一株异肠球菌SJR-16-1胞外多糖合成条件的研究

针对分离自内蒙古锡林郭勒牧区马奶酒中的41株乳酸菌进行胞外多糖生物合成能力的的研究,筛选出一株胞外多糖产量高的菌株异肠球菌SJR-16-1,分别改变基础培养基的碳源、氮源以及发酵温度、时间、pH等条件,探讨其对异肠球菌SJR-16-1胞外多糖生物合成能力的影响。优化的培养基的组成为蛋白胨2.0%;葡萄糖1.5%;麦芽糖1.5%;K2HPO40.2%;MnSO.44H2O 0.02%;MgSO.47H2O 0.02%;醋酸钠0.5%;酵母粉0.5%;Tween80 1 mL/L。确定其胞外多糖的最佳生物合成条件为:初始pH6.0,发酵温度35℃,发酵时间14 h,优化的条件显著提高了EPS的合成量。     

白灵菇产胞外多糖液体培养条件优化

以菌丝体生物量及发酵液中胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)含量为指标对白灵菇产胞外多糖的液体培养基组成和发酵条件进行了优化。结果表明,最适碳源是麦芽糖,最适氮源是酵母膏。正交实验确定最佳培养基组成为麸皮200g/L,麦芽糖25g/L,酵母膏3g/L,KH2PO41g/L,MgSO·47H2O1g/L。最佳发酵条件为起始pH8.0,培养温度25℃,摇床转速160r/min,装液量100mL/250mL,接种量0.50cm2菌种块,发酵时间4d。在此条件下,白灵菇菌丝体生物量(0.413g/100mL)及胞外多糖含量(2403.2mg/L)分别是对照(0.177g/100mL和664.533mg/L)的2.3倍和3.6倍。     

不同发酵条件对酿酒酵母产胞内胞壁多糖的影响

为提高酿酒酵母产多糖能力,了解酿酒酵母生长情况、代谢中间产物等特性,实现对酵母菌的综合利用,进一步扩大微生物多糖来源范围,本文对酿酒酵母发酵培养基中的碳源、氮源及碳源、氮源浓度配比对胞内及胞壁多糖产量的影响进行了研究,同时通过正交试验,对pH、装液量、时间、接种量等发酵条件进行了优化。得出发酵培养基最佳组合：葡萄糖5%、酵母浸粉0.5%、KH2PO40.1%。用此培养基,胞内多糖高产最佳发酵条件为培养基初始pH 5.0,装液量60mL/250mL,接种量为5%,发酵时间为2d,产量可达5.650mg/mL;胞壁多糖高产最佳发酵条件为初始pH为5.0,装液量为50mL/250mL,接种量为5%,产量为0.489mg/mL。     

Klebsiella oxytoca XCH-1菌产胞外粗多糖发酵

从青岛海藻化工厂海带浸泡液中分离得到KlebsiellaoxytocaXCH 1菌,研究了KlebsiellaoxytocaXCH 1菌产胞外多糖的摇瓶发酵情况,探讨了培养基中碳源、氮源、起始碳源质量浓度、碳氮比、温度、初始pH值、种龄、接种量、装液量等因素对KlebsiellaoxytocaXCH 1菌产生胞外多糖的影响.结果表明,最适宜条件为:以甘露醇为碳源,硫酸铵为氮源,起始甘露醇质量浓度为3g/dL,碳氮质量比为150∶1,温度28℃,初始pH值7～8,种龄54h,接种体积分数8%,250mL摇瓶装液量为40mL,并保持良好的供氧条件.     

宿主植物对内生真菌产胞外多糖的影响

药用植物内生真菌是生物活性物质的新型微生物资源。通过添加宿主植物及优化发酵培养的碳源和氮源,研究宿主植物及发酵条件对绞股蓝内生真菌JY25产胞外多糖的影响。首先优化发酵培养基的氮源和碳源种类及最佳添加量,其次添加不同粒度、不同灭菌方式的宿主植物,检测其对内生真菌JY25产胞外多糖的影响。结果显示:以3 g/L酵母粉为最佳氮源和40 g/L蔗糖为最佳碳源进行发酵,胞外多糖产量达到1.8g/L,相比优化前提升了98%;添加经高压灭菌、粒径约为1.7 mm(12目)、浓度20 g/L的宿主植物绞股蓝,胞外多糖产量达到2.13 g/L,而添加同样粒径、紫外灭菌处理的绞股蓝植物,胞外多糖产量达到2.56 g/L,比优化前提高了180%。研究结果不仅说明适宜的碳源、氮源对植物内生真菌产胞外多糖有明显的促进作用,且宿主植物体内的微生态对内生真菌JY25产胞外多糖也有互作效应。     

