感技术在消费品检测领域的研究前景进行了展望。由于SPR技术检测过程方便快捷、灵敏度高,且只要更换不同的修饰特异性匹配芯片,一台仪器便可实现无机和有机类危害因子的筛查检测,因此SPR技术在消费品检测中有很好的发展前景。     

基于表面等离子体共振技术测定猪肉中磺胺类药物残留

建立一种基于表面等离子体共振技术(SPR)测定猪肉中磺胺类药物残留的新方法。采用传感芯片为共振芯片,以0.1mol/L NaOH 溶液为再生溶液,HBS-EP 为缓冲溶液,流速为80μL/min,运用SPR 技术测定猪肉中磺胺类药物残留总量。结果表明,磺胺类药物在0.5～50ng/mL 范围内,传感芯片表面所产生的相对共振强度与质量浓度有良好的响应关系,平均回收率为75.7%～99.2%,精密度实验RSD 为1.3%(n=6),检测限为2.5μg/kg。该方法简便、灵敏,可以为产品的安全与质量控制提供快速分析方法。     

利用表面等离子体共振技术检测猪尿中盐酸克伦特罗

利用表面等离子体共振技术检测猪尿液中的盐酸克伦特罗。将盐酸克伦特罗-牛血清白蛋白偶联物作为传感芯片特异识别探针结合到生物芯片表面,通过溶液竞争法结合表面等离子体共振技术检测盐酸克伦特罗。标准曲线被建立并且检测盐酸克伦特罗的检测限能够达到1.03 ng/m L,与莱克多巴胺、沙丁胺醇无交叉反应,具有良好的特异性,猪尿的回收率为98.2%~107.0%,变异系数在可接受范围内。所采用的表面等离子体共振方法对于检测猪尿中的盐酸克伦特罗具有灵敏性,准确性,精密性。     

基于不同识别元件的表面等离子体共振技术在食品安全检测中的研究进展

表面等离子体共振（surface plasmon resonance,SPR）技术传感器具有灵敏度高、无需标记、简单、成本低、可实时监测等优点,已在生命科学、新药研发、食品安全、环境污染检测等方面得到了广泛应用。而识别元件是SPR传感器的重要组成部分,它决定检测的专一性及灵敏度,因此识别元件的研究与发展至关重要。本文分别综述了以抗体、适配体、分子印迹聚合物、蛋白质、肽、酶为识别元件的SPR传感器在食品安全检测中近10 年来的研究进展;重点分析了不同识别元件在SPR技术中的特点和优势;提出了今后SPR技术在食品安全检测中的技术难点及新应用前景。     

表面等离子体共振生物芯片快速检测克伦特罗

盐酸克伦特罗是一种瘦肉精,在中国被禁止使用。根据免疫反应的规律,研究基于表面等离子体共振技术的生物芯片无标记检测盐酸克伦特罗的方法,提出了连续检测法和快速检测法。连续检测法是在检测时交替通入待测样品和PBS缓冲液,检测完成后才通入SDS-HCl,实现芯片再生。该方法可以提高芯片的检测次数,延长使用寿命,适用于检测克伦特罗抗体、筛选抗体、研究免疫反应动力学、建立标准曲线。快速检测法是在生物芯片制备和检测免疫反应过程中动态调整扫描角度,能有效提高检测灵敏度,同时去除冗余的数据,检出限为2 mg/L。检测了猪肉中提取的克伦特罗样品,浓度2.75 μg/L。本文所采用的方法具有灵敏度高、操作简便、快速、不需要标记、成本低、设备简单、对环境无污染等优点,有望实现大量样品的现场实时检测。     

莲房原花青素对酪氨酸酶活力和黑色素生物合成影响的初步研究

目的：探讨莲房原花青素(LSPC)对酪氨酸酶及其黑色素生物合成的抑制机理。方法：采用酪氨酸酶多巴速率氧化法体外测定药物干预前后酪氨酸酶活性，求出酪氨酸酶抑制率，并作出相应Lineweaver-Burk曲线，推断其抑制类型。结果：莲房原花青素能显著抑制酪氨酸酶活性，其半抑制浓度IC50为1．15g/L。并能有效抑制形成黑色素的中间产物L-多巴色素向黑色素转化其半抑制浓度IC50为1．750g/L。结论 莲房原花青素可抑制酪氨酸酶活性，且属于酪氨酸酶竞争性抑制剂。     

