超高效液相-串联质谱法研究银杏叶提取物提取过程中咖啡因的转移规律

目的:研究银杏叶提取物提取过程中咖啡因的转移规律,采用超高效液相色谱-串联质谱法测定咖啡因含量。方法:色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×50 mm,2.7 μm),流动相采用0.1%甲酸溶液和0.1%甲酸乙腈溶液梯度洗脱进行,流速0.3 mL/min,进样量5 μL,柱温30℃,运行时间5 min。质谱参数采用电喷雾离子源(ESI),检测方式采用多反应监测和正离子模式扫描,并进行定量分析。结果:通过优化检测方法,加标回收率在95.23%~102.49%之间,检出限为5 μg/kg,定量限为15 μg/kg。结论:建立的超高效液相色谱-串联质谱检测咖啡因含量方法操作简便,灵敏度高。研究发现,银杏叶中天然存在咖啡因,且不同产地银杏叶中咖啡因含量不同,可能和银杏生长的气候和地域有关系。银杏叶提取生产加工时,原料中约35%的咖啡因会转移至提取物中。     

超高效液相色谱串联四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱同时测定含银杏叶提取物保健食品中的萜类内酯和黄酮醇类成分

目的运用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(ultra performance liquid chromatography-quadrupole/electrostatic field orbitrap high resolution mass spectrometry,UPLC-Q/OrbitrapHRMS),建立同时鉴别和定量测定含银杏叶提取物保健食品中的5种萜类内酯和3种黄酮醇类成分的分析方法。方法样品用80%甲醇水溶液提取,Acquity UPLC BEH C_(18)(50 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱分离,以甲醇和0.1%甲酸溶液作为流动相进行梯度洗脱,电喷雾负离子模式离子化,全扫描模式检测。结果槲皮素、山奈酚、异鼠李素、银杏内酯B、银杏内酯C、银杏内酯K和白果内酯在25~400μg/L范围内线性关系良好(r≥0.995),银杏内酯A在50~800μg/L范围内线性关系良好(r≥0.995)。8种成分的检出限在2~50 ng/g,定量限在8~150 ng/g之间。8种成分在含银杏叶提取物保健食品中均有较好的回收率和稳定性。结论该方法简便快速、灵敏准确,适合于含银杏叶提取物保健食品中的萜类内酯和黄酮醇类成分的鉴别和定量测定。     

液相色谱-串联质谱法测定巴西绿蜂胶制品中咖啡因的含量

目的建立液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)测定巴西绿蜂胶制品中咖啡因含量的方法。方法样品经50%甲醇溶液超声提取、Agilent C_(18)色谱柱分离,以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相进行等度洗脱,采用液相色谱-串联质谱在正离子模式下检测,外标法定量。结果本方法能较好地分离样品中的咖啡因,在0.8~4.0μg/mL浓度范围内呈现良好的线性关系,平均回收率为98.61%~104.72%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为2.3%。结论本方法准确性好、灵敏度高、重现性好,适用于巴西绿蜂胶制品中咖啡因含量的测定。     

银杏叶及其提取物中银杏黄酮的HPLC测定方法研究

为建立一种能同时使用中国药典(Chinese Pharmacopoeia,CP)和美国药典(United States Pharmacopeia,USP)方法测定银杏叶及银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract,EGB)中总黄酮含量的高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC),对检测色谱条件进行优化,优化后色谱条件为双波长检测:370 nm和360 nm;流速:1.0 mL/min;流动相:甲醇-0.4%磷酸水=2∶3;色谱柱:Eclipse Plus C18(4.6 mm×100 mm,3.5μm);进样量:10μL;柱温:40℃。在优化后的色谱条件下,对测定方法进行系统的方法学验证,结果表明该方法的线性好、回收率高、精密度好、准确度高,是一种可靠的测定方法。     

