不同环境条件对隆德假单胞菌生物被膜形成能力的影响

为研究环境条件对食品腐败菌隆德假单胞菌（Pseudomonas lundensis,PL）生物被膜形成能力的影响,采用微孔板结晶紫法测定不同的营养条件、接种浓度、pH、NaCl和Mg2+浓度条件下其生物被膜量,用激光共聚焦扫描显微镜观测其在不锈钢材料上的黏附和结构特征。结果表明,PL生物被膜的形成量在营养胁迫下降低,稀释TSB培养基50倍造成的营养胁迫使其生物被膜量从1.75±0.35降低至0.24±0.17。PL接种量从1.3×107 CFU/mL降至2.5×104 CFU/mL时,其生物被膜的形成量无显著差异（P>0.05）,在pH为8.0时PL形成生物被膜量最多,1.25%以上的葡萄糖、4%以上的NaCl和0.5%的Mg2+能够显著（P<0.05）抑制PL生物被膜的形成。激光共聚焦显微镜观测结果表明该菌在一定浓度下具有在不锈钢表面形成典型生物被膜的能力。PL生物被膜形成能力受营养条件、葡萄糖浓度、pH、NaCl浓度、Mg2+等环境因子的影响。     

植物提取物对浅黄假单胞菌生物被膜的作用

本文研究具有抑菌效果的药食同源植物提取物对冷却肉中关键腐败菌——假单胞菌生物被膜的抑制、清除效果.从市售冷却肉中分离一株具有较强生物被膜形成能力的假单胞菌,经鉴定为浅黄假单胞菌8-4.采用结晶紫染色法观察蒲公英、金银花、丁香、肉桂、薄荷、桑叶等6种提取物对浅黄假单胞菌生物被膜的抑制和清除作用.结果表明:金银花提取物和蒲...     

氯化钙对食品致腐荧光假单胞菌生物被膜形成的影响

研究氯化钙（CaCl2）对食品腐败株荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）生物被膜形成特征的影响。采用结晶紫法、菌体计数、苯酚-硫酸法、共聚焦扫描显微镜和实时荧光定量聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）检测Ca2＋对荧光假单胞菌的生物被膜形成、多糖分泌、被膜结构及相关基因表达的影响。结果表明,0.1 mmol/L Ca2＋刺激荧光假单胞菌生物被膜,随着浓度增加被膜形成增强,其中1 mmol/L促进最明显,而高于10 mmol/L作用减弱,并且Ca2＋不影响浮游细菌生长;同时,0.1 mmol/L和1 mmol/L Ca2＋对胞外多糖、薄膜和泳动性均呈现促进效果,而高浓度下呈现抑制;共聚焦扫描显微镜观察荧光假单胞菌对照组、1 mmol/L和20 mmol/L Ca2＋处理组的成熟生物被膜厚度分别为20.0、40.0 μm和25.0 μm,其中添加1 mmol/L Ca2＋显著增加PF07被膜厚度、菌体和胞外聚合物分泌量,使被膜结构更致密;实时荧光定量PCR检测显示,1 mmol/L Ca2＋刺激菌体黏附素lapA、藻多糖alg、鞭毛flgA基因表达量增加3～4 倍,并且Ca2＋均显著刺激AHLs合成酶luxI基因的表达,提示Ca2＋影响生物被膜与群体感应密切相关。可见,食品介质中CaCl2通过影响菌体黏附行为、胞外分泌物、基因表达导致荧光假单胞菌生物被膜形成特征和结构的改变,该研究为复杂的食品介质中腐败菌生物被膜形成和黏附提供依据。     

铜绿假单胞菌基因型与生物被膜形成能力的分析

通过改良的组织平板培养法及ERIC-PCR方法对48株PA生物被膜的形成进行定量分析并绘制其指纹图谱。结果发现48株PA菌株生物被膜形成能力不同,且在17%相似水平上分为A、B、C、D、E五个基因型,其中生物被膜形成能力较弱的菌株大多属于前三个基因型,而D和E基因型则包含了大部分生物被膜形成能力较强的菌株,这表明不同生物被膜形成能力的PA在5个基因型中的分布并非随机的,菌株生物被膜形成能力和基因型之间具有一定的相关性。     