纺织品中双酚 A 检测用表面等离子体共振传感器的表面预处理

针对纺织服装中双酚 A（BPA）分子量小,直接采用表面等离子体共振（SPR）技术难以精准检测的问题,采用传感器表面预处理方法和溶液竞争原理来扩大响应信号,对其进行定性定量检测。为更好地使双酚Ａ?牛血清白蛋白抗原（BPA?BSA）和传感芯片进行氨基偶联,从传感芯片的选择、修饰溶液的pH 值、离子浓度、BPA?BSA 抗原的最佳浓度４ 个因素出发,运用控制变量法,探索双酚Ａ 检测中传感芯片的最佳修饰条件。结果表明：当采用羧甲基葡聚糖组装（CM5） 芯片、修饰液pH 值为4.5、离子浓度为10 mmol/L、BPA?BSA 质量浓度为50 μg/mL 时,BPA?BSA 的氨基偶联修饰效果最佳,且预处理方法简便快捷,BPA 无需精度提纯,特异性识别度高,可应用在纺织品双酚 A 检测中。     

表面等离子体共振免疫传感器用于快速检测微囊藻毒素的研究

针对现有微囊藻毒素（MC-LR）检测方法操作复杂、因标记而污染环境、仪器贵重,不利于现场快速检测等问题,将自行研制的表面等离子体共振（SPR）生物芯片检测仪应用于微囊藻毒素的检测,提出抑制型SPR生物芯片快速检测痕量微囊藻毒素的方法。采用该方法分别对浓度为3.5、2.5、1.5、1、0μg/L的MC-LR样品进行了检测。结果表明:该方法检测限小于1μg/L,可满足世界卫生组织（WHO）对于饮用水和我国地表水环境质量标准中MC-LR最低含量检测的需求。该方法完成一个样品检测耗时约8 min,相比于高效液相色谱法（HPLC）和酶联免疫吸附法（ELISA）等传统检测方法,快速定量是其最大的优势,可用于食品质量监控和现场实时检测。      

表面等离子体共振技术在农药残留检测研究中的应用

表面等离子共振(SPR)技术具有灵敏度高、操作简单、能够实时监测反应的动态过程,只需对样品进行简单的预处理,无需进行标记,也可以无需纯化各种生物组分,耗样量少,检测时间短,已被广泛应用于各个研究领域。该技术不仅可以检测分析物,而且可以测定分子间相互作用的动力学常数。目前,SPR在检测食品和环境领域中的农药残留做了大量的研究工作。本文简单介绍SPR的基本原理以及SPR生物传感器的类型,重点综述SPR生物传感器应用于农药检测中传感芯片的识别分子种类,检测方法以及目前SPR检测农药的研究现状,最后对SPR生物传感器应用于农药检测领域的发展前景作出展望。     

表面等离子共振传感器检测3 种果汁中亚胺硫磷残留

基于亚胺硫磷多克隆抗体,建立苹果汁、桃汁、橙汁中亚胺硫磷残留的表面等离子共振（surface plasmonresonance,SPR）传感器检测方法。采用磷酸盐缓冲液直接稀释样品10 倍后,基本消除基质影响,加标回收率为84.88%～104.69%,变异系数低于6.70%,样品的最低检出限为0.1 μg/L,与高效液相色谱检测结果相关系数为0.992,所建立的SPR检测方法达到了快速准确检测的要求。SPR反应芯片对亚胺硫磷的检测时间为30 min,且在3 d内可反复检测30 次,可有效降低检测成本。通过与同源抗体建立的酶联免疫方法比较发现：SPR方法在检测限、精确度、灵敏度等方面有着一定优势,但对于单残留样品的检测,在时间上不具有明显优势,更适合于高通量、多残留的检测。     

基于间接竞争法的表面等离子共振免疫传感技术检测雌二醇

建立一种基于间接竞争法的表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)免疫传感技术检测雌二醇(estradiol,E_2),这种方法无需标记,可以实时监测竞争过程。在间接竞争实验中,E_2和E_2的单克隆抗体(monoclonal antibody,E_2-m Ab)等体积混合后共同竞争被固定在了SPR传感器的芯片表面的E_2-牛血清白蛋白包被原(E_2-bovine serum albumin,E_2-BSA),SPR产生的信号和E_2的质量浓度呈反比。优化实验参数如抗体质量浓度、再生次数等,最后再用全脂牛奶做E_2的加标实验。实验的线性范围为15.63~500 ng/m L,最低检出限为11.13 ng/m L。本研究的SPR免疫传感技术构建了一种通用的方法,可以用来无标记检测其他不同的小分子。     