银杏叶提取物总黄酮紫外分光光度法含量测定的适应性研究

目的建立适应银杏叶提取物总黄酮含量的紫外分光光度测定法。方法比较亚硝酸钠–硝酸铝–氢氧化钠、三氯化铝、盐酸-镁粉、硼酸–柠檬酸、三乙胺5种显色法在350～700 nm波长扫描图谱,分析不同显色方法对银杏叶提取物总黄酮含量测定的适应性。结果三氯化铝显色法在0.0898～0.9878 mg/mL范围内与吸光度(A)线性关系良好,回归方程为y=903.81x+9.6181,r=0.9991,加样回收率为99.3%,RSD=1.5%。样品中总黄酮含量为199.8 mg/g。结论该方法简便、快速、可靠、重复性好,可以适用于银杏叶提取物总黄酮含量测定。     

银杏叶提取物总黄酮紫外分光光度法含量测定的适应性研究

目的 建立适应银杏叶提取物总黄酮含量的紫外分光光度测定法.方法 比较亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠、三氯化铝、盐酸-镁粉、硼酸-柠檬酸、三乙胺5种显色法在350～700 nm波长扫描图谱,分析不同显色方法对银杏叶提取物总黄酮含量测定的适应性.结果 三氯化锅显色法在0.0898～0.9878 mg/mL范围内与吸光度(A)线性关系良好,回归方程为y=903.81x+9.6181,r=0.9991,加样回收率为99.3％,RSD=1.5％.样品中总黄酮含量为199.8 mg/g.结论 该方法简便、快速、可靠、重复性好,可以适用于银杏叶提取物总黄酮含量测定.     

含银杏叶提取物胶囊中黄酮类化合物检测方法改进

黄酮类化合物是银杏叶提取物中最重要的成分之一,采用亚硝酸钠—硝酸铝—氢氧化钠显色法测定保健食品中总黄酮含量存在一定缺陷。通过研究6种银杏叶提取物中主要的黄酮类组分对总黄酮含量的贡献值,结果表明槲皮苷是该方法下对总黄酮含量贡献最大的组分。进一步研究了该方法测定HZ胶囊(某公司生产的银杏叶提取物胶囊)中总黄酮含量过程中取样量、洗脱液乙醇浓度和超声时间对测定结果的影响,结果表明洗脱液乙醇浓度和超声时间对HZ胶囊中总黄酮含量具有重要影响。改进方法后,HZ胶囊中总黄酮含量在1.68~1.83g/100g,平均含量为1.71~1.77g/100g,相对标准偏差为1.36%~4.08%,芦丁回收率为94.05%~100.44%,重复性、精密度和加标回收率结果表明改进后的方法符合HZ胶囊生产过程用于质量控制的检测方法要求。     

液相色谱法测定茶氨酸提取物中咖啡因的含量

目的建立一种快速、简便测定茶氨酸提取物中咖啡因的液相色谱方法。方法样品经过前处理,以1-癸烷磺酸钠溶液(1.22 g→850 m L)+乙腈+磷酸=850+150+1(V:V:V)为流动相,流速1.0 m L/min,柱温40℃,进样量10μL,等度洗脱,经Agilent C18柱分离,于280 nm波长处检测,以外标法定量。结果用本方法进行检测,能很好的分离咖啡因,在浓度0.001 mg/m L至0.05 mg/m L之间呈现良好的线性关系,方法的相关系数可达1.000,平均回收率为100.2,在95%~105%之间,相对标准偏差(RSD)为1.0%,定量限为92.78μg/g,检出限为29.03μg/g。结论该方法耗时短、操作简便、准确、重现性好、分离效果明显。可以应用于茶氨酸提取物中咖啡因含量的测定。     

含银杏叶提取物的保健饮料

含银杏叶提取物的保健饮料李兆龙，卢耀明浙江省科技情报研究所，浙江康恩贝集团公司银杏叶提取物在治疗心脑血管疾病、预防老年性痴呆、清除活性氧自由基等方面的功效已得到肯定。银杏叶提取物除了药用以外，也广泛用于保健食品和化妆品中。日本在八十年代初就推出含银杏...     