鱼源荧光假单胞菌生物被膜形成和致腐表型的研究

荧光假单胞菌是养殖鱼类低温贮藏中的优势腐败菌。本研究比较分析5种荧光假单胞菌的生物被膜形成和腐败表型。采用结晶紫法、苯酚硫酸法、珠涡流法和荧光显微镜观察荧光假单胞菌的生物被膜形成和粘附能力,并测定细菌泳动性、蛋白酶活性、嗜铁素等致腐表型。结果表明,5株荧光假单胞菌在28℃LB肉汤中生长良好,经24 h培养后气-液界面上出现较厚的膜,在微孔板中生物被膜形成较快,其中鱼源PF01、PF06、PF07和PF10分离株在12 h含量最高,而标准菌株PFuk4在18 h最高。随着培养时间延长,细菌胞外多糖的含量逐步积累,在18～24 h达到最高,并较快粘附到不锈钢片表面,其中PF07的粘附量最高。5株荧光假单胞菌还具有较强的泳动性和蛋白酶活性,且均产嗜铁素。在PF07和PFuk4中还检测出短链高丝氨酸内酯(AHLs)活性,可能与其较高的被膜、粘附能力、泳动性及蛋白酶活性有关。本研究结果为从AHLs角度探究荧光假单胞菌的致腐机理打下良好的基础。     

金银花和蒲公英提取物对肉源性假单胞菌生物被膜的清除作用

为明确金银花和蒲公英提取物对假单胞菌生物被膜的清除效果,采用单因素实验确定假单胞菌生物被膜的最佳培养温度、培养时间和固定方法;在此条件下,采用结晶紫法结合扫描电镜研究金银花和蒲公英提取物在不同质量浓度、不同添加时间下对肉源性假单胞菌生物被膜的清除作用。结果表明,30 ℃培养24 h生物被膜测定值最高。提取物对生物被膜的清除效果随质量浓度的增加而逐渐增强(P<0.05),在生物被膜形成0 h加入的清除效果显著强于在24 h加入的清除效果(P<0.05)。当提取物浓度高于最小抑菌浓度(MIC)时,主要通过抑制菌体生长而清除生物被膜;当低于最小抑菌浓度时,主要通过破坏生物被膜立体结构而清除生物被膜。提取物破坏假单胞菌生物被膜结构,使生物被膜形成孔洞,从而清除生物被膜。本研究证明金银花和蒲公英提取物能够清除假单胞菌生物被膜,对肉的保鲜具有潜在应用价值。     

DMDC对假单胞菌浮游菌和被膜菌的杀菌效果及其应用

为探究二甲基二碳酸盐(DMDC)对食源性有害微生物的控制,本研究分析DMDC对生鲜食品特定腐败菌荧光假单胞菌和隆德假单胞菌的浮游菌和被膜菌的杀菌效果.通过API ZYM试剂盒、XTT检测试剂盒、共聚焦显微镜观察分析DMDC处理对假单胞菌存活性、胞内酶活、成熟生物被膜的影响,并评价该处理对生鲜蔬菜品质的影响.结果表明:与...     

冷却猪肉及托盘表面细菌生物被膜分析和肉源荧光假单胞菌的鉴定与被膜研究

为研究冷却猪肉及其接触面中细菌生物被膜能力并探讨肉类特定腐败菌的生物被膜特征,分析了腐败的冷却肉和销售托盘表面的细菌生物被膜形成能力;利用形态学观察、16S r DNA分析和VITEK2微生物鉴定系统鉴定了冷却肉中一株生物被膜能力较强的荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens);测定了该菌在培养基和猪肉浸提液中的生物被膜能力;用激光共聚焦和扫描电子显微镜观测了其生物被膜的结构特征。结果发现:冷却肉中及其销售托盘表面的细菌能够形成生物被膜的比例较高,37%和45%的细菌具有较强生物被膜形成能力。肉源性荧光假单胞菌能够在培养基和肉液中形成大量生物被膜,具有较强的生物被膜能力。显微成像结果表明荧光假单胞菌在培养6 h后有明显黏附,18 h后多糖分泌增多、菌体堆积并形成具有生物功能的立体生物被膜。这些特点可能有利于荧光假单胞菌在冷却肉表面黏附并成为优势腐败菌。     

