高渗氯化钠羟乙基淀粉40注射液对感染性休克患者血浆中细胞因子水平的影响

目的: 观察高渗氯化钠羟乙基淀粉40注射液(hypertonic sodium chloride hydroxyethyl starch 40 injection,HSH40)对感染性休克患者血浆中细胞因子水平的影响。方法: 将60例肠梗阻伴感染性休克手术患者随机分为两组,每组各30例。治疗组(Ⅰ组)为HSH40组;对照组(Ⅱ组)为复方乳酸钠林格氏液(LRS)组。全麻诱导成功后,30 min 内按 10 mL/kg 输入HSH40或LRS。分别于患者入室时(T₀)、输液后 30 min(T₁)、手术结束时(T₂),采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6和IL-10水平。结果: 与T₀比较,Ⅰ组T₁、T₂时TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显降低(P＜0.05),而IL-10水平明显升高(P＜0.05);在T₁、T₂两个时点,Ⅰ组与Ⅱ组比较,TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显降低(P＜0.05),而IL-10水平明显升高(P＜0.05);与T₀比较,Ⅱ组T₁、T₂时TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10水平变化并不明显(P＞0.05)。结论: HSH40对感染性休克患者的炎症反应有一定调控作用。     

罗哌卡因腰麻对腹膜透析置管术患者炎症因子的影响

目的: 对比腰麻和局部麻醉下行腹膜透析置管术患者围手术期白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、血糖(BS)的变化。方法: 将实施腹膜透析置管术的终末期肾病患者40例按病因配对分为腰麻组(SA组)和局部麻醉组(LA组),SA组和LA组患者分别在腰麻和局部麻醉下行腹膜透析置管术,分别于术前、术毕和术后6 h采血测IL-6、TNF-α、hs-CRP、BS,记录患者切皮时、进腹后和术毕时的视觉模拟评分(VAS)及手术时间。结果: 两组患者术前、术毕血清IL-6、TNF-α、hs-CRP差异无统计学意义(P>0.05)。与术前比较,LA组术后 6 h 血清IL-6、TNF-α、hs-CRP升高(P<0.05)。与LA组比较,SA组术后 6 h 血清IL-6、TNF-α、hs-CRP降低(P<0.05)。两组患者术前、术毕、术后 6 h BS值差异无统计学意义(P>0.05)。与LA组患者比较,SA组患者手术切皮时、进腹后、手术结束时VAS评分低,手术时间短(P<0.01)。结论: 与局部麻醉比较,腰麻下行腹膜透析置管术可明显减轻患者围术期疼痛,缩短手术时间,减少IL-6、TNF-α、hs-CRP的产生。     

环氧合酶-2抑制剂对大鼠机械通气所致肺损伤的影响

目的: 探讨环氧合酶-2抑制剂对大鼠机械通气所致肺损伤的影响。 方法: 健康成年雄性SD大鼠30只,随机分为3组(n =10):常规潮气量通气组(TV组,潮气量 8 mL/kg)、大潮气量通气组(HV组,潮气量 40 mL/kg)、大潮气量通气+环氧合酶-2选择性抑制剂组(HV+NS398组)。HV+NS398组于机械通气前 30 min 腹腔注射NS398 8 mg/kg。于机械通气 4 h 时处死大鼠,Western Blot法检测肺组织中水通道蛋白1(AQP1)表达;检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素6(IL-6)、血栓素B₂(TXB₂)含量及总蛋白浓度,计算肺组织湿/干重比(W/D)。 结果: 与TV组相比,HV组AQP1表达降低(P＜0.05),BALF中TNF-α、IL-6、TXB₂和总蛋白浓度增加,肺组织W/D升高(P＜0.05);与HV组相比,HV+NS398组AQP1表达升高,BALF中TNF-α、IL-6、TXB₂和总蛋白浓度降低(P＜0.05),肺组织W/D降低(P＜0.05)。 结论: 环氧合酶-2抑制剂可能通过上调AQP1的表达及减轻炎性反应程度,而缓解大鼠机械通气所致肺损伤。     

温郁金二萜类化合物C对脂多糖所致人胃腺癌SGC7901细胞NF-κB活化和炎症因子分泌的影响

目的: 研究温郁金二萜类化合物对脂多糖(LPS)诱导的人胃腺癌SGC7901细胞中炎症因子(TNF-α、IL-1β)分泌影响,并探讨其可能分子机制。方法: 以 10 mg/L 的LPS刺激体外培养的SGC7901细胞为炎症模型。酶联免疫法测上清中TNF-α、IL-1β分泌量,蛋白质印迹法检测P65、NF-κB抑制蛋白(IκBα)表达,细胞免疫荧光法检测NF-κB P65蛋白核易位。结果: LPS明显诱导人胃腺癌SGC7901细胞TNF-α、IL-1β分泌,P65蛋白生成增多,并大量易位于细胞核;IκBα蛋白降解增多。温郁金化合物抑制LPS诱导的IκBα蛋白降解及P65核易位。结论: 温郁金二萜类化合物可能通过抑制NF-κB活化来实现抗炎作用。     