HPLC-MS/MS法同时测定保健食品中11种壮阳类非法添加

对同时测定保健食品中11种壮阳类药物的高效液相色谱-串联质谱法进行优化,将仪器的检出限优化至0.01 mg/kg。针对保健食品样品的前处理、色谱条件和质谱条件进行优化,采用高效液相色谱-三重四级杆串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定保健食品中11种壮阳类药物的含量。样品直接采用乙腈提取,正离子模式下,以0.1%甲酸水-0.1%甲酸乙腈为流动相进行梯度洗脱,以多反应监测模式(MRM)记录11种那非的离子碎片响应进行定性定量分析。结果表明,采用优化后的提取方法,色谱条件及质谱条件, 11种那非的线性关系良好,线性范围为1.0～200.0ng/m L,线性相关系数R为0.999 1～0.999 8,样品添加回收试验的回收率范围为62.5%～120.7%,相对标准偏差范围为4.2%～9.5%(n=10)。该法简单、可靠、重现性好、灵敏度高,适用于保健品基质样品中11种壮阳类药物的同时检测。     

高效液相色谱法测定银杏保健品中总黄酮

目的：建立一种适用性好,能作为国家标准方法用于测定银杏保健品中总黄酮化合物的测定法。方法：对盐酸浓度、水解时间、水解温度三因素采用响应曲面优化保健品中黄酮化合物水解提取条件;采用高效液相色谱方法,梯度洗脱程序测定黄酮类化合物含量。结果：水解最佳条件为水解时间114min,水解温度79℃,盐酸浓度3.4mol/L,该条件下得到的银杏总黄酮含量最高为8851.468mg/100g;流动相 A：0.1% H3PO4,B：CH3OH;梯度洗脱程序为：0～20min,A 45%,B 55%;20～30min,A 由45% 线性变化为50%。该法线性关系良好,平均加标回收率在95.04%～104.56% 之间,RSD 小于2%。结论：该法操作简单、快速、分离效果好、专属性强、准确度和重现性好、适用性好,可作为国家标准方法推荐使用。     

银杏叶提取物的药用及食用价值

对银杏叶提取物的有效成分、质量标准,药效学的研究成果、药用价值和食用价值作一综述,以进一步认识和指导银杏制品的开发和应用。     

超声-溶剂萃取去除银杏叶提取物中的银杏酸

为降低银杏叶提取物中银杏酸的毒副作用,用超声辅助溶剂萃取法去除银杏酸。采用单因素和响应面法确定了最佳工艺条件:以正己烷为溶剂,超声功率320 W,料液比1∶19;超声提取14 min,超声间隙时间为每5 s间隔0.5 s,超声次数为2次。通过响应面模型验证确定,在该条件下银杏酸的去除量为3.463 mg/g。由回归模型方差分析可知,影响因素的排序大小依次为超声时间、料液比、超声功率。超声波辅助溶剂萃取银杏叶提取物中的银杏酸的工艺稳定可行,降低了银杏叶提取物的毒副作用,可作为银杏叶提取物中银杏酸的控制手段。     

银杏叶提取物对甲状腺癌细胞增殖和凋亡的影响

本文探究了银杏叶提取物对甲状腺癌细胞增殖、凋亡作用的影响。将培养后的细胞分为空白组、低浓度银杏叶组、中浓度银杏叶组、高浓度银杏叶组,观察四组细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移和粘附能力,并对凋亡相关蛋白p53、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bax表达进行检测。研究结果显示,72 h时高浓度银杏叶组细胞增殖率为14.25%,低于其他三组;凋亡率为81.64%,高于其他三组。高浓度银杏叶组甲状腺癌细胞迁移数、侵袭数、粘附数分别为25.66、24.19、13.02,均低于其他三组(p0.05)。高浓度银杏叶组甲状腺癌细胞p53、Bcl-2相对表达量分别为0.36、0.26,均低于其他三组,Bax相对表达量为1.79,高于其他三组(p0.05)。结果表明银杏叶提取物能够抑制甲状腺癌细胞增殖、侵袭、迁移、粘附能力,还能够通过调控凋亡相关蛋白p53、Bcl-2、Bax表达而促进细胞凋亡,且其能力呈现浓度依赖性。     

银杏不同部位中黄酮含量分析方法研究

采用有机溶剂索氏提取法进行提取，利用紫外分光光度计、高效液相色谱等分析仪器对银杏叶、银杏果梗、银杏外种皮中银杏黄酮成分含量进行了检测。通过对比研究紫外分光光度法和高效液相色谱法对银杏不同部位黄酮含量的检测结果，得出准确高效的银杏黄酮含量的检测方法。结果发现银杏黄酮的含量用紫外分光光度计的检测结果普遍高于商效液相色谱的检测结果，而HPLC法相对干扰较小，重现性好，更能反映其内在质量，准确可靠。     