不同粒径纳米金标记二抗增强表面等离子共振检测E. coli O157:H7

基于双通道表面等离子共振（surface plasmon resonance,SPR）传感器,结合不同粒径的金纳米粒子（Aunanoparticle,AuNPs）标记多克隆抗体（polyclonal antibody,PAb）作为第二抗体,采用氨基偶联的方法将PAb固定在传感器表面作为第一抗体,采用三明治夹心法进行了检测大肠杆菌O157∶H7（E. coli O157∶H7）的研究。考察3 种粒径的AuNPs作为标记物,增强SPR响应信号检测E. coli O157∶H7的能力。结果表明,增强效果最佳的AuNPs粒径为17.79 nm,其可检测到的E. coli O157∶H7的最低浓度为10 CFU/mL。     

Rapid Detection of Fish Major Allergen Parvalbumin by Surface Plasmon Resonance Biosensor

ABSTRACT: Seafood allergy is a common and major cause of food allergy in adults. In recent years, seafood allergy has become a serious problem with the increase of seafood consumption. To develop a rapid allergen detection method based on the affinity of antigen‐antibody interaction, fish major allergen, parvalbumin, was used for kinetic analysis by a surface plasmon resonance (SPR) biosensor. Anti‐parvalbumin murine monoclonal antibody (MAb) EG8 was immobilized onto a carboxymethyl dextran (CMD) surface. By the injection of various concentrations of purified carp parvalbumin (CPa), a standard curve and the affinity constants (K_D and k_*) for the MAb EG8‐CPa model system were determined. In addition, kinetic data were also obtained by the injection of serial dilutions of extracts from seafood products: sardine fish cake (tsumire) and dried skipjack tuna (katsuonut). Sardine tsumire and katsuonut contained 0.11 mg/kg and 0.39 mg/kg parvalbumins, respectively, where affinity constants K_D and k_* were almost similar among paralbumins from different sources. In the SPR system, the allergen can be detected only for 5 min according to the allergen‐MAb binding interaction. Consequently, by the use of a SPR biosensor, kinetic analysis based on the allergen specific MAb would be a rapid and powerful tool for allergen detection and quantification.     

光学免疫传感器的生物传感研究

正在研制的表面等离子体振子共振免疫传感器，用于测量血清中的抗原和抗体的迅速结合，它的共振灵敏度比光学技术的灵敏度高达７倍，所以它是一种新型的生物传感器技术、具的广泛的应用前景。     

表面等离子共振传感检测Cry2A蛋白

目的：建立利用表面等离子共振（surface plasmon resonance,SPR）传感器检测转基因植物中苏云金芽孢杆菌Cry2A蛋白的方法。方法：利用SPR检测技术,根据生物分子间的相互作用,在金片表面修饰Cry2A蛋白的特异性单克隆抗体,对不同质量浓度梯度的Cry2A蛋白进行检测研究。结果：该方法可有效地检测到Cry2A蛋白,检测灵敏度可达10 ng/mL,与同为抗虫基因编码的Cry1Ac和Cry2Ab蛋白未出现交叉反应。结论：利用SPR方法检测Cry2A蛋白操作简单,省时且灵敏度高、特异性强,可用于对Cry2A蛋白的定性检测。     

Plant pectin methylesterase and its inhibitor from kiwi fruit: Interaction analysis by surface plasmon resonance

Two surface plasmon resonance (SPR)-based interaction analysis methods were successfully implemented to explore the binding between plant PME and kiwi PMEI. In a first method, plant PMEs were immobilised on a chip surface via amine coupling. This experimental setup allowed studying the effect of pH and ionic strength on the PME–PMEI interaction kinetics. Strong binding was obtained at pH < 7 and at low salt concentrations, whereas both pH ? 8 and [NaCl] of ca. 1.0 M effectively caused dissociation. In a second method, kiwi PMEI was immobilised on a chip surface to which streptavidin had been covalently attached. Hereto, PMEI was biotinylated by means of a NHS-biotin reagent. With this immobilisation strategy, the effect of (partial) thermal or high pressure-induced denaturation of PME on its affinity towards PMEI was investigated. A notable degree of enzyme inactivation was required before interaction characteristics were significantly altered. Any incomplete inactivation of PME resulted in binding to the PMEI surface.