Nisin与和厚朴酚联用对铜绿假单胞菌生物被膜的协同抑制作用

目的:铜绿假单胞菌生物被膜(BF)难以清除,是引起食品持续性污染的重要原因。Nisin作为一种天然食品防腐剂可抑制多种食源性致病菌,然而其对革兰氏阴性菌效果差。通过Nisin与和厚朴酚联用来增强对铜绿假单胞菌ATCC 9027生物被膜的抑制和清除能力,并探究其作用机制。方法:首先,筛选可抑制铜绿假单胞菌BF的中药成分及最小抑制浓度;然后评估Nisin与和厚朴酚联用对铜绿假单胞菌生物被膜的协同抑制作用及其效果随时间的变化,以及对BF结构、组成成分、相关基因表达的影响。结果:和厚朴酚对铜绿假单胞菌ATCC 9027生物被膜的抑制效果最强,选择其作为与Nisin联用的中药成分。Nisin与和厚朴酚的MBIC50分别为1 mg/mL和12.5 μg/mL。多个组合均有协同抑制作用,其中1.5625 μg/mL和厚朴酚与0.125 mg/mL Nisin对BF的协同抑制效果最佳,在18 h达到最高,并且二者联用显著影响BF结构,降低胞外多糖和eDNA的含量,同时BF相关基因lasR、pelA、algC、pqsA、lasI的表达量降低。结论:Nisin与和厚朴酚联用对铜绿假单胞菌ATCC9027生物被膜具有协同抑制作用,其可降低BF相关基因转录水平以减少EPS和eDNA的分泌,从而抑制和清除BF。本研究旨在为减少由铜绿假单胞菌生物被膜引起的食品安全问题提供解决策略。     

制备条件对生姜浸提物抑制荧光假单胞菌活性的影响

研究使用水和乙醇作为提取剂对生姜浸提制得提取液,确定最佳的料液比分别为1∶12和1∶14。并且探究微波辅助浸提所制得的提取液对荧光假单胞菌的抑制效果,可知微波辅助水浸提的最优条件为料液比1∶12,微波功率200 W,提取时间3min。微波辅助乙醇浸提的最优条件为料液比1∶14,微波功率150 W,提取时间2.5min。     

桃金娘天然保健饮料开发研究

以桃金娘果实为原料,配以蔗糖、柠檬酸等,选择适宜的配方和工艺条件,研制出色、香、味俱佳,清凉止渴,具有较强保健功能的天然饮品。通过正交试验和感官评定的方法得出最佳配方为：澄清桃金娘汁45%、CMC-Na0.03%、蔗糖6%、柠檬酸0.3%。     

响应面法优化岗稔果汁脱涩工艺研究

采用活性炭-超声波联合处理脱除法与明胶脱除法两种方法对岗稔果汁进行脱涩处理。以单宁脱除率及花色苷保留率为指标,比较两种方法的脱涩效果。并在单因素实验的基础上,应用响应面法优化脱涩工艺条件。结果表明:明胶脱除法的单宁脱除率、花色苷保留率均高于活性炭-超声波联合处理脱除法,其最佳脱涩工艺条件为:明胶添加量为1.2%,作用温度51℃,处理42min,此时单宁脱除率达到48.72%,花色苷的保留率为53.11%。      

响应面法优化山稔叶总黄酮提取工艺的研究

在提取温度、乙醇体积分数、液固比、提取时间4个单因素实验基础上,利用响应面分析法对回流法提取山稔叶总黄酮的最佳工艺进行了研究。结果表明,最优提取条件为提取温度73℃、乙醇体积分数50%、液固比19∶1(mL/g)、提取时间124min,总黄酮提取率为5.426%,与模型预测值基本相符。山稔叶总黄酮对DPPH自由基清除作用呈一定的量效关系,其半数抑制浓度为9.797μg/mL。      