酿酒酵母胞外多糖发酵工艺条件优化

为提高酿酒酵母产胞外多糖能力,了解酿酒酵母生长情况、代谢产物等特性,进一步扩大微生物多糖来源范围,对酿酒酵母发酵培养基中的碳源、氮源及各种金属离子对其胞外多糖的影响进行了研究,同时对碳源、氮源浓度配比进行了试验,还对发酵条件中pH、装液量、时间、接种量等组合进行了正交试验。确定发酵培养基最佳组合：葡萄糖5%、酵母浸粉0.5%、KH2PO40.1%。用此培养基,最佳发酵条件为：初始pH为4.5,装液量为50mL/250mL,接种量为5%,发酵时间为2d,在此条件下,胞外多糖产量可达到0.292mg/mL。     

鸡枞菌产水溶性胞外多糖发酵条件及抗氧化活性的初步研究

为提高鸡枞菌（Collybia albuminosa）液体发酵产胞外多糖的产量，以鸡枞菌多糖产量为评价指标，通过单因素试验法对鸡枞菌发酵产多糖的液体发酵培养基和培养条件进行了研究，采用响应面法对影响胞外多糖产量较大的因素进行了优化，并对胞外多糖的抗氧化活性进行了初步研究。结果表明，最佳液体发酵培养基和发酵条件为麦芽糖6%，酵母提取粉1.5%，KH2PO4 0.1%，MgSO4·7H2O 0.05%，维生素B1 0.001%，接种量6%，装液量150 mL/300 mL，种龄5 d，发酵时间7 d。在此优化条件下，胞外多糖产量达671.57 μg/mL。质量浓度为1.2 mg/mL的鸡枞菌胞外多糖对DPPH自由基、ABTS自由基、OH自由基的清除率分别为77.18%、95.74%、80.04%。     

铜色牛肝菌活性胞外多糖的发酵优化研究

选择发酵液中的胞外多糖含量为生物指标,对其进行培养基(碳源、氮源、无机盐)和环境条件(p H、温度)的优化,最后确定了蔗糖50 g/L,酵母粉5 g/L的最优培养基和温度=25℃,p H=6的最优培养条件;用优化后的条件通过5 L式发酵罐发酵培养铜色牛肝菌,5天后胞外多糖产量达1.84 g/L。胞外多糖经除蛋白后,通过ABTS、DPPH、临二氮菲法测其抗氧化性,结果表明其胞外多糖具有很好的抗氧化能力。     

海洋细菌0417产胞外多糖发酵条件的优化

微生物多糖依据其不同的特性被广泛的应用于多个领域.近年来,微生物多糖抗肿瘤、抗炎、抗病毒等生物活性愈来愈受到关注.海洋微生物因其独特的生活环境而使其胞外多糖具有独特的结构和功能.对从威海近海分离筛选到的具有产胞外多糖能力的海洋细菌0417进行发酵条件的优化探究.结果表明,海洋细菌0417产胞外多糖的最佳碳源、氮源分别为葡萄糖和蛋白胨;培养基初始pH值为7.5;碳氮源最佳质量浓度分别为10g/100mL和0.6g/100mL;胞外多糖积累最佳时间为120h.在此条件下培养,海洋细菌0417胞外多糖产量可达1.62mg/mL.     

液体发酵生产古尼虫草多糖的营养条件优化

以提高古尼虫草菌丝体多糖的产量为目的,对古尼虫草液体发酵的营养条件进行优化.以三角瓶摇床培养中胞内多糖产量作为优化指标,对培养基中碳源、氮源的种类及添加量进行了筛选.碳源单因素实验结果表明最佳碳源为蔗糖,添加量为4％,此时胞内多糖产量高达147.40mg/100mL;氮源单因素实验结果显示蛋白胨为最佳氮源,添加量为1.0％,此时胞内多糖产量高达102.49mg/100mL.正交实验优化后营养条件为:蔗糖4％,蛋白胨1.0％,KH2PO40.05％,MgSO4·7H20 0.1％,在此条件下,多糖产量可达(181.5±2.3) mg/100mL.     