甲氨蝶呤对炎性细胞因子及丝裂原活化蛋白激酶信号通路的影响

目的: 探讨甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)对类风湿关节炎(RA)发病起重要作用的炎性细胞因子IL-1β和TNF-α的作用及其可能的机制。方法: 用II型胶原建立类风湿关节炎(CIA)动物模型,以MTX(0.2 mg/kg/W)进行处理,6周后处死大鼠,取血清进行IL-1β和TNF-α检测;分离大鼠膝关节取关节滑膜细胞(FLS)进行培养、鉴定,检测脂多糖(LPS)诱导的FLS培养上清中IL-1β和TNF-α的含量,并观察MTX对FLS分泌IL-1β和TNF-α的影响;在FLS的培养中加入不同剂量的MTX,用Westen Blot方法检测FLS中ERK蛋白及磷酸化蛋白的表达。结果: 关节炎指数评分、关节肿胀度测定及关节病理显示造模成功,分离关节滑膜细胞经流式细胞仪检测FLS的血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的表达为 85.5%。造模后,CIA大鼠血清IL-1β和TNF-α明显增加,与空白对照组比较有统计学差异(P<0.05),MTX能有效减少CIA大鼠血清中IL-1β和TNF-α的含量(P<0.05),但未能恢复至正常水平。MTX能抑制LPS诱导的CIA大鼠关节FLS分泌IL-1β和TNF-α。Western Blot检测显示,不同浓度的MTX对CIA大鼠FLS中ERK蛋白的表达与模型对照组相比无统计学差异(P>0.05)。CIA大鼠 FLS中p-ERK蛋白的表达明显高于空白对照组(P<0.01),MTX干预后,低剂量组对p-ERK蛋白表达无明显影响,而中、高剂量组可降低p-ERK蛋白的表达(P<0.05)。结论: MTX既有免疫抑制作用,同时还通过抑制炎性细胞因子IL-1β和TNF-α而具有抗炎作用,其机制可能部分与其抑制MAPK信号通路中的ERK蛋白磷酸化有关。     

鬼针草总黄酮对急性炎症的保护作用及可能机制研究

目的: 研究鬼针草总黄酮(TFB)对急性炎症的保护作用与可能机制。方法: 二甲苯诱导急性小鼠耳肿胀,检测耳肿胀度和血清TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8含量;氟氏完全佐剂诱导佐剂性关节炎(AA)大鼠原发性炎症,检测足肿胀度和血清TNF-α、IL-1、IL-2、IL-6、IL-8含量,HE染色观察炎症关节病理学变化,免疫组织化学法检测关节软骨组织ASIC1a蛋白。结果: 小鼠急性耳肿胀和AA大鼠原发性炎症中,模型组动物血清TNF-α、IL-1、IL-6和IL-8含量均明显升高,TFB(100、200 mg/kg) 灌胃给药能降低小鼠耳肿胀度和血清TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8含量,TFB(67、133 mg/kg)可以升高AA大鼠血清IL-2的含量。TFB灌胃给药可以使AA大鼠关节炎性细胞减少,改善病理变化。在AA大鼠原发性炎症中模型组大鼠关节软骨组织ASIC1a表达明显升高,TFB(67、133 mg/kg)组ASIC1a的表达明显降低。相关性分析结果显示,AA大鼠原发性炎症中ASIC1a与血清TNF-α、IL-1、IL-8含量呈正相关。结论: TFB对急性炎症具有保护作用,其抗炎机制可能与调节炎症介质释放有关。     

刺五加对急性胰腺炎模型大鼠体内炎性介质的影响

目的:观察刺五加对急性胰腺炎模型大鼠体内炎性介质的影响。方法:经胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠制备急性胰腺炎模型,术后定时取血,测定血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)以及淀粉酶(AMY)、脂肪酶(LIP)、磷脂酶A₂(PLA₂)等的变化。结果:刺五加能降低血清中TNF-α、IL-1、IL-6的水平,降低血清中AMY、LIP、PLA₂的活性。结论:刺五加对血清中TNF-α等多种细胞因子和AMY、PLA₂的影响,可能是其治疗急性胰腺炎的作用基础。     