Biological activity of Cassia occidentalis L. against Callosobruchus maculatus (F.) (Coleoptera: Bruchidae)

In developing countries, traditional control methods are commonly used against stored-product insects and mites. In Senegal, the leaves of Cassia occidentalis L. (Caesalpiniaceae) are used to protect cowpea seeds (Vigna unguiculata L. (Walpers)) against Callosobruchus maculatus (Coleoptera: Bruchidae). The biological activity of the leaves, the seeds and oil of C. occidentalis was evaluated in controlled conditions (28 ± 2°C, 45 ± 5% r.h.) against C. maculatus. At the rate of 10% (w/w), both fresh and dry leaves as well as whole and ground seeds had no contact toxicity on the cowpea beetle. In contrast, seed oil induced an increase in mortality of C. maculatus eggs and first larval instar at the concentration of 10 ml/kg cowpea. The basis of the ovicidal and larvicidal activities are discussed in this paper. Several trials using pure compounds have highlighted that several fatty acids (linoleic, oleic and stearic) are responsible for C. occidentalis toxicity. C. occidentalis seed oil did not reduce the oviposition of C. maculatus at 10 ml/kg seed.     

Antioxidant activity of polyphenol and anthocyanin extracts from fruits of Kadsura coccinea (Lem.) A.C. Smith

Polyphenols and anthocyanins were extracted from Kadsura coccinea fruit. The contents of total phenolics and anthocyanins, influences of pH and temperature on anthocyanins, and antioxidant activities of extracts were further analyzed. The results showed that the total phenolic content of peel extracts was superior to that of pulp extracts. The total anthocyanin content of peel extracts was 180 ± 2.91 mg/100 g of fresh peel tissues. K. coccinea anthocyanins were stable below pH 4, whilst high temperature and extended heating time induced their degradation. Metal-chelating capacity (MCC) assay indicated that no ortho-dihydroxy aromatic moiety existed in the B-ring of the anthocyanin molecules, but there might be a catechol group in the B-ring of the polyphenol molecules. 1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical-scavenging activity and reducing power of extracts decreased in the following order: peel polyphenol extracts > anthocyanin extracts > pulp polyphenol extracts. It would be worthwhile to introduce this rare fruit into more countries.     

不同品种甘薯制汁特性的比较

为了筛选出适宜制备甘薯汁的原料品种,选取了15个品种甘薯作为研究材料,对它们的基本制汁性能进行了研究,包括水分、淀粉、可溶性糖、还原糖、总酸、总蛋白质含量及酶解后的出汁率含量。结果表明,这15个品种甘薯的水分含量为52.5%~80.3%,淀粉含量为11.1%~18.1%,可溶性糖含量为1.76%~13.56%,还原糖含量为0.11%~1.24%,总酸含量为2.46~6.99 g/kg,蛋白质含量为0.88%~2.95%,出汁率为39.8%~77.9%。以出汁率及淀粉含量为主要评价指标,XN 1448-5出汁率最高,淀粉含量最低,水分含量较高,可溶性糖及蛋白质含量较高,因此认为XN 1448-5是这15个品种中制备甘薯汁的最佳品种。     

白苏叶乙醇提取物体外抗氧化活性评价及相关性分析

利用六种不同的评价抗氧化活性方法,包括细胞内活性氧清除能力(CAA)、总抗氧化活性(TAA)、清除超氧阴离子自由基(SSAR)、清除羟自由基(SHR)、清除二苯基苦基苯肼自由基(SDR)活性以及抑制卵黄脂蛋白脂质过氧化(ILLP)对白苏叶乙醇提取物(WPEE)体外抗氧化活性及清除自由基能力进行了评价,并与抗坏血酸(V_C)的抗氧化活性进行了比较。结果表明,六种评价方法均证实WPEE有明显的抗氧化活性,其中TAA、SSAR和SDR活性顺序均为:V_C > F₂ > WPEE > F₁(F₁和F₂为WPEE的组分1和2),但SHR及ILLP活性顺序为F₂ > WPEE > V_C > F₁。此外,WPEE在浓度1~500 μg/mL范围内,对RAW264.7细胞是无毒性的,且具有良好的活性氧(ROS)清除能力。皮尔森相关性分析显示,六种评价抗氧化活性的方法均具有局限性,其评价的是抗氧化活性的不同方面;但除了ILLP与SSAR几乎没有相关性外,其他4种评价抗氧化活性的方法具有很好的相关性;抗氧化活性大小与WPEE的浓度正相关,说明WPEE是有重要应用前景的广谱型天然抗氧化剂。     