枯草芽孢杆菌LY-05发酵玉竹产水溶性多糖工艺优化及其抗氧化活性研究

为了考察益生菌发酵玉竹产水溶性多糖的最佳工艺条件并比较发酵与未发酵多糖的抗氧化活性。本文以枯草芽孢杆菌LY-05为发酵菌株,水溶性多糖含量提高率为指标,研究了玉竹添加量、氮源种类、无机盐种类、接种量、培养温度、摇床转速及发酵时间等发酵条件对发酵玉竹产水溶性多糖的影响。在单因实验结果的基础上,选择对多糖含量提高率影响较大的因素,采用响应面试验法对发酵条件进行了优化;并通过检测DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率,OH自由基清除率及总还原能力,评价发酵与未发酵的玉竹多糖抗氧化活性的变化。结果表明:最佳的发酵工艺参数为:玉竹添加量4%,酵母提取粉3%,NaCl 1%,接种量3%,温度35 ℃,转速160 r/min,发酵时间48 h。在此条件下,多糖含量达到7.83 mg/mL,较未发酵（4.56 mg/mL）提高了71.78%。抗氧化试验表明,在一定浓度下,发酵后玉竹多糖的DPPH、ABTS、OH由基清除率及总还原力均有所提高,且呈现多糖浓度依赖性。发酵后多糖POP₂对ABTS自由基清除的半抑制浓度（IC₅₀）2.21 mg/mL,对OH自由基清除的IC₅₀为0.49 mg/mL。此项研究表明,利用枯草芽孢杆菌发酵玉竹可以明显提高玉竹多糖的提取效率。通过发酵产生的玉竹多糖,具有更强的抗氧化能力。     

响应面法优化刺梨果多糖发酵工艺研究

为研究并提高刺梨果中多糖的抗氧化活性,选取产朊假丝酵母（Candida utilis）为发酵菌种,采用酵母粉麦芽糖（YM）培养基对刺梨果多糖进行发酵。在单因素试验的基础上,以接种量、发酵时间、初始pH值为影响因素,刺梨果多糖DPPH自由基清除率为响应值,采用Box-Behnken试验设计建立数学模型,利用响应面法优化刺梨果多糖发酵工艺。结果表明,影响刺梨果多糖DPPH自由基清除率的主次顺序为：发酵时间＞初始pH值＞接种量;最佳发酵工艺为发酵时间50 h、接种量2%、初始pH值为3。在此最佳工艺条件下,刺梨果多糖DPPH自由基清除率为86.56%。结果表明刺梨果多糖具有较强的抗氧化活性。     

富硒香菇多糖发酵工艺的优化及其抗氧化活性

本试验利用香菇作为载体,Na₂SeO₃为添加的硒源,优化富硒香菇多糖的发酵条件并研究其抗氧化活性。采用单因素试验考察了培养基pH、硒灭菌方式、硒添加时间、硒添加量和发酵时间对富硒香菇多糖的影响,并通过 Box-Benhnken实验设计和响应面分析法确定最优发酵条件。在优化条件下得到富硒香菇多糖,并利用DPPH自由基清除能力研究其抗氧活性。结果表明:当培养基pH调至4.16,发酵至第162 h时,向发酵液中添加7.97 mg/L过滤除菌的Na₂SeO₃溶液,发酵11 d,富硒香菇胞内多糖提取量可达到71.54 mg/100 mL;当培养基pH调至4.01,发酵至第191.5 h时,向培养基中添加6.68 mg/L过滤除菌的Na₂SeO₃溶液,发酵11 d,富硒香菇胞外多糖提取量可达到853.96 mg/100 mL。DPPH自由基清除实验结果表明,抗氧化活性大小依次为富硒香菇胞内多糖 > 香菇胞内多糖 > 富硒香菇胞外多糖 > 香菇胞外多糖。硒的添加不仅促进香菇菌丝的生长及多糖的累积,同时也提高了其抗氧化活性,对DPPH有较好的清除作用。     