银杏叶提取液结合异抗坏血酸钠对鲜切砀山梨贮藏品质的影响

目的:研究银杏叶提取液结合异抗坏血酸钠对鲜切梨的保鲜效果。方法:以鲜切砀山梨为材料,探究总黄酮含量分别为0.25(处理1)、0.50(处理2)、0.75 mg/m L(处理3)的银杏叶提取液结合1%的异抗坏血酸钠(D-sodium ascorbate,D-VCNa)溶液对鲜切砀山梨在4℃条件下贮藏品质的影响。采用SPSS软件分析了贮藏期间鲜切梨的呼吸强度、质量损失率、色差、VC含量、硬度、可溶性固形物含量(soluble solid content,SSC)、过氧化物酶(peroxidase,POD)活力、相对电导率及pH值的变化等。结果:不同质量浓度黄酮的银杏叶提取液结合D-VCNa溶液都可以在不同程度上减缓鲜切梨的呼吸强度、质量损失率、色差的增加,减缓VC含量、硬度、SSC的下降速率,延迟褐变发生、POD活力高峰的出现时间,抑制果实pH值和相对电导率的上升。结论:银杏叶提取液结合D-VCNa对鲜切砀山梨的贮藏品质有一定的保鲜作用,其中以总黄酮含量为0.50 mg/m L银杏叶提取液结合1%的D-VCNa溶液处理的鲜切梨保鲜效果最好。     

白果蛋白质提取及SDS-PAGE分析

以白果为原料,采用不同的原料处理及蛋白质提取方法,运用单因素和正交设计的方法,以料液比、提取时间、提取液浓度、提取液pH 值为考察因素,研究白果蛋白质提取的最佳工艺条件,并对提取的白果蛋白进行SDS-PAGE 凝胶电泳分析。结果表明：经过冷冻干燥处理的白果采用Tris-HCl 提取法获得的白果蛋白含量较高;Tris-HCl 法提取白果蛋白的最佳工艺为pH8.5、0.15mol/L Tris-HCl 溶液、料液比1:20(g/mL)、提取时间4h,白果蛋白质的提取率达到75.01%。白果蛋白SDS-PAGE 分析表明,白果蛋白中约含13 条亚基,主要为21kD 和32kD 的两种亚基,白果蛋白的亚基主要集中在31～100kD,占亚基总数的77%。     

液相色谱-串联四极杆质谱法测定鸡蛋中8种三唑类农药残留量

目的建立液相色谱-串联四极杆质谱法测定鸡蛋中丙环唑、三唑酮、烯唑醇、抑霉唑、三唑醇、戊唑醇、氟硅唑和三环唑残留量的分析方法。方法取均质后的鸡蛋样品经乙腈溶液提取,加入无水硫酸镁和氯化钠进行脱水和盐析,高速离心后,取适量上层提取液经0.1%(V:V)甲酸稀释后,用中性氧化铝粉末净化并以10000 r/min离心取上清液,过0.22μm滤膜后上机测定。使用反相色谱柱进行分离,流动相为0.1%甲酸与乙腈,采用梯度程序进行洗脱,串联四极杆质谱法进行定性定量分析。结果 8种农药在2.5~250μg/kg范围内线性关系良好(r≥0.995),方法的检出限为1μg/kg,定量限为2.5μg/kg,添加回收率在78.31%~88.53%内,相对标准偏差低于10%。结论该方法具有较好的准确度与精密度,适用于鸡蛋中丙环唑、三唑酮、烯唑醇、抑霉唑、三唑醇、戊唑醇、氟硅唑和三环唑的残留量测定。     

硼酸-柠檬酸比色法测银杏枝叶中黄酮苷含量

用硼酸-柠檬酸比色法测定了银杏枝叶不同季节黄酮苷的含量,结果表明:硼酸-柠檬酸比色法测定银杏枝叶中的黄酮苷含量稳定性好,精度高,标准差为0.06,黄酮苷测定回收率为98.3%～101.1%,测定结果不受脂溶性杂质的干扰;银杏枝叶中的黄酮苷含量随季节的变化而变化,8月黄酮苷含量最高。