乌司他丁对心肺脑复苏后血细胞因子与脑超微结构的影响

目的: 探讨酶抑制剂乌司他丁(ulinastatin for injection, UTI) 对心肺脑复苏后肿瘤坏死因子-α(TNF-α) 、白细胞介素-6(IL-6) 、白细胞介素-10(IL-10) 和脑超微结构的影响。方法: 将24 只成年健康普通级SD 大鼠, 随机分成对照组、复苏组和乌司他丁组, 每组8 只。对照组仅行气管切开术, 不夹闭气管, 不造成心跳呼吸骤停;复苏组与乌司他丁组建立心肺脑复苏模型, 乌司他丁组在心肺脑复苏时加用单次UTI 10⁶ U·Kg^-1。对照组在气管切开即刻、0. 5 、2 、4 、6 h 采集血标本, 复苏组与乌司他丁组分别在气管切开即刻、复苏成功后0. 5 、2 、4 、6 h 采集血标本, 以放免法测定血清中TNF-α、IL-6 、IL-10 的水平。实验结束时每组随机取2 只动物快速断头取皮层脑组织观察脑超微结构的变化。结果: 对照组中TNF-α、IL-6 、IL-10 基本平稳, 各时间点间无显著变化(P >0. 05) 。复苏组复苏后TNF-α、IL-6 明显上升, IL-10明显下降(P<0. 01 或P<0. 05) 。乌司他丁组TNF-α、IL-6 、IL-10 复苏后各时间点与气管切开即刻比较均无显著性差异(P >0. 05), TNF-α在复苏后0. 5 、2 、4 h 与复苏组同时间点比明显下降(P<0. 05), IL-10 在复苏后0. 5 、6 h 与复苏组同时间点比明显升高(P<0. 05) 。脑组织超微结构改变:乌司他丁组较复苏组明显减轻。结论: 复苏过程合用UTI 可以抑制TNF-α、IL-6 的释放, 增加IL-10 的释放, 减轻脑组织损伤, UTI 可能通过干预这些炎性细胞因子对心肺脑复苏后组织器官起到一定的保护作用。     

巨噬细胞移动抑制因子siRNA对肺泡上皮细胞Toll样受体及其下游信号转导通路的影响

目的: 研究巨噬细胞移动抑制因子siRNA对脂多糖刺激的肺泡上皮细胞Toll样受体(TLR)及其下游信号转导通路的影响和作用机制。方法: 用LPS刺激A549细胞,脂质体法分别将巨噬细胞移动抑制因子(MIF) siRNA和非特异性siRNA加入A549细胞进行干预。RT-PCR法检测MIF和TLR2、TLR4 mRNA的表达,Western Blot法分析TLR下游信号转导通路元件髓样分化因子88(MyD88)和干扰素调节因子3(IRF3)蛋白表达,细胞免疫荧光法观察NF-κB核迁移,ELISA法测定细胞培养上清炎症介质TNF-α、IL-1β、IL-6,免疫介质IFN-β分泌水平。结果: MIF siRNA对LPS刺激诱导的MIF和TLR2、TLR4 mRNA高表达有显著的下调作用和部分阻断NF-κB(p65)核迁移。LPS刺激诱导后,MIF siRNA显著降低MyD88蛋白表达和炎症介质TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌水平,但MIF siRNA对IRF3蛋白表达和免疫介质IFN-β分泌水平无影响。结论: MIF siRNA能抑制A549细胞的炎症介质TNF-α、IL-1β、IL-6过度分泌,其机制可能是MIF siRNA降低了LPS刺激A549细胞诱导的MIF和TLR2、TLR4高表达,及阻断TLR下游信号转导通路元件MyD88和NF-κB核迁移。     

舒康汤治疗慢性盆腔炎的实验研究

目的: 观察舒康汤对慢性盆腔炎的影响,并初探其可能作用机制。方法: 采用机械损伤联合三种菌对其混合感染的方法来制备大鼠的盆腔炎模型。将实验大鼠随机分为5组:正常对照组、模型组、舒康汤低剂量组(1 mL/kg)、舒康汤高剂量组(l mL/100 g)、妇科千金片组(1.5 g/kg)。造模后3周连续给药20 d,在最后一次给药的24 h后,对子宫的肿胀程度进行观察并检测每组大鼠的血浆中SOD、MDA以及IL-1β、IL-6和 TNF-α的含量。结果: 舒康汤可以明显地使造模大鼠的子宫肿胀程度减轻,并且,可以使慢性盆腔炎大鼠模型血浆中的MDA、IL-1β、IL-6和 TNF-α含量降低,SOD含量提高。结论: 舒康汤对慢性盆腔炎的治疗作用可能与对氧自由基损伤以及炎症细胞因子的抑制有关。     