纤维素酶和果胶酶提取对甘草渣多糖抗氧化和抗肿瘤性能的影响

目的:考察不同酶提取对甘草渣多糖抗氧化性和抗肿瘤性能的影响,为后续甘草资源的有效再利用提供依据。方法:选用纤维素酶和果胶酶,在实验的优化条件下分别提取甘草渣多糖,比较两种酶提取的甘草渣多糖的得率、红外光谱、抗氧化性和抗肿瘤性。结果:果胶酶和纤维素酶提取的多糖得率分别为8.43%和10.71%。红外光谱结果表明,两种酶提取的多糖均具有α-吡喃环糖环。抗氧化性实验结果表明,果胶酶和纤维素酶提取的多糖对DPPH自由基、羟基自由基、ABTS自由基清除的IC₅₀值分别为0.00243、0.305、0.0403 mg/mL和0.226、0.0238、0.0401 mg/mL。抗肿瘤结果表明,在0.00250~0.125 mg/mL浓度范围内,纤维素酶提取的多糖肿瘤细胞的抑制率高于果胶酶提取的多糖。结论:纤维素酶提取的多糖得率更高、对羟基自由基的清除能力和抗肿瘤性能更强,果胶酶提取的多糖对DPPH自由基的清除能力更强,两者对ABTS自由基的清除能力基本相同。     

利用香菇菌丝体发酵藜麦及其发酵产物中粗多糖的抗氧化评价

以藜麦为固体培养基,利用香菇菌丝体将其发酵,通过正交试验设计探讨碳源、氮源、碳氮源添加比例、时间等因素对发酵产物中粗多糖含量的影响,测定最适发酵条件下发酵产物中粗多糖抗氧化活性。最终得出以粗多糖为目标产物的最适发酵条件为:碳源为淀粉,氮源为牛肉膏,碳氮源添加比例5:1,发酵时间15 d;在此条件下,香菇与藜麦的发酵产物中粗多糖含量达(58.89±1.33)mg/g,较未发酵藜麦提升了31倍;且其对DPPH·自由基和ABTS·^+自由基均表现出较好的体外清除效果,当粗多糖浓度为20 mg/mL时,其对DPPH·自由基和ABTS·^+自由基的清除能力均达到最高,分别为76.57%与60.16%。利用香菇菌丝体发酵藜麦后,能够大大提升藜麦培养基中多糖的含量,且发酵后的粗多糖具有较好的抗氧化能力,为发酵产物作为功能性食品的可行性提供一定数据支持。     

拟目乌贼肌肉多糖酶法脱蛋白工艺优化及体外清除自由基能力

以加酶量、酶解温度、pH值、酶解时间为影响因素,以蛋白脱除率和多糖损失率为评价指标,通过正交试验优化拟目乌贼肌肉多糖酶法脱蛋白工艺,并与三氯乙酸法、等电点法脱蛋白效果进行比较。同时对脱蛋白多糖的体外清除自由基能力进行研究。结果表明,拟目乌贼肌肉多糖脱蛋白最佳工艺条件为:加酶量3.0 g/100 m L、酶解温度53℃、p H 8.2、酶解时间1.5 h。此条件下蛋白脱除率为89.43%,多糖损失率为1.78%,优于三氯乙酸法和等电点法。清除自由基结果显示,多糖质量浓度为10 mg/m L时,酶法、三氯乙酸法和等电点法得到的脱蛋白多糖对羟自由基清除率分别为45.72%、38.72%和25.18%,相应的IC_(50)值分别为12.44、16.37、34.64 mg/m L;对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基的清除率分别为68.00%、30.08%和23.10%,相应的IC50值分别为7.62、16.71、28.96 mg/m L。3种脱蛋白方法所得拟目乌贼肌肉多糖清除自由基效果依次为:酶法三氯乙酸法等电点法。     