黔产民族药肺筋草的化学成分预试验研究

为优化粉条儿菜总黄酮的提取工艺,并探究抗氧化、抗炎活性。本研究以总黄酮得率为指标,采用单因素实验考察乙醇浓度、料液比、提取时间对粉条儿菜总黄酮得率的影响,在此基础上利用Box-Behnke响应面法对提取条件进行优化;以DPPH自由基、ABTS⁺自由基、羟基自由基清除能力为指标评价粉条儿菜总黄酮的抗氧化活性;采用脂多糖诱导巨噬细胞RAW264.7建立炎症模型以评价粉条儿菜总黄酮抗炎活性。结果表明,粉条儿菜总黄酮的最佳提取工艺为：乙醇浓度40%、料液比1:125 g/mL、提取时间30 min,得到粉条儿菜总黄酮平均得率为1.34%;粉条儿菜总黄酮对DPPH自由基、ABTS⁺自由基、羟基自由基的清除能力与其质量浓度呈正相关,IC₅₀值分别为5.46、21.69和56.01 µg/mL;粉条儿菜总黄酮在12.5~100 µg/mL范围内能明显抑制脂多糖诱导的RAW264.7巨噬细胞NO的分泌,其IC₅₀为6.95 µg/mL。该提取工艺稳定、可靠,可用于粉条儿菜总黄酮的提取,且粉条儿菜总黄酮具有一定的抗氧化、抗炎活性。

     

枝瑚菌多糖的结构及其免疫调节活性

本研究以枝瑚菌中分离纯化的枝瑚菌多糖(RF-S)为研究对象,运用红外光谱技术研究了其结构;运用细胞学技术,从体外水平,以巨噬细胞和淋巴细胞为靶细胞,研究了RF-S的免疫调节活性。结果表明:RF-S多糖结构明显,无其他结构,为多糖纯品,且其多糖中的单糖是以吡喃糖苷的形式存在。随着RF-S质量浓度的增加,极显著促进巨噬细胞、T淋巴细胞和B淋巴细胞的增殖(p<0.01),并呈现一定的剂量依赖关系。同时,当RF-S质量浓度为5 μg/mL时,能极显著地促进巨噬细胞吞噬中性红和荧光微球(p<0.01),并能极显著地刺激巨噬细胞分泌IL-2、IL-10、TNF α和释放NO(p<0.01);同时对刺激巨噬细胞分泌IL-6有显著效果(p<0.05)。综上所述,RF-S具有良好的免疫调节活性。     

荷叶离褶伞多糖提取工艺优化及抗氧化活性研究

本研究以荷叶离褶伞多糖为对象,采用单因素与响应面法对多糖提取温度、提取时间、液料比、次数进行优化,进一步研究了荷叶离褶伞多糖的抗氧化活性。结果表明:在提取温度为89 ℃,时间为3 h,液料比为30:1 (mL/g),提取2次时,荷叶离褶伞多糖得率为5.35%±0.12%,与预测值相近。荷叶离褶伞多糖的抗氧化活性与多糖浓度在0~1.0 mg/mL范围内呈现剂量依赖关系,多糖浓度在1.0 mg/mL时,DPPH和ABTS自由基清除率分别达到45.87%±2.12%和76.49%±1.56%。荷叶离褶伞多糖对DPPH和ABTS自由基半抑制浓度IC₅₀分别为1.40、0.44 mg/mL,说明荷叶离褶伞多糖具有较好的抗氧化能力。