积雪草总苷抗A549肺癌细胞诱导的肿瘤的实验研究

目的: 研究积雪草总苷对A549诱导的荷瘤裸鼠的抗肿瘤作用。方法: 用A549细胞建立裸鼠荷瘤模型,随机分为空白组、模型组、积雪草总苷高、中、低剂量组。造模后连续给药 21 d,断头取血,取瘤,计算抑瘤率;HE染色法观察肿瘤细胞形态变化;ELISA法测定血清中IL-2、TNF-α表达水平。结果: 与模型组相比,积雪草总苷能显著抑制肿瘤的生长;并使得部分肿瘤细胞坏死、溶解、消失;还能明显提高IL-2、TNF-α的含量(P<0.01)。结论: 积雪草总苷具有一定的抗肿瘤作用,其机制可能与提高IL-2、TNF-α的含量有关。     

米诺环素抑制炎症小体介导的细胞焦亡改善阿尔茨海默病小鼠的认知能力研究

目的: 研究米诺环素(minocycline, Mino)抑制炎症小体介导的细胞焦亡改善阿尔茨海默病认知能力的作用机制。方法: 脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导大鼠神经细胞株PC12构建神经细胞焦亡损伤模型,将细胞分为对照组、LPS组、LPS+Mino组,CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡水平,蛋白免疫印迹法检测炎症小体关键蛋白NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor pyrin domain containing 3, NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD, ASC)、Caspase-1及pro-Caspase-1的水平以及焦亡执行蛋白Gasdermin-D(GSDMD)、p30-GSDMD的水平,酶联免疫吸附法检测培养基中白介素(IL)-1β、IL-18、肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达水平。APP-PS1双转基因小鼠10只,随机分为对照组和实验组,实验组采用50 μg的米诺环素灌胃给药,分别在给药前和给药后3周采用Morris水迷宫实验检测小鼠的认知记忆能力,处死小鼠后取海马CA3区检测组织中NLRP3、ASC、Caspase-1及pro-Caspase-1的蛋白表达,以及炎症因子IL-1β、IL-18、TNF-α、焦亡执行蛋白GSDMD、p30-GSDMD的水平。结果: 米诺环素可以抑制LPS诱导的细胞凋亡,LPS+Mino组细胞活力显著高于LPS组,而细胞凋亡率显著低于LPS组,差异具有统计学意义(P<0.05)。而LPS+Mino组中炎症小体关键蛋白NLRP3、ASC、Caspase-1的表达低于LPS组,同时焦亡执行蛋白p30-GSDMD低于LPS组,GSDMD高于LPS组,培养基中IL-1β、IL-18、TNF-α的水平低于LPS组,差异具有统计学意义(P<0.05)。动物实验中,米诺环素可以显著改善小鼠的认知能力;Morris水迷宫实验中,小鼠潜伏期缩短,相比对照组具有统计学意义(P<0.05)。同时小鼠穿越平台次数明显增多,相比对照组具有统计学意义(P<0.05)。实验组小鼠炎症小体关键蛋白NLRP3、ASC、Caspase-1的表达低于对照组,同时焦亡执行蛋白p30-GSDMD低于对照组,GSDMD高于对照组,炎症因子IL-1β、IL-18、TNF-α的水平低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论: 米诺环素可以通过抑制炎症小体活化,抑制神经细胞焦亡的发生,同时改善阿尔茨海默病小鼠的认知能力。     

酮替芬对高糖高脂饮食诱导肥胖模型大鼠的减肥作用

目的: 探讨酮替芬对高糖高脂饮食诱导的大鼠肥胖模型的减肥作用及其机制。方法: SD大鼠随机分成肥胖模型组、酮替芬干预组和正常对照组,肥胖模型组和酮替芬干预组以高糖高脂饲料饲喂,正常对照组以基础饲料饲喂,酮替芬干预组每天灌胃给予酮替芬 0.09 mg/kg,持续12周。称重,计算Lee's指数,检测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、瘦素(LEP)、游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α);检测白色脂肪解偶联蛋白2(UCP2)mRNA的表达。结果: 酮替芬明显降低肥胖模型大鼠的体质量及Lee's指数(P<0.05),降低FBG、FINS和LEP水平(P<0.05),降低FFA、TG和LDL-C水平(P<0.05)和IL-6、TNF-α水平(P<0.05),而增加UCP2 mRNA的表达水平(P<0.05)。结论: 酮替芬能够降低肥胖模型大鼠炎症介质和游离脂肪酸水平,减轻高胰岛素血症和高瘦素血症,促进脂肪组织能量代谢,实现减肥作用。     