微波辅助提取澳洲坚果壳多糖的工艺优化及抗氧化性评价

优化微波辅助提取澳洲坚果壳多糖的提取工艺,并测定其多糖的抗氧化性。在单因素试验的基础上,以多糖提取率为指标,通过L9（33）正交试验优化其多糖的提取工艺参数,并通过澳洲坚果壳多糖对•OH、1,1-苯基-2-苦肼基（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基和O2－•的清除来评价其抗氧化能力。结果表明,最佳提取工艺参数为微波功率200 W、微波时间2.5 min、料液比1∶50 （g/mL）,在该条件下多糖的平均提取率为0.70%;多糖质量浓度为0.027 5 mg/mL时,对• OH、DPPH自由基和O2－•的清除率可分别达到63.11%、61.90%和80.09%,说明提取的澳洲坚果壳多糖对• OH、DPPH自由基和O2－•有较好的清除能力。     

乌贼墨汁多糖的提取及抗氧化作用研究

研究乌贼墨汁多糖的提取工艺和抗氧化能力。采用单因素试验和正交试验对乌贼墨汁多糖提取条件进行优化,同时通过乌贼墨汁多糖对清除DPPH自由基、 ·OH和Fe3＋还原能力的测定考察多糖的抗氧化能力。结果表明,最佳提取条件为加酶量4.5%、料水比1:15(g/mL)、温度50℃、时间4h、pH8,此条件下乌贼墨汁多糖的得率为3.63%。乌贼墨汁多糖具有一定的抗氧化能力,且在一定范围内,墨汁多糖的抗氧化能力与质量浓度呈线性正相关关系,其中对DPPH自由基和 ·OH的半数清除质量浓度分别为3.61mg/mL和8.06mg/mL。     

女贞内生真菌清除自由基活性成分的分离纯化

采用组织块分离法对女贞的内生真菌进行分离,对分离到的菌株进行清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical 2,2-diphenyl-1-（2,4,6-trinitrophenyl）hydrazyl,DPPH）自由基活性研究,并对活性较强菌株代谢产物中的清除自由基成分进行分离纯化。从女贞的叶片、茎、根、枝条等组织共分离出101 株内生真菌,研究发现NZ-18菌株清除自由基活性最强,并采用液相色谱法对NZ-18发酵液中清除自由基活性成分进行制备。分离到一种活性较强的化合物1,经高效液相色谱法（high performance liquid chromatography,HPLC）法和薄层色谱（thin layer chromatography,TLC）法纯度验证,发现该化合物为纯品化合物经活性验证发现化合物1在样品质量浓度为0.5 mg/mL时对0.2 mg/mL的DPPH自由基清除率为94.88%。结果表明,女贞内生真菌中存在大量的清除自由基活性菌株。     

三种食用菌多糖的基本结构与抗氧化活性研究

通过水提醇沉法提取香菇、黑木耳和红托竹荪的边角废料菌托中的多糖,并用Sevag试剂和透析法分离纯化,得到三种食用菌多糖。采用紫外分光光度计、高效凝胶渗透色谱法（high performance gel permeation chromatography,HPGPC）、红外光谱法（infrared spectroscopy,IR）、核磁共振波谱法（nuclear magnetic resonance,NMR）和刚果红实验分析三种食用菌多糖的分子量、官能团、糖苷键和三螺旋结构。将清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基（1,1-diphenyl-2-trinitrophenylhydrazine free radical,DPPH·）和羟基自由基（Hydroxyl free radicals,OH·）的能力及Fe3+总还原力来判断三种食用菌多糖抗氧化能力,比较分析三种食用菌的基本结构和抗氧化活性。结果显示,制备的三种食用菌多糖都具有较好的均一性,分子量分布在万级和百万级。三种食用菌多糖含有相似的官能团,是既具有α构型又具有β构型的酸性多糖,且均具有三螺旋结构。此外,三种食用菌多糖在实验浓度范围内,均具有良好的抗氧化活性。其中红托竹荪菌托多糖在1.0 mg/mL浓度时对DPPH和在3.0 mg/mL浓度时对OH自由基的清除能力优于香菇和黑木耳多糖,高达66.86%和35.69%,对DPPH和OH自由基的清除能力IC₅₀值分别为0.010和0.195 mg/mL。综上,三种食用菌多糖的基本结构无显著性差异,但抗氧化活性差异较大,为工业化生产利用红托竹荪边角废料提取食用菌多糖奠定基础。