阿司匹林对多囊卵巢综合征大鼠炎症反应的影响

目的: 探讨阿司匹林对多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome, PCOS)大鼠炎症反应的影响及其机制。方法: 采用人绒毛膜促性腺激素和胰岛素皮下注射建立PCOS模型,观察阿司匹林对PCOS大鼠体质量、卵巢重量和病理、血清TNF-α、IL-6、胰岛素水平及卵巢TNF-α、IL-6 mRNA表达的影响。结果: 阿司匹林可剂量依赖性降低PCOS大鼠体质量和卵巢重量,减轻卵巢病理改变,血清TNF-α、IL-6、胰岛素含量和卵巢TNF-α、IL-6表达水平亦明显降低。结论: 阿司匹林可通过其抗炎作用对PCOS大鼠产生保护作用。     

内毒素耐受状态小鼠对大肠埃希菌敏感性及促炎细胞因子水平变化的研究

目的: 研究内毒素耐受状态对大肠埃希菌的敏感性及促炎细胞因子水平的变化。方法: 采用小剂量LPS(1 mg/kg)连续腹腔注射 5 d 并在第6天尾静脉注射大剂量LPS(50 mg/kg)建立小鼠内毒素耐受模型。观察小鼠 7 d 存活率或采用ELISA法检测注射大剂量LPS后6、12 h 血清中TNF-α、IL-6水平。然后,采用不同浓度的大肠埃希菌攻击耐受小鼠,观察小鼠 7 d 存活率;或采用血培养方法检测血液中细菌数量,ELISA法检测血清中TNF-α、IL-6水平。结果: 大剂量LPS攻击组(攻击组)小鼠存活率为0 %,LPS耐受组(耐受组)小鼠存活率为100%;耐受组小鼠血清TNF-α、IL-6水平较攻击组显著降低(P＜0.01)。5.0×10⁸ CFU/kg 大肠埃希菌可导致正常小鼠100%死亡,但是仅 1.0×10⁷ CFU/kg大肠埃希菌就可导致耐受组小鼠100%死亡;耐受组给予大肠埃希菌低、高剂量组小鼠血液中细菌数量远远高于相应的正常小鼠大肠埃希菌低或高剂量组(P＜0.01),而血清中TNF-α、IL-6水平则远远低于相应的大肠埃希菌低或高剂量组(P<0.01)。结论: 连续腹腔注射小剂量LPS 5 d 后并在第6天尾静脉注射大剂量LPS可成功建立LPS耐受模型;与正常对照组小鼠比较,较低数量的大肠埃希菌就可导致耐受组小鼠死亡,说明内毒素耐受小鼠对大肠埃希菌的敏感性较正常小鼠明显增高,其机制可能与内毒素耐受后促炎细胞因子水平降低、机体抵抗力降低有关。     

参麦注射液对单肺通气患者肺损伤的保护作用

目的: 探讨参麦注射液对单肺通气患者肺损伤的保护作用。方法: 择期拟全麻复合连硬下行肺叶切除术的患者40例,随机分为两组:对照组(C组,n=20)和参麦组(S组,n=20)。S组患者麻醉前 10 min 将参麦注射液 0.5 mL/kg 加入 100 mL 生理盐水静脉滴注完毕,C组则使用同等量的生理盐水。分别于麻醉前(T₀)、单肺通气后 30 min(T₁)、60 min(T₂)、90 min(T₃)、120 min(T₄)时抽取桡动脉血和混合静脉血做血气分析,并计算肺泡动脉氧压差(A-aDO₂)和肺分流率(Qs/Qt)。同时抽取桡动脉血 3 mL 迅速离心,测定血浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、TNF-α、IL-6及IL-10浓度。结果: 与T₀比较,C组T_1-4 时Qs/Qt、A-aDO₂均升高(P<0.05),S组Qs/Qt、A-aDO₂仅T₄ 时升高(P<0.05)。与C组比较,S组T_1-4 时Qs/Qt、A-aDO₂均降低(P<0.05)。与T₀比较,C组T_1-4时TNF-α、IL-6和IL-10均升高(P<0.05),S组TNF-α、IL-6和IL-10仅T₄ 时升高(P<0.05)。与C组比较,S组T_1-4时Qs/Qt、A-aDO₂、TNF-α、IL-6和IL-10均降低(P<0.05)。结论: 参麦注射液预处理能有效抑制单肺通气后的氧化应激反应和TNF-α、IL-6、IL-10等炎症因子释放,改善肺换气功能,对单肺通气引起的肺损伤具有保护作用。